The Protective Effect Of Cistanche Total Glycosides On The Myocardial Toxicity Of Mice Induced By Adriamycin

Za više information:ali.ma@wecistanche.com

Yulia Yiming'

[Project supported by the Natural Science Foundation of Xinjiang Uygur Autonomous Region Science and Technology Commission (96814)]

[Profil autora, Eliya Yiming (1964-), ženski (Uyghur), majstor. Lecturer, Research direction: Cardiovascular pharmacology. ],

Wang Xiaowen', Wang Xuefei', Heiliman Yilahong 2, Xie Yaoyun 2, Du Niansheng 3

(Xinjiang Medical University| Odsjek za farmakologiju, Ljekarnička škola, Odjel za elektronsku mikroskopiju, Škola osnovnih medicinskih nauka, Odsjek za hemiju prirodnih lijekova, Apoteka, Urumqi 830054, Xinjiang)

Apstraktno:Za istraživanje zaštitnog efekta i mehanizmaCistanche glycosides(GCs) na doksorubicin (Dox)-inducirana miokarda oštećenja u miševe. Fang Xie: Za određivanje aktivnosti dismutaze miokarda (SOD) korišten je model akutne ozljede miokarda uzrokovane intraperitonealnom injekcijom Doxa (17,5 mg/kg). aktivnost selen-glutacija peroksidaze (Se-GSH- Px); malondialdehid (MDA) sadrži aktivnost kreatinina fosfokinaze u serumu (CPK). Elektronska mikroskopija ispituje ultrastrukturne promjene kardiomiocita. Rezultati: 48 sati nakon intraperitonealne injekcije Doxa može uzrokovati značajna oštećenja miokarda miša. Miokardijalni SOD i Se-GSH-Px aktivnost su se umanjili, povećan je sadržaj MDA, povećana je aktivnost CPK u serumu, a došlo je do oštećenja ultrastrukturnog tkiva miokarda. Cistanche glycosides(62,5, 125,0, 250,0 mg/kg)može povećati miokardnu SOD, Se-GSH-Px aktivnost. Smanjite MDA sadržaj i smanjite CPK oslobađanje. Smanjite oštećenje miokarda ultrastrukturom.Jie Leng: Cistanche total glycosidesimaju određeni zaštitni učinak na oštećenje miokarda uzrokovano doksorubicinom. Njegov mehanizam može biti povezan sa njegovom zaštitom miokarda SOD-a i Se-GSH-Px aktivnosti, skalvengingom slobodnih radikala, i sprečavanjem peroksidacije lipida.

Ključne reci: doksorubicin; totalni glycoside cistanche; kardiotoksičnost; peroksidacija lipida; kreatin kinaza; ultrastruktur

Doksorubicin (Dox) je vrsta antibiotika od miokarda, koji dobro djeluje na razne maligne tumore, ali zbog akutne i kronične toksičnosti miokarda ograničava široku primjenu Doxa u kliničkoj praksi. Poznato je da je anti-tumorski efekat Doxa da utiče na replikaciju DNK i sintezu RNK, a njegova kardiotoksičnost je povezana sa oštećenjem peroksidacije lipida izazvanim poluadriamicinom. Stoga je važno pronaći slobodne radikalne strvinara i antioksidante kako bi se antagonizirala kardiotoksičnost Doxa, a da se pri tome zauzda njegova anti-tumorska aktivnost. Ukupnoekstrakti Cistanchesu aktivni sastojci izvađeni izCistanche. Relevantne studije su pokazale da Cistanche glycosides imaju antioksidantne efekte na mišja maramice, Cistanche glycosidesmože značajno smanjiti sadržaj lipofuscina(3), Cistanche glycosidesimaju zaštitne efekte na miokardnu išmiju štakora(3), i Cistanche glycosidesimaju anti-lipidnu peroksidaciju i efekte protiv zračenja. Za istraživanje zaštitnog efekta i mehanizma Cistanche glycosidesNa Dox-induced miokarda ozljeda u miševe.

Kliknite na Cistanche tubulosa prednosti i nuspojave proizvodi

1 Materijal i metode

1.1 Lijekovi i reagenti

Cistanche glycosidesizdvajaju se izCistanche biljau sjevernom Xinjiangu, a glavni sastojci su echinacea, ergot etoxylates, itd. (pruža Odjel za hemiju prirodne medicine, Škola ljekarne, Xinjiang Medical University); tetra methoxy propan (TMP Sigma Company); Adriamycin (Dox, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.); Vitamin E (Vit E, Shanghai Yan'an Pharmaceutical Factory); drugi reagenti se domace proizvode.

1.2 Eksperimentalna oprema

721 tip spektrofotometar (Shanghai No. 3 Analytical Instrument Factory); OLYMPUS mikroskop (napravljen u Japanu); JEM-100CXII transmisioni elektronski mikroskop (napravljen u Japanu)? PHS-250 tip acidity meter (Shanghai Lei Magnetic Instrument Factory).

1.3 Grupisanje i administracija životinja

NIH miševe osigurava Eksperimentalni centar za životinje u Xinjiang Institutu za endemske bolesti. Broj potvrde o životinjama medicinskog laboratorija je broj 16-068. Odabrano je 138 NIH miševi, teški (24±2) g, pola muški i pola ženski. Nasumično podijeljena u 6 grupa (23 u svakoj grupi): (1) kontrolna grupa: normalni salin (NS) 20 ml/kg; (2) Grupa ozljeda Doxa: NS 20 ml/kg; (3) Vit E grupa: Vit E 100 mg /kg; (4) GCs i grupa: GCs 62,5 mg/kg; (5) GCs i grupa: GCs 125,0 mg/kg; (6) GCS1 grupa: GCs 25,0 mg/kg, svaka od gore navedenog grupe Sve su dane intragastrijskom administracijom, jednom dnevno. Grupa za povrede doksa, Vit E grupa, GCs | grupa, GCS I grupa, GCS I grupa su intraperitonealno ubrizgana sa Dox 17. 5 mg/kg 4. dana nakon što su NS i GC-ovi ubrizgani 48 sati, očne jabučice su uzimane i uzimana je krv, pripremljen je serum, a odmah su životinje žrtvovane da izvadi srce, isprane NS, prolivene suhe filter papirom, i vagale. Podvodni uslovi kupanja, miokardalni homogenat je pripremljen sa NS, centrifugiran na 3 500 r/min, 30 min, a supernatant je uzet za mjerenje biohemijskih indikatora. Bilo je 3 miša u svakoj grupi, a srca su uzeti da bi se napravile primjerci elektronskog mikroskopa.

1.4 Određivanje biokemijskih pokazatelja

Metoda autoksidacije pirogalola je korištena za određivanje aktivnosti dismutaze miokarda superoksida (SOD); DTNB metoda je korištena za određivanje aktivnosti miokarda selen-glutation peroksidaze (Se-GSH-Px) Koristite TBA metodu za određivanje sadržaja proizvoda za peroksidaciju miokarda lipida malondialdehida (MDA); kvantifikacija proteina koristi CBB-SDS metodu zvanu CPK metoda za određivanje aktivnosti serumske kreatinina fosfokinaze (CPK).

1.5 Elektronska mikroskopija miokarda

Apeks srca je fiksiran sa 4% glutaraldehida i 1% kiseline, dehidriran acetonom, ugrađen u Epon 812, i posmatran pod transmisijskim elektronskim mikroskopom sa olovno-uranij-elektronom koji je zatamnjenim JEM-100CX I.

1.6 Statistička obrada

Svi podaci su predstavljeni od strane Wang Shi-a. Nakon što se eksperimentalni podaci testiraju na homogenost varijance, F test i q test se koriste za statističku obradu. Nivo inspekcije a = 0,05.

2 Rezultati

2.1 UčinakCistanche glycosidesna biokemijskim indeksima miokarda povrijeđenog Doxa prikazan je u Tabeli 1.

2. 1- 1 EfekatCistanche glycosidesNa SOD aktivnosti Dox ozlijeđen miokard.

U poređenju sa kontrolnom grupom, Grupa za povrede Doxa smanjila je aktivnost SOD-a miokarda za 41,1% (P V0.01). U odnosu na Grupu za povrede Doxa, povećala se za 30,9%, 33,2%, 36,5%, i 34,9% (sve P<0.01), the="" gcs1="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0,05), a preostale grupe su bile niže od kontrolne grupe.

2.1.2 Efekat GC-a na Dox-povrijeđen miokard se-GSH-Px aktivnost.

U poređenju sa kontrolnom grupom, Dox grupa za povrede ima smanjenje aktivnosti miokarda Se-GSH-Px za 26,2% (P<0.01), gcs,="" gcs,="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" the="" gcs,="" group,="" and="" vit="" e="" group="" increased="" by="" 19.2%,="" 21.1%,="" 25.0%,="" and="" 26.1%="" respectively=""><0.01), which="" were="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0 . 05).

2.1.3 UčinakCistanche glycosidesna MDA sadržaju miokarda povrijeđenog Doxa smanjen je za 16,7%, 17,3%, 18,6%, odnosno 17,3% u odnosu na dox-ozlijeđenu grupu (Fall V0.01), koji su svi bili bliski Kontrolnoj grupi (P>0,05).

2.1.4 Utjecaj GC-ova na aktivnost CPK u serumu u Doxu je ozlijedio miševe.

Aktivnost CPK-a u serumu u skupini za ozljede Doxa se povećala za 87,3% (<0.01),>Cistanche glycosidesJaCistanche glycosidesgrupa, i Vit U odnosu na Grupu za ozljede Doxa, E grupa se sniћila za 26. 6%, 33,1%, 37,4% i 36. 7% (sve F<0.01), which="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" control="">

2.2 Elektronska mikroskopija miokarda miša

2.2.1 U kontrolnoj grupi sarkom miokardnih vlakana je bio netaknut, miofibrili su poredani na uredan način, sarkomirski pojasevi su jasno strukturirani, mitohondrija je uredno sređena, struktura je bila normalna, a nuklearna struktura normalna.

2.2.2 Dox grupa ozljeda

Može se vidjeti da postoje očite promjene u ultrastrukturi miokardnih vlakana, miokardne ćelije su otečene, raste intracitoplazmatski sarkomer, svijetla traka se širi, abnormalni kontrakcioni bendovi se pojavljuju u nekim područjima, a povećava se materijal Z-linije. Mitohondrija je bila difuzno otečena, hiperplastična, malo sređena, slomljena i vakuolirana. Sarkoplazmatski retikulum se širi, sekundarni lizosomi se povećavaju, a može se vidjeti i fokalna degeneracija. Volumen nukleusa se povećava i perinuklearni prostor se širi.

2. 2.3 Oticanje miokardnih vlakana u Cistanche glycosidesJa grupa je smanjena.

Struktura sarkomera je u osnovi normalna, ali sarkomera je i dalje šire od kontrolne grupe. Oteklina mitohondrija je smanjena, povećana je i denzacija matrice, povećana je i denzacija mitohondrija, a pojedinačni mitohondrij se još uvijek promijenio. Povećan sekundarni lizosomi u cistoplazmi.

2.2.4 Struktura miokardnih vlakana Cistanche glycosidesJa, ja sam se u osnovi oporavio u normalu.

Miofibrili su uredno sređeni, struktura sarkomere je normalna, a struktura mitohondrija se vraća u normalu.

3 Diskusija

Dox je vrsta antibiotika od bijelog mozga, koji ima karakteristike širokog anti-tumorskog spektra i snažnog efekta. Međutim, Dox može izazvati tešku toksičnost miokarda, kao što su razne aritmije u ranoj fazi lijekova, ovisno o dozi, i kongestivnog zatajenja srca u kasnim fazama, što ograničava njegovu kliničku primjenu. Glavni mehanizam Doxa koji uzrokuje toksičnost miokarda je proizvodnja pretjeranih reaktivnih radikala slobodnog kisika koji uzrokuju oštećenja miokarda. Afinitet Doxa sa miokardnim tkivom je znatno veći od afiniteta drugih tkiv. Nakon ulaska u miokardne ćelije, Dox se pretvara u poludox, koji djeluje na molekule kisika kako bi ih transformirao u superoksid anion slobodne radikale (Oksid), popraćen proizvodnjom vodikovog peroksida (H2O2). MDA sadržaj Ol i H2O2 u skupini ozljeda Haber-Weiss Doxa povećan je za 25,8% u odnosu na kontrolnu grupu (P<0.01), and="" the="">Cistanche glycosides|,Cistanche glycosides1,Cistanche glycosidesgrupa, a Vit E grupa je smanjena za 16,7% u odnosu na Grupu za povrede Doxa. , 17. 3%, 18. 6% i 17. 3% (Fall V0.01), koji su svi blizu kontrolne grupe (P>0,05). Reakcija ili Fentonova reakcija proizvodi hidroksilne radikale (OH • ). 0$ i OH • Velika količina akumulacije može izazvati peroksidaciju lipida u tkivima i ćelijske membrane i izazvati oštećenja bioloških makromolekula.

U eksperimentu je zapaženo da su nakon 48 sati intraperitonealne injekcije Doxa (17,5 mg/kg) mišu značajno smanjene aktivnosti SOD i Se-GSH-Px u mišjem miokardu, a sadržaj proizvoda za peroksidaciju lipida MDA je značajno povećan. Visoka, serumska CPK aktivnost se povećava. Pod elektronskim mikroskopom, oštećena je ultrastruktura srčanog mišića, manifestiran kao očigledan oteklina mitohondrija, ruptura mitohondrije, degeneracija vakuole, smanjenje mase matrice i širenje sarkoplazmatičkih retikuluma.

Sve doze grupe GC-ova mogu značajno povećati aktivnosti slobodnih radikalnih scavenging enzima SOD i Se-GSH-Px u srčanom mišiću Dox-ozlijeđenih miša, smanjiti sadržaj MDA i smanjiti oslobađanje CPK. Predlaže se daCistanche glycosides može smanjiti oštećenje peroksidacije lipida izazvano Doxom povećanjem aktivnosti slobodnih radikalnih prožderajućih enzima u tijelu. Cistanche glycosides, grupe značajno štite ultrastrukturu miokardnih vlakana od Oštećenja Doxa.Detektiran in vitro sa modernom tehnologijom analize kemiluminescence i otkrio daCistanche glycosidesmože se učinkovito eliminirati. Točni su samo aktivni radikali kisika kao što su OH • i H2O2. Efekat skalenja gangliona je posebno značajan "(2). Predlaže se da Cistanche glikozidi mogu očistiti OR izazvan poludoxom u miokardu, i time prekinuti lančanu reakciju slobodnih radikala i djelovati kao blokator lanca peroksidacije lipida.

U ovom eksperimentu, Vit E je korišten kao pozitivna kontrola. Rezultati su pokazali da Vit E ima određeni zaštitni efekat na akutna oštećenja miokarda izazvana Doxom kod miša. Može smanjiti MDA sadržaj miokarda i povećati SOD i Se-GSH-Px aktivnosti. Prema literaturi [13], izvještaji su dosljedni.

Glavna komponenta Cistanche glycosidesje fenetilamin, i njegova struktura je slična Vit E, to jest, ima fenoliku hidroksil grupu i hidroksil grupu. Stoga se špekulira da Cistanche glycosidesmože osigurati atome vodika na fenolnoj hidroksilnoj grupi svoje molekularne strukture lipidnom radikalu (LOO -), što ga pretvara u lipo hidroperoksid (LOOH), koji se zatim raspada u netoksiksil od strane GSH-Px. Sprečava peroksidaciju nezasićenih masnih kiselina u biofilmu slobodnim radikalima, čime se smanjuje oštećenje Doxa na kardiomiocitima. Mehanizam ostaje da se proučava u dubini.

Reference:

[1] Baser RL, Green MD. A complication of treatment: strategies for prevention of anthracycline cardiotoxicity [J ]. Cancer Tread Rer, 1993,19; 57.

[2] Doroshow JH. Efekt antraciklinske antibiotike na formiranje kiseonika radikala u pacova čuo [J] Rak Res, 1983,43; 460.

[3] Wang Xiaowen, Li Linlin, Mu Hu Yati, et al. Antioksidantni efekat Roxuanrong na mišja maramice]· Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1998,23(9):554-556.

[4] Mao Xinming, Wang Xiaowen, Li Linlin, et al. The protective effect of Rou Nu Rong Xi on myocardial ischemia in pacovi □], Chinese Herbal Medicine, 1999, 30(2): 118-120.

[5] Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Anti-lipid peroksidacija i anti-radijacijsko dejstvo totalne paste od mesnog pepela [J]. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997, 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin, Gui Xingfen, Zhong Xiaoling itd. Sod determination method-the improvement of pyrogallol self-oksidation method [J]. Napredak u biohemiji i biofizici, 1986, 4:17,

[7] Xia Yiming, Zhu Lianzhen. Određivanje aktivnosti glutation peroksidaze u krvi i tkivima. Metoda jedan DTNB direktna metoda [J], Hygiene Research, 1987, 16(4): 29-32.

[8] Chen Shunzhi, Jin Youyu. Usporedba tri metode razvoja boje lipid peroksida TBA. Journal of Clinical Laboratory Science. 1984, 2(4); 8-10.

[9] Macart M♦ Gerbaut L. Poboljšanje coomassie blue dye-binding metode koja omogućava dobru osjetljivost na varas proteine: primjena na Cerebrospinal fluid [J ], Clin Chem Acta, 1982,112:93.

[10] Xu Shuyun, Bian Ruyuan, Chen Xiu, Pharmacological Experiment Methodology [M]. 2. izdanje, Peking: People's Medical Publishing House, 1991.922.

[11] Halliwell B, Gutteridge JMC. Slobodni radikali iz biologije i medicine CM J. 2nd ed. New York Oxford University Press * 1989.543-550.

L12]Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Eliya Yiming, et al. Scavenging of free radikals and protective effects on DNA damage caused by OH -[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2001,36(1):29 -31.

[13] Wu Yuling, Xu Guangyuan. Eksperimentalna studija o akutnoj kardiotoksičnosti i zaštitnom efektu Vit E kod miša izazvanih adriamicinom[J]. Journal of Dalian Medical University, 1991, 13(1): 22-27.