Dio 2 Preventivni efekti feniletanol glikozida iz Cistanche Tubulosa na fibrozu jetre izazvanu albuminom u goveđem serumu kod pacova
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Ekspresija NF-κB p65 i kolagena I nakon intervencije lijeka u HSC-T6 stanicama Kako bi se karakterizirali signali fibroze jetre, dva ključna regulatorna gena u jetri su određena putem RT-PCR testa. Podaci su pokazali da ćelije tHSC-T6 iz kontrolne grupe imaju niže nivoe mRNK NF-κB i kolagena tipa I. S druge strane, TGF- 1 je inducirao HSC-T6 ćelije da značajno regulišu NF-κB (P < 0.01)="" i="" col-i="" (p="">< 0,01)="" mrna,="" sa="" nivoima="" višim="" od="" one="" u="" kontrolnoj="" grupi.="" u="" prisustvu="" različitih="" koncentracija="">feniletanoid glikozid iz cistanche) , rezultati NF-κB p65 [P NF-κB=0.001 za 100 ug/ml, P NF-κB=0.002 za 75 ug/ml, P NF-κB {{ 11}}.007 za 50 ug/ml, i P NF-κB=0.012 za 25 ug/ml, respektivno] i Col-I [P Col-I=0.006, P Col -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019, respektivno] su pokazali smanjenu ekspresiju ovih mRNA (slika 7).
Western blot analiza nivoa kolagena I nakon intervencije lijeka u HSC-T6 ćelijama Slika 8 prikazuje nivoe ekspresije proteina kolagena I u ćelijama HSC-T6 različitih eksperimentalnih grupa. Nivo ekspresije proteina kolagena I je značajno smanjen u različitim doznim grupama CPhG(feniletanoid glikozid iz cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml i 25 ug/ml) u poređenju sa TGF- 1 grupom
Diskusija
CPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)je feniletanoidni glikozid izoliran i pročišćen iz rizoma Cistanchea, koji se koristi kao tradicionalni kineski biljni lijek. Poslednjih godina pokazalo se da CPhG poseduju moćnu sposobnost prevencije oštećenja jetre [20]. Stoga smo imali za cilj da istražimo da li CPhG imaju inhibitorni učinak na fibrozu hepatitisa kod pacova indukovanom BSA fibrozom jetre. BJRG se obično koristi kao terapeutski lijek za fibrozu jetre u Kini. Napravljen je od oklopa kornjače. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, itd. imaju efekte obnavljanja Qi-ja i krvi, ublažavanja umora, omekšavanja čvorova. Osim toga, prethodne studije pokazuju da ima očiglednu funkciju blokiranja rane fibroze jetre, inhibiranja proliferacije stanica koje pohranjuju masnoće i smanjenja sinteze kolagena [21]. Stoga je BJRG korišten kao pozitivan lijek u ovoj studiji.
Patološke promjene fibroze jetre kod pacova izazvane injekcijama BSA slične su onima kod portalne ciroze kod ljudi [22]. CPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)dozno-zavisno ublažio stepen fibroze jetre i inhibirao transformaciju HSC u ćelije slične miofibroblastu, smanjio povišene nivoe serumskih ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 i indeksa jetre, te značajno potisnuo ekspresiju kolagena I, kolagena III i TGF- 1 u tkivu jetre. Faze fibroze jetre su u korelaciji sa serumskim nivoima HA, LN i IV-C, koji kao markeri mogu igrati ulogu u otkrivanju stepena fibroze jetre [23]. Prijavljeno je da je HA glavni resurs ekstracelularnog matriksa. IV-C kao esencijalni element bazalne membrane će se sintetizirati u izobilju i u velikoj mjeri deponovati u ranijim fazama ciroze jetre. Nivoi LN i IV-C u serumu su indeksi brzine obrtanja bazalne membrane i pokazuju stepen fibroze u području portala i sinusoidnih kapilara [24]. PC III je marker u dijagnozi hepatične fibroze i rane ciroze, ali njegova osjetljivost i specifičnost nisu visoke i nema značajne razlike između različitih faza fibroze u mnogim referencama [24, 25].
Ova studija je dobila sličan rezultat. Pored toga, H&E i Masson-ova zapažanja obojenih trihromom pokazuju normalno tkivo jetre sa izrazitim jetrenim lobulima i jetrenim sinusoidima. Struktura tkiva jetre u grupi modela bila je poremećena, a tkivo jetre i jetreni sinusoid zamijenjeni su velikom količinom vezivnog tkiva. Međutim, uočeno je značajno poboljšanje u tretiranim grupama u poređenju sa modelnom grupom. Važno je da ekspresija kolagena tipa I i kolagena tipa III igraju bitnu ulogu u razvoju fibroze jetre, čije blokiranje može spriječiti i liječiti fibrozu jetre. Stoga, stvaranje i taloženje u tkivu jetre kolagena tipa I i kolagena tipa III može poslužiti kao važna determinanta efikasnosti anti-hepatičke fibroze. TGF- 1 je također važan profibrogeni citokin kod oštećenja jetre i biološki je aktivan s višestrukim farmakološkim djelovanjem [26]. Za održavanje homeostaze tkiva potrebna je ravnoteža između ovih radnji. Aberantna ekspresija TGF- 1 je uključena u patogenezu bolesti jetre [27, 28]. Poznato je da je TGF- 1 ključni citokin koji je uključen u rane faze fibroze jetre.
Oksidativni stres pokreće TGF- 1, što rezultira time da potonji stimulira proizvodnju i taloženje ECM [29]. Stoga je jedna od efikasnih strategija za proizvodnju lijeka protiv fibroze jetre identifikacija anti-TGF- 1 agenasa. Imunohistohemijska analiza je pokazala da ekspresija kolagena tipa I, kolagena tipa III i TGF- 1 može otkriti patološki proces fibroze jetre. Ekspresija kolagena tipa I, kolagena tipa III i TGF- 1 u tretiranim grupama je smanjena, koja je bila značajno niža u visokim dozama CPhG-a(feniletanoid glikozid iz cistanche)terapijskoj grupi, i sugerirao da je CPhGs efikasan inhibitor kolagena tipa I, kolagena tipa III i TGF- 1. Pretpostavlja se da CPhG mogu poboljšati aktivnost kolagenaze, održavajući dinamičku ravnotežu sinteze i degradacije ECM-a, odgađajući i sprječavajući stvaranje fibroze jetre. CPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)ne samo da bi mogao poboljšati fibrozu jetre izazvanu BSA kod pacova, već bi također mogao biti povezan sa inhibicijom aktivacije HSC in vitro. Smatra se da aktivacija HSC predstavlja ključni korak fibrogeneze. U ovoj studiji, rezultati su ilustrirali da primjena CPhG-a od 25 do 100 ug/ml značajno smanjuje smanjenu ekspresiju NF-κB p65, ekspresiju mRNA kolagena I i ekspresiju proteina kolagena I u HSC. NF-κB igra važnu ulogu u modulaciji imunološkog odgovora na infekciju ili podražaje [30]. Nagomilavanje NF-κB u ćelijama jetre može dovesti do regrutacije upalnih citokina/medijatora, izazivajući tako razvoj fibroze [31, 32]. Štaviše, kolagen je takođe osetljiv indeks koji odražava nivo fibroze i čini oko 50 procenata ukupnog proteina u fibroznoj jetri [33].
Kao rezultat toga, pretpostavili smo da je molekularni mehanizam protiv hepato-fibroze povezan sa CPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)-posredovana inaktivacija ekspresije NF-κB, u kojoj korist doprinosi sinergističkoj ulozi ublažavanja imunotoksičnosti i upalnog stresa u tkivu jetre oštećenom BSA, dodatno ispravljajući dismetabolizam radi poboljšanja funkcija jetre.
Zaključci
Zaključno, naše studije pokazuju da CPhGs(feniletanoid glikozid iz cistanche)značajno umanjuju stepen fibroze jetre izazvane BSA kod pacova. Njegov mehanizam može barem djelomično biti posljedica inhibitornog efekta CPhG-a na sastav ECM-a i stimulacije degradacije ECM-a, i/ili direktnom inhibicijom sinteze kolagena tipa I, kolagena tipa III i ekspresije TGF{ {0}}. Stoga smo očekivali da se CPhG mogu koristiti u proizvodima za zdravstvenu njegu ili u kliničkim lijekovima za prevenciju fibroze jetre kod ljudi. Potrebne su buduće studije kako bi se utvrdila efikasnost CPhG-a kao snažnog lijeka protiv fibroze jetre.
Skraćenice
CPhGs:Feniletanol glikozidi iz cistanche; BSA: goveđi serum albumin; HSC-T6: zvijezdaste ćelije jetre; Hyp: Hidroksiprolin; BJRG: Compound Biejiarangan tablete; TGF- 1: Transformirajući faktor rasta 1; ALT: Alanin aminotransferaza; AST: Aspartat aminotransferaza; HA: hijaluronska kiselina; LN: Laminin; PC III: prokolagen tipa III; IV-C: kolagen tipa IV; NF-κB: Nuklearni faktor kapa-pojačavač lakog lanca aktiviranih B ćelija; RT-PCR: lančana reakcija reverzne transkriptaze-polimeraze; SDS-PAGE: Natrijum dodecil sulfat-poliakrilamid gel elektroforeza.
Konkurentni interesi Autori izjavljuju da nemaju suprotstavljenih interesa. Autorski doprinosi TL, JZ, SPY, LM, MT i SLZ osmislili su i dizajnirali eksperimente. SPY, TL i JZ analizirali su podatke. SPY i JZ su napisali rukopis. TL, LM i JZ pregledali su rukopis. Svi autori su pročitali i odobrili konačni rukopis. Zahvala Ovo istraživanje je podržala Nacionalna fondacija za prirodne nauke Kine (81260624). Autori bi željeli izraziti iskrenu zahvalnost profesoru Tao Liuu na predloženim poboljšanjima za pisanje ovog rada. Detalji o autoru 1 Odsjek za toksikologiju, Škola javnog zdravlja, Medicinski univerzitet Xinjiang, br. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011 Xinjiang Uyghur Autonomous
Region, Kina. 2 Ključna laboratorija za ujgursku medicinu, Institut Materia Medica iz Xinjianga, Urumqi 830004, Kina. 3 No. 140 Xinhua South Road, Tianshan District, Urumqi 830000 Xinjiang Uyghur Autonomous Region, Kina. Primljeno: 6. avgusta 2015. Prihvaćeno: 24. novembra 2015
Reference
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Trenutni status novih antifibrotskih terapija u bolesnika s kroničnom bolešću jetre. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Zvezdaste ćelije jetre i fibroza jetre. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Patogeneza fibroze jetre. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Pregledni članak: reverzibilnost ciroze. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Kineska akademija nauka. 23. ed. Kina: Redakcija Flora of China; 2013. str. 1–16.
Komisija za kinesku farmakopeju Ministarstva sanitarne zaštite Narodne Republike Kine. Kineska farmakopeja, Dio 1. Kina: Izdavačka kuća hemijske industrije; 2010. str. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Napredak istraživanja feniletanoidnih glikozida iz Cistanche tubulosa. Central South Pharm. 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, He L. Efekat Rou Cong Ronga(Herba Cistanches Deserticola) na reproduktivnu toksičnost kod miševa izazvanu glikozidom Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE i inhibitori agregacije trombocita iz Tamarix Hojnacki Bunge (biljka domaćin Herba Cistanches) koja raste u Xinjiangu. Pharmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Poboljšanje kolitisa izazvanog dekstran sulfatom natrijumom kod miševa ekstraktom Cistanche tubulosa obogaćenim ehinakozidom. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.
