SLC37A2, molekul vezan za fosfor povećava u glatkim mišićnim ćelijama u kalcificiranoj aorti Ⅱ
Feb 04, 2024
Rezultati
Potražite molekule kandidate ufosfatom inducirano kalcificiranoAoSMC. Za traženje molekula čija se ekspresija povećava u kalcificiranom AoSMC-u, izvršena je analiza DNK mikromreža oko 26,000 gena korištenjem kalcificiranog AoSMC i nekalcificirane AoSMC mRNA. Slika 1 prikazuje HeatMap različitih gena eksprimiranih između AoSMC koji nisu kultivisani sa 2,6 mM i onih koji su kultivisani sa 2,6 mM P tokom 12 dana. Ukupno 3.066 gena povećano je više od dva puta na kultiviranom naspram nekultivisanog AoSMC. Geni sa povećanom ekspresijom bili su molekuli povezani sa formiranjem osteoblasta kao što su osteopontin, periostinski osteoblast-specifični faktor (POSTN), Wnt3, interleukin-6 (IL-6), ifaktor rasta fibroblasta23 (FGF23) kao i nekoliko molekula u superfamiliji SLC (Tabela 1). Među ovim molekulima, fokusirali smo se na SLC37A2 za koji se mRNA povećala oko 3,1 puta na AoSMC kultivisanom sa 2,6 mM P tokom 12 dana u poređenju sa AoSMC koji nije kultivisan sa 2,6 mM P. Izvještava se da je SLC37A2 povezan s regulacijom P, ali njegov detaljan učinak nije poznat inflamacije na ekspresiji SLC37A2.Vaskularna kalcifikacijaje prijavljeno da ga promoviše upala pa smo ispitali da li je na SLC37A2 mRNA utjecao upalni odgovor. 24 h nakon LPS tretmana, IL-6 se značajno povećao u poređenju sa AoSMC koji nije tretiran LPS (slika 2A). Ovi rezultati su također vidljivi 72 h nakon LPS tretmana. Nije bilo značajnih razlika između grupa u ekspresiji SLC37A2mRNA (slika 2B).
KLIKNITE OVDJE DA DOBIJETE PRIRODNI ORGANSKI EKSTRAKT CISTANCHE SA 25% EHINAKOZIDA I 9% AKTEOZIDA ZA FUNKCIJU BUBREGA
Wecistanche usluga podrške - najveći izvoznik cistanchea u Kini:
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tel:+86 15292862950
Kupite za više detalja o specifikacijama:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
Ekspresija SLC37A2 u kalcificiranom AoSMC izazvanom fosfatom. Da bismo utvrdili da li je SLC37A2 uključen u kalcifikacija, ispitali smo ekspresiju mRNA SLC37A2 na nekalcificiranom i kalcificiranom AoSMC (Sl.3). Kalcifikacija je uočena u AoSMC kultivisanoj sa 2,6 mM P tokom 6 dana, a naprednija kalcifikacija je primećena u AoSMC kultivisanoj sa 2,6 mM P tokom 12 dana (slika 3A). Runx2 mRNA značajno se povećala na kalcificiranom AoSMC u poređenju sa nekalcificiranim AoSMC (slika 3B). SLC37A2 mRNA značajno je počela da raste 3. dana u kalcificiranom AoSMC, a 9. dana, kalcificirani AoSMC značajno se povećao oko dva puta u odnosu na nekalcificirani AoSMC (slika 3C). Ekspresija proteina SLC37A2 značajno se povećala oko dva puta 6. dana u kalcificiranom AoSMC u poređenju sa nekalcificiranim AoSMC (slika 3D).
Ekspresija SLC37A2 kod pacova modela CKD.
Da bismo otkrili da li je SLC37A2 uključen u vaskularnu kalcifikacija in vivo, ispitali smo ekspresiju mRNA SLC37A2 na krvnim sudovima pacova s CKD izazvanim adeninom. Adeninom indukovana CKD pacova stvorena su prema protokolu prikazanom na slici 4A. Tabela 2 prikazuje tjelesnu težinu i biohemijske podatke na dan žrtvovanja. Telesna težina odadeninom indukovana CKDpacova je bila značajno niža u poređenju sa pacovima bez CKD. U poređenju sa grupom koja nije imala CKD, grupe sa CKD su imale više nivoe P i Cr u plazmi, niže nivoe kalcijuma u plazmi i 24-satnu ekskreciju P, Ca i Cr u urinu. Dalje, ovi rezultati su bili istaknutiji u grupi koja je primala CKD-HP, kao što se vidi u prethodnim studijama.37,39) Dakle, bubrežna funkcija je smanjena u grupi sa CKD-HP, posebno u grupi sa CKD-HP. Ispitivali smo ekspresiju mRNA u aortnim sudovima pacova sa CKD (slika 4). Iako nije bilo značajnih razlika u ekspresiji Runx2 mRNA, transkripcionog faktora koji se kreće rano u mehanizmu vaskularne kalcifikacije, između grupa (slika 4B) ekspresija osteopontinske mRNA značajno se povećala u grupi sa CKD-HP u poređenju sa ne- CKD grupa iCKD-LPgroup(Slika 4C). Ekspresija mRNA SLC37A2 je takođe značajno povećana u grupi koja je primala CK D-HP u poređenju sa grupom bez CKD i grupom sa CKD-LP (slika 4D). Budući da su postojale velike individualne razlike kod ovih pacova, ispitali smo korelaciju između osteopontina i mRNA SLC37A2 i pronašli značajnu korelaciju između ovih molekula (slika 4E). Histološki pregled torakoabdominalne aorte otkrio je medijalnu kalcifikacija samo u aorti CKD-HP grupe (slika 5A). Da bismo ispitali mjesto ekspresije SLC37A2 na aorti, izvršili smo imunobojenje aorte CKD-HPrats. SLC37A2 je bio snažno izražen na području gdjevaskularna kalcifikacija(slika 5B).
Slika 1. HeatMap različito izraženih gena između AoSMC nekultivisanog sa 2,6 mM P i AoSMC kultivisanog sa 2,6 mM P. Crvena predstavlja gene sa visokim nivoom signala, a zelena predstavlja gene sa niskim nivoom signala. AOSMC ćelije glatkih mišića aorte. Pogledajte sliku u online verziji.
Diskusija
Istraživali smo kandidate vezane za P molekule uključene u vaskularnu kalcifikacija. Naši rezultati su pokazali da je SLC37A2 jedan od molekula koji se povećavaju savaskularna kalcifikacijain Vitro i in vivo.
Porodica SLC37 pripada superfamiliji SLC i uključuje proteine: SLC37A 1-440) Porodica SLC37 sadrži transmembranske proteine u membrani endoplazmatskog retikuluma i ima sekvencu homolognu bakterijskom organofosfat-fosfat antiporteru.(41) SLC37A4 je poznatiji kaotransporter glukoze{0}}fosfata.(2-44 Međutim, postoji nekoliko izvještaja o SLC37A2, a detalji o njegovoj funkciji nisu u potpunosti shvaćeni. SLC37A2, također poznat kao SPX2, obilno je eksprimiran u mišjim makrofagima, slezeni, timusu i bijelom masnom tkivu (WAT ) genetski gojaznih mišjih modela i ćelija sličnih osteoklastima izvedenih iz ćelija Raw264.7. (45.6) Protein SLC37A2 prenosi i razmjenu glukoza-6-fosfata/fosfata i fosfata/fosfata.(4) Nedavno su izvještaji pokazali povezanost između SLC37A2 sa bolestima životinja. (47-49) SLC37A2 defekt uzrokujekraniomandibularna osteopatija(CMO), samoograničavajuća proliferativna bolest kostiju, kod rasa terijera. (47) Kod mliječnih goveda, SLC37A2 homozigotna mutacija je odgovorna za embrionalnu smrt. (8.9) Pored toga. SLC37A2 se smatra metom ciljnih gena vitamina D. (dakle) Potencijal ciljnog gena za receptor za fosfor-Ser294 progesteron u progresiji raka dojke je također uzet u obzir (1) Prijavljeno je da upala može i uzrokovati i pogoršati vaskularnu kalcifikacija. (2s26) Nadalje. SLC37A2 je obilno eksprimiran u makrofagima i WAT koji su zahvaćeni infiltracijom makrofaga. (s) Dakle. smatrali smo da bi SLC37A2 mogao biti molekul izražen tokom upale. Međutim, naši nalazi nisu pokazali povećanje ekspresije SLC37A2 u AoSMC izloženom inflamatornom odgovoru, čini se da ovaj molekul nije direktno pod utjecajem upalne stimulacije. SLC37A2 može biti uključen u vaskularnu kalcifikacija kroz mehanizam koji nije upala.
Prijavljeno je da SLC37A2 djeluje kao P-vezananti-porter. (41) Osim toga, prijavljeno je da je SLC37A2 ciljni gen za vitamin D, a gen SLC37A2 sadrži glavno mjesto za vezivanje receptora vitamina (ss2). Sistematski korelirane promjene u ekspresiji gena SLC37A2 i cirkulirajućih oblika vitamina D. uočen je u mononuklearnim stanicama periferne krvi čovjeka. (50) Receptori vitamina D se vezuju za 1a, 25-dihidroksi vitamin D, koji je metabolit vitamina D, i regulišu ekspresiju gena. lo, 25 dihidroksivitamin D, djeluje u apsorpciji Ca i P u crijevima, mobilizaciji Ca u kostima i reapsorpciji Caina u bubrezima. (3) Postoji izvještaj da je kod pacova modela CKD induciranog adeninom, serum la, 25-dihidroksi vitamin D, bio značajno viši kod štakora koji su uzimali ishranu sa visokim sadržajem p, sa uznapredovalom vaskularnom kalcizacijom, u poređenju sa štakorima sa niskim -p unos ishranom.39) SLC37A2 može biti povezan sa regulacijom P preko vitamina D. Potrebna su dalja istraživanja kako bi se razjasnilo da vitamin D utiče na ekspresiju SLC37A2 in vitro i Vivo.
Pokazalo se da je mehanizam vaskularne kalcifikacije sličan mehanizmu formiranja kostiju. Nedostatak SLC37A2 uzrokovan CMO klinički je uporediv sa humanom infantilnom kortikalnom hiperostozom, također poznatom kao Caffeyeva bolest.7 Osim toga, postoje izvještaji da se SLC37A2 eksprimira u koštanoj srži i osteoklastima.o Hytone et al. (7 pretpostavili su da je disfunkcija SLC37A2 bi izazvao neravnotežu u funkciji formiranja osteoblastične i osteoklastične kosti i kao rezultat toga doveo do hiperostoze.
Runx2 je bitan faktor transkripcije za vaskularnu kalcifikacija. Također je objavljeno da je Runx2 transkripcijski faktor diferencijacije osteoblasta izražen u epitelnim stanicama dojke u razvoju. (s435) Čini se da je Runx2 neophodan za regulaciju ciljanih gena za fosfor-Ser294 progesteron, koji su povezani sa progresijom raka dojke. SLC37A2 se smatra kandidatom za ciljni gen za fosfor-Ser294 receptor progesterona. (s1) Stoga se smatra da Runx2 može regulisati SLC37A2. U ovoj studiji, ekspresija mRNA SLC37A2 u aorti CkD pacova bila je u korelaciji sa osteopontinskom mRNA, koja cilja gen Runx2.
