2. DIO Antioksidacija i citoprotekcija akteozida i njegovih derivata: poređenje i mehanička hemija
Mar 08, 2022
2. dio Kako antioksidans Cistanche Acteoside štiti stanice?
Kliknite ovdje za 1. dio
Za više informacija kontaktirajte:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola ima mnogo efekata, kliknite ovde da saznate više
3. Diskusija
Poznato je da je antioksidativno djelovanje prirodnih fenolnih spojeva uključeno u prijenos elektrona (ET) [18,19]. Stoga su neki testovi za redukciju metala bazirani na ET široko korišteni za procjenu nivoa antioksidansa fenola, kao što su FRAP i CUPRAC testovi. Smjernice za FRAP test moraju biti ispunjene s pH manjim od 3,6. Takva kisela sredina je uspješno potisnula H plus jonizaciju iz fenola; stoga se FRAP test smatra pukim ET procesom [20,21]. Efikasnost odacteosidea njegovi derivati u FRAP testu impliciraju da, kada akteozid i njegovi derivati djeluju kao antioksidansi, oni mogu koristiti ET put da ispolje svoje antioksidativno djelovanje.
Osim toga, izvršili smo i CUPRAC test u puferu pH 7,4. Kao što se vidi u Suppl. 1,acteosidei njegovi derivati su dozno-ovisno povećali svoj Cu2 plus-smanjenje procenta snage, što ukazuje da bi mogli ostati ET potencijal na fiziološkom pH. Međutim, njihovi ET potencijali su se smanjivali sljedećim redoslijedom:acteoside> forzitozid B > poliumozid (Tabela 1). Ova dinamika jasno sugerira da su apiozilni dio u forzitozidu B i ramnozilni dio u poliumozidu snizili ET potencijal.
Kako bi se testirala mogućnost da se ET javlja tokom njihovih procesa uklanjanja radikala, u studiju je uveden slobodni radikal PTIO・ u centru kisika. Dokazi ciklične voltametrije su otkrili da je PTIO・-čišćenje ispod pH 5.0 jedna elektron-redox reakcija. Zapažanje kojeacteosidei njegovi derivati bi mogli efikasno očistiti PTIO・ radikal na pH 4,5, sugerira mogućnost ET-a tokom njihovih procesa uklanjanja radikala. Očigledno, ovaj nalaz dodatno podržava gore navedene rezultate FRAP i CUPRAC testova, kao i prethodne rezultate da je donirajući elektron (e) karakteristika fenolnih antioksidanata [23].
Međutim, pri fiziološkom pH 7,4, esej o uklanjanju PTIO・ nije samo ET put već uključuje i put prijenosa protona (H plus). Tokom procesa, PTIO・ je predloženo da prihvati Hplusod fenola za proizvodnju pika proizvoda ([PTIO-H]plus). Jer Hplus-transfer je uvijek praćen ET u postupnim ili sinhronim mehanizmima [24], realan (ili konačni) proizvod je [PTIO-H] molekul [22]. PTIO・-čišćenje pri pH 7,4 (Suppl. 1) implicira daacteosidea njegovi derivati također posjeduju H plus -transferni potencijal. Vrijednosti IC50 (Tabela 1) ukazuju da je relativni Hplus-transferni potencijali su bili u opadajućem redoslijedu odacteoside>forsitozid B > poliumozid. Jasno je da su apiozilni i ramnozilni dijelovi također oslabili Hplus-transferni potencijal tokom antioksidativnog procesa.
Kao što je ranije rečeno, tokom antioksidativnog procesa fenola, ET obično prati proton (Hplus) prijenos u formiranje nekoliko antioksidativnih mehanizama [24], kao što je prijenos atoma vodika (HAT) [23,25-27], sekvencijalni prijenos elektron-protona (SEPT) [26,27], sekvencijalni gubitak protona jednog elektrona prijenos (SPLET) [26] i prijenos elektrona spregnutog protona (PCET) [24-26,28]. Na primjer, nedavno je dokazano da na ABTS plus • -scavenging, reakciju kojom dominira prijenos jednog elektrona (SET) [29], utječu nivoi H plus [30]. ABTS plus • -scavenging je stoga antioksidativni test zasnovan na više puteva [21,31]. Činjenica daacteosidei njegovi derivati bi mogli ukloniti ABTS plus ・ radikale ukazuje na to da njihovo antioksidativno djelovanje također može biti posredovano višestrukim putevima. Ovu hipotezu dalje potvrđuju dokazi iz DPPH・-scavenging testa, reakcije koja se sastoji od višestrukih puteva HAT, ET, SEPT i PCET [26,32]. Međutim, IC se bazira na kvantitativnoj analizi50vrijednosti (Tabela 1) otkrile su da u aspektima ABTS zasnovanog na više putanja plus --čišćenje i DPPH*,acteosidebio superiorniji u odnosu na svoj odgovarajući forzitozid B i ramnozid poliumozid. Dakle, može se zaključiti da apiol i ramnozilni dijelovi na kraju ometaju potencijale višestrukih puteva (posebno ET i Hplus-transfer) tokom procesa uklanjanja slobodnih radikala.
Kao što su primijetili autori i drugi [14,26], tokom antioksidativnog procesa može doći i do RAF reakcije. Međutim, da bi se potvrdila mogućnost RAF-a, proučavana su tri fenilpropanoidna glikozida zajedno sa kafeinskom kiselinom pomoću UPLC-ESI-Q—TOF-MS/MS analize. Utvrđeno je da kofeinska kiselina daje dimerni proizvod, dok tri fenilpropanoidna glikozida nisu dala vrhunac RAF proizvoda. Ovaj nalaz jasno sugerira da tri fenilpropanoidna glikozida ne mogu proći kroz RAF put kako bi ispoljili svoje antioksidativno djelovanje. Budući da se tri fenilpropanoidna glikozida mogu smatrati esterima kafeinske kiseline (Slika 1), takva razlika između estera kofeinske kiseline i estera kafeinske kiseline također ukazuje da veliki dio može ometati stvaranje RAF-a.
Uzeti zajedno, sa aspekta uklanjanja slobodnih radikala,acteosidea njegovi derivati mogu proći kroz više puteva da ispolje svoje antioksidativno djelovanje. Ovi antioksidativni putevi su barem uključeni u ET i H plus -transfer (ali ne i RAF). Naši nalazi su djelimično podržani teorijskom studijom kojaacteosidemože imati antioksidativno djelovanje putem SPLET puta. U tom procesu, akteozid bi prvo mogao deprotonirati (Hplus-transfer) da bi se dobio anjon. Smatra se da se deprotonacija javlja u kateholnim dijelovima sa slabom kiselošću. Nakon toga, anion je donirao elektrone kako bi doveo do fenoksi radikalne forme [33]. Međutim, fenoksi radikali s pn konjugacijom su stabilni do neke mjere. Naravno, u tom pogledu je potreban dalji eksperimentalni rad u budućnosti.
Vrijedi napomenuti da ćelijski oksidativni stres također može poticati od prijelaznih metala (posebno Fe2 plus). The Fe2 plusjon, međutim, može transformisati H2O2molekulu u najštetnije •OH radikale putem Fentonove reakcije (Fe2plus plus H2O2 T Fe3plus plus ・OH plus OH-). Stoga, slabljenje Fe2plus nivoi mogu efikasno inhibirati ・OH radikale za oslobađanje ćelijskog oksidativnog stresa. Zapravo, keliranje željeza prirodnim fenolnim antioksidansima sada je razvijeno u efikasnu terapiju za neke bolesti oksidativnog stresa [34,35].
U ovoj studiji, akteozid i njegovi derivati su predloženi kao efikasan Fe2 plus-helatori po promjenama spektroskopije i boje otopine (slika 2). Ipak, akteozid je inferioran u odnosu na dva glukozida u helatiranju Fe2 plusa forzitozid B sa apiozilnom ostatkom je inferioran poliumozidu sa ramnozilnom ostatkom. Na osnovu poređenja njihovih preferencijalnih konformacija (Slika 1, desno), predlaže se da apiozil (ili ramnozil) dio može pomoći glavnom ligandu (fenilpropanoidnoj grupi) u keliranju Fe2 plus. Takav sinergijski efekat nesumnjivo jača Fe2 plus-kelatirajuća sposobnost i povećava UV-vis vrhove. Međutim, ramnozil je efikasniji od apiozila u svom Fe2 plus- sposobnost helatiranja. Razlika se može pripisati činjenici da se ramnozil javlja u egzocikličnom obliku (tj. aL-ramnopiranozil), dok je apiozil u pentacikličnom obliku (tj. pD-apiofuranzil). Poznato je da je egzociklični oblik veći i stabilniji. Dakle, egzociklični ramnozil je efikasniji u poređenju sa pentacikličnim apiozilom u svom Fe2 plus- sposobnost helatiranja.
Da bismo testirali mogu li akteozid i njegovi derivati da pokupe ROS, proveli smo test autooksidacije pirogalola. Kao što se vidi u Suppl. 1, svi bi mogli efikasno očistiti - radikal, tipičan ROS koji se javlja u ćelijama. Međutim, relativna bioaktivnost se smanjila u redu poliumozid > forzitozid B >acteoside. Ovaj redoslijed je također paralelan sa redoslijedom citoprotektivnih efekata (Tabela 2). Ovaj nalaz ukazuje na to da je opći učinak ramnozilnog dijela ili apiozilnog dijela da pojača ROS-čišćenje ili citoprotektivne efekte.
4. Materijali i metode
4.1. Hemikalije i životinje
Akteozid (CAS broj: 61276-17-3, 97 posto), forsitozid B (CAS broj: 81525-13-5, 97 posto) dobijeni su od BioBioPha (Kunming, Kina, Suppl. 3). Poliumozid (CAS broj: 94079-81-9, 97 posto) je naš tim izolovao iz tradicionalne kineske biljkeCallicarpa periHT Chang (Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilhroman-2-karboksilna kiselina (Trolox), 2,9-dimetil{{ 9}},10-fenantrolin (neokuproin), 2,4,6-tripiridiltriazin (TPTZ) i pirogalol su kupljeni od Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Šangaj, Kina). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-etilbenzen-tiazolin-6-sulfonska kiselina diamonijum sol)] je dobijen od Amresco Chemical Co. (Solon, OH, SAD). PTIO・radikal je kupljen od TCI Development Co., Ltd. (Shanghai, Kina).Kafeinska kiselina je kupljena od Nacionalnog instituta za kontrolu farmaceutskih i bioloških proizvoda (Peking, Kina).Dulbecco modificirani Eagle's medij (DMEM), fetalni goveđi serum (FBS), a tripsin su nabavljeni od Gibco-a (Grand Island, NY, SAD).AnexinV/propidijum jodid (PI) komplet za analizu je kupljen od Invitrogen-a (Carlsbad, CA, USA).Svi ostali reagensi su bili analitičkog kvaliteta.
Sprague-Dawley (SD) pacovi od 4 sedmice su dobijeni iz Centra za životinje Guangzhou Univerziteta kineske medicine. Protokol ovog eksperimenta izveden je pod nadzorom Institucionalnog komiteta za etiku životinja na Kineskom univerzitetu Guangzhou (broj odobrenja 20170306A).
4.2. Testovi za smanjenje metala (FRAP& CUPRAC)
Testovi redukcije metala uključuju Fe3 plus-test smanjenja snage i Cu2 plus- test smanjenja snage. The Fe3 plus-redukcioni test su uspostavili Benzie i Strain i formalno je nazvan FRAP [20]. Eksperimentalni protokol ovog testa opisan je u prethodnom izvještaju [9]. Ukratko, FRAP reagens je pripremljen svježe miješanjem 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl3,i {{0}}.25 M acetatni pufer u omjeru 1:1:10 pri pH 3,6. Ispitni uzorak (x=4-20 L, 0,05 mg/mL) je dodan u (20 — x) 95 posto etanola, a zatim 80 RL FRAP reagensa. Nakon 30-min inkubacije na temperaturi okoline, apsorbancija je izmjerena na 595 nm pomoću čitača mikroploča (Multiskan FC, Thermo Scientific, Šangaj, Kina). Relativna redukujuća snaga uzorka izračunata je pomoću sljedeće formule:
gdje je Amaxje maksimalna apsorbancija reakcione smeše sa uzorkom, a Aminje minimalna apsorpcija u testu. A je apsorbancija uzorka.
Cu2 plus-smanjenje snage također može karakterizirati nivo antioksidansa i stoga se naziva CUPRAC. Ovaj test je izveden prema prethodno objavljenoj metodi [36]. Ukratko, 12 RL vodene otopine CuSOq (10 mmol/L), 12 RL etanolne otopine neokuproina (7,5 mmol/L) i (75 — x) RL CH3COONH4puferski rastvor ({{0}}.1 mol/L, pH 7,5) je dodat u jažice sa različitim zapreminama uzorka (0,05 mg/mL, 4-20 |^L). Apsorbancija na 450 nm nakon 30 minuta je izmjerena pomoću prethodno spomenutog čitača mikroploča. Relativna CUPRAC snaga je izračunata korištenjem formule za FRAP. Amaxje maksimalna apsorbancija reakcione smeše sa uzorkom, a Aminje minimalna apsorpcija u testu. A je apsorbancija uzorka.
4.3. PTI{0}}・-ScavengingAssay
Testovi PTIO*-čišćenja (pri pH 4,5 ili pH 7,4) provedeni su prema našoj metodi [16]. Ukratko, rastvor testnog uzorka (x=0-20 ^L, 1 mg/mL za pH 4,5 i {{0}}.5 mg/mL za pH 7,4) je dodan u (20 — x) rL 95 posto etanola, nakon čega slijedi 80 RL vodene otopine PTIO*. Vodeni rastvor PTIO* pripremljen je korišćenjem rastvora fosfata i putera (0,1 mM, pH 4,5 ili pH 7,4). Smjesa je održavana na 37 stepeni 2 h, a apsorbancija je zatim izmjerena na 560 nm pomoću gore pomenutog čitača mikroploča. Procenat PTIO* inhibicije izračunat je na sljedeći način:
gdje je A stepen apsorpcija kontrole bez uzorka, a A je apsorbanca reakcione smjese sa uzorkom.
4.4. ABTSplus*-Čišćenje i DPPH*-Scavenging Assays
ABTS*plus-aktivnost čišćenja je procijenjena prema metodi [37]. ABTS plus * je proizveden miješanjem 0.2 mL ABTS diamonijum soli (7.4 mmol/L) sa 0.2 mL kalijum persulfata (2.6 mmol/L). Smjesa je držana u mraku na sobnoj temperaturi 12 h kako bi se omogućilo završetak generiranja radikala prije nego što je razrijeđena destilovanom vodom (u omjeru od približno 1:20) tako da je njena apsorpcija na 734 nm bila { {16}}.35 土 0.01 koristeći prethodno spomenuti čitač mikroploča. Da bi se odredila aktivnost čišćenja, testni uzorak (x=4-20 RL, 0,05 mg/mL) je dodan u (20 — x) RL destilovane vode, a zatim 80 RL ABTS plus * reagensa i apsorbanciju na 734 nm je izmjeren 3 minute nakon početnog miješanja, koristeći destilovanu vodu kao slijepu probu.
DPPH* aktivnost uklanjanja radikala određena je kao što je prethodno opisano [18]. Ukratko, 75 RL otopine DPPH* (0.1 rM) pomiješano je sa naznačenim koncentracijama uzorka (0.025 mg/mL, 5-25 RL) otopljenog u metanolu. Smjesa je držana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a apsorbancija je izmjerena na 519 nm pomoću prethodno spomenutog čitača mikroploča.
Procenti ABTS plus •-aktivnosti čišćenja i DPPH*-aktivnosti čišćenja su izračunati na osnovu formule predstavljene u Odjeljku 4.3.
4.5. UPLC—ESI—Q-TOF—MS/MS analiza PPH* Reaction Products
Ova metoda je zasnovana na našoj prethodnoj studiji [25]. Metanolni rastvor akteozida je pomešan sa rastvorom DPPH* radikala u metanolu u molarnom odnosu 1:2, a dobijena smeša je inkubirana 24 h na sobnoj temperaturi. Smjesa proizvoda je zatim filtrirana kroz 0.22-Rm filter i analizirana korištenjem UPLC sistema opremljenog C18 kolonom (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, Kalifornija, SAD). Mobilna faza je korištena za eluiranje sistema i sastojala se od mješavine metanola (faza A) i vode (faza B). Kolona je eluirana brzinom protoka od 0,3 mL/min sa sljedećim programom eluiranja gradijenta: 0-10 min, 60-100 posto A; 10-15 min, 100 posto A. Volumen ubrizgavanja uzorka je postavljen na 1 RL za odvajanje različitih komponenti. ESI-Q-TOF-MS/MS analiza je izvedena pomoću Triple TOF 5600plusMaseni spektrometar (AB SCIEX, Framingham, MA, SAD) opremljen sa ESI izvorom, koji je radio u načinu negativne jonizacije. Opseg skeniranja je postavljen na 100-2000 Da. Sistem je radio sa sledećim parametrima: napon jonskog spreja, —4500 V; grejač jonskog izvora, 550 stepeni C; zavjesni plin (CUR, N2), 30 psi; gas za raspršivanje (GS1, vazduh), 50 psi; Taj plin (GS2, zrak), 50 psi. Potencijal deklasteriranja (DP) je postavljen na —100 V, dok je energija sudara (CE) postavljena na —40 V sa širinom energije sudara (CES) od 20 V. RAF proizvodi
su kvantificirani ekstrahiranjem odgovarajuće molekularne formule iz ukupnog ionskog hromatograma (Suppl. 2).
Gore spomenuti eksperiment je ponovljen korištenjem forsitozida B, podijumske strane i kafeinske kiseline. Odgovarajućim/zpikovi su ekstrahovani iz odgovarajuće molekularne formule iz ukupnog ionskog hromatograma (Suppl. 2).
4.6. UV-Vis-Spectra Analysis of Fe2 plus-Chelating Products
The Fe2 plus-produkti reakcije heliranja akteozida-Fe2 plusevaluirani su UV-Vis spektroskopijom [13]. Za eksperiment, 300 metanolnog rastvora akteozida (0,24 mM) dodato je u 700 rL vodenog rastvora FeCl? 4H2O (168 mM). Rastvor je zatim snažno izmiješan. Nakon toga, rezultirajuća smjesa je skenirana pomoću UV-Vis spektrofotometra nakon sat vremena (Unico 2600A, Šangaj, Kina) od 200-850 nm.
Navedeni eksperiment je ponovljen korištenjem forsitozida B, ili strane podijuma, umjesto akteozida.
4.7. Test autooksidacije pirogalola za superoksid anion (•O2~) Čišćenje
Mjerenje aktivnosti čišćenja superoksid aniona (・.{{0}}) bazirano je na našoj metodi [17]. Ukratko, uzorak je otopljen u etanolu pri 1 mg/mL. Rastvor uzorka (x rL) je pomešan sa Tris-HCl puferom (980 — x rL, 0,05 M, pH 7,4) koji sadrži EDTA (1 mM). Kada se doda 20 RL pirogalola (60 mM u 1 mM HCl), smjesa je odmah protresena na sobnoj temperaturi. Apsorbancija na 325 nm mješavine je mjerena (Unico 2100, Šangaj, Kina) u odnosu na Tris-HCl pufer kao slijepu probu svakih 30 s tokom 5 minuta. — sposobnost čišćenja je izračunata na sljedeći način:
4.8. Citoprotektivni efekat prema bmMSC pod oksidativnim stresom (MTT test)
BmMSC-ovi su kultivisani prema našim prethodnim izveštajima [38] uz male modifikacije. Ukratko, koštana srž je dobijena iz femura i tibije štakora. Uzorci srži su razrijeđeni sa DMEM (niska razina glukoze) koji sadrži 10 posto FBS. BmMSC su pripremljeni gradijentnim centrifugiranjem na 900 g tokom 30 minuta na 1,073 g/mL Percoll-a. Pripremljene ćelije su odvojene tretmanom sa 0,25 posto tripsina i prebačene u tikvice za kulturu pri 1 x 104/cm2. BmMSC-ovi na pasusu 3 procijenjeni su na homogenost kultiviranih ćelija korištenjem detekcije CD44 pomoću MTT testa [39].
MTT test je korišten za procjenu citoprotektivnog efekta akteozida i njegovih derivata prema bmMSC [40]. Model povrede ustanovljen je na osnovu prethodne studije [41]. Eksperimentalni protokol je ukratko ilustrovan na slici 3.
4.9. Statistička analiza
Svaki eksperiment u odjeljcima 4.2-4.4 i 4.7 izveden je u tri primjerka, a eksperiment MTT testa izveden je u petostrukom primjerku. Podaci su zabilježeni kao srednja vrijednost土SD (standardna devijacija). Krive doza-odgovor su nacrtane korištenjem Origin 6.0 profesionalnog softvera (OriginLab, Northampton, MA, SAD). Vrijednost IC50 definirana je kao konačna koncentracija 50 posto radikalne inhibicije (relativne redukcijske moći) [42]. Statistička poređenja su napravljena jednosmjernom ANOVA-om kako bi se otkrile značajne razlike koristeći SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) za Windows.p< 0.05 smatra se statistički značajnim.
5. Zaključci
Tri prirodna fenilpropanoidna glikozida, naime, akteozid, forzitozid B i podijumska strana, mogu biti uključeni u više puteva za ispoljavanje antioksidativnog djelovanja, uključujući ET, H plus -transfer; i Fe2 plus-kelatiranje, ali ne i RAF. ET i Hplus-transferni putevi mogu biti ometani ramnozilnom ili apiozilnom ostatkom; međutim, Fe2 plus-kelacijski put može biti poboljšan ostacima šećera (posebno ramnozilnom skupinom). Opći učinak ramnozilnog dijela ili apiozilnog dijela je da poboljša sposobnost uklanjanja ROS-a koja uključuje višestruke puteve. Dakle, forsitozid B i poliumozid su superiorniji od akteozida u citoprotektivnim efektima.
Dodatni materijali:Dodatni materijali dostupni su na internetu. 1. Krive doza-odgovor; 2. HPLC-MS spektri; 3. Potvrde o analizi akteozida, forzitozida B i poliumozida.
Priznanja:Ovaj rad su podržali Nacionalna naučna fondacija Kine (81573558, 81603269), projekat nauke i tehnologije Guangdong (2017A050506043) i Fondacija prirodnih nauka provincije Guangdong (2 017A030312009, 2015A403).
Doprinosi autora:Xian Li i Dongfeng Chen su osmislili i dizajnirali eksperimente; Aichi Wu je pripremio poliumozid; Yulu Xie, Qian Guo i Penghui Xue izveli su antioksidativne eksperimente; Ke Li i Wei Zhao izveli su MTT eksperimente; Hong Xie je analizirao podatke; Jiasong Guo je proveo eksperiment na slici 2D; Xian Li je napisao rad. Svi autori su pročitali i odobrili konačni rukopis.
Sukobi interesa:Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.
acteosideincistanche
A skraćenice
ABTS plus • 2,2'-azino-bis (3-etilbenzo-tiazolin-6-sulfonska kiselina) radikal
bmMSCs mezenhimske matične ćelije izvedene iz koštane srži
CUPRAC bakar smanjuje antioksidativni kapacitet
dAMP 2'-deoksiadenozin-5'-monofosfatni radikal
DMEM Dulbecco-ov modificirani Eagleov medij
dGMP 2/-deoksiguanozin-5'-monofosfatni radikal
DPPHe 1,1-difenil-2-pikril-hidrazin radikal
ET prijenos elektrona; FBS: Fetalni goveđi serum
FRAP feri joni smanjuju antioksidativnu moć;
HAT prijenos atoma vodika
MTT 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil
PCET protonsko spregnuti prenos elektrona
PTIOe 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolin-1-oksil 3-oksid radikal
Formiranje radikalnog adukta RAF
ROS reaktivne vrste kiseonika
SCNT nuklearni prijenos somatskih stanica
SEPT sekvencijalni prijenos elektron-protona
SPLET sekvencijalni gubitak protona prijenos jednog elektrona
TPTZ 2,4,6-tripiridil triazin
trolox (±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilhroman-2-karboksilna kiselina
Reference
1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Proizvodnja verbaskozida i fenolnih kiselina u biomasi Verbena Officinalis L. (verbena) uzgajane u različitim in vitro uslovima. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663-1668.
2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Efekat akteozida kao zaštitnika ćelija za stvaranje kloniranog psa. PLOS ONE 2016,11, e0159330.
3. Wang, sjedište; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sunce, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside štiti ćelije ljudskog neuroblastoma SH-SY5Y od |3-amiloidnih ozljeda ćelija. Brain Res. 2009,1283,139-147.
4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Zaštitni efekti akteozida protiv oštećenja izazvanih rendgenskim zračenjem u fibroblastima ljudske kože. Mol. Med. Rep. 2015,12, 2301-2306.
5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Određivanje forzitiazida B i poliumozida različitog porijekla i dijelova iz Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.
6. Jiang, WL; Tian, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektivna učinkovitost i terapijski prozor forsitozida B: Ina Rat model cerebralne ishemije i reperfuzijske ozljede. EUR. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.
7. Pan, N.; Hori, H. Antioksidativno djelovanje akteozida i njegovih analoga na peroksidaciju lipida. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.
8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR brza popravka DNK radikala. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.
9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Hemijska studija o zaštitnom dejstvu protiv oštećenja DNK izazvanog hidroksilom i antioksidativnom mehanizmu miricitrina. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.
10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Brza popravka oksidativnog oštećenja DNK od strane fenilpropanoidnih glikozida i njihovih analoga. Mutagenesis 2008, 23, 19-26.
11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Liofilizirani vodeni ekstrakti Mori Fructusa i Mori Ramulusa štite mezenhimalne matične ćelije od oštećenja tretiranih eOH: biološki test i antioksidativni mehanizam. BMC Complement. Altern. Med. 2017, 17, 242.
12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro studije o antioksidativnom i zaštitnom dejstvu 2-supstituisanih-8-derivata hidroksihinolina protiv H2O2-indukovanog oksidativnog stresa u BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.
13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) Štiti mezenhimalne matične ćelije od oksidativnog stresa: Bioevaluacija i mehanička hemija. BMC Complement. Altern. Med. 2016, 16, 423.
14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Zaštitni efekat sinapina protiv oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija izazvanih hidroksilnim radikalima i mogući mehanizmi. Chem. Pharm. Bik. 2016, 64, 319-325.
15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oksidativni status predviđa kvalitet u ljudskim mezenhimalnim matičnim ćelijama. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 3.
16. Li, XC 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolin-1-oksil 3-oksid (PTIOe) uklanjanje radikala: novi i jednostavan antioksidans Test in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.
17. Li, X. Poboljšana metoda autooksidacije pirogalola: Pouzdan i jeftin test čišćenja superoksida pogodan za sve antioksidante. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.
18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Poređenje antioksidativnih efekata kvercitrina i izokvercitrina: razumijevanje uloge grupe 6〃-OH. Molecules 2016, 21,1246.
19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioksidativna svojstva fenolnih jedinjenja: H-atom u odnosu na mehanizam prenosa elektrona. J. Phys. Chem. A 2004,108,4916^922.
20. Benzie, IFF; Strain, JJ Sposobnost plazme za smanjenje željeza (FRAP) kao mjera "antioksidativne moći": FRAP test. Anal. Biochem. 1996, 239, 70-76.
21. Gulčin, I. Antioksidativna aktivnost sastojaka hrane: pregled. Arch. Toxicol. 2012, 86, 345-391.
22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reakcije PTIO i karboksi-PTIO sa ・NO, ・NO2 i O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.
23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioksidativna aktivnost i mehanizam tetrahidroamentoflavona in vitro. Nat. Prod. Commun. 2013, 8, 787-789.
24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Studija prenosa elektrona spregnutog protona (PCET) sa četiri eksplicitna dijabatska stanja na ab initio nivou. Račun. Theor. Chem. 2017, 1116, 50-58.
25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Zaštitni efekat protiv oštećenja DNK izazvane hidroksilnim radikalima i antioksidativni mehanizam [6]-gingerola: Hemijska studija. Bik. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.
26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioksidativna aktivnost trans-resveratrola prema hidroksilnim i hidroperoksilnim radikalima: studija kvantne hemije i kompjuterske kinetike. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Štiti od oštećenja DNK i MSC izazvanih hidroksilom putem antioksidativnog mehanizma. J. Saudi Chem. Soc. 2015,19, 454-460.
28. Amic, A.; Marković, Z.; Marković, JMD; Stepanić, V.; Lučić, B.; Amic, D. Towards an Improved Prediction of Free Radical Scavenging Potency of Flavonoids: The Significance of Double PCET Mechanisms. Food Chem. 2014, 152, 578-585.
29. Lee, CH; Yoon, JY UV direktna fotoliza 2,2'-and-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonata) (ABTS) u vodenom rastvoru: kinetika i mehanizam. J. Photochem. Photobiol. A 2008, 197, 232-238.
30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reakcija radikala izvedenih iz 2,2'-azinobisa(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline (ABTS) s hidroperoksidima. Kinetika i mehanizam. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.
32. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS radikalno-pokrenuta oksidacija polifenola: izolacija i strukturno objašnjenje kovalentnih adukata. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006, 346, 321-329.
32. Osman, AM Višestruki putevi reakcije 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil radikala (DPPHe) sa (plus)-katehinom: dokaz za formiranje kovalentnog adukta između DPPHe i oksidiranog oblika polifenola. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2011, 412, 473-478.
33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Analogi fenilpropanoidnih glikozida: enzimska sinteza, antioksidativna aktivnost i teorijska studija njihovog mehanizma uklanjanja slobodnih radikala. PLOS ONE 2011, 6, e20115.
34. Perron, NR; Brumaghim, JL Pregled antioksidativnih mehanizama polifenolnih spojeva povezanih s vezivanjem željeza. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.
35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; et al. Usmjeravanje na željezo koje se može helirati kao terapeutski modalitet kod Parkinsonove bolesti. Antioksid. Redox Signal. 2014, 21, 195-210.
36. Čekić, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Test modificiranog bakra koji smanjuje antioksidativni kapacitet (CUPRAC) za mjerenje antioksidativnih kapaciteta proteina koji sadrže tiol u mješavini s polifenolima. Talanta 2009, 79, 344-351.
37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Usklađenost između antioksidativnih aktivnosti in vitro i hemijskih komponenti Radix Astragali (Huangqi). Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050-1053.
38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Heksadekanska kiselina iz Buzhong Yiqi dekocije izazvala je proliferaciju mezenhimalnih matičnih ćelija koštane srži. J. Med. Hrana 2010,13, 967-975.
39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Zaštitni efekti dihidromiricetina protiv »OH-induciranog oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija i mehanička hemija. Molecules 2016, 21, 604.
40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP sinteza, antioksidacijska aktivnost (E)-9-p-tolil-3-2-(8-hidroksi-kinol- 2-il)vinil-karbazola i (E){{8 }}(p-Anisyl)-3-2-(8-hidroksi-kinol-2-il)vinil-karbazol i njihova indukciona proliferacija mezenhimskih matičnih ćelija. Acta Chim. Sin. 2009, 67, 974-982.
41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Ciljanje na Shh put atraktilenolida promoviše hondrogenu diferencijaciju mezenhimalnih matičnih ćelija. Biol. Pharm. Bik. 2012, 35, 1328-1335.
42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin štiti od oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija izazvanih hidroksilnim radikalima: Procjena antioksidansa i uvid u mehanizme. Chem. Biol. Interakcija. 2014, 219, 221-228.
Dostupnost uzorka: Uzorak jedinjenja poliumozida dostupan je od autora.
© 2018 autora. Imalac licence MDPI, Basel, Švicarska. Ovaj članak je članak otvorenog pristupa koji se distribuira pod uslovima i odredbama licence Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
