2. dio Učinci feniletanozida Cistanche Deserticola na ekspresiju -amiloidnog proteina u hipokampusu APP/PS1 transgenih miševa

2. dio Djelotvorni sastojci Cistanchea: terapeutski učinak totalfeniletanoidni glikozidii Acteosides na Alchajmerovu bolest

Kliknite ovdje za 1. dio

Za više informacija kontaktirajte ali.ma@wecistanche.com

Click to Cistanche DHT za Alchajmerovu bolest

4 . Zaključak

Alchajmerova bolestuglavnom se javlja u centralnom nervnom sistemu i indukovano je više faktora. Do sada je njegova patogeneza još uvijek nejasna, ali jezgro istraživanja je još uvijek oko A. Kao glavni peptidi koje luči APP u mozgu, abnormalno taloženje A 1-42 i A 1-40 ne može direktno uzrokovati neuronsku degeneraciju. Iz perspektive etiologije, rastvorljivi oligomer ADDL koje proizvodi A 1-42 uzrokuje mozak Pravi uzrok neuronske degeneracije. Međutim, istraživanje ekspresije ova dva proteina može također odražavati obim AD lezija mozga u realnom vremenu, indirektno pokazati ekspresiju rastvorljivih oligomera ADDL-a, a zatim dinamički pratiti oštećenje neurona u mozgu od izvora, pružajući preporuke za prevenciju i liječenje bolesti. S obzirom na to, A 1-42 i A 1-40 su postali ključni ciljevi u proučavanju patogeneze AD. Hipokampus je glavni dio mozga za procjenu sposobnosti učenja i pamćenja. Oštećenje njegovih neurona je vodeći uzrok kognitivne disfunkcije u AD. CA1 područje hipokampusa jedan je od glavnih dijelova patološkog oštećenja AD. Ovaj dio eksperimenta koristi HE Metoda bojenja je pokazala da su neuroni u području CA1 hipokampusa normalne grupe raspoređeni uredno i čvrsto, ravnomjernije raspoređeni i da imaju jasne slojeve. U grupi modela, hipokampalno područje CA1 miša pokazalo je degenerativne promjene kao što je apoptoza neuronskih stanica zbog ozljede. Nakon intervencije različitih doza Cistanche fenetil alkoholnih glikozidnih grupa, morfologija ćelija CA1 područja hipokampusa

Svi imaju različite stepene poboljšanja, što ukazuje na toCistanche feniletanoidni glikozidimože imati učinak zaštite neurona i inhibicije njihove apoptoze, ali budući da HE bojenje nije specifično za apoptozu stanica i gubitak neurona, još uvijek je potrebno ciljati molekule specifične za apoptozu u kasnijoj fazi. Relevantna detekcija markera.

Prethodni tretman tkiva koje se testira direktno je povezan s rezultatom bojenja. U eksperimentu je autor otkrio da je hipokampus transgenih miševa lociran u dubokom unutrašnjem dijelu temporalnog režnja telencefalona, ​​male veličine i teško je odvojiti tkivo. Mala nepažnja će uzrokovati mehanička oštećenja tako da se patološke promjene ne mogu efikasno uočiti. U isto vrijeme, budući da su genetski modificirani miševi skupi, a ciklus eksperimentalnog doziranja dug, gubitak uzoraka može utjecati na ukupan napredak istraživanja. Stoga, kada miš završi srčanu perfuziju, cijeli mozak se vadi i fiksira paraformaldehidom, oštrica skalpela se koristi za uklanjanje olfaktorne lukovice, a ostatak moždanog tkiva se dehidrira i ugrađuje. Debljina kriške se kontrolira na 3 do 5 μm kako bi se osiguralo da je hipokampus netaknut. Pod pretpostavkom optimizacije procesa rada poboljšava se efikasnost istraživanja. U Western-blot detekciji, autor je otkrio da zbog male molekularne težine A 1-42 i A 1-40 proteina, ekspresijske trake nije lako blotirati, pa je potrebno pregledati njihov SDS -PAGE koncentracija gela, vrijeme elektroforeze i vrijeme prijenosa. Ako je koncentracija gela za razdvajanje premala, staze elektroforeze će migrirati i aktivacija proteina će biti nepotpuna; predugo vrijeme elektroforeze će uzrokovati pomicanje trake iz sloja gela; odgovarajuće vrijeme prijenosa će učiniti western blot zamućenim, čime će utjecati na inkubaciju primarnog antitijela. Kombinirajte sa sekundarnim antitijelima. Imajući to u vidu, ova studija je sprovedena kroz preliminarne eksperimente i na kraju je odabrana 15 posto gela za separaciju, elektroforezirana i prebačena membrana u trajanju od 2 sata da se izvrši Western blot na A 1-42 i A 1-40 kako bi se istražila njihova ekspresija .

Među tehničkim metodama koje se trenutno koriste za regulaciju proteina, Western-blot metoda se uglavnom koristi za kvantifikaciju kako bi se istražila specifična ekspresija srodnih proteina. Metoda imunohistohemije polazi sa kvalitativne tačke gledišta. S jedne strane, može intuitivnije pokazati stepen specifičnog vezivanja proteina i antitijela, a s druge strane može podržati kvantitativne rezultate. Budući da je imunohistohemija da detektuje ekspresiju proteina vezivanjem antitela za antigenska mesta na histopatološkim rezovima, priprema histopatoloških rezova je posebno važna. Odsjek nije lako biti previše debeo. Nakon što je sekcija završena, treba paziti da se sačuva kako bi se izbjeglo vanjsko oštećenje presjeka tkiva; prije obrade treba izvršiti odgovarajuću deparafinizaciju, a vrijeme ne smije biti kraće od 2 sata; izaberite pufer limunske kiseline sa blagim uslovima i manje slučajnih oštećenja antigena. Izvršite popravku, uklonite katalazu, potpuno otkrijte antigensko mesto i učinite da primarno antitelo potpuno odgovara mestu. Gore navedene dvije metode, kao najčešće korištene metode detekcije u molekularnoj biologiji, dopunjuju jedna drugu i pružaju tehničku podršku za istraživanje regulacije proteina.

Ova studija je koristila HE i druge metode za istraživanje hipokampalnih lezija i ekspresije proteina povezanih s A u mozgu. Rezultati su pokazali da je nakon intervencije vCistanchefeniletanoid , ćelijska morfologija hipokampalnog CA1 područja u mozgu AD modela miševa poboljšana je u različitom stupnju. Nivoi ekspresije A 1-42 i A 1-40 su značajno smanjeni. Osim toga, utvrđeno je da je zaštitni neuronski učinak grupe koja je primala verbaskozid bio bolji od ukupnogfeniletanoidni glikozidigrupa. Ukupni glikozidi odCistanche feniletanoidni glikozidiimaju veliki potencijal da poboljšaju patološke promjene u području mozga AD modela miševa, a zatim imaju antagonistički učinak na AD. Specifičan mehanizam djelovanja treba dalje proučavati u budućnosti. Ovo istraživanje upotpunjuje podatke istraživanja o mehanizmuCistancheantagonizira AD iz perspektive A, a istovremeno postavlja istraživačku osnovu za dalje razjašnjavanje mehanizma djelotvornih komponenti ili aktivnih monomeraCistancheprotiv AD u kasnijem periodu.