Study On The Antioxidant Activities Of Phenylethanoid Glycosides From Cistanche Deserticola

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

LI Li et al ( Centralna laboratorija Changchun Normal Univerziteta, Changchun, Jilin 130032)

Apstraktno[Cilj] Istraživanje je bilo za cilj sistematsko proučavanje antioksidantnih aktivnosti feniletanoidnih glycosides izCistanchedeserticola. [Metoda] Dva modela sistema, slobodni radikalni 2,2-diphenyl-l -picrylhydrazyl ( DPPH ' ) assay i foto hemiluminescence (PCL) assay, korišteni su za mjerenje antioksidantne aktivnosti ekstrakta C. deserticola, akteoside, izoacteoside, i echinacoside. [Rezultat] Rezultati su pokazali da je ukupan fenolički sadržaj (TPC) u ehinakozidu, akteosideu, izoakteosideu i 80% ekstrakta etanola C. deserticola bio 753,95, 659,94, 356,14, i 14,73 mg galne kiseline /g uzorka. Ekstrakt C. deserticola je pokazao snažnu antiox记antnu aktivnost u PCL eksperimentu, a slijedi echinacoside, acteoside, i izoacteoside. Međutim, echinacoside je ispoljio snažnu antioksidativnu aktivnost u DPPH eksperimentu, a slijedi ga akteoside, izoakteoside, i ekstrakt C. deserticola.

[Zaključak]Ovo istraživanje bi moglo pružiti reference za farmakološku i biološku aktivnost studija fenilethanoidnih glikozida iz C. deserticola.

Ključne riječi Cistanche deserticola ; Acteoside ; Izoakteoside ; Echinacoside ; Antioksidantna aktivnost ; DPPH ; PCL

Cistanche(Cistanche deserticolaY.C. Ma.) je biljkaCistancherod (Oro-banehaeeeaeae) izCistancherod (Cistanche). Sušeno mesnato stabilo Cistanchea s krljavim lišćem. Veliki broj istraživanja je otkrio da su glavni aktivni sastojci cistanche biljaka fenetil alkohol glycoside spoja. . Fenilethanol glikozid spoj pripada vrsti polifanol spoja, koji je široko distribuiran u mnogim vrstama biljaka. Farmakološka ispitivanja su pokazala da ovi spojovi imaju širok spektar farmakološkog i biološkog djelovanja, kao što su anti-hepatotoksin, anti-upalne, analgetičke i antioksidativne aktivnosti. Među njima, najupadljivija stvar je da fenoksietanol glycoside spoj ima vrlo dobru antioksidativnu aktivnost. Autor je uglavnom proveo sistematsku analizu antioksidantske aktivnosti fenetil alkohola glycoside spoja uCistanche, koristeći dvije metode evaluacije antioksidantnih in vitro, i to Fotoehemiluminezencija (PCL) i 2,2-difinil-1-pieril-hidroksil (DPPH)) Dva različita sistema su korištena za mjerenje antioksidantne aktivnosti 80% ekstrakta etanola odCistanche,ergosteroside,izoergosideiechinacoside.

1 Materijal i metode

1.1 Uzorci i reagenti

Cistanche (Cistanche deserticola)Medicinski materijali su kupljeni od Apoteke Tongrentang u Pekingu.Ergosteroside, izoergoside ,echinacosideFolin. Ciocalteu reagent, galna kiselina, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH.), itd. su kupljeni od SigmaChemicalCo. Company (St. Louis, Mo). Otapak koji se koristi za PCL analizu dao je Analytik Jena AG (Berlin, Njemačka). Ostali reagenti su svi analitički reagenti (proizvedeni od strane Beijing Chemical Plant). Voda je ultračista voda (18,2 nPa).

1.2 Vađenje uzorka

Točno vagati 2.0005g odCistancheuzorak u prahu, koristite 50rnl od 80% etanola za ultrazvučnu ekstrakciju na zvučnoj temperaturi za 0,5h, ekstrakt dva puta, filtrirajte otopinu uzorka, rotacijski isparite do suhoće (<40oc), use="" 100ml="" of="" distilled="" water="" dissolve,="" degrease="" twice="" with="" 100ml="" n-hexane,="" discard="" the="" n-hexane="" solution,="" extract="" the="" water="" part="" with="" 100="" ml="" of="" water-saturated="" n-butanol="" 3="" times,="" combine="" the="" n-butanol="" extracts,="" rotary="" evaporate="" to=""><40oc), and="" use="" 4ml="" for="" the="" residue="" the="" volume="" of="" absolute="" ethanol="" is="" fixed="" to="" obtain="" a="" sample="" of="">Cistanche deserticola.

1.3 Određivanje ukupnog sadržaja polifonola uzorka

Ukupan sadržaj fenola uzorka određuje se metodom F0-lin-Ciocaheu, a rezultat se izražava kao miligrami galne kiseline po gramu ekstrakta. Uzmite uzorak otopine sa određenom koncentracijom od 0,2rnI (kako bi apsorpcija pala na standardnu krivinu), dodajte 1ml Folin-Ciocaheu reagenta sa koncentracijom od 0,5mol/L, a zatim dodati 0,8ml otopine natrijevog karbonata sa koncentracijom od 7,5% za dobro miješanje, 0,5ml otopine natrijevog karbonata za dobro miješanje, 0,5h, a zatim izmjeriti apsorpciju na 765nm (ultraljubičasto vidljivi spektrofotometar: DU800, Beckman Couher, Inc. USA). Koristite otopinu galne kiseline (raspon koncentracije mase je 0,02~0,20me,/m1) da bi standardnu krivinu, a svi testovi se ponavljaju dva puta.

1.4 Antioksidantna aktivnost in vitro analiza

1.4.1 ODREĐIVANJE PCL metode.

Test je Photochem@ (Berlin, Ger-many) ultrabrzi antioksidans i slobodni radikalni automatski analizator. Princip je generiranje slobodnih radikala fotohemijskim metodom i korištenje metode kemiluminescence za otkrivanje slobodnih radikala. U eksperimentu, fotosenzitizer sa fotohemijskim efektom uzbuđenja je korišten za uzbuđenje molekula reakcije, tako da je pod djelovanjem ultraljubičaste lampe reakcija oksidacije nastupila 1000 puta brže od normalnih uvjeta, a slobodni radikali su brzo generirani." Odaberite PCL-ACW-Kit metodu Mjerenje antioksidantne aktivnosti komponenti rastvornih u vodi pod-uzoraka psyllium. Pufer za reakciju pipete 1,0ml (uključujući koncentraciju 0,1moL/L Natrij karbonat, pH vrijednost 10,5 i koncentraciju 0,1mmol/LNA, jedan EDTA, 1,5ml ACW- razlučivač (voda), koncentracija 1mmol/LLumino1) djeluje kao fotosenzitizer za uzbuđenje molekula reakcije, tako da se slobodni radikali brzo generišu, a istovremeno kao fotohemiluminescentna supstanca. I uzorak i standard su 10 "l. Mjereći različite koncentracije (0,5, 1,0, 2,0 i 3,0 nmol/L) od L. Standardna jednadžba krive za akorbnu kiselinu je Y = 24.640Ox + 2.9311, R² = 0.9969. Potrebno je razrijeđenje uzorka ili standardne otopine u testu tako da vremenski interval zaostaje unutar linearnog raspona standardne krive. Fotohema generira standardnu krivinu i testira antioksidantnu aktivnost uzorka automatski, a antioksidantna aktivnost uzorka je ekvivalentna L. Izračunato po broju nanomola askombne kiseline.

1.4.2 DPPH određivanje metode.

Diphenylpicrylhydrazino radikal [DPPH ·] je stabilni radikal centriran na dušik sa maksimalnom apsorpcijom na talasnoj dužini od 515nm. [DPPH ·] otopina metanola je ljubičasta, a njegova koncentracija ima linearni odnos sa apsorpcijom." Nakon dodavanja antioksidanata u [DPPH ·] rastvor metanola, antioksidansi se mogu kombinirati sa [DPPH ·] slobodnim radikalima ili ih zamijeniti kako bi [DPPH ·] Broj slobodnih radikala se umanjuje, a boja otopine postaje lakša, što se očituje kontinuiranim sniženjem apsorbacije na talasnoj dužini od 515 nm dok ne dosegne stabilnost." U testu je umjesto metanola korišten etanol. Precizno vagati [DPPH ·] i konfigurisati koncentraciju na 0. [DPPH ·] rastvor etanola od 0,040 76mg/ml, dobija se standardna krivina [DPPH ·] : Y: 18.032x-0.0016, R = 0.9993. Metoda za mjerenje zaostale stope slobodnih radikala odnosi se na literaturu [16]. Koristeći etanol kao otapaj, pripremite različite koncentracije uzorka i standardne otopine, uzmite 0,1ml uzorak ili standardnu otopinu odnosno dodajte 3,9ml [DPPH·] standardnu otopinu sa koncentracijom mase od 2,5mg/L (trenutno se koristi sada) ), zamijenite otopinu uzorka etanolom kao prazninu. Protresite miješano rješenje, koristite kuvetu za mjerenje njene apsorbacije u različitim vremenima na talasnoj dužini od 515nm, i pretvorite ga u koncentraciju mase [DPPH·] prema standardnoj krivini kako bi se izračunala stopa rezistualne stope [DPPH·]. Prema zaostaloj stopi [DPPH ·] i odgovarajućoj količini dodanog uzorka, može se izvući krivina za uklanjanje [DPPH -] slobodnih radikala iz uzorka. Prema obličju odnosa između masene koncentracije [DPPH ·] i apsorbacije, apsorbacija mjerena nakon dodavanja slobodnog radikalnog strvinara može se pretvoriti u koncentraciju mase [DPPH ·] kako bi se izračunao [DPPH ·] nakon dodavanja slobodnog radikalnog strvinara. Formula izračuna za stopu zaostataka je slijedeće: [DPPH ·] REM=[DPPH·] /[DPPH·] r=0×100% gdje je [DPPH·] masa koncentracije DPPH· u određenom trenutku u slobodnom radikalnom procesu scavenging, [DPPH·]:. Je li originalna masa koncentracije DPPH·. Prema broju dodanih antioksidanata i stopi zaostanka [DPPH ·], pravi se kriva odnosa između ta dva, a regresijska jednadžba se može dobiti kroz linearnu regresijsku analizu. Prema jednadžbi regresije, može se izračunati antioksidantna doza kada je zaostala stopa [DPPH ·] 50%. Pola inhibicije. Prema [DPPH·] slobodnoj radikalnoj scavenging krivini različitih koncentracija uzoraka ili standarda, izračunajte količinu EC uzorka kada se originalna masa koncentracije [DPPH·] smanji na 50% (stanje u stanju stalanosti). Što je ec manja, slobodna radikalna scavenging sposobnost The stronger". Test 3 puta paralelno.

cistanche

2 Rezultati i analiza

2.1 Određivanje ukupnog sadržaja polifonola uzorka U određivanju ukupnog sadržaja polifonola, ukupan sadržaj polifonolaechinacosideje najviši, što je 753,95 mg galne kiseline/g. Slijede ergosteroidni glycosides, izoergosteroidni glycosides, i sirovi ekstraktiCistanche, koje su bile 468,3, 356,14, odnosno 14,73 mg galne kiseline/g.

2.2 Određivanje antioksidantne aktivnosti uzorka

2.2.1 PCL- ACW rezultati određivanja metode. U PCL-ACW antioksidantnom testu, antioksidacijski kapacitet od 1txgCistancheljekoviti materijal je ekvivalentan antioksidantnom kapacitetu od 15,68nmol L-askombne kiseline; 1 gechinacosideje ekvivalentan antioksidantnom kapacitetu od 14,03nmol askombne kiseline Aktivnost: 1txgergosterosideje ekvivalentan 11,44nmol antioksidacidnog kapaciteta askombne kiseline; 1Ixg izomergosteroside je ekvivalentan antioksidantnoj aktivnosti 8,24nmol askombne kiseline.

2.2.2 Rezultati mjerenja DPPH metoda. Iz tablice 1 se vidi da je očišćen. Poredak sposobnosti slobodnih radikala jeergosteroside,echinacoside, izoergoside i sirovog ekstraktaCistanche, među kojima ergo strana iechinacosideimaju u osnovi isti antioksidacijski kapacitet u DPPH testu. Vidi se iz ovoga. Pošto se za mjerenje uzoraka koriste različiti in vitro antioksidantni testni sistemi, mehanizam antioksidantnih efekata je različit, a rezultati mogu biti nedosledni. Ovo je također potvrđeno u testu. Stoga je potrebno odabrati druge sisteme antioksidane analize za daljnju provjeru.

echinacosie

Reference

[1] Yang Cuiping, Su Weiwei. Istraživački napredak mesne juhe[J]· Chinese Medicinal Materials, 2001, 24(12): 907-909.

[2] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei Research progress on the chemical constituents of Cistanche plants[J]. Chinese Herbal Medicine,2003,34(5):473 -476.

[3] HIROMI KOBAYASHI, HIROKO KARASAWA JOSHIO MIYASE. Studije o konstituentima Cistanchis Herba. ZDRAVO. Izolacija i strukture novih fenilpropanoidnih glycosides, Cistanosides A i B[ J]. Chem. Pharm Bull, 19^,32(10):3009 -3014.

[4] LI LI, RONG TSAO, RAYMOND YANG, ET AL. Izolacija i pročišćavanje fenilethanoidnih glycosides izCistanche deserticolapo brzoj kontra-strujni hromatografiji[ J ]. Food Chemistry,2008,1(^:702-710.

[5] LI LI, RONG TSAO, LIU ZQ, et al. Izolacija i pročišćavanje actec^ide i izoacteoside od Plantago psyllium L. by hi e-speed counter-current chromatography [J ]. Journal of Chromatography A,2005,1063: 161-169.

[6] RAVN H, NISHIBE S, SASAHARA M, et al. Fenolički spojovi iz Plantago Asiatica[ J]. Phytochemistry, 1990, 29: 3627-3631.

[7] TOYAMA Y, MATSUMOTO M, NISHIOKA I. Phenolic glycosides from Diseased roots of Rehmannia gluiinosa var. purpurea [J]. Phytochemistry, 1987, 26: 983-986.

[8] Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Wu Ji J Ya, et al. Cistanche cistanche total glycosides in Vitro scavenging free radikals and protective effects on DNA damage induced by OH [J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2001, 36(1): 29-31.

[9] XIONG Q, HASE K, TEZUKA Y, et al. Hepatoprotektivna aktivnost fenilethanoida izCistanche deserticola[J ]. Planta Med, 1998,64:120.

[10] SCHAPOVAL E E S, WINTER DE VARGAS M R, CHAVES C G, et al. Anti-upalne i antinociceptivna djelovanja ekstrakta i izoliranih spoja iz Stachytarpheta cayeunensis [J]. J Ethnopharmacol, 1998, 60: 53.

[11] LI J, WANG PF, ZHENG R L, et al. Zaštita fenilpropanoidnih glycosides od Pedicularies od oksidativne hemolize in vitro [J]. Planta Med, 1993,59:315—317.

[12] HE Z D, LAU KM, Xu H X, et al. Antioksidantska aktivnost feniletanoidnih glycosides od Brandisia raka [J]. Etnofarmakologija, 2000, 71:483-486.

[13] XIONG Q, KADOTA S, TANI T, et al. Antioksidantni efekti feniletanoida izCistanche deserticola[J]. Biol Pharm Bull, 1996,19: 1580-1585.

[14] TSAO R, YANG R, XIE S, et al. Koji polifenolički spojovi doprinose ukupnom antioksidantu aktivnosti jabuke? [J]. J Agric Food Chem, 2005,53:4989-4995.

[15] POPOV I N, LEWIN G. Hiotochemiluminescent detection of antiradical activity: U. testing of nonenzymic water-soluble antioxidants [J ]. Free Rad Biol Med, 1994, 17: 267-271.

[16] BRAND-WILLIAMS W, CUVEHER M E, BERGET C. Korištenje slobodne radikalne metode za procjenu antioksidantske aktivnosti [J ]. Lebensm Wiss Technol, 1995,28:25-30.

[17] Li Chunyang, Xu Shiying, Wang Zhang. DPPH metoda za određivanje sposobnosti sema grožđa proanthocyanidins da skalvege slobodnih radikala [J]. Journal of Food and Biotechnology, 2006, 25(2)" 02-106.

SCHLESIER K, HARWICH M, BOHM V, et al. Procjena antioksidantne aktivnosti korištenjem različitih in vitro metoda [J ]. Free Radical Research,2002,36(2):177-187.