Dio 2: Antioksidacija i citoprotekcija akteozida i njegovih derivata: poređenje i mehanička hemija

Xican Li 1,2,*,† ID, Yulu Xie 1,2,†, Ke Li 3,4, Aizhi Wu 1,2,*, Hong Xie 1,2, Qian Guo 1,5 Penghui Xue 1, Yerkingul Maleshibek 1, Wei Zhao 6, Jiasong Guo 7 i Dongfeng Chen 3,

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

1 Škola kineske biljne medicine, Guangzhou Univerzitet kineske medicine, Guangzhou 510006, Kina; xieyulu1900@163.com (YX); xiehongxh1@163.com (HX); 15622178307@163.com (QG); 15228738137@163.com (PX); pandiphd@163.com (YM)

2 Inovativna istraživačka i razvojna laboratorija TCM, Guangzhou Univerzitet kineske medicine,

Guangdžou 510006, Kina

3 Škola osnovnih medicinskih nauka, Univerzitet kineske medicine Guangdžou, Guangdžou 510006, Kina; ys1090992678@163.com (KL); chen888@gzucm.edu.cn (DC)

4 Istraživački centar osnovne integrativne medicine, Guangzhou Univerzitet kineske medicine,

Guangdžou 510006, Kina

5 School of Basic Medical Science, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510007, Kina

6 Zhongshan School of Medicine, Univerzitet Sun Yat-sen, br. 74 Zhongshan Road. 2, Guangdžou 510080, Kina;

7 Odsjek za histologiju i embriologiju, Southern Medical University, Guangzhou 510515, Kina;

Cistancheakteozid ima antioksidativno dejstvo

Kliknite ovdje za prvi dio

4.3. PTIO·-Scavenging Assay

Testovi PTIO·-čišćenja (pri pH 4,5 ili pH 7,4) sprovedeni su na osnovu naše metode [16]. Ukratko, rastvor testnog uzorka (x=0–20 L, 1 mg/mL za pH 4,5 i 0,5 mg/mL za pH 7,4) je dodan u (20 x) L 95-postotnog etanola, zatim 80 L vodenog rastvora PTIO·. Vodeni rastvor PTIO· pripremljen je korišćenjem rastvora fosfata i putera (0,1 mM, pH 4,5 ili pH 7,4). Smjesa je održavana na 37 stepeni 2 h, a apsorbancija je zatim izmjerena na 560 nm pomoću gore pomenutog čitača mikroploča. Procenat PTIO· inhibicije je izračunat na sledeći način:

gdje je A0 apsorbanca kontrole bez uzorka, a A je apsorbanca reakcione smjese sa uzorkom.

4.4. ABTS plus ·-Scavenging and DPPH·-Scavenging Assays

ABTS· plus aktivnost čišćenja je procijenjena prema metodi [37]. ABTS plus · je proizveden mešanjem 0.2 mL ABTS dijamonijum soli (7.4 mmol/L) sa 0.2 mL kalijum persulfata (2.6 mmol/L). Smjesa je držana u mraku na sobnoj temperaturi 12 h kako bi se omogućilo završetak generiranja radikala prije nego što je razrijeđena destilovanom vodom (u omjeru od približno 1:20) tako da je njena apsorpcija na 734 nm bila { {16}}.35 o 0.01 koristeći prethodno spomenuti čitač mikroploča. Da bi se odredila aktivnost čišćenja, testni uzorak (x=4–20 L, 0,05 mg/mL) je dodan u (20, x) L destilovane vode, a zatim 80 L ABTS plus · reagensa i apsorbanciju na 734 nm je izmjereno 3 minute nakon početnog miješanja, koristeći destilovanu vodu kao slijepu probu.

DPPH· aktivnost uklanjanja radikala određena je kao što je prethodno opisano [18]. Ukratko, 75 L DPPH· rastvora (0.1 M) je pomešano sa naznačenim koncentracijama uzorka (0.025 mg/mL, 5–25 L) rastvorenog u metanolu. Smjesa je držana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a apsorbancija je izmjerena na 519 nm pomoću prethodno spomenutog čitača mikroploča. Procenti ABTS plus ·-aktivnosti čišćenja i DPPH·-aktivnosti čišćenja su izračunati na osnovu formule predstavljene u Odjeljku 4.3.

cistancheimaju funkciju izbjeljivanja kože

4.5. UPLC.ESI.Q.TOF.MS/MS analiza DPPH· reakcijskih proizvoda

Ova metoda je zasnovana na našoj prethodnoj studiji [25]. Otopina metanola odacteosideje pomešan sa rastvorom DPPH· radikala u metanolu u molarnom odnosu 1:2, a dobijena smeša je inkubirana 24 h na sobnoj temperaturi. Smjesa proizvoda je zatim filtrirana kroz 0.22- m filter i analizirana korištenjem UPLC sistema opremljenog C18 kolonom (2.0 mm id 土 10{ {13}} mm, 1,6 m, Phenomenex, Torrance, Kalifornija, SAD). Mobilna faza je korištena za eluiranje sistema i sastojala se od mješavine metanola (faza A) i vode (faza B). Kolona je eluirana brzinom protoka od 0,3 mL/min sa sljedećim programom eluiranja gradijenta: 0–10 min, 60–100 posto A; 10–15 min, 100 posto A. Volumen ubrizgavanja uzorka je postavljen na 1 L za odvajanje različitih komponenti. ESI-Q-TOF-MS/MS analiza je izvedena korišćenjem Triple TOF 5600 plus masenog spektrometra (AB SCIEX, Framingham, MA, USA) opremljenog sa ESI izvorom, koji je vođen u režimu negativne jonizacije. Opseg skeniranja je postavljen na 100–2000 Da. Sistem je radio sa sljedećim parametrima: napon jonskog spreja, .4500 V; grejač jonskog izvora, 550 stepeni; zavjesni plin (CUR, N2), 30 psi; gas za raspršivanje (GS1, vazduh), 50 psi; Taj plin (GS2, zrak), 50 psi. Potencijal deklasteriranja (DP) postavljen je na 0,100 V, dok je energija sudara (CE) postavljena na 0,40 V sa širenjem energije sudara (CES) od 20 V. RAF proizvodi su kvantifikovani ekstrahiranjem odgovarajuće molekularne formule iz ukupni ionski hromatogram (Suppl. 2).

Gore spomenuti eksperiment je ponovljen korištenjem forsitozida B, poliumozida i kafeinske kiseline. Odgovarajući m/z pikovi su ekstrahovani iz odgovarajuće molekulske formule iz ukupnog ionskog hromatograma (Suppl. 2).

4.6. UV-Vis-Spectra analiza Fe2 plus helirajućih proizvoda

Fe2 plus -helirajući produkti reakcijeacteoside-Fe2 plus su procijenjeni korištenjem UV-Vis-spektroskopije [13]. Za eksperiment, 300 L metanolne otopineacteoside(0.24 mM) je dodat u 700 L vodenog rastvora FeCl2×4H2O (168 mM). Rastvor je zatim snažno izmiješan. Nakon toga, rezultirajuća smjesa je skenirana korištenjem UV-Vis spektrofotometra nakon sat vremena (Unico 2600A, Šangaj, Kina) od 200-850 nm. Navedeni eksperiment je ponovljen upotrebom forsitozida B, odnosno poliumozida, umjestoacteoside.

4.7. Test autooksidacije pirogalola za uklanjanje superoksid aniona (·O2.)

Mjerenje aktivnosti čišćenja superoksid aniona (·O2.) baziralo se na našoj metodi [17]. Ukratko, uzorak je otopljen u etanolu pri 1 mg/mL. Rastvor uzorka (x L) je pomešan sa Tris-HCl puferom (980. x L, 0,05 M, pH 7,4) koji sadrži EDTA (1 mM). Kada je dodato 20 L pirogalola (60 mM u 1 mM HCl), smjesa je odmah protresena na sobnoj temperaturi. Apsorbancija na 325 nm mješavine je mjerena (Unico 2100, Šangaj, Kina) u odnosu na Tris-HCl pufer kao slijepu probu svakih 30 s tokom 5 minuta. The ·O2. sposobnost čišćenja je izračunata na sljedeći način:

Ovdje, △A325nm, kontrola je povećanje u A325nm mješavine bez uzorka, a △A325nm, uzorak je povećanje u A325nm mješavine s uzorkom; T=5 min. Eksperimentalna temperatura bila je 37 .C.

4.8. Citoprotektivni efekat prema bmMSC pod oksidativnim stresom (MTT test)

BmMSC su kultivisani prema našim prethodnim izveštajima [38] uz male modifikacije. Ukratko, koštana srž je dobijena iz femura i tibije štakora. Uzorci srži su razrijeđeni sa DMEM (niska razina glukoze) koji sadrži 10 posto FBS. BmMSC su pripremljeni gradijentnim centrifugiranjem na 900 g tokom 30 minuta na 1,073 g/mL Percoll-a. Pripremljene ćelije su odvojene tretmanom sa 0,25 procenata tripsina i prebačene u bočice za kulturu pri 1 土 104/cm2. BmMSC-ovi na pasusu 3 procijenjeni su na homogenost kultiviranih ćelija korištenjem detekcije CD44 pomoću MTT testa [39].

MTT test je korišten za procjenu citoprotektivnog efektaacteosidei njegove derivate prema bmMSC [40]. Model povrede ustanovljen je na osnovu prethodne studije [41]. Eksperimentalni protokol je ukratko ilustrovan na slici 3.

cistancheučinak izbjeljivanja na kožu do antioksidacije

4.9. Statistička analiza

Svaki eksperiment u odjeljcima 4.2–4.4 i 4.7 izveden je u tri primjerka, a eksperiment MTT testa izveden je u pet primjeraka. Podaci su zabilježeni kao srednja vrijednost o SD (standardna devijacija). Krive doza-odgovor su nacrtane korištenjem Origin 6.0 profesionalnog softvera (OriginLab, Northampton, MA, SAD). IC50 vrijednost je definirana kao konačna koncentracija od 50 posto radikalne inhibicije (relativne redukcijske snage) [42]. Statistička poređenja su napravljena jednosmjernom ANOVA-om kako bi se otkrile značajne razlike koristeći SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, SAD) za Windows. p < 0,05="" se="" smatra="" statistički="">

5. Zaključci

Tri prirodnefenilpropanoidglikozidi, naime,acteoside, forsitozid B i poliumozid, mogu biti uključeni u više puteva za ispoljavanje antioksidativnog djelovanja, uključujući ET, H plus -transfer i Fe2 plus -keliranje, ali ne i RAF. Putevi ET i H plus -transfera mogu biti ometani ramnozilnom ili apiozilnom ostatkom; međutim, put Fe2 plus -keliranja može biti poboljšan ostacima šećera (posebno ramnozilnom ostatkom). Opći učinak ramnozilnog dijela ili apiozilnog dijela je da poboljša sposobnost uklanjanja ROS-a koja uključuje višestruke puteve. Dakle, forsitozid B i poliumozid su superiornijiacteosideu citoprotektivnim efektima.

Dodatni materijali: Dodatni materijali su dostupni na internetu. 1. Krive doza-odgovor; 2. HPLC-MS spektri; 3. Potvrde o analiziacteoside, forsitozid B i poliumozid.

Zahvalnice: Ovaj rad su podržali Nacionalna naučna fondacija Kine (81573558, 81603269), projekat nauke i tehnologije Guangdong (2017A050506043) i Fondacija za prirodne nauke provincije Guangdong (2017A030312009, 2017A0303120159, 2017).

Doprinosi autora: Xican Li i Dongfeng Chen su osmislili i dizajnirali eksperimente; Aizhi Wu je pripremio poliumozid; Yulu Xie, Qian Guo i Penghui Xue izveli su antioksidativne eksperimente; Ke Li i Wei Zhao izveli su MTT eksperimente; Hong Xie je analizirao podatke; Jiason Guo je proveo eksperiment na slici 2D; Xican Li je napisao rad. Svi autori su pročitali i odobrili konačni rukopis.

Sukob interesa: Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Skraćenice

ABTS plus · 2,2→-and-bis (3-etilbenzen-tiazolin-6-sulfonska kiselina) radikal bmMSCs mezenhimske matične ćelije izvedene iz koštane srži

CUPRAC bakar smanjuje antioksidativni kapacitet

dAMP 2'-deoksiadenozin-5'-monofosfatni radikal DMEM Dulbecco-ov modifikovani orlov medij

dGMP 2'-deoksiguanozin-5'-monofosfatni radikal DPPH· 1,1-difenil-2-pikril-hidrazl radikal

ET prijenos elektrona; FBS: Fetalni goveđi serum

FRAP feri joni smanjuju antioksidativnu moć; HAT prijenos atoma vodika

MTT 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil PCET protonsko spregnuti prijenos elektrona

PTIO· 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolin-1-oksil 3-oksidni radikal RAF radikalni adukt formiranje

ROS reaktivne vrste kiseonika

SCNT nuklearni prijenos somatskih stanica

SEPT sekvencijalni prijenos elektron-protona

SPLET sekvencijalni gubitak protona prijenos jednog elektrona TPTZ 2,4,6-tripiridil triazin

Trolox (o)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilhroman-2-karboksilna kiselina

Cistancheakteozid ima antioksidativno djelovanje i djelovanje protiv starenja

Reference

1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Proizvodnja verbaskozida i fenolnih kiselina u biomasi Verbena officinalis L. (verbena) uzgajane u različitim in vitro uslovima. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663–1668.

2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK EfekatActeosidekao zaštitnik ćelija za proizvodnju kloniranog psa. PLOS ONE 2016, 11, e0159330.

3. Wang, sjedište; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sunce, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQActeosideŠtiti ćelije ljudskog neuroblastoma SH-SY5Y od oštećenja ćelija izazvanih -amiloidom. Brain Res. 2009, 1283, 139–147.

4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Protective Effects ofActeosideprotiv oštećenja izazvanih rendgenskim zracima u fibroblastima ljudske kože. Mol. Med. Rep. 2015, 12, 2301–2306.

5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Određivanje forzitiazida B i poliumozida različitog porijekla i dijelova iz Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324–3326. [PubMed]

6. Jiang, WL; Tian, ​​JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektivna efikasnost i terapeutski prozor forsitozida B: model cerebralne ishemije i reperfuzijske povrede kod pacova. EUR. J. Pharmacol. 2010, 640, 75–81. [CrossRef] [PubMed]

7. Pan, N.; Hori, H. Antioksidativno djelovanjeActeosidei njegovi analozi o peroksidaciji lipida. Redox Rep. 1996, 2, 149–154.

8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR brza popravka DNK radikala. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827–2834.

9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Hemijska studija o zaštitnom dejstvu protiv oštećenja DNK izazvanog hidroksilom i antioksidativnom mehanizmu miricitrina. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383–390.

10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Brza popravka oksidativnog oštećenja DNK od strane fenilpropanoidnih glikozida i njihovih analoga. Mutagenesis 2008, 23, 19–26.

11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, ​​YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Liofilizirani vodeni ekstrakti Mori Fructusa i Mori Ramulusa štite mezenhimalne matične ćelije od oštećenja tretiranih OH: biološki test i antioksidativni mehanizam. BMC Complement. Altern. Med. 2017, 17, 242.

12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro studije o antioksidativnom i zaštitnom dejstvu 2-supstituisanih-8-derivata hidroksihinolina protiv H2O2-indukovanog oksidativnog stresa u BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214–222.

13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) Štiti mezenhimalne matične ćelije od oksidativnog stresa: Bioevaluacija i mehanička hemija. BMC Complement. Altern. Med. 2016, 16, 423.

14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Zaštitni efekat sinapina protiv oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija izazvanih hidroksilnim radikalima i mogući mehanizmi. Chem. Pharm. Bik. 2016, 64, 319–325.

15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oksidativni status predviđa kvalitet u ljudskim mezenhimalnim matičnim ćelijama. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 3.

16. Li, XC 2-Fenil-4,4,5,5-Tetrametilimidazolin-1-oksil 3-Oksid (PTIO·) Čišćenje radikala: Novo i jednostavno Antioksidativni test in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288–6297.

17. Li, X. Poboljšana metoda autooksidacije pirogalola: Pouzdan i jeftin test čišćenja superoksida pogodan za sve antioksidante. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418–6424.

18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Poređenje antioksidativnih efekata kvercitrina i izokvercitrina: razumevanje uloge grupe 6→→-OH. Molecules 2016, 21, 1246.

19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioksidativna svojstva fenolnih jedinjenja: H-atom u odnosu na mehanizam prenosa elektrona. J. Phys. Chem. 2004, 108, 4916–4922.

20. Benzie, IFF; Strain, JJ Sposobnost plazme za smanjenje željeza (FRAP) kao mjera "antioksidativne moći": FRAP test. Anal. Biochem. 1996, 239, 70–76.

21. Gulčin, I. Antioksidativna aktivnost sastojaka hrane: pregled. Arch. Toxicol. 2012, 86, 345–391.

22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reakcije PTIO i karboksi-PTIO sa ·NO, ·NO2 i O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949–50955.

23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioksidativna aktivnost i mehanizam tetrahidroamentoflavona in vitro. Nat. Prod. Commun. 2013, 8, 787–789.

24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Studija prenosa elektrona spregnutog protona (PCET) sa četiri eksplicitna dijabatska stanja na ab initio nivou. Račun. Theor. Chem. 2017, 1116, 50–58.

25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Zaštitni efekat protiv oštećenja DNK izazvane hidroksilnim radikalima i antioksidativni mehanizam [6]-gingerola: Hemijska studija. Bik. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633–1638.

26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioksidativna aktivnost trans-resveratrola prema hidroksilnim i hidroperoksilnim radikalima: studija kvantne hemije i kompjuterske kinetike. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868–3877. [CrossRef] [PubMed]

27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Štiti od oštećenja DNK i MSC izazvanih hidroksilom putem antioksidativnog mehanizma. J. Saudi Chem. Soc. 2015, 19, 454–460.

28. Amic, A.; Marković, Z.; Marković, JMD; Stepanić, V.; Lučić, B.; Amic, D. Ka poboljšanom predviđanju potencijala flavonoida uklanjanja slobodnih radikala: značaj dvostrukih PCET mehanizama. Food Chem. 2014, 152, 578–585.

29. Lee, CH; Yoon, JY UV direktna fotoliza 2,2→-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonata) (ABTS) u vodenom rastvoru: kinetika i mehanizam. J. Photochem. Photobiol. 2008, 197, 232–238.

30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reakcija radikala izvedenih iz 2,2→-Azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline (ABTS) s hidroperoksidima. Kinetika i mehanizam. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, 565 –570.

32. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS radikalno-pokrenuta oksidacija polifenola: izolacija i strukturno objašnjenje kovalentnih adukata. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006, 346, 321–329.

32. Osman, AM Višestruki putevi reakcije 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil radikala (DPPH·) sa (plus)-katehinom: Dokaz za formiranje kovalentnog adukta između DPPH· i Oksidirani oblik polifenola. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2011, 412, 473–478.

33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Analogi fenilpropanoidnih glikozida: enzimska sinteza, antioksidativna aktivnost i teorijska studija njihovog mehanizma uklanjanja slobodnih radikala. PLOS ONE 2011, 6, e20115.

34. Perron, NR; Brumaghim, JL Pregled antioksidativnih mehanizama polifenolnih spojeva povezanih s vezivanjem željeza. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75–100.

35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; et al. Usmjeravanje na željezo koje se može helirati kao terapeutski modalitet kod Parkinsonove bolesti. Antioksid. Redox Signal. 2014, 21, 195–210.

36. Čekić, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Test modificiranog bakra koji smanjuje antioksidativni kapacitet (CUPRAC) za mjerenje antioksidativnih kapaciteta proteina koji sadrže tiol u mješavini s polifenolima. Talanta 2009, 79, 344–351.

37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Usklađenost između antioksidativnih aktivnosti in vitro i hemijskih komponenti Radix Astragali (Huangqi). Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050–1053.

38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Heksadekanska kiselina iz Buzhong Yiqi dekocije izazvala je proliferaciju mezenhimalnih matičnih ćelija koštane srži. J. Med. Food 2010, 13, 967–975.

39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Zaštitni efekti dihidromiricetina protiv ·OH-indukovanog oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija i mehanička hemija. Molecules 2016, 21, 604.

40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP sinteza, antioksidacijska aktivnost (E)-9-p-tolil-3-2-(8-hidroksi-kinol- 2-il)vinil-karbazola i (E){{8 }}(p-Anisyl)-3-2-(8-hidroksi-kinol-2-il)vinil-karbazol i njihova indukciona proliferacija mezenhimskih matičnih ćelija. Acta Chim. Sin. 2009, 67, 974–982.

41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Ciljanje na Shh put atraktilenolida promoviše hondrogenu diferencijaciju mezenhimalnih matičnih ćelija. Biol. Pharm. Bik. 2012, 35, 1328–1335.

Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin štiti od oštećenja mezenhimalnih matičnih ćelija izazvanih hidroksilnim radikalima: Procjena antioksidansa i uvid u mehanizme. Chem. Biol. Interakcija. 2014, 219, 221–228.