Peptid sličan galaninu i njegova korelacija s razinama androgena kod pacijenata sa sindromom policističnih jajnika

Uvod

Sindrom policističnih jajnika (PCOS) je multifaktorsko stanje koje karakterizira klinički ili biokemijski hiperandrogenizam, disfunkcija jajnika i/ili policistični jajnici. Često su prisutni inzulinska rezistencija i centralna adipoznost, a žene sa PCOS-om imaju veći rizik od metaboličkih komorbiditeta kao što su dislipidemija, predijabetes i dijabetes tipa 2 [1–3]. Takođe, PCOS je povezan sa važnim reproduktivnim komorbiditetima, uključujući neplodnost, nepravilna krvarenja iz materice i povećan gubitak trudnoće tokom reproduktivnih godina.

Click to ekstrakt cistanche tubulosa za bolest bubrega

Zbog dugotrajne stimulacije estrogenom bez suprotstavljanja, ovi pacijenti su skloni povećanom riziku od raka endometrijuma [4]. Tačna etiologija PCOS-a nije u potpunosti shvaćena; smatra se heterogenim poremećajem sa višefaktorskim uzrocima. Mogući osnovni uzroci PCOS-a uključuju povećanu frekvenciju pulsa gonadotropin-oslobađajućeg hormona (GnRH), što dovodi do povećane amplitude i učestalosti luteinizirajućeg hormona (LH) i stimulacije theca ćelija da proizvode androgen; sniženi nivoi folikulostimulirajućeg hormona (FSH) u odnosu na LH, inzulinska rezistencija u masnom tkivu i skeletnim mišićima putem postreceptorskog defekta (abnormalna fosforilacija tirozin kinaze), disfunkcija beta-ćelija pankreasa i gojaznost [4-6].

Povišena frekvencija LH pulsa, povećani nivoi hipotalamusa kisspeptina i povećana aktivnost GnRH neuronske mreže su među gore navedenim predloženim osnovnim patologijama u PCOS-u [7]. Ovaj povišeni izlaz GnRH hipotalamusa vjerovatno dijelom proizlazi iz promjene u metaboličkom stanju tijela. Neuropeptid Y (NPY), grelin (GHRL), galanin (GAL) i peptid sličan galaninu (GALP) su predloženi kao kandidati koji prenose metabolički status GnRH neuronskoj mreži kod životinja [8].

GALP je nedavno identificirani peptid hipotalamusa, lokaliziran u arkuatnom jezgru (ARC), koji izgleda stimulira ćelije hipotalamusa i GT1-7 (ćelijska linija GnRH neurona) da oslobađaju GnRH [9]. GALP je neuropeptid uključen u regulaciju ponašanja pri unosu hrane, tjelesne težine i energetskog metabolizma.

Budući da patogeneza PCOS-a uključuje neuroendokrine abnormalnosti, cilj nam je bio da istražimo nivoe GALP-a u serumu (sa neuralnim i metaboličkim funkcijama) kod pacijenata sa PCOS-om. Takođe smo imali za cilj da procenimo korelaciju nivoa GALP u serumu sa hormonskim profilom, kao i metaboličkim parametrima, vitaminom D i serumskim biomarkerima rizika od kardiovaskularnih bolesti kao što su CRP, fibrinogen i D-dimer kod pacijenata sa i bez PCOS. Do danas, u literaturi nije bilo studija o nivoima GALP-a kod pacijenata sa PCOS-om.

Materijal i metode

Ova poprečna studija slučaj-kontrola uključivala je 48 žena (uzrasta od 18 do 44 godine) sa dijagnozom PCOS definisanom Roterdamskim kriterijumima [6]. Kontrolnu grupu činilo je 40 zdravih žena (18-49 godina). Studija je sprovedena između januara 2022. i avgusta 2022. na Odeljenju za endokrinologiju i bolesti metabolizma u bolnici za istraživanje i obuku Tepecik Univerziteta zdravstvenih nauka. Žene s kroničnim bolestima kao što su očigledna hipotireoza ili hipertireoza, zatajenje bubrega ili jetre, hiperprolaktinemija, kasna hiperplazija nadbubrežne žlijezde, dijabetes, hipertenzija ili Cushingov sindrom, kao i žene koje uzimaju hormone štitnjače ili antitireoidne lijekove, isključene su iz studije. .

Osim toga, isključene su žene koje su primale hormonsku terapiju, uključujući oralne kontraceptive ili steroide (glukokortikoide), unutar 6 mjeseci. Svi učesnici su dali pismeni informirani pristanak za učešće, odobren od strane Etičkog komiteta bolnice za obuku i istraživanje Izmir Tepecik, Univerziteta zdravstvenih nauka, (Datum: 15. novembar 2021; Broj sastanka: 11; Odluka: 9) i Deklaracijom Helsinki. Indeks tjelesne mase (BMI) i obim struka mjereni su kod svih ispitanika. Hirzutizam je procenjen na osnovu Ferriman-Gallwey indeksa za 9 delova tela [10].

Venska krv natašte je dobijena od svih subjekata studije radi procene biohemijskih parametara uključujući glukozu u plazmi i profil lipida [ukupni holesterol (TC), holesterol lipoproteina visoke gustine (HDL-C), holesterol lipoproteina niske gustine (LDL-C) i trigliceride (TG)] kao i hormoni uključujući estradiol, progesteron, ukupni testosteron, prolaktin, inzulin, dehidroepiandrosteron sulfat (DHEA-S), FSH, LH, slobodni trijodtironin (FT3), slobodni tiroksin (FT4), TSH i antitiroidne žlezde antitijela na peroksidazu (anti-TPO). Uzorci seruma su alikvoti, zamrznuti i pohranjeni na –80ºC za GALP analizu. Uzorci krvi su uzeti tokom trećeg do devetog dana menstrualnog ciklusa ili 60 dana nakon toga

ima poslednju menstruaciju. Svim učesnicima je urađen ultrazvuk karlice. Laboratorijske procjene nivoa glukoze, TG, TC i HDL-C mjerene su enzimskim metodama korištenjem AU5800 autoanalizera (Beckman Coulter Inc., CA, Sjedinjene Države). LDL-C je izračunat pomoću Friedewaldove jednačine. Nivoi insulina, FSH, LH, TC, estradiola, progesterona, prolaktina i DHEAS analizirani su metodom hemiluminiscencije korišćenjem DxI imunoanalizera (Beckman Coulter Inc., Kalifornija, Sjedinjene Države). Nivoi FT3, FT4, TSH i anti-TPO mjereni su hemiluminiscentnom metodom korištenjem Immulite 2000 autoanalizera (Immulite XPi, Siemens, Njemačka).

Glikirani hemoglobin (HbA1c) mjeren je metodom tečne hromatografije visokih performansi sa afinitetom boranata (Trinity Biotech, Kansas City, MO, Sjedinjene Američke Države). Za detekciju serumskog 25-hidroksivitamina D (25(OH)D) (Siemens Advia Centaur XP, Mannheim, Njemačka) korištena je hemiluminescentna imunološka metoda. Nivoi fibrinogena i D-dimera su analizirani Sysmex CS-2500 analizatorom (Sysmex Corporation, Kobe, Japan). GALP je mjeren metodom enzimskog imunosorbentnog testa (ELISA) sa komercijalno dostupnim kompletima (osjetljivost: 1,4 pg/mL; raspon analize: 4,69–300 pg/mL). Procjena modela homeostaze (HOMA) korištena je za mjerenje osjetljivosti na inzulin pomoću jednačine: Inzulin natašte (mU/L) × glukoza (mmol/L)/22,5 Inzulinska rezistencija se određuje tako što je vrijednost HOMA > 2,7 [11].

Rezultati

Kliničke karakteristike pacijenata i kontrolnih grupa prikazane su u tabeli 1. Nisu uočene značajne razlike između 2 grupe prema starosti i BMI. Obim struka (90,72 ± 15,36 cm naspram 84,33 ± 12,21 cm, p=0.044) i Ferriman-Gallwey skor (8,95 ± 2,94 naspram 7,10 ± 4,11, p {{02}) bili su značajno veći. kod pacijenata sa PCOS-om u poređenju sa kontrolnom grupom.

Vrijednosti glukoze u krvi natašte i HbA1c, parametri lipida, slobodni T3, slobodni T4, TSH i anti-TPO bili su slični između 2 grupe (Tab. 2). Isto tako, nivoi insulina natašte i vrednosti HOMA nisu se značajno razlikovale između dve grupe. Nivoi 25(OH)D u serumu (9,62 ± 6,84 ng/mL naspram 16,73 ± 9,87 ng/mL, p=0.001) bili su značajno niži kod pacijenata sa PCOS-om u kontrolnoj grupi. Dok su nivoi FSH, LH, estradiola, progesterona, prolaktina i DHEAS bili slični, ukupni testosteron je bio značajno viši kod pacijenata sa PCOS. Ukupni nivo testosterona bio je 67,68 ± 34,68 ng/dL u grupi pacijenata i 47,87 ± 19,32 ng/dL u kontrolnoj grupi (p=0,002).

Nivoi CRP-a, fibrinogena i D-dimera bili su slični između 2 grupe. Nivo GALP u serumu bio je značajno viši kod pacijenata sa PCOS-om (24,84 ± 12.08 ng/mL) nego u kontrolne grupe (1,54 ± 1,21 ng/mL) (p=0,001). Takođe, analiza krive operativnih karakteristika prijemnika (ROC) pokazala je da je, kada se uzme granična vrijednost > 5,83, osjetljivost GALP-a bila 69,7 posto, a specifičnost 100 posto u identifikaciji PCOS [područje ispod krive (AUC) 0,892] ( p=0.001) (slika 1).

Urađene su korelacione analize između GALP-a i svih ostalih proučavanih parametara. GALP je imao negativnu korelaciju sa 25(OH)D (r=–0.401, p=0.002) i pozitivnu korelaciju sa ukupnim vrijednostima testosterona (r=0.265, p=0.024) (slika 2). Nije uočena korelacija između GALP-a i drugih parametara. Višestruka regresiona analiza je otkrila da iako su i ukupni nivoi testosterona i 25(OH)D značajno doprinijeli nivoima GALP, doprinos 25(OH) D je bio veći (beta=–0,379, p=0.003 ) (Tab. 3).

Diskusija

PCOS je jedna od najčešćih endokrinopatija kod žena reproduktivne dobi, a karakteriziraju je hiperandrogenizam, menstrualni poremećaji i morfologija policističnih jajnika na ultrazvuku. Osim reproduktivnih bolesti, često se povezuje i s metaboličkom disfunkcijom – uključujući dijabetes tipa 2 – i kardiovaskularnim bolestima [12]. Iako je tačna etiologija i dalje nepoznata, sugerira se nekoliko patogenetskih mehanizama: genetski faktori, povećana frekvencija GnRH pulsa i pulsacija LH, te relativno sniženi nivoi FSH, hiperinzulinemija i inzulinska rezistencija [4, 13].

Povećana pulsacija LH potiče povećanu proizvodnju androgena iz theca ćelija, a smanjeni nivoi FSH dovode do poremećene aromatizacije estrogena, sazrevanja folikula i ovulacije. Inzulinska rezistencija uočena kod PCOS-a je uzrokovana abnormalnom fosforilacijom inzulinskog receptora intracelularnim serin kinazama u masnom tkivu i skeletnim mišićima, što doprinosi povećanju 17,20-liazne aktivnosti P450c17 u theca stanicama jajnika i povećanju regulacije formiranje testosterona putem povećane ekspresije gena HSD17B5 u masnom tkivu [14, 15]. Hiperinzulinemija pojačava LH stimulaciju proizvodnje androgena u jajnicima tako što povećava regulaciju LH-vezujućih mjesta i povećava proizvodnju androgena na nivou citokroma P450c17 [14, 16].

Osim što igra značajnu ulogu u homeostazi kalcija i metabolizmu kostiju, sugerirano je da vitamin D igra ulogu u patogenezi PCOS-a. Utvrđeno je da nedostatak vitamina D doprinosi gojaznosti, insulinskoj rezistenciji i metaboličkom sindromu, koji se obično primećuju kod PCOS-a i povezani su sa ovulatornom disfunkcijom [17–19]. Takođe, prijavljeno je da korekcija nedostatka vitamina D povećava rastvorljive receptore krajnjih produkata napredne glikacije (sRAGE) i smanjuje povišeni anti-Mullerov hormon (AMH). sRAGE se vezuje za cirkulišući AGES i inhibira njegove upalne štetne efekte [17, 20].

Budući da je poznato da LH povećava proizvodnju AMH u ćelijama granuloze PCOS jajnika, smanjenje nivoa AMH povezano sa smanjenjem nivoa LH dovodi do smanjenja intrafolikularnih androgena i povećanja folikularne osjetljivosti na FSH, što sve poboljšava ovulatorni proces [ 21]. Postoje brojne studije o nivoima vitamina D u PCOS-u. Dok neki od njih nisu otkrili nedostatak vitamina D, većina njih je pokazala niži nivo vitamina D kod pacijenata sa PCOS-om [22–25]. U nekim studijama, koncentracije 25(OH)D u serumu bile su u negativnoj korelaciji s glukozom natašte, inzulinom, trigliceridima, CRP-om, indeksom slobodnog androgena i DHEAS-om. U skladu sa prethodnim nalazima, u našoj studiji smo pronašli značajno niže nivoe 25(OH)D u serumu kod pacijenata sa PCOS u odnosu na kontrolnu grupu. Međutim, nismo pronašli nikakvu korelaciju između serumskog 25(OH)D i metaboličkih i hormonalnih parametara. Biomarkeri rizika od kardiovaskularnih bolesti kao što su CRP i parametri koagulacije uključujući fibrinogen i D-dimer procijenjeni su u prethodnim studijama [26–28]. Dok su neke od studija otkrile slične nivoe iu PCOS iu kontrolnim grupama [26], druge su pronašle povišene vrednosti kod PCOS-a [27, 28].

U našoj studiji smo pronašli slične vrijednosti iu PCOS iu kontrolnoj grupi u pogledu CRP, fibrinogena i d-dimera. Ovo se može objasniti činjenicom da se u prethodnim studijama hiperkoagulabilno stanje kod PCOS-a pripisivalo povećanom BMI-u, inzulinskoj rezistenciji i upali, au našem istraživanju vrijednosti BMI i inzulina bile su slične u obje grupe. GALP je otkriven 1999. godine u svinjskom hipotalamusu i dijeli homologiju sekvence sa galaninom. Utvrđeno je da može da veže i aktivira sva 3 receptorska podtipa galanina (GalR1, GalR2, GalR3).

U eksperimentalnim studijama na štakorima, ćelije koje proizvode GALP mRNA i protein pronađene su u arkuatnom jezgru, srednjoj eminenciji, infundibularnoj stabljici i stražnjoj hipofizi [26, 27]. Nakon intracerebroventrikularne (ICV) primjene kod pacova, GALP je povećao ekspresiju C fos u neuronima koji sadrže NPY u DMH i stimulirao unos hrane tokom 2 sata [26, 28]. Međutim, pokazalo se da GALP ima dvosmjerni učinak na hranjenje, jer je nakon 24 sata primjene ICV GALP-a zabilježeno smanjenje unosa hrane i tjelesne težine te povećanje tjelesne temperature kod pacova i miševa [26, 29].

Nakon toga, eksperimentalne studije su pokazale da su GALP-imunoreaktivna (GALP-ir) vlakna bila u bliskom kontaktu sa tijelima GnRH ćelija u dijagonalnom pojasu Broca i medijalne preoptičke oblasti. Kod pacova, centralna primjena GALP-a stimulira sekreciju LH posredovanu GnRH [26, 30–34]. Budući da je otkriveno da je GALP uključen u povećano lučenje LH posredovano GnRH, on bi mogao funkcionirati kao posrednik u povećanoj frekvenciji GnRH pulsa i pulsiranju LH kod PCOS-a. Naša studija je prva u literaturi koja je istraživala nivoe GALP u serumu kod pacijenata sa PCOS. Pronašli smo značajno više nivoe GALP-a kod pacijenata sa PCOS-om.

U našoj studiji smo pronašli značajnu pozitivnu korelaciju između GALP i vrijednosti ukupnog testosterona. Ovo se može objasniti činjenicom da GALP stimulacija povećane sekrecije LH posredovane GnRH može dovesti do povećane proizvodnje androgena u theca stanicama jajnika. Također smo otkrili značajnu negativnu korelaciju između nivoa 25(OH)D u serumu i GALP-a. Budući da su receptori za vitamin D također pronađeni u hipotalamusu u eksperimentalnim studijama, a pokazalo se da suplementacija vitamina D smanjuje intrafolikularne androgene i povećava osjetljivost folikula na FSH, može se pretpostaviti da može postojati međusobna povezanost između vitamina D i GALP. Međutim, u literaturi nema dokaza koji podržavaju ovu hipotezu.

Zaključci

Zaključno, PCOS je složen poremećaj koji uključuje inzulinsku rezistenciju ili višak LH. Međutim, točna patogeneza još uvijek nije otkrivena. Naša studija je prva u literaturi koja procjenjuje nivoe GALP u serumu kod pacijenata sa PCOS. Povećani nivoi GALP-a u PCOS-u i njihova povezanost s ukupnim nivoima testosterona mogu pokazati da GALP može djelovati kao posrednik u povećanom oslobađanju LH-posredovanog GnRH-a, što je jedan od temeljnih patogenetskih mehanizama PCOS-a. Budući da ne možemo potvrditi uzročnost zbog dizajna poprečnog presjeka studije, treba provesti daljnja istraživanja o mogućoj ulozi GALP-a u PCOS-u.

Mehanizam Cistanchea pojačava učinak testosterona

Utvrđeno je da Cistanche podiže nivo testosterona na nekoliko načina. Prvo, sadrži spojeve poznate kao ehinakozid i akteozid, za koje se pokazalo da pojačavaju proizvodnju luteinizirajućeg hormona (LH) u hipofizi. LH stimuliše Leydigove ćelije u testisima da proizvode testosteron. Cistanche također sadrži polisaharide i feniletanoidne glikozide, za koje se pokazalo da imaju antioksidativna i protuupalna svojstva. Ovo može pomoći u smanjenju oksidativnog stresa i upale u testisima, što može umanjiti proizvodnju testosterona. Dodatno, utvrđeno je da Cistanche povećava ekspresiju gena uključenih u sintezu testosterona i smanjuje aktivnost enzima koji razgrađuju testosteron, kao što je {{1} }alfa-reduktaza. Sve u svemu, smatra se da kombinacija ovih mehanizama doprinosi Cistancheovim efektima povećanja testosterona.

Reference

1 Spritzer PM, Santos BR, Fighera TM, et al. Intrinzične abnormalnosti masnog tkiva i disfunkcija masnog tkiva u PCOS-u. U: Diamanti-Kandarakis E. ed. Sindrom policističnih jajnika, izazovna pitanja u modernoj eri individualizirane medicine. Elsevier 2022: 73–96.

2. Bozkırlı E, Bakıner O, Ertörer E, et al. Inzulinska rezistencija kod osoba sa sindromom policističnih jajnika bez gojaznosti i veza sa porodičnom istorijom dijabetes melitusa. Turk Jem. 2015; 19(2): 55–59, doi: 10.4274/tjem.2761.

3. Çakır E, Çakal E, Özbek M, et al. Sindrom policističnih jajnika i odnos rizika od kardiovaskularnih bolesti. Turk Jem. 2013; 17(2): 33–37, doi: 10.4274/tjem.2071.

4. Bednarska S, Siejka A. Patogeneza i liječenje sindroma policističnih jajnika: šta je novo? Adv Clin Exp Med. 2017; 26(2): 359–367, doi: 10.17219/item/59380, indeksirano u Pubmed: 28791858.

5. Wołczyński S, Zgliczyński W. Abnormalnosti menstrualnog ciklusa. U: Zgliczyński W. ed. Large Interna — Endokrinologija. 2. izdanje. Medical Tribune Poljska, Varšava 2012: 561–567.

6. Roterdamska ESHRE/ASRM-Sponzorirana PCOS grupa za konsenzus, Roterdamska ESHRE/ASRM-Sponzorirana PCOS grupa za konsenzusnu radionicu. Revidirani konsenzus iz 2003. o dijagnostičkim kriterijima i dugoročnim zdravstvenim rizicima povezanim sa sindromom policističnih jajnika (PCOS). Hum Reprod. 2004; 19(1): 41–47, doi: 10.1093/humrep/deh098, indeksirano u Pubmed: 14688154.

7. Esparza LA, Schafer D, Ho BS, et al. Hiperaktivni LH pulsevi i povišena ekspresija gena Kisspeptina i NKB u arkuatnom jezgru mišjeg modela PCOS. Endokrinologija. 2020; 161(4), doi: 10.1210/endocr/bqaa018, indeksirano u Pubmed: 32031594.

8. Li Y, Zhi W, Haoxu D, et al. Efekti elektroakupunkture na ekspresiju hipotalamusa neuropeptida Y i grelina kod pubertetskih pacova sa sindromom policističnih jajnika. PLoS One. 2022; 17(6): e0259609, doi: 10.1371/journal.pone.0259609, indeksirano u Pubmed: 35704659.

9. Mohr MA, Leathley E, Fraley GS. Hipotalamus sličan peptidu galaninu spašava početak puberteta kod pacova koji se odvajaju od hrane ograničene na hranu. J Neuroendocrinol. 2012; 24(11): 1412–1422, doi: 10.1111/j.1365-2826.2012.02351 .x, indeksirano u Pubmed: 22681480.

10. Ferriman D, Gallwey JD. Klinička procjena rasta dlačica na tijelu kod žena. J Clin Endocrinol Metab. 1961; 21: 1440–1447, doi: 10.1210/jcem-21-11-1440, indeksirano u Pubmed: 13892577.

11. Matthews DR, Hosker JP, Rudenski AS, et al. Procjena modela homeostaze: inzulinska rezistencija i funkcija beta-ćelija iz koncentracije glukoze u plazmi natašte i inzulina kod čovjeka. Diabetologia. 1985; 28(7): 412–419, doi: 10.1007/BF00280883, indeksirano u Pubmed: 3899825.

12. Goodarzi MO, Dumešić DA, Chazenbalk G, et al. Sindrom policističnih jajnika: etiologija, patogeneza i dijagnoza. Nat Rev Endocrinol. 2011; 7(4): 219–231, doi: 10.1038/nrendo.2010.217, indeksirano u Pubmed: 21263450.

13. Burt Solorzano CM, Beller JP, Abshire MY, et al. Neuroendokrina disfunkcija kod sindroma policističnih jajnika. Steroidi. 2012; 77(4): 332–337, doi: 10.1016/j.steroids.2011.12.007, indeksirano u Pubmed: 22172593.

14. Rosenfield RL, Ehrmann DA. Patogeneza sindroma policističnih jajnika (PCOS): Ponovo razmotrena hipoteza PCOS-a kao funkcionalnog hiperandrogenizma jajnika. Endocr Rev. 2016; 37(5): 467–520, doi 10.1210/er.2015-1104, indeksirano u Pubmed: 27459230. 15. Wu S, Divall S, Nwaopara A, et al. Neplodnost izazvana gojaznošću i hiperandrogenizam se koriguju brisanjem inzulinskog receptora u teka ćeliji jajnika. Dijabetes. 2014; 63(4): 1270–1282, doi: 10.2337/db13-1514, indeksirano u Pubmed: 24379345.

16. Rosenfield RL, Ehrmann DA. Patogeneza sindroma policističnih jajnika (PCOS): Ponovo razmotrena hipoteza PCOS-a kao funkcionalnog hiperandrogenizma jajnika. Endocr Rev. 2016; 37(5): 467–520, doi 10.1210/er.2015-1104, indeksirano u Pubmed: 27459230. 17. Irani M, Merhi Z. Uloga vitamina D u fiziologiji jajnika i njegove implikacije u reprodukciji: sistematski pregled . Fertil Steril. 2014; 102(2): 460–468.e3, doi: 10.1016/j.fertnstert.2014.04.046, indeksirano u Pubmed: 24933120.

18. Wehr E, Pilz S, Schweighofer N, et al. Povezanost hipovitaminoze D sa metaboličkim poremećajima kod sindroma policističnih jajnika. Eur J Endocrinol. 2009; 161(4): 575–582, doi 10.1530/EJE-09-0432, indeksirano u Pubmed: 19628650.

19. Yildizhan R, Kurdoglu M, Adali E, et al. Koncentracije 25-hidroksivitamina D u serumu kod gojaznih i ne-gojaznih žena sa sindromom policističnih jajnika. Arch Gynecol Obstet. 2009; 280(4): 559–563, doi 10.1007/s00404-009-0958-7, indeksirano u Pubmed: 19214546.

20. Irani M, Minkoff H, Seifer DB, et al. Vitamin D povećava serumske nivoe rastvorljivih receptora za krajnje proizvode uznapredovale glikacije kod žena sa PCOS-om. J Clin Endocrinol Metab. 2014; 99(5): E886–E890, doi: 10.1210/jc.2013-4374, indeksirano u Pubmed: 24606102.

21. Oh SoRa, Choe SYi, Cho YJ. Klinička primjena serumskog anti-Müllerovog hormona kod žena. Clin Exp Reprod Med. 2019; 46(2): 50–59, doi: 10.5653/cerm.2019.46.2.50, indeksirano u Pubmed: 31181872.

22. He C, Lin Z, Robb SW, et al. Nivoi vitamina D u serumu i sindrom policističnih jajnika: sistematski pregled i meta-analiza. Nutrienti. 2015; 7(6): 4555–4577, doi: 10.3390/nu7064555, indeksirano u Pubmed: 26061015.

23. Kim JJu, Choi YM, Chae SJ, et al. Nedostatak vitamina D kod žena sa sindromom policističnih jajnika. Clin Exp Reprod Med. 2014; 41(2): 80–85, doi: 10.5653/cerm.2014.41.2.80, indeksirano u Pubmed: 25045632.

24. Hassan N, El-Orabi H, Eid Y, et al. Utjecaj 25-hidroksivitamina D na metaboličke parametre i insulinsku rezistenciju kod pacijenata sa sindromom policističnih jajnika. Middle East Fertil Soc J. 2012; 17(3): 176–180, doi: 10.1016/j.mefs.2012.04.005.

25. Mazloomi S, Sharifi F, Hajihosseini R, et al. Povezanost između hipoadiponektinemije i niske koncentracije kalcija i vitamina D u serumu kod žena sa sindromom policističnih jajnika. ISRN Endocrinol. 2012; 2012: 949427, doi: 10.5402/2012/949427, indeksirano u Pubmed: 22363895.

26. Sánchez-Ferrer ML, Prieto-Sánchez MT, Corbalán-Biyang S, et al. Postoje li razlike u bazalnoj trombofiliji i C-reaktivnom proteinu između žena sa ili bez PCOS-a? Reprod Biomed Online. 2019; 38(6): 1018–1026, doi: 10.1016/j.rbmo.2019.01.013, indeksirano u Pubmed: 31023609.

27. Moin AS, Sathyapalan T, Diboun I, et al. Metaboličke posljedice gojaznosti na hiperkoagulabilno stanje sindroma policističnih jajnika. Sci Rep. 2021; 11(1): 5320, doi 10.1038/s41598-021-84586-y, indeksirano u Pubmed: 33674695.

28. Gnanadass SA, Prabhu YD, Gopalakrishnan AV. Povezanost metaboličkih i inflamatornih markera sa sindromom policističnih jajnika (PCOS): ažuriranje. Arch Gynecol Obstet. 2021; 303(3): 631–643, doi 10.1007/s00404-020-05951-2, indeksirano u Pubmed: 33439300.

29. Lawrence C, Fraley GS. Peptid sličan galaninu (GALP) je hipotalamički regulator energetske homeostaze i reprodukcije. Front Neuroendocrinol. 2011; 32(1): 1–9, doi: 10.1016/j.yfrne.2010.06.001, indeksirano u Pubmed: 20558195.

30. Kageyama H, Kita T, Toshinai K, et al. Peptid sličan galaninu potiče ponašanje pri hranjenju putem aktivacije oreksinergičkih neurona u lateralnom hipotalamusu štakora. J Neuroendocrinol. 2006; 18(1): 33–41, doi: 10.1111/ j.1365-2826.2005.01382.x, indeksirano u Pubmed: 16451218.

31. Kuramochi M, Onaka T, Kohno D, et al. Peptid sličan galaninu stimuliše unos hrane putem aktivacije neuropeptida Y neurona u dorsomedijalnom jezgru hipotalamusa pacova. Endokrinologija. 2006; 147(4): 1744–1752, doi: 10.1210/en.2005-0907, indeksirano u Pubmed: 16410310.

32. Patterson M, Murphy KG, Thompson EL, et al. Mikroinjekcija peptida sličnog galaninu u medijalno preoptičko područje stimulira unos hrane kod odraslih mužjaka pacova. J Neuroendocrinol. 2006; 18(10): 742–747, doi: 10.1111/ j.1365-2826.2006.01473.x, indeksirano u Pubmed: 16965292.

33. Takenoya F, Guan JL, Kato M, et al. Neuralna interakcija između peptida sličnog galaninu (GALP) i neurona koji sadrže luteinizirajući hormon oslobađajući hormon (LHRH). Peptidi. 2006; 27(11): 2885–2893, doi: 10.1016/j.peptides.2006.05.012, indeksirano u Pubmed: 16793173.

34. Rich N, Reyes P, Reap L, et al. Polne razlike u učinku prepubertalne GALP infuzije na rast, metabolizam i lučenje LH. Physiol Behav. 2007; 92(5): 814–823, doi: 10.1016/j.physbeh.2007.06.003, indeksirano u Pubmed: 17632189.