Dio 2: Cistanoside of Cistanche Herba ublažava reproduktivna oštećenja muškaraca uzrokovana hipoksijom putem supresije oksidativnog stresa

Kontaktiraj Tinutina.xiang@wecistanche.com

https://www.xjcistanche.com/news/part1-cistanoside-of-cistanche-herba-ameliorat-54370405.html

Kliknite na link za informacije o prvom dijelu

Efekti Cis-a na reprodukciju kod pacova izazvanih hipobaričnom hipoksijom.

Da bi se utvrdili efektihipobarična hipoksijana mužjacima štakora, prvo smo testirali morfološke promjene testisa kod pacova izazvanih hipobaričnom hipoksijom. Rezultati HE bojenja su pokazali da su u kontrolnoj grupi normalne spermatogene ćelije u različitim fazama bile raspoređene na uredan način od bazalne membrane do lumena, a zrele sperme bile su vidljive u lumenima tubula (slika 4A). U poređenju sa kontrolama, u grupi modela su uočene patološke promjene tkiva testisa, bazalna membrana epitelnih ćelija testisa bila je labavo raspoređena, spermatogeni epitel je bio izuzetno tanak, a nivo i broj zametnih ćelija su značajno smanjeni (Slika 4A) . Međutim, liječenje Cis-om značajno je poboljšalo histologiju oštećenja testisa izazvanih hipobaričnom hipoksijom in vivo (slika 4A). Također smo mjerili tjelesnu težinu, težinu testisa, težinu epididimisa i težinu žlijezde sjemenih mjehurića, što je dovelo do izračunavanja indeksa reproduktivnog organa (odnos reproduktivnog organa/tjelesne težine). Kao što je prikazano na slici 4B-D, indeks reproduktivnih organa (testisi, epididimis i žlijezda sjemenih mjehurića) bio je značajno niži u grupi modela (P< 0.01)than="" in="" the="" control="" group.="" however,="" the="" effect="">hipobarična hipoksijaindeks reproduktivnog organa pacova je poništen Cis tretmanom (Slika 4B-D).

Zatim, aktivnost enzima akrozoma i stopa žive sperme sperme mužjaka pacova su također izmjereni kako bi se razjasnilo oštećenje funkcije testisa. Kao što je prikazano na slici 4E, 4F, aktivnost enzima akrozoma i pokretljivost spermatozoida bili su niži u modelnoj grupi pacova nego u kontrolnoj grupi (P< 0.01).="" however,="" compared="" with="" rats="" in="" the="" model="" group,="" acrosome="" enzyme="" activity="" was="" restored="" in="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="">< 0.05)(figure="" 4d).="" moreover,="" as="" shown="" in="" figure="" 4f,="" treatment="" with="" cis="" also="" enhanced="" the="" live="" sperm="" rate;="" the="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="" all="" showed="" a="" significantly="" increased="" live="" sperm="" rate(55.83="" ±=""><><><0.05; and=""><0.05 respectively)="" when="" compared="" with="" the="" model="" rats="" (43.83="">

Uzeti zajedno, ovi rezultati sugeriraju dahipobarična hipoksijaokruženje je dovelo do morfoloških promjena testisa, gubitka težine reproduktivnih organa i oštećenja funkcije testisa kod mužjaka pacova, a Cis je mogao učinkovito zaštititi reproduktivne organe od oštećenja uzrokovanih hipoksijom.

Efekti Cis na OS u testisima pacova izazvanih hipobaričnom hipoksijom. Nivoi ROS i LPO u testisima pacova su izmjereni kako bi se analizirali efekti Cis na OS izazvan hipobaričnom hipoksijom. Analiza ROS-a je pokazala da je u poređenju sa kontrolnom grupom, nivoi ROS-a u testisima u grupi modela bili značajno povećani (P < 0.01="" slika="" 5a).="" suprotno="" tome,="" lpo="" je="" bio="" dramatično="" povišen="" u="" testisima="" (p="">< 0.01)="" pod="" hipobaričnom="" hipoksijom="" u="" poređenju="" sa="" normoksičnim="" uslovima="" (slika="" 5b).="" međutim,="" cis="" tretman="" je="" promijenio="" gore="" navedene="" promjene="" (p="">< 0,05),="" u="" kojima="" je="" cis-b="" pokazao="" bolje="" efekte="" od="" drugih="" cis="" (slika="" 5a,="" 5b).="" činilo="" se="" da="" cis="" štiti="" testise="" smanjenjem="" os="" pod="" hipobaričnim="" hipoksičnim="" uvjetima="" in="">

Dodatno, izvršene su analize apoptoze kako bi se dalje procijenio mehanizam kojim je Cis štitio od oštećenja funkcije testisa izazvane hipobaričnom hipoksijom. Rezultati TUNEL bojenja (slika 5C) pokazali su da postoji značajna apoptoza u grupi modela com

uparen sa kontrolnom grupom. Međutim, nakon tretmana sa Cis (8 mg/kg/d), došlo je do manjeg broja apoptotičkih ćelija (P < 0.05)="" (slika="" 5c).="" to="" su="" pokazali="" i="" western="" blot="">hipoksija i hipobaričnatretman je rezultirao aktivacijom kaspaze{{0}} i PARP-a i povećanim Bax/Bcl-2 omjerom u tkivu testisa, što ukazuje na povećanje apoptoze (Slika 5D). Osim toga, različite vrste Cis tretmana značajno su smanjile apoptozu u tkivu testisa (slika 5D). Slično, IHC analiza tkiva testisa pokazala je slične rezultate (dodatna slika 1). Da bismo potvrdili mehanizam Cis-reduciranog OS izazvanog hipobaričnom hipoksijom, dalje smo testirali aktivnosti GR, GPx i SOD u tkivu testisa. Kao što je prikazano na slici 5E, u poređenju sa kontrolnom grupom, tretman hipobarične hipoksije značajno je smanjio aktivnosti GR, GPx i SOD (P < 0.01).="" međutim,="" cis="" tretman="" je="" obnovio="" aktivnosti="" enzima="" (gr,="" gpx="" i="" sod)="" tkiva="" testisa="" kod="" pacova="" liječenih="" hipobaričnom="" hipoksijom="" (p="">< 0,05).="" u="" zaključku,="" činilo="" se="" da="" cis="" štiti="" testise="" aktiviranjem="" moćnog="" endogenog="" antioksidantnog="" enzimskog="" odbrambenog="" mehanizma="" u="" uvjetima="" hipobarične="">

Diskusija

U visinskim područjima,hipobarična hipoksijapoznato je da utiče na više sistema kod ljudi, uključujući i muški reproduktivni sistem [4, 20]. Nedavna eksperimentalna istraživanja usmjerena su na razumijevanje mehanizama kakohipobarična hipoksijanarušava muški reproduktivni sistem. U ovoj studiji, terapeutski efekat ekstrakta Cis izCistanchesHerbaistražena je reproduktivna oštećenja uzrokovana hipoksijom. Rezultati su pokazali da Cis može zaštititi muški reproduktivni sistem od hipoksičnog oštećenja smanjenjem akumulacije ROS i OS izazvane hipoksijom kroz povećanje aktivnosti endogenih antioksidativnih enzima.

ROS su slobodni radikali dobiveni iz kisika koji igraju vitalnu ulogu u ljudskoj fiziologiji i patologiji. Niske doze ROS-a su neophodne za kapacitaciju spermatozoida, akrosomsku reakciju i fuziju spermatozoida i oocita [24, 25]. Međutim, prekomjerno nakupljanje ROS često dovodi do oštećenja zametnih stanica i stromalnih stanica, što rezultiramuška neplodnost[26]. ROS može lako oštetiti ćelijske membrane, nukleinske kiseline, proteine, enzime i druge biološke makromolekule peroksidacijom. Osim toga, oni također dovode do potencijalnog oštećenja stanica i DNK kada premaše kapacitet nošenja antioksidansa. Akumulirani dokazi podržavaju ključnu ulogu ROS-a u patogenezi muške plodnosti [27, 28]. Proizvodnja ROS regulirana je napetošću kisika. U hipoksičnim uvjetima, raspoloživi kisik u okolišu se smanjuje, a viskozitet krvi se povećava, što utiče na mnoge metaboličke procese u organizmu zavisne od kisika [29, 30]. Međutim, niži atmosferski tlak na velikim visinama uzrokuje slab venski povratak i smanjenje količine kisika koji se prenosi krvotokom do svih stanica organizma, što dodatno povećava hipoksiju organa i stanica [29, 30]. Stoga, izlaganje visokom stavu dovodi do niza hipoksičnih fizioloških odgovora, uključujući proizvodnju i akumulaciju ROS, kada potražnja za kisikom premašuje vaskularnu opskrbu. Kao što je ranije spomenuto, akumulacija ROS dovodi do različitih intracelularnih efekata, od kojih je najkritičniji izazivanje OS u stanicama.

OS se odnosi na neravnotežu između reakcija oksidacije i redukcije, što dovodi do stvaranja viška oksidansa ili molekula koji prihvataju elektron iz drugog reaktanta, koji zauzvrat proizvodi ROS [31, 32]. Poznato je da OS može biti izazvan nizom endogenih i egzogenih faktora, uključujući izloženost velikim visinama. Spermatozoidi su ćelije koje su posebno osjetljive na OS s obzirom na njihove neadekvatne sisteme popravke ćelija i visok sadržaj polinezasićenih masnih kiselina u plazma membrani [33]. Tkiva testisa i epididima nisu izuzetak, jer je uočeno prisustvo teške OS u okruglim spermatidama pacova podvrgnutih hipoksiji [4]. OS utiče na stabilnost DNK, čime se ugrožava integritet genetskog materijala gameta [34-36]. Međutim, potvrđeno je da visok nivo oštećenja DNK u muškim gametama dovodi do aktivacije signalizacije apoptoze, što rezultira smanjenjem broja spermatozoida epididima i povećanjem procenta defektnih ćelija [28, 37]. U ovoj studiji, hipoksija je značajno smanjila vitalnost GC-1 ćelija kroz indukciju apoptoze i zaustavljanje ćelijskog ciklusa. Što je još važnije, FCM analiza je pokazala značajno povećan nivo ROS nakon stimulacije hipoksije, sa povećanom stopom apoptoze i većom aktivacijom omjera Caspase-3, PARP i Bax/Bcl-2, što ukazuje da se ROS može aktivirati apoptozu aktiviranjem kaspaznog signalnog puta tokom oštećenja plodnosti izazvanog hipoksijom. Sadašnji nalazi su pokazali da je hipoksija dovela do prekomjerne akumulacije ROS-a, uzrokujući oksidativno oštećenje reproduktivnih stanica. Stoga je značajno identificirati nove antioksidante koji mogu poslužiti kao efikasan pristup za ublažavanje hipoksijom izazvane povrede plodnosti. Za zaštitu od OS, u tijelu postoji kompleksan antioksidativni sistem, koji se uglavnom sastoji od enzimskih faktora. U fiziološkim uslovima, sadržaj ROS i antioksidativni sistem održavaju određenu ravnotežu. Međutim, prekomjerna proizvodnja ROS-a iscrpljuje antioksidativni sistem sperme, što dovodi do OS, što uzrokuje oštećenje DNK sperme i rezultira nižom stopom plodnosti i trudnoće [23]. Stoga, kako bi se riješila prekomjerna proizvodnja ROS i povezani štetni efekti na ćelijskom nivou u muškom reproduktivnom sistemu, testirane su različite antioksidativne strategije [23]. Trenutno je opsežna literatura o upotrebi spojeva s antioksidativnim djelovanjem i poboljšanjem funkcije spermatozoida. Važno je da većina izvještaja opisuje poboljšanje parametara sperme nakon oralnog uzimanja antioksidansa, uključujući poboljšanje koncentracije i pokretljivosti sperme ili smanjenje oštećenja DNK [38]. Stoga, sve veći broj urologa propisuje oralne antioksidanse za neplodnost zbog problema povezanih s OS [39]. Ovi antioksidansi uglavnom uključuju karnitine, vitamine, cink, melatonin i prirodna jedinjenja [23, 40]. Trenutno, s razvojem tehnologije ekstrakcije lijekova, razmatra se i sve veći broj TCM ekstrakata za ublažavanjemuška neplodnostjer ovi antioksidansi mogu smanjiti destruktivne efekte OS [41]. Yüce A. et al. objavio je 2013. da cimet ima blagotvoran učinak na oksidativni i antioksidativni balans u testisima i kvalitetu sperme [42]. Zhang L et al. pokazalo je da kurkumin značajno poboljšava pokretljivost spermatozoida kod pacijenata i smanjuje H2O2 [43]. Osim toga, dokazano je da niz drugih biljnih ekstrakata kao što su borovnica, crocus sativus, sjemenke nara i zeleni čaj štite reproduktivni sistem putem antioksidativnih mehanizama [27, 44-47].Cistanches Herbaje važan TKM koji ima povoljan sigurnosni profil i široke medicinske funkcije za liječenje neplodnosti, između ostalih stanja [13]. Moderne farmakološke studije su to pokazaleCistanches Herbaposjeduje različite aktivnosti, kao što su antioksidativno, protuupalno, hepatoprotektivno i djelovanje protiv neurodegenerativnih bolesti [13, 48]. Dakle, ekstrakti, frakcije ili spojevi izCistanches Herbamogu imati potencijalna antioksidativna svojstva za liječenje neplodnosti.

Aktivne tvari u biljkama koje poboljšavaju plodnost uključuju različite kemijske grupe kao što su PhG, saponini, oksigenirana hlapljiva jedinjenja i alkaloidi [41]. Studije farmakološke aktivnosti PhGs su pokazale da PhG pokazuju širok spektar bioaktivnosti, kao što su antioksidacija, antiradijacijska neuroprotekcija i poboljšanje seksualne funkcije [49, 50]. Među ovim aktivnostima, antioksidacija postepeno privlači pažnju. Prijavljeno je da neke pojedinačne komponente ili frakcije PhG inhibiraju apoptozu zametnih ćelija izazvanu različitim hemikalijama, a njihove antioksidacione sposobnosti in vitro su takođe demonstrirane in vivo na nekoliko životinjskih modela [51, 52]. Ovi rezultati ukazuju da bi PhGs mogli biti atraktivan kandidat za liječenjemuška neplodnost. Cis je aktivan PhG od kojeg se može izolovatiCistanches Herba. U ovoj studiji, istražili smo efekte Cis-a na ćelije tretirane hipoksijom ili model štakora i istražili osnovne molekularne mehanizme. Cis je pokazao zaštitne aktivnosti na smanjenje vitalnosti izazvane hipoksijom i povećanje apoptoze u GC-1 ćelijama, a pokazao je i zaštitni efekat na oštećenja izazvana hipoksijom u reproduktivnom sistemu pacova in vivo. Uočeno je značajno smanjenje aktivnosti GR, GPx i SOD pod hipoksijom u odnosu na normoksične grupe, dok su specifične aktivnosti GR, GPx i SOD značajno povećane u testisima ili GC-1 ćelijama tretiranim Cis. Činilo se da cis štiti testise i GC-1 ćelije u uslovima hipoksije pojačavajući aktivnosti antioksidativnih enzima.

Enzimski antioksidansi funkcionišu uglavnom tako što uklanjaju superoksidne anione, čime se sprečavaju peroksidacija lipida i oštećenje DNK kako bi se sprečila neplodnost. Enzimski antioksidativni mehanizmi igraju ključnu ulogu u prevenciji oksidativnog oštećenja [23]. Enzimski mehanizam protiv OS uključuje hvatače slobodnih radikala i enzime zavisne od glutationa uključujući GR, GPx i SOD [12]. Poznato je da su antioksidativni enzimi neophodni za muški reproduktivni sistem. U trenutnoj studiji, efekat smanjene aktivnosti antioksidativnih enzima u hipobaričnoj hipoksiji bio je praćen povećanjem ROS i LPO u grupi modela, što je u skladu sa prethodnim izveštajima [12]. Međutim, primjena Cis-a dovela je do oporavka aktivnosti enzima antioksidansa u GC-1 ćelijama i testisima pacova, što je omogućilo stvaranje strategija za primjenu Cistanches Herba kako bi se spriječilo oštećenje izazvano hipobaričnom hipoksijom, kao što je prethodno predloženo. Iako su sadašnji rezultati pokazali da liječenje Cis-om djelomično smanjuje oštećenje zametnih stanica izazvano hipoksijom kod pacova, potrebna su daljnja istraživanja kako bi se razotkrila potpuna slika njegovih reproduktivnih zaštitnih učinaka. Na primjer, specifični mehanizam Cis-a utiče na aktivnost antioksidativnih enzima. Osim toga, postavlja se pitanje da li bi neki drugi mehanizmi također mogli biti relevantni jer je Cis samo djelimično povratio reproduktivnu štetu uzrokovanu hipoksijom. Konačno, treba takođe razmotriti da li Cis ima direktan efekat na podsticanje rasta na zametne ćelije.

Zaključci

Općenito, nalazi ove studije naglašavaju potencijal Cis-a kao antioksidansa u liječenju hipoksijom izazvanih muških reproduktivnih oštećenja. Cis može zaštititi od hipoksije izazvanog reproduktivnog oštećenja muškaraca obnavljanjem aktivnosti antioksidativnih enzima, smanjenjem OS izazvanog ROS, istovremeno povećavajući vitalnost stanica i smanjujući apoptozu. Važno je da su podtipovi Cis (Cis-A, Cis-B, Cis-C i Cis-H) proučavani u ovoj studiji pokazali određeni zaštitni efekat na reproduktivni sistem, a Cis-B je pokazao najznačajniji efekat. Stoga nagađamo da bi Cis mogao biti dobar kandidat za antioksidans za liječenje reproduktivnih oštećenja muškaraca uzrokovanih hipoksijom, iako precizan osnovni mehanizam zahtijeva dalja istraživanja.

Priznanja

Ova studija je podržana grantovima Nacionalne fondacije za prirodne nauke Kine (br. 81672535; 82002686) i Narodne oslobodilačke vojske Kine (Fond za istraživanje medicinskih nauka; br. 16QNP114). Otkrivanje sukoba interesa Nema.

Reference

[1] Bracke A, Peeters K, Punjabi U, Hoogewijs D i Dewilde S. Potraga za molekularnim mehanizmima koji leže u osnovi muške idiopatske neplodnosti. Reprod Biomed Online 2018; 36: 327-339.

[2] Agarwal A, Mulgund A, Hamada A i Chyatte MR. Jedinstven pogled na mušku neplodnost širom svijeta. Reprod Biol Endocrinol 2015; 13:37.

[3] Janković Veličković L i Stefanović V. Hipoksija i spermatogeneza. Int Urol Nephrol 2014; 46: 887-894.

[4] Farias JG, Bustos-Obregon E, Orellana R, Bucarey JL, Quiroz E i Reyes JG. Učinci kronične hipobarične hipoksije na histologiju testisa i oksidativni metabolizam okruglih spermatozoida. Andrologia 2005; 37: 47-52.

[5] Liao W, Cai M, Chen J, Huang J, Liu F, Jiang C i Gao Y. Hipobarična hipoksija uzrokuje štetne efekte na spermatogenezu kod pacova. Reprodukcija 2010; 139: 1031-1038.

[6] Paul C, Teng S i Saunders PT. Pojedinačni, blagi, prolazni skrotalni toplinski stres uzrokuje hipoksiju i oksidativni stres u testisima miša, što uzrokuje smrt zametnih stanica. Biol Reprod 2009; 80: 913-919.

[7] Gasco M, Rubio J, Chung A, Villegas L i Gonzales GF. Utjecaj izloženosti velikoj nadmorskoj visini na spermatogenezu i broj spermatozoida u epididimu kod mužjaka pacova. Andrologia 2003; 35: 368- 374.

[8] Zepeda AB, Figueroa CA, Calaf GM i Farias JG. Muški reproduktivni sistem i antioksidansi u oksidativnom stresu izazvanom hipobaričnom hipoksijom. Andrologia 2014; 46: 1-8.

[9] Quindry J, Dumke C, Slivka D i Ruby B. Utjecaj ekstremne vježbe na velikoj nadmorskoj visini na oksidativni stres kod ljudi. J Physiol 2016; 594: 5093-5104.

[10] Otašević V, Stančić A, Korać A, Janković A i Korać B. Reaktivne vrste kiseonika, azota i sumpora u plodnosti muškaraca. Raskršće stanične signalizacije i patologije. Biofaktori 2020; 46: 206-219.

[11] Bui AD, Sharma R, Henkel R i Agarwal A. Reaktivne vrste kiseonika utiču na DNK sperme i njihovu ulogu u muškoj neplodnosti. Andrologia 2018; 50: e13012.

[12] Bisht S, Faiq M, Tolahunase M i Dada R. Oksidativni stres i muška neplodnost. Nat Rev Urol 2017; 14: 470-485.

[13] Fu Z, Fan X, Wang X i Gao X. Cistanches Herba: pregled njegove hemije, farmakologije i farmakokinetike. J Ethnopharmacol 2018; 219: 233-247.

[14] Wang T, Chen C, Yang M, Deng B, Kirby GM i Zhang X. Ekstrakt etanola Cistanche tubulosa posreduje nivoe polnih hormona pacova indukcijom steroidogenih enzima testisa. Pharm Biol 2016; 54: 481-487.

[15] Wong HS i Ko KM. Herba Cistanches stimuliše ćelijski redoks ciklus glutationa pomoću reaktivnih vrsta kiseonika nastalih mitohondrijalnim disanjem u H9c2 kardiomiocitima. Pharm Biol 2013; 51: 64-73.

[16] Wang N, Ji S, Zhang H, Mei S, Qiao L i Jin X. Herba cistanches: protiv starenja. Aging Dis 2017; 8: 740-759.

[17] Gu C, Yang X i Huang L. Cistanches Herba: Neuropharmacology Review. Front Pharmacol 2016; 7: 289.

[18] Yan Q, He B, Hao G, Liu Z, Tang J, Fu Q i Jiang CX. KLF9 pogoršava ishemijsku ozljedu u kardiomiocitima kroz povećanje oksidativnog stresa. Life Sci 2019; 233: 116641.

[19] Xu F, Guo G, Zhu W i Fan L. Testovi funkcije akrozoma ljudske sperme predviđaju stopu oplodnje in vitro: retrospektivna kohortna studija i meta-analiza. Reprod Biol Endocrinol 2018; 16:81.

[20] Farias JG, Puebla M, Acevedo A, Tapia PJ, Gutierrez E, Zepeda A, Calaf G, Juantok C i Reyes JG. Oksidativni stres u testisima i epididimisu štakora pod intermitentnom hipobaričnom hipoksijom: zaštitna uloga suplementacije askorbatom. J Androl 2010; 31: 314-321.

[21] Saleh RA, Agarwal A, Nada EA, El-Tonsy MH, Sharma RK, Meyer A, Nelson DR i Thomas AJ. Negativni efekti povećanog oštećenja DNK sperme u odnosu na semenski oksidativni stres kod muškaraca s idiopatskim i muškim faktorom neplodnosti. Fertil Steril 2003; 79 Suppl 3: 1597-1605.

[22] Aitken RJ i Baker MA. Uzroci i posljedice apoptoze spermatozoida; doprinosa neplodnosti i uticaja na razvoj. Int J Dev Biol 2013; 57: 265-272.

[23] Martin-Hidalgo D, Bragado MJ, Batista AR, Oliveira PF i Alves MG. Antioksidansi i muška plodnost: od molekularnih studija do kliničkih dokaza. Antioksidansi (Bazel) 2019; 8: 89.

[24] Drevet JR. Porodica antioksidansa glutation peroksidaze i spermatozoida: složena priča. Mol Cell Endocrinol 2006; 250: 70-79.

[25] Aitken RJ, Clarkson JS, Hargreave TB, Irvine DS i Wu FC. Analiza odnosa između defektne funkcije sperme i stvaranja reaktivnih vrsta kiseonika u slučajevima oligozoospermije. J Androl 1989; 10: 214-220.

[26] Agarwal A, Sharma RK, Nallella KP, Thomas AJ, Jr, Alvarez JG i Sikka SC. Reaktivne vrste kiseonika kao nezavisni marker muškog faktora neplodnosti. Fertil Steril 2006; 86: 878- 885.

[27] Zepeda A, Aguayo LG, Fuentealba J, Figueroa C, Acevedo A, Salgado P, Calaf GM i Farias J. Ekstrakti borovnice štite testise od oksidativnog stresa kod pacova izazvanog hipobaričnom hipoksijom. Oxid Med Cell Longev 2012; 2012: 975870.

[28] Yang S, Zhang W, Xuan LL, Han FF, Lv YL, Wan ZR, Liu H, Ren LL, Gong LL i Liu LH. Akebia Saponin D inhibira stvaranje ateroskleroze kod ApoE(-/-) miševa slabljenjem apoptoze izazvane oksidativnim stresom u endotelnim ćelijama. Atherosclerosis 2019; 285: 23-30.

[29] Saxena DK. Utjecaj hipoksije povremenim izlaganjem na nadmorskoj visini na karakteristike sjemena i morfologiju testisa mužjaka rezus majmuna. Int J Biometeorol 1995; 38: 137- 140.

[30] Verratti V, Berardinelli F, Di Giulio C, Bosco G, Cacchio M, Pellicciotta M, Nicolai M, Martinotti S i Tenaglia R. Dokazi da hronična hipoksija uzrokuje reverzibilno oštećenje plodnosti muškaraca. Asian J Androl 2008; 10: 602-606.

[31] Henkel RR. Leukociti i oksidativni stres: dilema za funkciju spermatozoida i mušku plodnost. Asian J Androl 2011; 13: 43-52.

[32] Tremellen K. Oksidativni stres i muška neplodnost--klinička perspektiva. Hum Reprod Update 2008; 14: 243-258.

[33] Saradha B i Mathur PP. Indukcija oksidativnog stresa lindanom u epididimisu odraslih mužjaka pacova. Environ Toxicol Pharmacol 2006; 22: 90-96.

[34] Aitken RJ i Roman SD. Antioksidativni sistemi i oksidativni stres u testisima. Adv Exp Med Biol 2008; 636: 154-171.

[35] Wagner H, Cheng JW i Ko EY. Uloga reaktivnih vrsta kiseonika u muškoj neplodnosti: ažurirani pregled literature. Arab J Urol 2018; 16: 35-43.

[36] Agarwal A, Saleh RA i Bedaiwy MA. Uloga reaktivnih vrsta kiseonika u patofiziologiji ljudske reprodukcije. Fertil Steril 2003; 79: 829-843.

[37] Redza-Dutordoir M i Averill-Bates DA. Aktivacija signalnih puteva apoptoze reaktivnim vrstama kisika. Biochim Biophys Acta 2016; 1863: 2977-2992.

[38] Zengerling F i Schmidt S. [Antioksidansi za mušku subfertilnost]. Urologe A 2016; 55: 956- 959.

[39] Esteves SC i Agarwal A. Novi koncepti u muškoj neplodnosti. Int Braz J Urol 2011; 37: 5-15.

[40] Pisoschi AM i Pop A. Uloga antioksidansa u hemiji oksidativnog stresa: pregled. Eur J Med Chem 2015; 97: 55-74.

[41] Tahvilzadeh M, Hajimahmoodi M, Toliyat T, Karimi M i Rahimi R. Pristup ljekovitim biljkama zasnovan na dokazima za liječenje abnormalnosti sperme u tradicionalnoj perzijskoj medicini. Andrologia 2016; 48: 860-879.

[42] Yuce A, Turk G, Ceribasi S, Sonmez M, Ciftci M i Guvenc M. Efekti ulja kore cimeta (Cinnamomum zeylanicum) na vrijednosti antioksidansa testisa, apoptotičke zametne stanice i kvalitet sperme. Andrologia 2013; 45: 248-255.

[43] Zhang L, Diao RY, Duan YG, Yi TH i Cai ZM. In vitro antioksidativni učinak kurkumina na kvalitetu ljudske sperme u leukocitospermiji. Andrologia 2017; 49: e12760.

[44] Heidary M, Vahhabi S, Reza Nejadi J, Delfan B, Birjandi M, Kaviani H i Givrad S. Efekat šafrana na parametre sjemena neplodnih muškaraca. Urol J 2008; 5: 255-259.

[45] Safarinejad MR, Shafiei N i Safarinejad S. Prospektivna dvostruko slijepa randomizirana placebo kontrolirana studija o efektu šafrana (Crocus sativus Linn.) na parametre sjemena i antioksidativni kapacitet sjemene plazme kod neplodnih muškaraca s idiopatskom oligoasperom. Phytother Res 2011; 25: 508-516.

[46] Kolahdooz M, Nasri S, Modarres SZ, Kianbakht S i Huseini HF. Efekti ulja sjemenki Nigella sativa L. na abnormalni kvalitet sjemena kod neplodnih muškaraca: randomizirano, dvostruko slijepo, placebom kontrolirano kliničko ispitivanje. Phytomedicine 2014; 21: 901-905.

[47] Jiao N, Chen Y, Zhu Y, Wang W, Liu M, Ding W, Lv G, Lu J, Yu B i Xu H. Zaštitni efekti katapola na reproduktivna oštećenja muškaraca izazvana dijabetesom melitusom putem supresije AGE-a /RAGE/Nox4 signalni put. Life Sci 2019; 116736.

[48] ​​Xiong Q, Kadota S, Tani T i Namba T. Antioksidativni efekti feniletanoida iz Cistanche deserticola. Biol Pharm Bull 1996; 19: 1580-1585.

[49] Shao SY, Feng ZM, Yang YN, Jiang JS i Zhang PC. Forsythenethosides A i B: dva nova feniletanoidna glikozida sa 15-članim prstenom iz Forsythia suspensa. Org Biomol Chem 2017; 15: 7034-7039.

[50] Xue Z i Yang B. Feniletanoidni glikozidi: napredak u istraživanju njihove fitohemije, farmakološke aktivnosti i farmakokinetike. Molecules 2016; 21: 991.

[51] Chen W, Lin HR, Wei CM, Luo XH, Sun ML, Yang ZZ, Chen XY i Wang HB. Echinacoside, feniletanoidni glikozid iz Cistanche deserticola, produžava životni vijek Caenorhabditis elegans i štiti ih od toksičnosti izazvane Abetaom. Biogerontology 2018; 19: 47-65.

[52] Xuan GD i Liu CQ. [Istraživanje učinka feniletanoidnih glikozida (PEG) Cistanche deserticola na anti-aging kod ostarjelih miševa izazvanih D-galaktozom]. Zhong Yao Cai 2008; 31: 1385-1388.