Interventno istraživanje glikozida feniletil alkohola u cistači na životinjskom modelu perimenopauzalnog sindroma Ⅲ

Eksperiment 2

Efekat odCistanche feniletanol glikozidna mišuperimenopauzamodel Materijali i metode

Eksperimentalni materijali

1.1 Eksperimentalne životinje

SPF miševi, vrsta Kunming, ženka, 20-25g, obezbijedio Institut za biološke proizvode Wuhan. Broj potvrde: 42000400000611; Broj certifikata laboratorije SYXK (Yu) 2010-001. 1.2 Eksperimentalni lijekovi

Cistanche deserticola feniletanol glikozid pripremljen je prema metodi Eksperimenta 1, a sadržaj je dostigao 66,47%. Gengnian'an kapsula, sastojci: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, kora božura, Poria cocos, sedef, curculigo, Schisandra chinensis, magnetit, Polyvineum u multiflora, polygonum multiflorum he. . Funkcije i indikacije: Njeguju jin i savladavaju jang, ublažavaju probleme i smiruju um. Koristi se za valunge i znojenje u menopauzi, vrtoglavicu, tinitus, razdražljivost i nesanicu. Specifikacije: 0.3g po kapsuli. Upotreba i doziranje: Oralno, po 3 kapsule, 3 puta dnevno. Proizvođač: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Broj serije proizvodnje: 121104. Broj odobrenja: National Drug Approval No. Z14021848.

Sojini izoflavoni i vitamin E meke kapsule, lista sastojaka: izoflavoni soje u prahu, vitamin E, suncokretovo ulje, želatin, glicerin, voda, tartrazin, titanijum dioksid. Ikonični sastojci i sadržaj: Svakih 100 g sadrži 55,2 mg sojinih izoflavona (izračunatih kao genistein) i 608,5 mg vitamina E. Zdravstvene funkcije: Povećava gustinu kostiju. Uputstvo i doziranje: Uzimati 1 kapsulu 2 puta dnevno sa toplom vodom. Specifikacije: 500mg×100 kapsula. Proizvođač: Weihai Ziguang Biotechnology Development Co., Ltd. Broj serije proizvodnje: 13070302. Broj odobrenja: National Food Health G20080032.

Rezultat 1 Utjecaj na autonomne aktivnosti u modelu perimenopauze miša

Rezultati testa autonomne aktivnosti miševa u svakoj eksperimentalnoj grupi prikazani su u tabeli 2 i slici 2.

1.3 Eksperimentalni reagensi

Natrijum karboksimetil celuloza, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., broj serije: 20120418; penicilin natrijum za injekcije, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikacija: 4 miliona jedinica, proizvodna serija: c1206807; otopina formaldehida (analitička kvaliteta), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., proizvodna serija: 20130902; 0,9% injekcija natrijum hlorida, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; specifikacija: 250ml, proizvodna serija: 1301265303;

Hloralhidrat, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, serijski broj 20120827; miš E2 ELISA komplet za detekciju, kompanija za istraživanje i razvoj, serijski broj: 20131001A; miš T ELISA komplet za detekciju, kompanija za istraživanje i razvoj, broj serije: 20131001A; miš LH ELISA detekcija Test kit, R&D Company, serijski broj: 20131001A;

Komplet za detekciju FSH ELISA za miš, kompanija za istraživanje i razvoj, serijski broj: 20131001A. 1.4 Eksperimentalni instrumenti

Elektronska vaga, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronska analitička vaga, kompanija Ohaus (Šangaj), model: AR1140/C; brza desktop centrifuga, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, model: TGL-168; Električno termostatsko vodeno kupatilo, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Tester autonomne aktivnosti miša, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Mjerač izbjegavanja mraka miša, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; rashladna centrifuga velike brzine, Zhongjia podružnica HKUST Innovation Co., Ltd., model: KDC-160HR; podesiva pipeta, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Čitač mikropločica, američka kompanija BIO-RAD, model: 680;

Električni mikroskop, japanska kompanija OLYMPUS, model: BX61

KOLIKO JE TREBA DA CISTANCHE proradi?

2 Eksperimentalne metode

2.1 Modeliranje i administracija lijekova

Metoda modeliranja: Uzmite 100 ženku Kunming miša težine 23-25g, nasumično odaberite 12 miševa kao praznu grupu i izvršite lažnu operaciju, a preostali miševi se koriste za kreiranje modela u menopauzi . Nakon vaganja, miševi su anestezirani intraperitonealnom injekcijom 10% hloral hidrata (0,03ml/10g) i fiksirani u abdominalni položaj. Zatim je dlaka ošišana sa stražnje strane miša ispod zadnjeg rebra na raskrsnici midaksilarne linije i oko 1 cm od vanjske strane kičme, a zatim dezinficirana i ošišana. Koža i leđni mišići su otvoreni oko 0.5-1cm, a u polju reza se može vidjeti mliječno bijela sjajna masna masa, au njoj je ugrađen jajnik. Malom pincetom lagano uhvatite masnu masu i izvucite je iz reza, odvojite masnu masu i vidjet ćete grupu tankih, nepravilnih, žutocrvenih jajnika. Prilikom rezanja prvo podvezite jajovode (uključujući masnoću) ispod jajnika tankim nitima, a zatim uklonite jajnike. Nakon operacije, rogovi materice se vraćaju u trbušnu šupljinu, šivaju se mišići i koža, a na isti način se uklanjaju oba jajnika. Nakon operacije, životinje su pažljivo uzgajane i penicilin 200,{12}} u/kg (0,1 mL svaki) je intramuskularno ubrizgan kako bi se spriječila infekcija, jednom dnevno tokom 3 uzastopna dana. Pregled vaginalnog razmaza rađen je na svakom mišu 5 dana nakon operacije, jednom dnevno tokom 5 uzastopnih dana kako bi se utvrdilo da li su jajnici potpuno uklonjeni. Miševi koji su pokazivali estrusnu reakciju u razmazu su odbačeni, a 72 potpuno kastrirana miša su nasumično i ravnomjerno podijeljena u 6 grupa za eksperimentalne svrhe, odnosno grupa modela,Grupa kapsula Gengniang'an, sojina izoflavonska grupa mekih kapsula i velika grupa. , srednje i male dozeCistanche feniletanol glikozidgrupa. Način pripreme: {{0}}.5% CMC Način pripreme: Izvagati 4g natrijum karboksimetil celuloze i pomiješati sa destilovanom vodom da dobijete 800ml. Doze velikih, srednjih i malih doza grupe Cistanche feniletanol glikozida bile su 20{{30}}mg/kg, 100mg/kg i 50mg/kg respektivno (zapremina primjene 0,1ml/ 10g). Način pripreme: Odvažite 2000mg, 1000mg, odnosno 500mg Cistanche feniletanoidnog glikozida, rastvorite ga sa malom količinom 0,5% CMC, zatim podesite zapreminu na 100ml, dobro promiješajte i to je to. Gengniangan kapsule (675 mg/kg, pomešane sa destilovanom vodom do 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, što odgovara 15 puta većoj kliničkoj dozi); način pripreme: uzmite 9 Gengnianan kapsula, prvo upotrijebite malu količinu 0,5% CMC rastvora, zatim podesite volumen na 40 ml, i dobro promiješajte da dobijete dozu Gengnianan kapsule suspenzije (675 mg/kg). Meka kapsula vitamina E iz soje izoflavona (250 mg/kg, koristite destilovanu vodu za pripremu 25 mg/ml, 0,1 ml/10 g, što odgovara 15 puta većoj kliničkoj dozi); način pripreme: uzmite 2 kapsule sojinog izoflavona, prvo upotrijebite malu količinu od 0,5 otopine %CMC, zatim podesite volumen na 40 ml i dobro promiješajte da dobijete dozu suspenzije sojinih izoflavona (250 mg/kg).

Način čuvanja: u frižideru, na toplom tokom upotrebe.

Način primjene: Životinje u svakoj grupi su 10. dana nakon operacije dobile odgovarajuće lijekove. Grupi Gengnian'an kapsula je oralno davana suspenzija Gengniang'an kapsula 675 mg·kg-1, a grupa mekih kapsula sojinog izoflavona oralno je davana 250 mg·kg-1 suspenzija mekih kapsula sojinog izoflavona, i veliki, srednji imale doze Cistanche benzenasu administrirani. Grupi etanol glikozida su oralno davane velike, srednje i male doze Cistanche feniletanoidnog glikozida 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ {5}}, 0,1ml/10g respektivno. Grupa slepih uzoraka i grupa modela su davane istom zapreminom 0,5% rastvora CMC jednom dnevno tokom 21 uzastopnog dana.

Komplet za detekciju FSH ELISA za miš, kompanija za istraživanje i razvoj, serijski broj: 20131001A. 1.4 Eksperimentalni instrumenti

Elektronska vaga, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronska analitička vaga, kompanija Ohaus (Šangaj), model: AR1140/C; brza stolna centrifuga, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, model: TGL-168 ; Električno termostatsko vodeno kupatilo, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Tester autonomne aktivnosti miša, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Mjerač izbjegavanja mraka miša, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; rashladna centrifuga velike brzine, Zhongjia podružnica HKUST Innovation Co., Ltd., model: KDC-160HR; podesiva pipeta, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Čitač mikropločica, američka kompanija BIO-RAD, model: 680;

Električni mikroskop, japanska kompanija OLYMPUS, model: BX61

2 Eksperimentalne metode

2.1 Modeliranje i primjena lijekova

Metoda modeliranja: Uzmite 100 ženku Kunming miša težine 23-25g, nasumično odaberite 12 miševa kao praznu grupu i izvršite lažnu operaciju, a preostali miševi se koriste za kreiranje modela u menopauzi . Nakon vaganja, miševi su anestezirani intraperitonealnom injekcijom 10% hloral hidrata (0,03ml/10g) i fiksirani u abdominalni položaj. Zatim je dlaka ošišana sa stražnje strane miša ispod zadnjeg rebra na raskrsnici midaksilarne linije i oko 1 cm od vanjske strane kičme, a zatim dezinficirana i ošišana. Koža i leđni mišići su otvoreni oko 0.5-1cm, a u polju reza se može vidjeti mliječno bijela sjajna masna masa, au njoj je ugrađen jajnik. Malom pincetom lagano uhvatite masnu masu i izvucite je iz reza, odvojite masnu masu i vidjet ćete grupu tankih, nepravilnih, žutocrvenih jajnika. Prilikom rezanja prvo podvezite jajovode (uključujući masnoću) ispod jajnika tankim nitima, a zatim uklonite jajnike. Nakon operacije, rogovi materice se vraćaju u trbušnu šupljinu, šivaju se mišići i koža, a na isti način se uklanjaju oba jajnika. Nakon operacije, životinje su pažljivo uzgajane i penicilin 200,{12}} u/kg (0,1 mL svaki) je intramuskularno ubrizgan kako bi se spriječila infekcija, jednom dnevno tokom 3 uzastopna dana. Pregled vaginalnog razmaza rađen je na svakom mišu 5 dana nakon operacije, jednom dnevno tokom 5 uzastopnih dana kako bi se utvrdilo da li su jajnici potpuno uklonjeni. Miševi koji su pokazali estrusnu reakciju u razmazu su odbačeni, a 72 potpuno kastrirana miša su nasumično i ravnomjerno podijeljena u 6 grupa za eksperimentalne svrhe, odnosno grupa modela, grupa Gengniang'an kapsula, grupa mekih kapsula izoflavona soje i velika grupa. , srednje i male dozeCistanche feniletanol glikozidgrupa. Način pripreme: 0.5% CMC Način pripreme: Izvagati 4 g natrijum karboksimetil celuloze i pomešati sa destilovanom vodom da dobijete 800 ml. Doze velike, srednje i male dozeCistanche feniletanol glikozidgrupa je iznosila 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg i 50mg/kg respektivno (upotreba 0,1ml/10g). Način pripreme: Odvažite 2000mg, 1000mg, odnosno 500mg Cistanche feniletanoidnog glikozida, rastvorite ga sa malom količinom 0,5% CMC, zatim podesite zapreminu na 100ml, dobro promiješajte i to je to. Gengniangan kapsule (675 mg/kg, pomešane sa destilovanom vodom do 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, što odgovara 15 puta većoj kliničkoj dozi); način pripreme: uzmite 9 Gengnianan kapsula, prvo upotrijebite malu količinu 0,5% CMC rastvora, zatim podesite volumen na 40 ml, i dobro promiješajte da dobijete dozu Gengnianan kapsule suspenzije (675 mg/kg). Meka kapsula vitamina E iz soje izoflavona (250 mg/kg, koristite destilovanu vodu za pripremu 25 mg/ml, 0,1 ml/10 g, što odgovara 15 puta većoj kliničkoj dozi); način pripreme: uzmite 2 kapsule sojinog izoflavona, prvo upotrijebite malu količinu od 0,5 otopine %CMC, zatim podesite volumen na 40 ml i dobro promiješajte da dobijete dozu suspenzije sojinih izoflavona (250 mg/kg).

Način čuvanja: u frižideru, na toplom tokom upotrebe.

Način primjene: Životinjama u svakoj grupi su davani odgovarajući lijekovi 10 dana nakon operacije. Grupi Gengnian'an kapsula je oralno davana suspenzija Gengniang'an kapsule 675 mg·kg-1, a grupa mekih kapsula sojinog izoflavona oralno je davana 250 mg·kg-1 sojinog izoflavona suspenzija meke kapsule, a davane su velike, srednje i male doze Cistanche benzena. Grupi etanol glikozida su oralno davane velike, srednje i male doze Cistanche feniletanoidnog glikozida 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg-1, 0,1ml/10g respektivno. Grupa slepih uzoraka i grupa modela su davane istom zapreminom 0,5% rastvora CMC jednom dnevno tokom 21 uzastopnog dana.

2.2 Stavke posmatranja i metode detekcije

Broj spontanih aktivnosti miševa u svakoj grupi unutar 5 minuta mjeren je 18. dana primjene. Latencija miševa koji su prvi put ušli u mračnu komoru i broj električnih šokova primljenih u roku od 5 minuta od ulaska u tamnu komoru izmjereni su od 19. do 20. dana primjene. 2 sata nakon posljednje doze (12 sati bez hrane i vode), miševi su izmjereni, očne jabučice su im uklonjene, krv je sakupljena, serum je odvojen i sadržaj E2, T, LH i FSH u serumu izmjereno; miševi su zatim žrtvovani dislokacijom grlića materice i secirani. , uklonite timus, slezinu i tkivo materice, izvažite njihovu vlažnu težinu i izračunajte indeks organa (indeks organa=vlažna težina organa mg/težina miša g), a zatim uklonite hipofizu; fiksirajte timus, slezenu, matericu i hipofizu na U 10% rastvoru formalina, ulivenog u parafin, presecite, HE obojeno, a morfološke promene tkiva svake grupe posmatrane su pod svetlosnim mikroskopom.

2.2.1 Test na broj nezavisnih aktivnosti

Miševi iz svake grupe stavljeni su u aparat za dobrovoljne aktivnosti, koji su prvo prilagođeni okolini 1 minut, a zatim je meren broj voljnih aktivnosti u roku od 5 minuta.

2.2.2 Test izbjegavanja mraka

Stavite miševe iz svake grupe u kutiju za testiranje sa repovima okrenutim prema malom otvoru u mračnoj komori i provedite obuku. Nakon 24 sata, ponovo je izmjeren period latencije miševa koji su prvi put ušli u mračnu komoru i broj strujnih udara primljenih u roku od 5 minuta nakon ulaska u mračnu komoru.

2.2.3 Metoda određivanja kompleta

Uzmite uzorke seruma: Koristite epruvete koje ne sadrže pirogene i endotoksine. Izbjegavajte bilo kakvu ćelijsku stimulaciju tokom operacije. Nakon prikupljanja krvi, centrifugirajte je na 3000 o/min 10 minuta da brzo i pažljivo odvojite serum i crvena krvna zrnca. Metoda testa kompleta za detekciju mišjeg estradiola (E2) ELISA: Izvadite potrebne trake iz vrećice od aluminijske folije koja je bila ekvilibrirana na sobnoj temperaturi 20 minuta, a preostale trake zatvorite u samozatvarajuću vrećicu i vratite ih na 4 stepena . Postavite standardne jažice i jažice za uzorke i dodajte 50 μL standarda različitih koncentracija u svaku standardnu ​​jažicu. Prvo dodajte 10 μL uzorka koji se ispituje u bunar za uzorak, a zatim dodajte 40 μL razblaživača uzorka (tj. uzorak se razblaži 5 puta); nemojte ga dodavati u prazan bunar. Osim u praznu jažicu, dodajte 100 μL detekcionog antitijela označenog peroksidazom hrena u svaku jažicu standardne jažice i jažice za uzorke i zatvorite reakcionu jažicu filmom za brtvljenje. Inkubirajte u vodenom kupatilu na 37 stepeni ili inkubatoru 60 minuta. Odbacite tečnost, osušite na upijajućem papiru, napunite svaku jažicu rastvorom za pranje i ostavite da odstoji 1 minut. Otresite tečnost za pranje, osušite na upijajućem papiru i ponovite pranje ploče 5 puta. Prvo dodajte po 50 μL supstrata A i B u svaku jažicu i inkubirajte na 37 stepeni u mraku 15 minuta. Izvadite enzimsku ploču, dodajte 50 μL stop rastvora u svaku jažicu i u roku od 15 minuta izmjerite vrijednost apsorbancije (OD vrijednost) svake jažice na talasnoj dužini od 450 nm. Prema koncentraciji standardnog proizvoda i odgovarajućoj vrijednosti OD, nacrtajte krivu regresije standardnog proizvoda i izračunajte vrijednost koncentracije svakog uzorka prema jednadžbi krivulje. Konačna koncentracija je stvarno izmjerena koncentracija pomnožena faktorom razrjeđivanja. Među njima, koncentracije standardnih proizvoda (S0-S5) su 0, 4, 8, 16, 32 i 64 pmol/L. Koncentracije standardnog kompleta za detekciju testosterona (T) miša (miša) (S0-55) su 0, 50, 100, 200, 400 i 800 pg/mL;

Koncentracije standardnog kompleta za detekciju ELISA luteinizirajućeg hormona (LH) miša (S{{0}}) su 0, 0,5, 1, 2, 4, 8mIU/mL;

Koncentracije standardnog kompleta za detekciju ELISA folikulostimulirajućeg hormona (FSH) miša (Miš) (S0-55) su 0, 5, 10, 20, 40 i 80 mIU/mL.

2.3 Metode statističke obrade

Za analizu podataka korišten je medicinski statistički paket SPSS17.0 za statističku obradu podataka. Podaci mjerenja izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (-x±s). Za poređenje između grupa korištena je jednosmjerna analiza varijanse. LSD metoda je korištena za testiranje homogenosti varijansi. , Games-Howell test je korišten za neujednačene varijanse, a Ridit test je korišten za podatke o ocjenama.

Slika 3. Utjecaj Cistanche feniletanol glikozida na latentni period eksperimenta izbjegavanja mraka u modelu perimenopauze kod miša

Slika 4. Utjecaj Cistanche feniletanol glikozida na broj električnih šokova u eksperimentu izbjegavanja mraka na modelu miša u perimenopauzi. Iz tabele 3 i slika 3~4 može se videti da su u poređenju sa grupom slijepih miševa, period inkubacije i broj električnih šokova miševa u grupi modela značajno smanjeni (P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 Efekti na indeks organa u modelu perimenopauze kod miša

Indeksi timusa, slezine i materice miševa u svakoj eksperimentalnoj grupi prikazani su u tabeli 4 i slici 5.

Kao što se može vidjeti iz tabele 4 i slike 5, u poređenju sa slijepom grupom, uteralni indeks miševa u modelnoj grupi bio je značajno niži (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

Sadržaj E2, T, FSH i LH u serumu miševa u svakoj grupi. Vidi tabele 5~6 i slike 6~9. Iz tabela 5-6 i slika 6-9 može se vidjeti da su u poređenju sa slijepom grupom, nivoi E2 i T u serumu miševa u grupi modela bili značajno smanjeni (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 Efekti na nivoe polnih hormona u serumu u modelu perimenopauze kod miša

Sadržaj E2, T, FSH i LH u serumu miševa u svakoj grupi. Vidi tabele 5~6 i slike 6~9.

Iz tabela 5-6 i slika 6-9 može se vidjeti da su u poređenju sa slijepom grupom, nivoi E2 i T u serumu miševa u grupi modela bili značajno smanjeni (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

Patološki i histološki rezultati promatranja materice, timusa, slezene i hipofize miševa u svakoj eksperimentalnoj grupi su sljedeći. Patološke fotografije su prikazane u Dodatku 1 za patološke fotografije miševa u perimenopauzi.

5.1 Utjecaj na morfologiju tkiva materice kod modela miševa u perimenopauzi

Prema različitim stupnjevima promjena u endometrijumu, žlijezdama i miometrijumu miševa u svakoj grupi eksperimenata, korišteni su polukvantitativni standardi za podjelu patološke morfologije tkiva na četiri nivoa. Mjerene su materice miševa u svakoj grupi eksperimenata. Rezultati posmatranja prikazani su u Tabeli 7. Tabela 7. Utjecaj feniletanol glikozida Cistanche deserticola na patološke promjene maternice kod miševa u perimenopauzi Jedinica: samo

"-" Epitelne ćelije endometrijuma, žlezde, miometrijum i seroza su normalne; "+" epitelne ćelije i žlezde endometrijuma su atrofirane, a miometrijum i seroza su normalni; "++" epitel endometrijuma Ćelije i žlijezde su djelimično atrofirane, mišićni sloj je blago atrofiran, a seroza je normalna; "+++" epitelne ćelije i žlezde endometrijuma su značajno atrofirane, a seroza je normalna.

Nakon Ridit testa, iz gornje tabele se može vidjeti da je u poređenju sa slijepom grupom, materica miševa u modelnoj grupi pokazala značajne patološke lezije tkiva (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

Koristite mikrometar da izmjerite debljinu najdebljih i najužih dijelova korteksa timusa svakog miša u svakoj eksperimentalnoj grupi kako biste dobili prosjek; koristite mikrometar da postavite osnovnu liniju na čvorić slezene i izmjerite dvije debljine sa centralnom arterijom kao središtem. Izračunata je i usrednjena debljina čvorova slezene sa obe strane; rezultati su prikazani u tabeli 8 i na slici 10.

Tabela 8. Učinci feniletanol glikozida Cistanche deserticola na patološke promjene timusa i slezene kod modela miševa u perimenopauzi (-x±s)

Kao što se može vidjeti iz tabele 8 i slike 10, u poređenju sa slijepom grupom, debljina korteksa timusa i volumen čvorova slezene u grupi modela su značajno smanjeni (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

Vidno polje velikog povećanja pokriva površinu od 10000 μm

2. Izmjerite broj bazofilnih ćelija i ćelija prednje hipofize u mikropravougaonom okviru. Rezultati su prikazani u tabeli 9 i slikama 11~12.

Iz tabele 9 i slika 11-12 može se vidjeti da je u poređenju sa slijepom grupom, broj bazofilnih ćelija i ćelija prednje hipofize u grupi modela značajno smanjen (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).