Fitokemijsko profiliranje i mehanizmi antidijabetičke nefropatije *Cistanche Tubulosa* vodenog ekstrakta zasnovani na analizi odnosa spektralnog efekta

Fitokemijsko profilisanje i mehanizmi antidijabetičke nefropatijeCistanche tubulosaVodeni ekstrakt zasnovan na analizi odnosa spektra i efekta

Abstract

Broj riječi: 236 Dijabetička nefropatija (DN) predstavlja jednu od najtežih mikrovaskularnih komplikacija dijabetes melitusa i primarni je uzrok završnog stadijuma bubrežne bolesti širom svijeta. Prirodni biljni materijali iz tradicionalne kineske medicine (TCM) pružaju višeciljne terapeutske kandidate za usporavanje bubrežne fibroze i ublažavanje oštećenja bubrega.Cistanche tubulosa, klasična tonik "pustinjskog ginsenga" snimljena uShennong Bencao Jing, pokazuje dokumentovana renoprotektivna farmakološka svojstva. Ovaj pregled sintetizira pretkliničke in-vitro eksperimentalne dokaze koji su usvojili strategiju odnosa spektralnog efekta za skrining bioaktivnih sastojaka izCistanche tubulosavodeni ekstrakt. UPLC‑Orbitrap‑MS/MS je primijenjen za karakterizaciju složenih hemijskih profila sekvencijalno eluiranih frakcija. Za procjenu citoprotektivne aktivnosti korišten je model ozljede HK-2 stanica tubularnog epitela bubrega ljudi uzrokovanih stanjem visoke razine glukoze i masti. Parcijalna regresija najmanjih kvadrata i analiza sive korelacije identificirali su kandidate za bioaktivna jedinjenja. Naknadni ćelijski testovi potvrdili su da 8-epideoksiloganska kiselina i genipozidna kiselina mogu ublažiti oštećenje HK-2 ćelija, pojačati regulaciju aktivnosti antioksidativnih enzima, potisnuti proinflamatorne medijatore i modulirati epitelno-mezenhimalni signal tranzicije (EMT) u kaskadeznom tranziciji (EMT) Ovaj rad sažima fitokemijske karakteristike, in-vitro farmakološka zapažanja i molekularne mehanizme, razmatra ograničenja trenutnih istraživanja i nudi perspektive za dalje proučavanjeCistanche tubulosaprotiv dijabetičke nefropatije.

Ključne riječi: Cistanche tubulosa; vodeni ekstrakt; odnos spektralno-efekt; UPLC‑Orbitrap‑MS/MS; dijabetička nefropatija; HK‑2 ćelije; PI3K‑Akt put; fibroza bubrega

1. Uvod

Globalna prevalencija dijabetes melitusa i dalje raste zbog promjena u obrascima ishrane, stopama gojaznosti i starenju stanovništva; Epidemiološke projekcije ukazuju na više od 360 miliona dijabetičara širom svijeta do 2030. godine [1]. Otprilike 20%-35% ljudi koji žive s dijabetesom tipa 2 će na kraju razviti dijabetičku nefropatiju, što značajno povećava rizik od morbiditeta i mortaliteta [2-3]. Progresivna intersticijska fibroza bubrega uzrokovana oksidativnim stresom, trajnom upalom i tubularni epitelno-mezenhimalni prijelaz predstavlja središnju patološku karakteristiku DN. Trenutne kliničke intervencije ne mogu u potpunosti preokrenuti uznapredovalu bubrežnu fibrozu, tako da novi višekomponentni terapeutski agensi dobiveni iz prirodnih biljnih resursa privlače sve veći istraživački interes [4-5].

Cistanche tubulosa(porodica Orobanchaceae) je dobro poznata tonik biljka u TCM praksi. Istorijski zapisi materia-medica ukazuju da njegove terapijske indikacije uključuju nedostatak bubrega-janga, iscrpljenost esencijalne krvi, lumbago, slabost kostiju i tetiva, kao i suhu crijevnu konstipaciju [6-7]. Savremena fitokemijska istraživanja to pokazujuCistanche tubulosasadrži obilje feniletanoidnih glikozida, iridoidnih glikozida, lignana, betaina, aminokiselina i saharida, dajući antioksidativne, anti-stareće, reproduktivno-zaštitne i nefroprotektivne bioaktivnosti [8-9]. Prethodna farmakološka istraživanja ove biljke uglavnom su se fokusirala na frakcije feniletanoid-glikozida; manje pažnje je posvećeno vodotopivim komponentama dobijenim iz vodene dekokcije, koje odgovaraju kliničkim tradicionalnim oblicima pripravaka za dekokciju [10].

Odnos spektralnog efekta predstavlja strategiju istraživanja koja je široko prihvaćena za studije kompleksnih ekstrakata TCM. Ovaj analitički radni tok spaja hemijske otiske prstiju masene spektrometrije visoke rezolucije s podacima testa bioaktivnosti, koristeći kemometrijske algoritme za korelaciju hromatografskih vršnih intenziteta sa farmakološkim očitanjima, kako bi se locirali kandidati za efektivne supstance iz višekomponentnih biljnih mješavina [11]. Kombinacija UPLC‑Orbitrap‑MS/MS otiska prsta, HK‑2 procjene ćelijskog modela sa visokim sadržajem glukoze i masti i multivarijantnog statističkog modeliranja omogućava istraživačima da izdvoje potencijalne anti-DN sastojke iz kompleksaCistanche tubulosavodeni ekstrakt, i dalje validiraju njihove citoprotektivne mehanizme na molekularnom nivou [12].

Ovaj pregled reorganizira objavljene pretkliničke in-vitro eksperimentalne rezultate iz postojeće literature [12] i proširuje kontekstualnu pozadinu o patogenezi DN iCistanche tubulosafitologija. Glavni ciljevi su: (1) da se sumiraju rezultati profiliranja hemijskih komponenti za sekvencijalno eluirane frakcijeCistanche tubulosavodeni ekstrakt; (2) uvesti tok rada skrininga spektralnog efekta i odnosa za anti-DN bioaktivne sastojke; (3) da tumači ćelijsko-molekularne mehanizme jedinjenja olova 8-epideoksiloganske kiseline i geniposidne kiseline protiv oštećenja bubrežnih tubularnih ćelija; (4) da ukaže na trenutna ograničenja studije i pruži izglede za naknadno istraživanje.

2. Pregled materijala i eksperimentalnog toka rada (sintetizirano iz objavljenih pretkliničkih izvještaja)

Napomena: Svi neobrađeni eksperimentalni podaci preuzeti su iz javno dostupne objavljene literature [12]; ovaj članak ne reprodukuje originalne grafikone instrumenata ili fotografije generisane u laboratoriji. Čitaoci mogu konsultovati citirani izvor za potpune zapise o primarnim eksperimentima.

2.1 Biljni materijal i priprema frakcija vodenog ekstrakta

Biljni materijal:Cistanche tubulosamesnate stabljike ubrane su iz vještački uzgojenih populacija u Hotanu, u regiji Xinjiang, što su taksonomski potvrdili stručnjaci za biljnu farmakologiju [12]. Sirove biljne kriške su više puta preparivane destilovanom vodom pod uslovima kipuće vode. Spojeni vodeni filtrati su vakuumski koncentrirani u suhu sirovu pastu od vodenog ekstrakta. AB-8 kolonska hromatografija sa makroporoznom smolom je primijenjena za gradijent eluiranja: uzastopno korištenjem čiste vode, 20 %, 40 %, 60 %, 80 %, 95 % otopine etanola. Sakupljeno je šest odvojenih frakcija eluata (označene A-F), koncentrirane i osušene u uzorke praha [12]. Svaka frakcija u prahu je ponovo otopljena sa otapalom pomiješanim metanolom i vodom za naknadnu pripremu uzorka UPLC-Orbitrap-MS/MS.

2.2 Instrumenti, reagensi i ćelijski resursi

Analitička platforma: Vanquish UHPLC u kombinaciji sa Orbitrap Exploris 120 masenim spektrometrom visoke rezolucije (Thermo Fisher Scientific). Za hromatografsko odvajanje korištena je analitička kolona Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈ (2,1 mm × 100 mm, 1,7 μm). Ostala glavna laboratorijska oprema uključivala je čitač mikroploča MultiskanGO, ćelijski inkubator, niskotemperaturnu centrifugu velike brzine, obrnuti optički mikroskop [12].

Ljudska bubrežna epitelna HK-2 ćelijska linija je kupljena za uspostavljanje in-vitro modela ozljede bubrega, eksperimenti su koristili ćelijske prolaze ispod 30 generacija. Referentna standardna jedinjenja: 8-epideoksiloganska kiselina, genipozidna kiselina, pinorezinol, siringin, betain (čistoća veća ili jednaka 98 %). Kompleti za biološke analize sadržavali su reagense za MTT analizu, SOD, GSH-Px biokemijske komplete za detekciju; ELISA setovi koji ciljaju IL-1 , TNF- , TGF- ; Western-blot primarna antitela uključujući ‑SMA, kolagen Ⅰ, E‑kadherin, PI3K, p‑PI3K, Akt, p‑Akt [12].

2.3 Eksperimentalni tok rada

1. Hemijsko uzimanje otisaka prstiju: UPLC‑Orbitrap‑MS/MS radi u oba režima elektrosprej-jonizacije pozitivnih jona i negativnih jona. Gradijentni program eluiranja koristeći sistem mobilne faze mravlja kiselina-acetonitril / mravlja kiselina-voda. Usklađivanje MS/MS fragmenata spektra sa referentnim standardima i objavljenim bazama podataka masenog spektra korišteno je za karakterizaciju fitokemijskih sastojaka u šest frakcija elucije [12]. 2.In-vitro konstrukcija modela ozljeda: HK-2 ćelije su bile izložene kombinovanom visokom glukozi (30 mmol·L⁻¹ glukoze) plus palmitatu da bi se simulirao fenotip oštećenja bubrežnih tubularnih tubula sa visokim sadržajem glukoze i masti koji je relevantan za dijabetičku nefropatiju. Testovi serijskog gradijenta koncentracije utvrdili su optimalne uslove modeliranja: palmitat 700 μmol·L⁻¹ ko-inkubiran 24 h doveo je do stabilnog smanjenja vitalnosti ćelija [12]. 3.Probir aktivnosti frakcija: Različite koncentracije šest frakcija eluiranja (A-F) su davane na oštećene HK-2 ćelije. MTT test je mjerio stopu održivosti proliferacije stanica kako bi se procijenila citoprotektivna moć svake frakcije [12]. 4.Hemometrijska analiza spektralnog efekta: Peak‑area data of chromatographic signals from each fraction and corresponding HK‑2 cell‑viability bio‑activity data were imported into SIMCA 14.1 and SPSSPRO platforms. Partial‑least‑squares regression calculated VIP values and regression coefficients; grey‑correlation‑analysis output correlation‑degree index. Compounds satisfying VIP > 1 and grey‑correlation‑index >0,7 su ušli u uži izbor kao kandidati za bioaktivne anti-DN komponente [12]. 5.Eksperimenti validacije jednog jedinjenja: Kandidati čista jedinjenja identifikovana modeliranjem spektralnog efekta pojedinačno su primenjena na HK-2 ćelije oštećene sa visokim sadržajem glukoze i masti. MTT test je potvrdio zaštitnu moć ćelija. Biohemijski kompleti su otkrili antioksidativne indikatore SOD, GSH‑Px; ELISA kvantificirani nivoi proinflamatornih faktora (IL‑1, TNF‑, TGF‑). Western-blot test je otkrio obilje ekspresije proteina koji je povezan s EMT-om, kao i obilje ekspresije proteina povezanog s PI3K-Akt-putem [12].

2.4 Statistička obrada

Podaci mjerenja u ćelijskom eksperimentu su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija. Višestruka poređenja su usvojila jednosmjernu ANOVA nakon čega slijedi post-hoc testiranje; P< 0.05 was considered statistically significant difference. Chemometric spectral‑effect‑modelling relied on SIMCA and online‑platform grey‑correlation‑analysis modules [12].

3. Sinteza eksperimentalnih nalaza iz objavljene literature

3.1 Fitokemijska karakterizacija frakcija sekvencijalnog eluiranja

Uspoređivanjem vremena zadržavanja, mase prekursora i informacija o fragmentima MS/MS s referentnim standardima i objavljenim spektralnim bazama podataka, ukupno su 72 zajednička fitokemijska sastojka uvjetno identificirana u šestCistanche tubulosaeluacijske frakcije vodenog ekstrakta [12]. Otkrivene kategorije jedinjenja obuhvatale su iridoidne glikozide, feniletanoidne glikozide, lignane, betain, aminokiseline, fenolne kiseline, derivate saharida i druge sekundarne metabolite. Distribucija komponenti pokazala je očigledne razlike u zavisnosti od frakcija: frakcije eluirane vodom (A) i frakcije etanola niske koncentracije (B, C) bile su bogatije visokopolarnim molekulima rastvorljivim u vodi uključujući betain, nekoliko iridoidnih glikozida; frakcije eluirane etanolom veće snage akumulirale su relativno niže polaritetne lignane i feniletanoid-glikozidne supstance [12].

3.2 Skrining citoprotektivne aktivnosti frakcija elucije na oštećenim HK-2 ćelijama

Tretman visokoglukozom i visokim sadržajem masti značajno je snizio stopu preživljavanja HK-2 bubrežno-tubularnih epitelnih ćelija, uspješno reproducirajući in vitro fenotip oštećenja bubrežnih stanica ranog stadijuma dijabetičke-nefropate [1]. Među šest frakcija eluiranih gradijentom, frakcija A (vodeni eluat), frakcija B (20 % eluat etanola), frakcija C (40 % eluat etanola) mogle bi značajno povećati vitalnost oštećenih HK-2 ćelija, dok su D-F frakcije pokazale vrlo ograničen zaštitni efekat{-6{6} služio je kao optimalna koncentracija intervencije za naknadno modeliranje podataka o odnosu spektralnog efekta [12].

3.3 Rezultati hemometrijskog skrininga spektralnog efekta

Partial‑least‑squares regression and grey‑correlation‑analysis jointly screened eight candidate compounds which simultaneously satisfied VIP > 1 and grey‑correlation‑degree >0,7: 8-epideoksiloganska kiselina, geniposidna kiselina, pinorezinol, betain, siringin, tubulozid A, akteozid, cistanozid E [12]. Ovi sastojci su smatrani glavnim doprinositeljima anti-DN citoprotektivne aktivnostiCistanche tubulosavodeno-ekstraktne frakcije. Četiri reprezentativne čiste supstance (8-epideoksiloganska kiselina, genipozidna kiselina, pinorezinol, siringin) odabrane su za daljnje testove ćelijske validacije jednog spoja [12].

3.4 Citoprotektivna validacija jednog jedinjenja

Rezultati MTT-a su to pokazali8-epideoksiloganska kiselina i geniposidna kiselinaispoljili su istaknute zaštitne efekte i obnovili vitalnost oštećenih HK-2 ćelija sa visokim sadržajem glukoze i masti, dok su pinorezinol i siringin pokazali relativno slabu aktivnost pod test koncentracijama [12]. Stoga su ova dva molekula iridoid-glikozida postala ključna olovna jedinjenja za nizvodno mehaničko istraživanje.

Biohemijsko otkrivanje antioksidansa: u poređenju sa grupom modela povreda, tretman korišćenjem 8-epideoksiloganske kiseline ili geniposidne kiseline značajno je povećao nivo aktivnosti antioksidativnih enzima SOD i GSH-Px, ublažavajući opterećenje unutarćelijskog oksidativnog stresa izazvano visokim nivoom glukoze-glukoze-2-fa.

ELISA mjerenje inflamatornog faktora: oba spoja mogu značajno smanjiti razinu sekrecije proupalnih medijatora IL-1, TNF- i TGF- koje oslobađaju oštećene bubrežne tubularne stanice, potiskujući lokalni inflamatorni odgovor povezan s 12-fibrozom.

Western-blot analiza ekspresije proteina: stimulacija visoke glukoze-visoke masti pokrenula je tipičan fenomen epitelno-mezenhimalne tranzicije (EMT) u HK-2 ćelijama: povišena ekspresija profibrotskog markera-proteina, srednja ekspresija Col-lagen-SMA Obilje proteina E-kadherina markera adherentnog spoja značajno se smanjilo. Nakon intervencije spoja, ekspresija ‑SMA i kolagena Ⅰ je smanjena, ekspresija E‑kadherina se oporavila. Nadalje, nivo fosforilacije ključnih proteina PI3K-Akt signalnog puta (p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt omjer) evidentno je opao [12]. Ova zapažanja su pokazala da 8-epideoksiloganska kiselina i genipozidna kiselina mogu obuzdati abnormalnu aktivaciju PI3K-Akt signalne kaskade. Inhibiranjem prekomjerne aktivacije PI3K-Akt, dva sastojka iridoid-glikozida suzbijala su oštećenje oksidativnog stresa, upalni odgovor i EMT-proces tubularnih stanica, kako bi ublažili bubrežno-tubularni put povezan s dijabetičkim stanicama [12].

4. Diskusija

Patogeneza dijabetičke nefropatije predstavlja multifaktorski interaktivni patološki proces: hiperglikemija-lipotoksičnost provocira eksploziju oksidativnog stresa, stimulira snažno oslobađanje proinflamatornih citokina, pokreće bubrežno-tubularni epitelni epitelno-transverzalni progres intersticijalna fibroza bubrega [13-14]. PI3K-Akt signalna osa zauzima centralnu regulatornu poziciju u ovom patološkom lancu; trajna prekomjerna aktivacija PI3K-Akt će promovirati EMT-progresiju bubrežno-tubularnih epitelnih ćelija, ubrzati taloženje ekstracelularnog matriksa i razvoj fibroznih lezija [15-16]. Stoga farmakološki agensi koji ciljaju PI3K-Akt put imaju obećavajuću vrijednost za istraživanje DN intervencije.

Cistanche tubulosavodena dekokcija odgovara tradicionalnom načinu kliničke primjene u praksi TCM, sadrži obilje aktivnih sastojaka rastvorljivih u vodi. Prethodna farmakološka istraživanja uglavnom su obraćala pažnju na lipofilne frakcije feniletanoid-glikozida dobijene ekstrakcijom alkohola; biološke funkcije iridoidnih glikozida i betaina obogaćenih ekstraktom vode zaslužuju dublju pažnju [17-18]. Analitička-strategija odnosa spektra i efekata efikasno sužava kandidate za bioaktivne supstance iz složenih višekomponentnih biljnih ekstrakata bez zamornog ponavljanja izolacije-pročišćavanja svakog pojedinačnog jedinjenja, nudeći efikasno rešenje za moderna farmakološka istraživanja TCM multi-komponente [109].

Prema sažetim pretkliničkim in-vitro eksperimentalnim rezultatima, 8-epideoksiloganska kiselina i geniposidna kiselina (sastojci tipa iridoid-glikozida odvojeni odCistanche tubulosafrakcije rastvorljive u vodi) mogu zaštititi HK-2 bubrežno-tubularne-epitelne ćelije od oštećenja izazvanih visokim sadržajem glukoze i masti. Njihov citoprotektivni mehanizam uključuje tri međusobno povezane dimenzije: jačanje ćelijskog antioksidativnog odbrambenog kapaciteta, obuzdavanje prekomjerne sekrecije proinflamatornog faktora i supresiju epitelno-mezenhimalne tranzicije vođene PI3K-Aktom, progresom miga-prelaza u zglobovima, koji zajednički mijenjaju mio-ćeliju. dijabetička nefropatija u ranom stadijumu [12]. Ovo daje nove pretkliničke dokaze na molekularnom nivou koji objašnjavaju nefro-zaštitnu moćCistanche tubulosavodeni ekstrakt. U međuvremenu, modeliranje spektralnog efekta je također pokazalo da betain, pinorezinol tipa lignana, kao i nekoliko dobro dokumentiranih feniletanoidnih glikozida također mogu doprinijeti bioaktivnosti anti-DN; sinergijski višekomponentni kombinovani efekti ne bi trebali biti zanemareni u kompleksnim sistemima biljnih ekstrakata [12].

Ovaj korpus postojećih istraživanja još uvijek nosi značajna ograničenja: prvo, sva mehanička zapažanja izvedena su iz in-vitro eksperimenata na modelu ćelija HK-2, bez in-vivo validacije životinjskog modela. Sistem ćelijske kulture ne može u potpunosti rekapitulirati integriranu složenost patologije dijabetičke nefropatije cijelog organizma, uključujući glomerularne lezije, bubrežno-međućelijsko preslušavanje i promjene metaboličke homeostaze in-vivo. Drugo, ovo istraživanje se uglavnom fokusiralo na dva spoja olovnih iridoid-glikozida; sinergijska interakcija između više aktivnih sastojaka unutar sirovog vodenog ekstrakta zahtijeva dalje istraživanje. Treće, postoji nedostatak istraživanja farmakokinetičkog ponašanja 8-epideoksiloganske kiseline i genipozidne kiseline: biološka dostupnost, distribucija tkiva i situacija metaboličke transformacije nakon in-vivo primjene ostaju nepoznati. Četvrto, još uvijek nisu dostupni dokazi iz kliničkog ispitivanja na ljudima, a izvodljivost kliničke transformacije zahtijeva dalju procjenu.

Za smjernice daljnjeg istraživanja: životinjski modeli dijabetičke nefropatije in-vivo (modeli dijabetičkih štakora/miša izazvani STZ) mogu se usvojiti za provjeru in-vivo renoprotektivne učinkovitosti 8-epideoksiloganske kiseline i geniposiloganske kiseline patologija bubrežnog tkiva, varijacije nivoa proteina u urinu i biohemijskog indeksa u serumu. Trebalo bi organizirati višekomponentne kombinirane interventne grupe kako bi ispitale potencijalne sinergističke efekte različitih kategorijaCistanche tubulosasastojci. Sprovesti farmakokinetičke studije kako bi se razjasnile karakteristike apsorpcije, distribucije, metabolizma jedinjenja olova. U kasnijoj fazi, potrebna je dobro osmišljena pretklinička procjena sigurnosti i kliničko istraživanje prije prevođenja ovih osnovnih nalaza istraživanja u praktičnu terapijsku referencu.

Iz šire perspektive TCM-teorije,Cistanche tubulosafunkcionira za toniziranje bubrega-janga i obnavljanje esencije krvi. Moderne farmakološke studije otkrile su njegove zaštitne efekte na reproduktivni sistem, metabolizam kostiju i oštećenje bubrega. Različite vrste hemijskih sastojaka mogu odgovarati različitim farmakološkim manifestacijama ove TCM biljke. Multi-omics kombinovani spektralno-efekat-odnos analitičko-protok će poslužiti kao moćan alat za dešifrovanje višeciljnih farmakoloških karakteristika klasičnih tonik-bilja u budućim istraživanjima modernizacije TCM-a.

5. Zaključak

1. UPLC-Orbitrap-MS/MS-bazirano fitokemijsko profilisanje otkriva 72 zajednička sastojka u sekvencijalno eluiranim frakcijamaCistanche tubulosavodeni ekstrakt, koji pokriva iridoidne glikozide, feniletanoidne glikozide, lignane i druge komponente rastvorljive u vodi. Frakcije eluiranja vode i etanola niske čvrstoće pokazuju istaknutu citoprotektivnu aktivnost za HK-2 bubrežno-tubularne epitelne-refektivne reakcije{2} kemometrijsko modeliranje identificira osam kandidata za anti-DN-aktivna jedinjenja. Među njima, dva iridoid-glikozida: 8-epideoksiloganska kiselina i geniposidna kiselina pokazuju snažne zaštitne efekte za oštećene HK-2 ćelije u testovima validacije jednog jedinjenja. 3. 8-epideoksiloganska kiselina i geniposidna kiselina i geniposidna kiselina može, GELESH-vaxPOD aktivnost antioksidativnih enzima, potiskuju proupalni medijator IL-1, TNF-, TGF-oslobađanje, moduliraju markere proteina povezanih s EMT-om i ispoljavaju citoprotektivne efekte djelomično inhibiranjem prekomjerne PI3K-aktivacije signalni put. 4. Trenutni dokazi su ograničeni na in-vitro eksperimente na nivou ćelije. Potrebna je dalja in-vivo verifikacija životinjskog modela, analiza farmakokinetičkih karakteristika i procena bezbednosti kako bi se unapredilo translaciono istraživanje ovih bioaktivnih supstanci koje potiču izCistanche tubulosa.

Priznanja

Ovaj narativni pregled sintetizira javno objavljene pretkliničke eksperimentalne resurse. Zahvalnost ide originalnom istraživačkom timu za završetak rada u laboratoriji za ekstrakciju biljaka, masenu spektrometriju i ćelijsku molekularnu laboratoriju.

Reference

[1] Carracher A M, Marathe P H, Close K L. Međunarodna dijabetes federacija 2017 [J]. Journal of Diabetes, 2018, 10(5): 353‑356.

[2] Fakhruddin S, Alanazi W, Jackson K E. Reaktivne vrste kiseonika izazvane dijabetesom: Mehanizam njihovog stvaranja i uloga u oštećenju bubrega [J]. Journal of Diabetes Research, 2017, 2017: 8379327.

[3] Lavoz C, Rayego-Mateos S, Orejudo M, et al. Može li IL-17A biti nova terapijska meta kod dijabetičke nefropatije?[J]. Journal of Clinical Medicine, 2020, 9(1): 272.

[4] Tu P F, Jiang Y. Ažuriranje istraživanja klasične književnosti o Cistanches Herba[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670‑5679.

[5] Xiang X J, Zhang P P, Ye Q Q, et al. Studija o efektu Xiaoyu Xiezhuo decokcije u prevenciji i liječenju renalne fibroze kod miševa dijabetičke nefropatije[J]. Kineski časopis moderne primijenjene farmacije, 2022, 39(4): 442-449.

[6] Fu Z, Liu Y. Farmakološki napredak rodaCistanche: Pregled [J]. Phytotherapy Research, 2021, 35(8): 4234‑4252.

[7] Jiang Y, Wang Y‑F. Tradicionalna upotreba, fitohemija i farmakologijaCistanche tubulosa[J]. Časopis za etnofarmakologiju, 2020, 259: 112968.

[8] Ran Z, Ju B‑W, Cao L, et al. Mikrobiomsko-metabolomska analiza otkriva potencijalni učinak verbaskozida na ublažavanje kognitivnih oštećenja kod db/db miševa[J]. Food & Function, 2023, 14(8): 3488‑3508.

[9] Zhi Y‑J, Zhen Y‑Q, Tian W, et al. Napredak istraživanja hemijskih sastojaka i farmakoloških efekataCistanche deserticolai prediktivnu analizu markera kvaliteta (Q‑Marker)[J]. Kineske tradicionalne i biljne droge, 2021, 52(9): 2758-2767.

[10] Liu T‑H, Ma C, Wang B‑C, et al. Efikasne komponente i mehanizam vodenog ekstrakta Cistanches Herba protiv dijabetičke nefropatije na osnovu odnosa spektra i efekta[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2024, 41(10): 1313-1323.

[11] Zhang Y, Li H‑Y. Strategija istraživanja odnosa spektralnog efekta za kompleksne ekstrakte tradicionalne kineske medicine[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2022, 57(12): 969‑975.

[12] Liu T H, Ma C, Wang B C, et al. Efikasne komponente i mehanizam vodenog ekstrakta Cistanches Herba protiv dijabetičke nefropatije na osnovu odnosa spektra i efekta[J]. Chin J Mod Appl Pharm, 2024, 41(10): 1313-1323.

[13] Xu Z, Xiang X, Su S L, et al. Multi-omička analiza otkriva patogenezu dijabetesne bolesti bubrega kod db/db miševa i mehanizme liječenja kombinacijom multibioaktivnih spojeva iz Salvia miltiorrhiza[J]. Frontiers in Pharmacology, 2022, 13: 987668. [14] Zhou R, Liao J, Cai D, et al. Nupr1 posreduje u fibrozi bubrega aktiviranjem fibroblasta i promocijom epitelno-mezenhimalne tranzicije[J]. FASEB Journal, 2021, 35(3): e21381.

[15] Dian M‑J, Li J, Zhang X‑L, et al. MST4 negativno reguliše EMT, invaziju i metastaze ćelija HCC inaktivirajući PI3K/AKT/Snail1 os [J]. Journal of Cancer, 2021, 12(15): 4463‑4477.

[16] Zhang B‑B, Zeng M‑N, Li B‑K, et al. Arbutin ublažava akutnu ozljedu bubrega izazvanu LPS-om inhibiranjem upale i apoptoze putem PI3K-Akt/Nrf2 puta[J]. Phytomedicine, 2021, 82: 153466.

[17] Wu Y‑Y, Zhang X‑H. Iridoidni glikozidi iz rodaCistanche: Fitohemija i bioaktivnosti[J]. Istraživanje prirodnih proizvoda, 2023, 37(14): 2311‑2326.

[18] Cao L, Ju B‑W, Ran Z, et al. Protective effects of phenylethanol glycosides of herba cistanche on mice with cholestatic liver disease[J]. Chinese Journal of Pharmacovigilance, 2023, 20(3): 286‑291.

[19] Wang L, Chen J‑B. Napredak primjene korelacije spektra i efekta u skriningu bioaktivnih supstanci tradicionalne kineske medicine[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(7): 1801‑1808.

[20] Li M‑X, Huang S‑Q. Hemometrijski potpomognut skrining bioaktivnih sastojaka iz biljnih preparata: mini-pregled[J]. Journal of Separation Science, 2024, 47(6): 2300897.