Dio 2 Feniletanol glikozidni liposom inhibira PDGF-indukovanu aktivaciju HSC putem regulacije FAKPI3KAkt signalnog puta
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materijali i metode
4.1. Materijali
CPhGs (feniletanoidni glikozid iz cistanche)kupljeni su od Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, Kina). Sadržajehinaceabio je više od 35 posto , a akteozida više od 16 posto . Lecitin je kupljen od Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Šangaj, Kina). 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycerol-3-fosfoholin (DPPC) i holesterol je isporučila Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, SAD). Besmrtnu zvjezdanu ćeliju jetre štakora obezbijedio je Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Šangaj, Kina). Dulbeccov modifikovani Eagleov medijum (DMEM) kupljen je od Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, SAD). Fetalni goveđi serum (FBS) nabavljen je od Gibco Life Technologies (Waltham, MA, SAD). Penicilin (100 卩g/mL) i streptomicin (100 卩g/mL) su proizvodi Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il){ {13}},5-difeniltetrazolijum bromid] (5 mg/mL) je kupljen od Sigme (Oakville, ON, Kanada). Aktivnost LDH je procijenjena korištenjem kompleta za analizu LDH iz Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Peking, Kina). FITC Annexin V komplet za otkrivanje apoptoze I i propidijum jodid (PI)/RNase pufer za bojenje su svi kupljeni od BD Biosciences (San Diego, CA, USA), a rrPDGF-BB je obezbijedila R&D Systems (Minneapolis, MN, SAD). TRIzol reagens je kupljen od Thermo Fisher Scientific, Inc. RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit je proizvod Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Litvanija). TB Green Premix Ex Taq TM II je kupljen od Takare (Dalian, Kina). Ripa rastvor za pirolizu je obezbedio Thermo Fisher Scientific, Inc. Inhibitor proteaze fenilmetilsulfonil fluorid i mešavina inhibitora fosfataze širokog spektra su kupljeni od Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Kina). Proteinske trake su vizualizovane pomoću Pierce™ ECL Western Blotting supstrata, koji je obezbedio Invitrogen (Karlsbad, Kalifornija, SAD). Enzim hrena koji označava kozji anti-zečji IgG kupljen je od Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Šangaj, Kina). Probni komplet Super Signal West Femto je isporučio Thermo Fisher Scientific, Inc. Zečji anti-p-aktin, a-SMA, kolagen-1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt i fosfo-Akt antitijelo su svi kupljeni od Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Peking, Kina). X-3-FAK i X-3-NC su kupljeni od Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Šangaj, Kina). Lipofectamine 2000 je osigurao Invitrogen.
4.2. Priprema CPhG liposoma
Lecitin, DPPC i holesterol (1:2:2, m/m/m) rastvoreni su u mešavini hloroforma i metanola (2:1 v/v), rotirani da formiraju film na 49-50 stepenu, iCPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)(250 卩g/mL) su dodani naknadno. Reaktivna otopina je kontinuirano rotirana i hidratizirana, a fosfolipidna membrana je prebačena u vodu kako bi se formirali CPG lipozomi. Proces inkapsuliranih liposoma je ponovljen prema gore navedenim metodama. Da bi se dobio uniforman liposom, inkapsulirani liposom je ekstrudiran 5 puta sa 0.45 卩m mikroporoznom membranom i filtriran 18-20 puta sa 0,22 卩m membranom. CPG liposomi su čuvani na 4 stepena. Raspodjela veličine čestica je mjerena laserskim analizatorom veličine čestica, oblik čestica je promatran transmisijskom elektronskom mikroskopijom, a opterećenje lijekom i efikasnost inkapsulacije određivani su HPLC-om.
4.3. In vitro oslobađanje iz CPG liposoma i CPhG(feniletanoid glikozid iz cistanche)
Profil oslobađanja in vitro CPG liposoma iCPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche) izvedena je metodom dijalizne membrane. Ukupno 5 mL svakog uzorka je prebačeno u vrećicu za dijalizu sa 14,000 Da molekularnom težinom cut-o任 Vrećica za dijalizu je uronjena u 20{{10 }} mL rastvora PBS pufera (pH=6.0) vibrirao je na 37 stepeni. Medij za oslobađanje (3 mL) je povučen i zamijenjen izopikničkim PBS puferskim rastvorom (pH=6.0) u predviđenim vremenskim intervalima (0,5,1, 2, 4, 8,12,16, 24 i 48 h). Koncentracije ehinakozida u CPG liposomima iCPhGsu mediju za oslobađanje određivali su
HPLC. Kumulativno oslobađanje (procenti) CPG liposoma iCPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche) izračunato je korištenjem sljedeće jednačine (1):
gdje je Cn koncentracija lijeka u mediju za oslobađanje na n-toj tački uzorkovanja, V je volumen oslobođenog medija, a W je ukupna doza.
Da biste bolje razumjeli vitro karakteristike oslobađanjaCPhG(feniletanoid glikozid iz cistanche) liposom iCPhGs, primijenjena su tri različita modela kako bi se uklopili dobiveni podaci o oslobađanju: (a) kinetički model nultog reda, (b) kinetički model prvog reda i (c) Higuchi model dat u jednadžbama (2)-(4) :
gdje je Mt/Mo udio kurkumina koji se oslobađa iz uzorka u trenutku t, a k je konstanta oslobađanja različitih modela. Koeficijent korelacije se izračunava da ilustruje stepen uklapanja između modela izdanja i podataka.
4.4. Citotoksičnost
Za HSC, gustina od 1 x 105 ćelija/mL je postavljena u ploče sa 96-jažicama i ostavljena da raste preko noći na 37 stepeni u inkubatoru sa 5 posto CO2. Vitalnost ćelija testirana je na širokom spektruCPhGkoncentracije liposoma (117,79,58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68,1,84, 0,92 i 0,46 卩g/mL) za detekciju vitalnosti test ćelija i izračunavanje vrijednosti IC50. Zatim su ćelije inkubirane na 37 stepeni tokom 4 sata sa 20 µL MTT (5 mg/mL u PBS rastvoru). Ljubičasti proizvod MTT-proizvoda je otopljen u 150 µL DMSO, a Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, SAD) je korišten za mjerenje apsorbera na 490 nm. Sljedeća formula (jednačina (5)) je korištena za izračunavanje postotka vitalnosti ćelije:
4.5. Toksičnost ćelija CPhG liposoma na HSC
Ćelije su posađene u ploče sa 6-jažicama, a toksičnost HSC-a je izmjerena korištenjem LDH kompleta za detekciju. Ćelije su postavljene na gustinu od 2 x 105 ćelija/bunariću u 6-ploče na 37 stepeni u inkubatoru sa 5 posto CO2. Nakon rasta preko noći, ćelije su tretirane saCPhGliposomi (29,45, 14,72 i 7,36 卩g/mL). Prazan (DEME medij) kontrola je istovremeno održavana. Nakon 24 h, ćelije su sakupljene tripsinom i centrifugiranjem. Svaka grupa ćelija je davana striktno u skladu sa uputstvima za komplet. Zatim je izračunata stopa curenja LDH iz tečnosti ćelijske kulture.
4.6. Analiza apoptoze
Ćelije su kultivisane u 6-ploče sa gustinom od 2 x 105 ćelija/jažici na 37 stepeni u inkubatoru sa 5 procenata CO2. Nakon rasta preko noći, ćelije su tretirane saCPhGliposoma (29,45, 14,72 i 7,36 µg/mL), a zatim je izmjerena apoptoza HSC pomoću FITC Annexin V kompleta za detekciju apoptoze. Koncentracije su zasnovane na IC50 određenom testom citotoksičnosti. Prazan (DEME medij) kontrola je istovremeno održavana. Nakon 24 h, ćelije su sakupljene tripsinom i centrifugiranjem i isprane sa PBS i suspendovane u 500 µL pufera za vezivanje. Zatim su ćelije obojene sa 5 µL Annexin V-FITC i 5 µL PE. Ćelije su inkubirane na sobnoj temperaturi 30 minuta u mraku, a brzina apoptoze je izmjerena pomoću FACSCalibur citometra (Becton Dickinson, San Jose, CA, SAD).
4.7. Analiza zaustavljanja ćelijskog ciklusa
HSC (2 X 105 ćelija/2 mL/jažici) tretirani su 24 h saCPhGliposomi na 29,45, 14,72 i 7,36 ^g/mL u 6-pločama. Prazan (DEME medij) kontrola je istovremeno održavana. Ćelije su sakupljene i isprane sa 1 mL PBS i fiksirane sa 75 posto etanola preko noći na 4 stepena. Ćelije su zatim centrifugirane i resuspendirane u 500 otopinama propidijum jodida (PI)/RNase pufera za bojenje na 37 stepeni 30 minuta u mraku. Na kraju, ćelije su izmjerene pomoću FACSCalibur citometra (Becton Dickinson). Proporcije ćelija u G0/G1, S i G2/M fazama ćelijskog ciklusa analizirane su pomoću softvera FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. EfekatCPhG(feniletanoid glikozid iz cistanche) Liposom na PDGF posredovanom FAK i PI3K/Akt signalnom putu
4.8.1. Proliferacijski test
HSC linije (1 X 105 ćelija/mL) su postavljene u 96-ploče i ostavljene da rastu preko noći na 37 stepeni u inkubatoru sa 5% CO2. Nakon 24 h ćelijske kulture, ćelije su nasumično podijeljene u sljedećih pet grupa: prazna kontrola (kultivirana u DMEM koji sadrži samo 10 posto FBS), PDGF-BB (kultiviran u DMEM koji sadrži 50 卩g/L PDGF-BB), aCPhGintervencija liposoma (stimulisana medijumom koji sadrži 50 µ/mL PDGF-BB 24 h). Zatim su ćelije tretirane sa 29,45, 14,72 i 7,36 Rg/mL CPhG liposoma. Ćelije su kontinuirano uzgajane 24 h, 48 h i 72 h u inkubatoru na 37 stepeni tokom 4 h sa 20 mL MTT (5 mg/mL u PBS rastvoru). Ljubičasti MTT-formazan proizvod je otopljen u 150 rL DMSO i procijenjen mjerenjem apsorbancije na 490 nm u Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Thermo Fisher Scientific, Inc.), a IC50 je izračunat. Četvorostruki uzorci su rađeni za svaku koncentraciju u četiri nezavisna eksperimenta. Sljedeća formula (jednačina (6)) izračunava postotak vitalnosti ćelije:
4.8.2. Kvantitativna lančana reakcija polimeraze u realnom vremenu (qRT-PCR)
Ćelije su posađene u {{0}} ploče sa gustinom od 1 X 105 ćelija/mL. Ova metoda grupisanja je ista kao i prethodna. Nakon 24 h, ukupna RNK je ekstrahirana iz kultiviranih ćelija pomoću TRIzol reagensa. Koncentracija i čistoća RNK mjerene su na 260/280 nm pomoću ultraljubičastog spektrofotometra prema standardnom omjeru OD260/OD280 od 1.8-2.0. Reakcije reverzne transkripcije su reverzno transkribovane sa RNK pomoću kompleta RevertAid First Strand cDNA Synthesis. Za mjerenje ekspresije gena korišten je TB Green Premix Ex TaqTM II. qRT-PCR je izveden korišćenjem ABI QuantStudio™6 Flex PCR sistema u realnom vremenu (Applied Biosystems, Foster City, Kalifornija, SAD). Prajmer sekvence su sintetizovane od strane Sangon Biotech (Šangaj, Kina) (tabela 4).
4.8.3. Western blot analiza
Ukupni proteini ekstrahovani iz HSC u različitim grupama pripremljeni su kako je prethodno opisano. Ukratko, slični proteini su razdvojeni putem elektroforeze na 10% natrijum dodecil sulfat-poliakrilamidnom gelu (SDS-PAGE), a zatim prebačeni na membrane od poliviniliden fluorida (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Njemačka). Zatim su PVDF membrane blokirane u 3 posto BSA i inkubirane preko noći na 4 ◦C sa primarnim antitelima. Sljedećeg dana, HRP-obilježen kozji anti-zečji IgG (1:25,000 razrjeđenje; 1 h). Proteinske trake su vizualizirane putem Pierce™ ECL Western Blotting supstrata i snimljene korištenjem FluorChem E Imaging System (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), koje su normalizirane sa -aktinom kao internom kontrolom.
4.8.4. FAK Eksperimenti prekomjerne ekspresije
Ćelije su podijeljene u kontrolnu grupu normalnog medijuma, PDGF-BB stimulacijsku grupu, PDGF-BB stimulaciju plus X-3-FAK grupu, PDGF-BB stimulacijsku plus X-3-NC grupu, PDGF -BB stimulacija plus X-3-FAK plusCPhGgrupa liposoma, i rrPDGF-BB stimulacija plus X-3-NC plusCPhGgrupa liposoma. HSC linije (1 × 105 ćelija/mL) su postavljene u ploče sa 6-bunarićima i ostavljene da rastu preko noći na 37 ◦C u inkubatoru sa 5% CO2. Sljedećeg dana, PDGF-BB (kultivisane u DMEM koji sadrži 50 µg/L PDGF-BB) ćelije su dodane i uzgajane. Trećeg dana, pEX-3-FAK i X-3-NC su razrijeđeni u mediju bez antibiotika, dobro pomiješani sa lipofectaminom 2000 i ostavljeni da odstoje na 37 ◦C 20 minuta, prije dodavanja u svaku jažicu ćelija na 37 ◦C. Nakon inkubacije od 5 h, medij koji je sadržavao 10 posto seruma je zamijenjen 48 h, a petog dana medij je zamijenjen koncentracijom od 29,45 µg/mL CPhG lipozoma u trajanju od 24 h. Zatim je svaki bunar sakupljen drugog, trećeg, petog i šestog dana i detektovana je ekspresija proteina gena FAK, PI3K, Akt, p-PI3K i p-Akt.
4.9. Statistička analiza
Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (SD). Za statističke analize korišten je softver SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, USA). Značajnost razlike izračunata je jednosmjernim ANOVA testom nakon čega je uslijedio LSD test. Jednačinu rastvaranja lijeka postavio je Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, SAD).
5. Zaključci
U zaključku, naši rezultati to pokazujuCPhG(feniletanoid glikozid iz cistanche) liposomi značajno inhibiraju aktivaciju HSC-a, značajno smanjujući razvoj fibroze jetre povećanjem apoptoze i regulacijom ćelijskog ciklusa u HSC-ima. Inhibiranje aktivacije FAK/PI3K/Akt signalnih puteva može biti osnovni mehanizam pomoću kojegCPhGliposomi štite od kronične bolesti jetre povezane s fibrozom. Ovi nalazi pružaju novi uvid u mehanizme ove nove formulacije lijeka kao antifibrogenog kandidata za buduće liječenje fibroze jetre. Međutim, osnovni mehanizmi su složeniji od onoga što je ovdje opisano, a naši rezultati ne isključuju moguću uključenost drugih uređaja uzrokovanihCPhGliposomi za liječenje fibroze jetre.
Doprinosi autora:TL, JZ, S.-PY, LM i S.-LZ osmislili su i dizajnirali eksperimente. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM i X.-YY analizirali su podatke. S.-LZ i JZ su napisali rukopis. TL, LM i JZ pregledali su rukopis. Svi autori su pročitali i odobrili konačni rukopis.
finansiranje:Ovo istraživanje je finansirala Nacionalna fondacija za prirodne nauke Kine, grant broj 81560628.
Priznanja:Ovaj rad je finansijski podržala Nacionalna fondacija za prirodne nauke Kine (br. 8156140127). Autori bi željeli izraziti iskrenu zahvalnost Jun Zhaou i Xin Wangu za njihovo poboljšanje pisanja ovog rada.
Sukobi interesa:Autori navode da nema izjava o interesu.
Reference
1. Zhang, H.; Sun, D.; Wang, G.; Cui, S.; Field, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin ublažava fibrozu jetre supresijom aktiviranih zvezdastih ćelija jetre. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2019,511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Fibroza jetre: Patofiziologija, patogenetski ciljevi i klinička pitanja. Mol. Aspects Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Reparativni efekti astaksantin-hijaluronanskih nanoagregata protiv retrorsin-CCl(4)-inducirane fibroze i nekroze jetre. Molecules 2018, 23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Sun, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla promoviše visoku glukozu i PDGF-indukovanu aktivaciju zvjezdanih ćelija jetre indukcijom autofagije putem CaMKKp/ERK signalnog puta. Toxicol. Lett. 2019, 300, 1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Uloga citokina izvedenih iz zvjezdanih ćelija jetre (HSC) u upali i imunitetu jetre. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosafeniletanoidni glikozidi indukuju apoptozu u Eca-109 ćelijama putem puta koji zavisi od mitohondrija. Oncol. Lett. 2019,17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Vi, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Phenylethanol Glycosides fromCistanche tubulosaSuzbijanje aktivacije zvjezdanih ćelija jetre i blokiranje provođenja signalnih puteva u TGF-beta1/smad kao potencijalnom agensu protiv fibroze jetre. Molecules 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Vi, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Preventivni efekti feniletanoidnih glikozida izCistanche tubulosana fibrozu jetre izazvanu albuminom u goveđem serumu kod pacova. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Efikasnost zamke i apsorpcija četiri vrste proliposoma. J. Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bio-adhezivni sistem za isporuku lijekova i njegova primjena u tradicionalnoj kineskoj medicini. Brada. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Long, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Derivat nitroimidazola inkorporirao je liposome za isporuku lijeka izazvanu hipoksijom i poboljšanu terapijsku efikasnost kod tumorskih ksenografta izvedenih od pacijenata. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Lipozomski sistem za isporuku lijekova koji cilja na jetru i napredak u istraživanju bolesti jetre. World Chin. J. Digest. 2016, 24,4238. [CrossRef]
13. Zhou, BiH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, HW PI3K/AKT uključivanje signalnog puta u apoptozu izazvanu fluorom u C2C12 ćelijama. Chemosphere 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinacoside stimuliše ćelijsku proliferaciju i sprečava ćelijsku apoptozu u MODE-K ćelijama epitela creva preko regulacije transformacije ekspresije faktora rasta-p1. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Anti-nociceptivna i protuupalna aktivnost uzrokovanaCistanche deserticolakod glodara. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaEkstrakt povećava formiranje kostiju u osteoblastima. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. EfekatCistanches HerbaVodeni ekstrakt o gubitku kosti kod štakora sa ovarijektomijom. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studije o sedativnom dejstvuCistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Antifatigue aktivnost ekstrakta bogatog feniletanoidima izCistanche deserticola. Phytother. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Neuroprotektivni efekti ehinakozida u mišjem MPTP modelu Parkinsonove bolesti. EUR. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acilirani feniletanoidni aminoglikozidi sa hepatoprotektivnim djelovanjem iz pustinjske biljke Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Prevencija ekstrakta Cistanche salsa kod jetrene fibroze izazvane ugljen-tetrahloridom kod pacova. Brada. Herbal Med. 2013, 5,199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Priprema tečnih proliposoma od feniletanoidnih glikozida Cistanche: Optimizirana formulacija, karakterizacija i prolipo neke pilule za kapanje in vitro i in vivo evaluacija. EUR. J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Fibroza jetre utiče na svojstva ciljanja sistema za isporuku lekova na podskupine makrofaga in vivo. Biomaterijali 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Sun, H.; Li, S.; Da.; Galoni, H. Dizajn kompozicije i medicinska primjena liposoma. EUR. J. Med. Chem. 2019,164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofenom napunjene etanolne liposomske čestice za biomedicinske primjene. J. Microbiol. Metode 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Utjecaj površinskog naboja na ćelijsku internalizaciju liposoma ovisno o veličini. Chem. Phys. Lipidi 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Sun, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Liposomi punjeni galanginom, ciljani na jetru: Optimizacija i hepatoprotektivna efikasnost. J. Drug Deliv. Sci. Technol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Hepatična fibroza: Vrijeme je da krenemo sa terapijskim ciljevima specifičnim za jetrene zvjezdane stanice. Hepatobiliary Pancreatic Dis. Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brown, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Mehanizmi specifični za matične ćelije osiguravaju genomsku vjernost unutar HSC-a i nakon starenja HSC-a. Cell Rep. 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Motion, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 inducira apoptozu zvjezdanih ćelija jetre i ublažava fibrozu jetre kod miševa smanjujući miR-23a-5p i miR-28a-5p. Biochim. Biophys. Acta Biophys. Incl. Photosynth. 2018, 1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Razlike u statusu ćelijskog ciklusa leže u osnovi transkripcione heterogenosti u HSC kompartmentu. Cell Rep. 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Rosmarinska kiselina umanjuje fibrogenezu jetre putem supresije aktivacije/proliferacije jetrenih zvezdastih ćelija i indukcije apoptoze. Asian Pac. J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Efekti endotelnih progenitornih ćelija na proliferaciju i biološku funkciju jetrenih zvezdastih ćelija pod stresom smicanja. Brada. J. Appl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Aktivirane zvjezdane ćelije jetre promoviraju progresiju rezidualnog hepatocelularnog karcinoma nakon zagrijavanja od autofagnog preživljavanja do proliferacije. Int. J. Hyperthermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH sukcinat inducira fibrogenezu jetre promovišući aktivaciju, proliferaciju i migraciju, i inhibirajući apoptozu zvjezdanih ćelija jetre. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mehanizmi fibroze jetre. Clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16一Mechanisms of Liver Fibrosis. In Comprehensive Toxicology, 3. ed.; McQueen, CA, ur.; Elsevier: Oxford, UK, 2018; str. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Obrasci ekspresije PDGF-A, -B, -C i -D i PDGF-receptora a i |3 u aktiviranim zvezdastim ćelijama jetre štakora (HSC). Cytokine 2005, 31, 349-357. [CrossRef]
