Anti-iritantna strategija protiv retinola zasnovana na genetskoj analizi korejske populacije: genetski vođen pristup odozgo prema dolje Ⅱ

3.3. Efikasnost formule protiv iritacije; Human Tests

Na osnovusupstance protiv iritacijeprovjereno iz in vitro eksperimenta vođenog genetskom analizom, pripremili smo AF (Formula protiv iritacije) protiv iritacije izazvane retinolom, koja se sastojala od glukozamina 0.1 posto, trehaloze 2 posto, ektoina 2 posto, sukralfata 0.1 posto, omega-9 1 posto i {{8 }}t-butil cikloheksanol 0.7 posto sa retinolom. (standardizovano kao aktivna koncentracija) Prvo smo izveli pilot studiju sa sedam pojedinaca kako bismo kvantitativno potvrdili efikasnost AF. Kada se rezultat iritacije svake vrste iritacije za pojedinca sumira tokom perioda testiranja, pokazalo se da u poređenju sa kontrolnom kremom s retinolom, AF efektivno smanjuje iritaciju izazvanu retinolom, posebno deskvamaciju (smanjenje od 66,67 posto), peckanje (68,42 posto). ), i peckanje (68,97 posto), a ovo ublažavanje simptoma bilo je statistički značajno (Slika4a). Zanimljivo je da su ispitanici tvrdili da nisu osjetili suhoću tokom testnog perioda, iako su bili podvrgnuti značajnoj deskvamaciji i suhoći nakon 10 dana, čak i tokom 2 sedmice. Ovo zapažanje je u skladu s prethodnom studijom koja je tvrdila da retinoična kiselina izaziva suhoću kože nakon 9 dana tretmana i da traje do 18 dana pokazujući smanjenu stopu promjene stratum corneuma (15,8 dana) u usporedbi s placebom (18 dana) [56]

Slika 4. Šema i dijagrami koji prikazuju iritantnu efikasnost AF. Panel (ad) pokazuje rezultate male pilot studije (n=7). Lijevi šematski dijagram prikazuje raspored i proceduru testiranja i rezultate testnog područja (crveno isprekidano) lica koje je procijenjeno za mjerenje TEWL i crvenila kože. (a) Prosjek rezultata iritacije koje je ispitanik iskusio tokom perioda testiranja. (b) Ukupan rezultat iritacije u svakoj vremenskoj tački. Skor prekomjerne iritacije " odnosi se na zbir rezultata svih vrsta iritacije koje su pojedinci doživjeli. (C) Ukupan rezultat iritacije pojedinaca. Ukupni rezultati za svaku vrstu iritacije koju je pojedinac doživio tokom testnog perioda su u prosjeku. Ukupni rezultati " na svakoj vremenskoj tački su zbrojeni. (d) Crvenilo kože i transepidermalni gubitak vode (IEWL) mjereni hromametrom i tewametei Povećani omjeri (procenti) za pojedince su u prosjeku, (e) Stopa pojavljivanja iritacije izazvane retinolom. Ispitanicima je postavljeno dihotomno pitanje da li je "krema na bazi retinola iritantna ili ne" na osnovu pet kriterijuma njihovog sopstvenog subjekta. Urađen je hi-kvadrat test da bi se ispitala statistička značajnost. (p-vrijednost: 2.17906E-10): * p-vrijednost < 0.05** p-vrijednost< 0.001, AF,Anti-iritant Formula protiv iritacije izazvane retinolom; prikazane su trake grešaka.

Nabavite supstancu protiv iritacijeCistanche Cosmetic Material

Zatim je istražen ukupni rezultat iritacije tokom vremena (slika 4b). Kao što se i moglo očekivati, iritacija je uočena u roku od nekoliko minuta nakon nanošenja kreme s retinolom i smanjila se nakon nekoliko sati. Otkrili smo da naš AF efikasno smanjuje iritaciju, posebno nakon trećeg nanošenja kreme. Dok se nivo iritacije povećavao čak i nakon prestanka primjene kreme s retinolom, antiiritacijski učinak AF je ostao i ublažio iritaciju izazvanu retinolom nakon procedure. Zajedno, AF je smanjio ukupni rezultat iritacije pojedinaca tokom perioda testiranja za 58,3 posto (slika 4c).

Sedmog dana izmjerili smo TEWL i crvenilo (slika 4d). AF je smanjio i povećanje TEWL-a i crvenilo izazvano retinolom. Prosječno povećanje crvenila (a*) bilo je 8,31 posto za AF i 8,31 posto za kontrolu. Crvenilo kože, klinička karakteristika kožne vazodilatacije, pokazatelj je upale [57]. Prethodne studije su pokazale da retinoidi izazivaju upalu kože posredovanu oslobađanjem MCP-1 i IL-8 iz fibroblasta. Važno je napomenuti da, kao što je prikazano u prethodnom dijelu, retinol aktivira makrofage (prekomjerna ekspresija IL-4R), koji je glavni pokretač kožne vazodilatacije [9].

U TEWL analizi, krema s retinolom na bazi AF povećala je TEWL za 19,07 posto za ispitanike pojedinačno, dok je kontrolna krema s retinolom povećala TEWL za 42,54 posto. Ovo kliničko zapažanje je slično onom iz prethodnog izvještaja koji ukazuje da retinoidi privremeno izazivaju povećanje TEWL in vivo kod miševa i ljudi [42,58]. Iako je statistička značajnost bila niska, može se očekivati ​​efekat ublažavanja AF na povećanje TEWL-a i crvenila.

Također smo izmjerili prag pritiska i boli pomoću algometra s vrhom radijusa od 1 mm (slika S2, vidi dodatne materijale). Prijavljeno je da osjetljiva koža pacijenata s psorijazom pokazuje smanjeni prag pritiska i boli u poređenju sa normalnim osobama [59]. Prosječne su razlike u graničnim vrijednostima pojedinaca prije i nakon tretmana kremom s retinolom. Uočeno je da je retinol smanjio prag pritiska i bola (PPT), a AF je značajno povećao smanjeni PPT u poređenju sa kontrolom. Čini se da je posredovana antiinflamatornim i antagonističkim efektima AF na TRPV1. Ranije studije su pokazale da je neurogena upala u velikoj mjeri povezana s mehaničkom senzibilizacijom kožnih nociceptora [60], a miševi kojima nedostaje funkcionalni TRPV1 pokazuju slabljenje mehaničke hiperalgezije na štetne mehaničke podražaje [61]. Jedna klinička studija na ljudima takođe je pokazala da antagonist TRPV1 (V116517) značajno povećava PPT kože u različitim uslovima [62].

Da bismo potvrdili antiiritantni efekat AF u nezavisnoj grupi, grupisali smo sve ljudske subjekte, koja se sastojala od 44 muškarca i 47 žena, starosti od 27 do 50 godina. Ispitanicima je postavljeno dihotomno pitanje, da li je "krema na bazi retinola iritantna ili ne", na osnovu sopstvenih subjektivnih kriterijuma. Ovaj omjer odgovora upoređen je s onim iz prve velike kliničke procjene 173 osobe koje su koristile normalnu kremu s retinolom kako bi se izveo antiiritativni učinak AF. Izračunata je i upoređena stopa pojave iritacije izazvane retinolom (Slika 4e).

Stopa pojavljivanja od 64,43 posto uočena je u grupi koja je koristila normalnu kremu s retinolom, dok je stopa pojavljivanja od samo 21,35 posto uočena u grupi koja je koristila AF-retinol kremu, što je ukazalo na smanjenje od 65,80 posto.

3.4. Poligeni model predviđanja rizika za iritaciju izazvanu retinolom

Kako su antiiritansi u AF testirani iz povezanih gena, konstruirali smo model za predviđanje poligenskog rizika kako bismo procijenili kumulativni genetski učinak višelokacijske iritacije izazvane retinolom. Model za predviđanje poligenskog rizika je konstruisan korišćenjem 26 značajnih SNP-ova odabranih nakon LD analize na osnovu |D'| i r2 vrijednosti (koeficijenti za stepen do kojeg je alel jednog SNP-a naslijeđen ili koreliran sa alelom drugog SNP-a) između SNP-a.

Then, the risk scores of all 159 samples were visualized. The test subjects of the second large-scale clinical test were arbitrarily categorized into three groups: high (>75, 31 pojedinac), srednji (65–75, 33 osobe) i skor niskog rizika (<65, 27 individuals) (Figure S3, see Supplementary Materials). As characteristics of retinol-induced irritation in each group, the high-risk score group exhibited dryness and desquamation after the last third treatment of retinol compared to the other groups (Figure S4, see Supplementary Materials). This result supports our hypothesis that skin barrier disruption with increased TEWL plays an important role in retinoid-induced irritation, as SLS exhibited similar clinical features and anatomical changes [63].

Kao što je prikazano na slici 5a, grupa sa visokom ocenom rizika sastojala se od učesnika sa najviše iritacije među ostalim grupama. "Pruritus" je bio najdominantniji tip iritacije za grupu visokog rizika u poređenju sa ostalim grupama. Učesnici u visokorizičnoj grupi imali su svrab najčešće prvog dana tretmana retinolom, a stepen svrbeža se postepeno smanjivao tokom vremena. Činilo se da je grupa visokog rizika imala simptome slične alergijama povezane sa sistemima posredovanim histaminom i mastocitima (slika S4, vidi dodatne materijale).

Figure 5. Bar plots illustrating polygenic risk score model and validation. 3300 IU retinol cream with AF to 91 individuals lest subjects were categorized into three groups: high-risk score (>75, 31 pojedinac), skor srednjeg rizika (65-75, 33 osobe) i skor niskog rizika (<65,27 individuals) (a) irritation score of each type of irritation for three risk score groups. The scores for types of irritation of individuals during the test period were summed and averaged by risk score groups. (b) The total score during the test period. (c) Comparison of the occurrence rate of irritation in each risk-score group. The dichotomous question of whether retinol cream is irritant: Y/N was asked to test subjects. In the first clinical evaluation, retinol without AF was given. Retinol with AF was given in the second clinical evaluation.

Ukupan rezultat tokom perioda testiranja izračunat je kao 6.370 i 10.161 za grupe sa niskim, srednjim i visokim rizičnim rezultatom (Slika 5b). Efikasnost AF je ispitivana prema modelu skora poligenskog rizika.

Rezultati su pokazali da AF ublažava iritaciju izazvanu retinolom, a efikasnost se može predvidjeti korištenjem poligenskog modela skora rizika (Slika 5c).

Shodno tome, ovi eksperimentalni rezultati i zapažanja ne samo da demonstriraju antiiritacijski učinak AF-a, već također impliciraju da je predlaganje odgovarajuće doze retinola procjenom osjetljivosti na iritaciju izazvanu retinolom na osnovu individualnih genetskih informacija primjenjivo, što konačno može ponuditi genetski najoptimiziraniji protokol upotrebe za pacijente s većom usklađenošću.

3.5. Dalje razmatranje; Akutna naspram hronične iritacije?

Kao što je već spomenuto, reakcije slične alergijama, koje uključuju brzo peckanje i peckanje, svrab i brzi difuzni edem i osip, uočene su kod osoba osjetljivih na retinol. Ove reakcije, koje su se javile u roku od nekoliko minuta, ponekad čak i nekoliko sekundi, ne mogu se jasno objasniti prethodnim retinoidno-mehanističkim studijama koje su se uglavnom fokusirale na proizvodnju citokina keratinocitima ili fibroblastima [9], ili imunološki sistem u kojem T ćelije, Uglavnom su uključene B ćelije, odnosno komplementarna aktivacija. Iako je neosporno da je poremećaj kožne barijere glavni uzrok iritacije, to ne objašnjava u potpunosti akutnu iritaciju koja se brzo javlja.

U prvoj kliničkoj evaluaciji uočeno je da je oko 5 posto ispitanika doživjelo nasilne i teške gore navedene reakcije i da su odustali od testa. Međutim, detaljna istraživanja o intoleranciji retinoida u zavisnosti od rase, pola ili starosti nisu rađena, a prijavljeno je da je azijska populacija sklonija ovim reakcijama, što ukazuje na neophodnost razmatranja brzo izazvane iritacije kod dalji razvoj proizvoda na bazi retinoida. Naši rezultati testiranja na ljudima sugeriraju da je neurogena upala, ili sličan brzi mehanizam, također uključena u iritaciju izazvanu retinolom. Osećaj pečenja i peckanja su dominantno primećeni pri svakom tretmanu retinolom u roku od nekoliko minuta u sve tri grupe i potisnuti tokom vremena.

Evo, ovo su neke tačke koje zaslužuju razmatranje.

1. Kao što je ranije objavljeno, retinol se može pretvoriti u retinaldehid (retinal) i retinoičnu kiselinu da bi imao bioraspoloživost u kojoj je uključeno vezivanje RAR ili RXR.

2. Međutim, homeostaza retinoida u koži je vrlo strogo kontrolirana [64], i paradoksalno, nije eksperimentalno dokazano da se retinol pretvara u retinoičnu kiselinu in vitro i ex vivo [65,66].

3. Pod tretmanom retinolom, fibroblasti ili keratinociti aktiviraju okolni kožni imuni sistem u roku od nekoliko minuta tako što proizvode IL-1 ili IL-6 kroz interakciju između RAR i retinoične kiseline, kojoj retinol treba konvertovati.

Na osnovu ovih razmatranja, čini se razumnijim da akutnu iritaciju u roku od nekoliko minuta može odmah izazvati sistem histamin-mastocita ili neurogena upala, koja potom pokreće opsežnu i pervazivnu upalu, što dovodi do dugotrajne iritacije.

4. Zaključak