Višesmjerna aktivnost Bakuchiola protiv ćelijskih mehanizama starenja lica - Eksperimentalni dokazi za holistički pristup tretmanu, 1. dio

Abstract

Cilj: Starenje kože je multifaktorski proces koji uključuje stvaranje reaktivnih vrsta kisika, uzastopnu upalu sa smanjenom vitalnošću epidermalnih i dermalnih stanica i rezultirajućim oštećenjem ekstracelularnog matriksa. Efikasni dermokozmetički modaliteti tretmana bi u idealnom slučaju trebali riješiti ove karakteristike u holističkom pristupu. Ovdje smo odredili odgovarajući profil aktivnosti bakuhiola, meroterpena biljnog porijekla, u nizu in vitro, ex vivo i in vivo studija i uporedili ga s retinolom, koji se trenutno smatra zlatnim standardom u lokalnoj kozmetici protiv starenja.

Glikozid cistanche takođe može povećati aktivnost SOD u tkivima srca i jetre, te značajno smanjiti sadržaj lipofuscina i MDA u svakom tkivu, efikasno hvatajući različite reaktivne radikale kisika (OH-, H₂O₂, itd.) i štiteći od oštećenja DNK uzrokovanih od strane OH-radikala. Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju jaku sposobnost uklanjanja slobodnih radikala, veću redukcijsku sposobnost od vitamina C, poboljšavaju aktivnost SOD u suspenziji sperme, smanjuju sadržaj MDA i imaju određeni zaštitni učinak na funkciju spermatozoida. Cistanche polisaharidi mogu pojačati aktivnost SOD i GSH-Px u eritrocitima i plućnim tkivima eksperimentalno starenja miševa uzrokovanih D-galaktozom, kao i smanjiti sadržaj MDA i kolagena u plućima i plazmi, te povećati sadržaj elastina. dobar učinak čišćenja na DPPH, produžava vrijeme hipoksije kod starijih miševa, poboljšava aktivnost SOD u serumu i odlaže fiziološku degeneraciju pluća kod eksperimentalno starenja miševa. i ima potencijal da bude lijek za prevenciju i liječenje bolesti starenja kože. U isto vrijeme, ehinakozid u Cistancheu ima značajnu sposobnost uklanjanja slobodnih radikala DPPH i može ukloniti reaktivne vrste kisika, spriječiti degradaciju kolagena izazvanu slobodnim radikalima, a također ima dobar učinak popravljanja oštećenja anjona slobodnih radikala timina.

Kliknite na Antioxidant Cistanche Tubulosa

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Metode: Antioksidativni kapacitet i moć bakuhiola i retinola analizirani su mjerenjem redukcije 2,2′-difenil-1-pikrilhidrazila (DPPH) putem njegovog apsorpcionog raspada i spektroskopije elektronske spin rezonance, respektivno. Učinci na prostaglandin E2 (PGE2), faktor inhibicije migracije makrofaga (MIF), faktor rasta fibroblasta 7 (FGF7), kolagen tip I i ​​VII (COL1A1, COL7A1), nivoe fibronektina (FN) kao i metabolizam tetrazolija rastvorljivog u vodi 1 (WST-1) su određeni u ljudskim dermalnim fibroblastima. Epidermalna regeneracija je procijenjena korištenjem in vitro modela zacjeljivanja rana. Nivoi FN proteina su analizirani ex vivo nakon tretmana sa formulacijom koja sadrži bakuhiol, retinol ili vehikulum koristeći tečnost za usisavanje blistera. Poboljšanje stanja kože utvrđeno je in vivo u studiji poređenja split-face nakon primjene bakuchiola ili vehikuluma.

Rezultati: Za razliku od retinola, bakuchiol je pokazao visoku antioksidativnu efikasnost. Nivoi PGE2 i MIF su značajno smanjeni i bakuhiolom i retinolom. Bakuchiol, ali ne i retinol, značajno povećava nivoe proteina FGF7. Nivoi metabolizma WST-1 značajno su povećani bakuhiolom i retinolom. Primena bakuhiola i retinola dovela je do značajnog povećanja nivoa COL1A1, COL7A1 i FN proteina. Rane nadopunjene bakuhiolom, ali ne i retinolom, pokazale su značajno povećanje regeneracije epidermisa. Klinički, područja tretirana formulacijom koja sadrži bakuhiol pokazala su statistički značajno povećanje vrijednosti FN proteina nakon 4-sedmične primjene u poređenju sa netretiranim područjima i područjima tretiranim vehikulom.

Zaključak: Ovi podaci pružaju dokaze za višesmjernu efikasnost bakuchiola protiv ćelijskih znakova starenja kože. Njegov profil aktivnosti dijeli neke zajedničke karakteristike s retinolom, ali pokazuje nekoliko do sada nepoznatih pozitivnih efekata u našim studijama, naime stimulaciju kritične komponente ekstracelularnog matriksa FN i ubrzanu regeneraciju epiderme i zacjeljivanje rana.

KLJUČNE RIJEČI

anti-aging, bakuchiol, potvrđivanje zahtjeva in vivo/ex vivo/in vitro, retinol, fiziologija/strukture kože

UVOD

Ostarjelu kožu karakteriziraju bore, neujednačena pigmentacija, hrapavost kože i opuštenost. Ovi klinički znakovi su rezultat strukturnih i metaboličkih promjena uzrokovanih procesima unutarnjeg i ekstrinzičnog starenja. Intrinzično starenje se pripisuje faktorima uključujući skraćivanje telomera, hroničnu upalu, pojedinačne mutacije mitohondrijske DNK i slobodne radikale [1]. Ostarjela koža dodatno uključuje smanjenje svojih antioksidativnih sistema[2]. Također, stopa proliferacije stanica opada zbog biološkog procesa starenja koji dovodi do gubitka strukture i funkcije kože. Ekstrinzično starenje prvenstveno je izazvano UV zračenjem i uticajima okoline. Ove uvrede rezultiraju oštećenjem kože koje pojačava hronološki pad i ubrzava starenje kože. Ljudska koža dalje gubi sposobnost da se nosi s upalnim stanjima tijekom starenja, što rezultira kroničnim proupalnim stanjem.

Lokalna primjena retinoida kao što su retinoična kiselina, retinal ili retinol smatra se kliničkim zlatnim standardom za efikasan tretman protiv starenja [3, 4]. Molekularni mehanizmi retinoida su opširno opisani [5-10]. Lokalni retinoidi efikasno smanjuju vidljive znakove starenja kao što su bore, opuštenost ili hrapavost [4, 11] i smanjuju depigmentaciju fotooštećene kože uključujući livedo reticularis i aktinične lentigine [12]. Međutim, lokalno liječenje retinoidima može dovesti do suvoće i iritacije kože ovisno o koncentraciji [13]. Kako primjena retinola uzrokuje manje nuspojave u odnosu na druge retinoide kao što je retinoinska kiselina [6, 14], on je široko korišteni aktivni u kozmetičkom tretmanu starenja lica.

Za razliku od retinola koji se u proizvodima za njegu kože primjenjuje od 1984. godine [15], bakuchiol je tek nedavno privukao pažnju kao topikalni spoj protiv starenja. Bakuchiol je meroterpen (Slika 1) koji se dobija iz sjemena Psoralea corylifolia. Vjekovima se koristi u tradicionalnoj indijskoj i kineskoj medicini [16, 17] i dobro se podnosi [18]. Sugerirano je da Bakuchiol pokazuje funkcije slične retinolu, jer u modelu zamjene kože obje supstance pokazuju slične obrasce ekspresije gena in vitro [19] i poboljšanje fotooštećenja kože in vivo [20]. Stoga se također naziva funkcionalnim analogom retinoida biljnog porijekla [21]. Dalja istraživanja su pokazala antioksidativno [19, 22–24], protuupalno [19, 25–27], antibakterijsko [28], kao i antiproliferativno i antitumorsko djelovanje [29, 30] bakuhiola.

Da bi se efikasno poboljšali i odgodili procesi višefaktornog starenja kože, različitim ćelijskim mehanizmima treba se baviti integriranim pristupom. Bakuchiol istovremeno modulira različite ciljeve, što ga čini obećavajućim spojem u ovom pogledu. Kako su oksidativni i upalni stres usko povezani sa starenjem kože, njihova prevencija bakučiolom može unaprijediti cjelokupno stanje kože. Međutim, kvalitet trenutnih naučnih dokaza nedavno je kritički procijenjen [31]. U tom kontekstu, utvrdili smo (i) antioksidativne i (ii) antiinflamatorne kapacitete bakuhiola i retinola i ispitali njihovu sposobnost da poboljšaju ćelijski metabolizam i sintezu faktora rasta 7 sažeto kao (iii) ćelijska aktivnost. Nadalje smo analizirali da li bakuhiol i retinol utiču na ekspresiju određenih (iv) komponenti ECM i poboljšavaju (v) epidermalnu regeneraciju i reepitelizaciju. Konačno, provedena je in vivo studija kako bi se potvrdila klinička sposobnost bakuhiola protiv starenja u ljudskoj koži.

MATERIJALI I METODE

Ispitni materijali

Bakuchiol je nabavljen od Sytheon Ltd (Boonton, New Jersey, Sjedinjene Države). Retinol je kupljen od Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, Sjedinjene Države). Za eksperimente sa ćelijskom kulturom, obe ispitivane supstance su sveže razblažene u DMSO (Merck, Darmstadt, Nemačka). Za osnovne otopine DMSO, primijenjena koncentracija ispitivanih supstanci bila je 1000-puta iznad najveće koncentracije primijenjene u ćelijskoj kulturi dajući 0.1 posto DMSO u mediju ili puferu. Dalja razrjeđenja su izvršena korištenjem medija ili pufera sa 0.1 posto DMSO. Dakle, svi eksperimenti sa ćelijskom kulturom su izvedeni u prisustvu 0.1 posto DMSO. Za in vivo studije, lokalni retinol je formuliran u istom nosaču kao i bakuchiol.

In vitro studije

Određivanje antioksidativnog kapaciteta

Bakuchiol, retinol (oba primijenjena u konačnoj koncentraciji od 100 μM) ili trolox visokog standarda (Merck, konačna koncentracija od 25 μM) razrijeđeni su u DMSO. Ukratko, 30 μL ovih jedinjenja (10- puta veća koncentracija od konačne koncentracije testa) dodano je u ploču s ravnim dnom 96- bunara. Nakon toga, 270 μL 39 ug/mL DPPH (Merck, razrijeđen u 1:1 mješavini voda/etanol) je brzo dodato u svaku jažicu dajući konačnu koncentraciju od 10 posto DMSO. Kao kontrola, otopina DPPH je inkubirana sa DMSO bez ispitivanih supstanci. Dalje, slepe kontrole su izvedene inkubacijom bakuhiola ili retinola sa vodom/etanolom (1:1) ili samo sa mešavinom voda/etanol (1:1) koja sadrži 10 procenata DMSO u odsustvu DPPH. Nakon 10, 30 i 60 minuta, mjerena je apsorbancija na 524 nm korištenjem Spark multimode čitača mikroploča (Tecan, Männedorf, Švicarska). Signali slepih kontrola su oduzeti.

Određivanje antioksidativne moći

HDF-ovi su zasijani u {{0}}ploče sa 150 000 ćelijama/bunariću u mediju od 2 mL koji sadrži 10 posto telećeg seruma i inkubirani 24 sata. Nakon toga, stari medij je odbačen, a ćelije su tretirane medijumom koji je sadržavao 2 posto telećeg seruma i bakuhiol ili retinol u konačnoj koncentraciji od 10 μM. Kontrolni HDF su dopunjeni sa 0,1 posto DMSO bez bakuhiola ili retinola. Slijepe kontrole su izvedene inkubacijom podloge bez ćelija. Nakon 24 h, kondicionirani medij je prebačen u Vivaspin protein koncentrator spin kolone (5000 MWCO; Sartorius, Göttingen, Njemačka) i koncentriran približno 10-put. Zapremine svih supernatanata medija su izjednačene ponovnim dodavanjem protoka. Nivoi proteina FGF7 u koncentrovanom kondicioniranom mediju analizirani su korištenjem komercijalno dostupnog ELISA kompleta prema uputama proizvođača (Bio-Techne GmbH). Mjerenja su obavljena korištenjem Spark multimode čitača mikroploča (Tecan). Signali dobijeni iz slepih kontrola su oduzeti i nivoi proteina FGF7 su normalizovani na ukupan broj ćelija koji je određen pomoću brojača ćelija (Scepter, Merck).

Određivanje WST-1 metabolizma

HDF-ovi su zasijani u {{0}} ploče sa 3000 ćelija po jažici u 100 μL medijuma koji sadrži 10 procenata telećeg seruma i inkubirani 24 sata. Osiromašeni medij je odbačen, a ćelije su tretirane sa 100 μL medija koji je sadržavao retinol ili bakuhiol u konačnoj koncentraciji od 1 μM odnosno 10 μM. Kontrolni HDF su dopunjeni sa 0,1 posto DMSO bez bakuhiola ili retinola. Kao dodatna kontrola, ćelije su tretirane sa 10 posto triton-X (Merck). Slijepe kontrole su izvedene inkubacijom podloge bez ćelija. Nakon 72h, ćelije su obojene korištenjem komercijalno dostupnog reagensa za ćelijsku proliferaciju WST-1 prema uputama proizvođača (Merck). Apsorpcija je mjerena na 450 i 620 nm pomoću Tecan infinity M200 čitača mikroploča (Tecan). Za analizu je korištena razlika u ovim mjerenjima. Signali slepih kontrola su oduzeti.

Određivanje nivoa proteina COL1A1 i COL7A1

HDF-ovi su zasijani u {{0}}ploče sa 10  000 ćelijama/ bunar u 100 μL medijuma koji sadrži 10 posto telećeg seruma i inkubirani 24 sata. Bakuhiol ili retinol razrijeđeni su u 100 μL podloge bez telećeg seruma i dopunjeni sadašnjom podlogom u konačnoj koncentraciji od 1 μM ili 10 μM, respektivno. Kontrola je dopunjena sa 100 μL medijuma bez seruma koji daje koncentraciju od 0,1 posto DMSO koja odgovara tretmanu retinolom i bakuhiolom. Kao visoki standard, primijenjeno je 10 ng/mL transformirajućeg faktora rasta (TGF-) i 11 ug/mL natrijum askorbata (oba Merck). Slijepe kontrole su izvedene inkubacijom podloge bez ćelija. Nakon 4 h, nivoi proteina COL1A1 i COL7A1 u kondicioniranoj podlozi su analizirani korištenjem komercijalno dostupnih ELISA kompleta prema uputama proizvođača (Novus Biologicals, Littleton, Colorado, Sjedinjene Države). Mjerenja su obavljena korištenjem Spark multimode čitača mikroploča (Tecan). Signali slepih kontrola su oduzeti. Nivoi proteina COL1A1 i COL7A1 su normalizovani na ukupnu količinu proteina lizata ćelija koja je određena korišćenjem komercijalno dostupnog kompleta za analizu bicinhoninske kiseline (Thermo Fisher Scientific) prema uputstvima proizvođača. Preduvjet za korištenje rezultata bila je pozitivna reakcija stanica na visoki standard TGF- i natrijum askorbat.

Za analizu nivoa proteina COL7A1 nakon produženog vremena inkubacije, HDF-ovi su zasijani u 96-ploče sa 3000 ćelija po jažici u mediju od 100 μL koji sadrži 10 posto telećeg seruma. Svi tretmani, kontrole i analize izvedeni su kako je gore opisano s izuzetkom da su bakuhiol i retinol korišteni samo u konačnoj koncentraciji od 10 μM. Ćelije su sakupljene kada je postignuta subkonfluencija, posebno nakon 72 ili 96h.

Određivanje nivoa FN proteina

HDF-ovi su zasijani u {{0}}ploče sa 10 000 ćelijama/jamici u 100 μL medijuma koji sadrži 10 posto telećeg seruma i inkubirani 24 sata. Stari medij je zamijenjen medijumom koji je sadržavao 2 posto telećeg seruma i bakuhiol ili retinol u konačnoj koncentraciji od 10 μM. Kontrola je dopunjena sa 0,1 posto DMSO bez bakuhiola ili retinola. Slijepe kontrole su izvedene inkubacijom podloge bez ćelija. Nakon 24 sata, nivoi FN proteina u kondicioniranoj podlozi su analizirani korištenjem komercijalno dostupnog ELISA kompleta prema uputama proizvođača (R&D Systems, Minneapolis, Minnesota, Sjedinjene Države). Mjerenja su obavljena korištenjem Spark multimode čitača mikroploča (Tecan). Signali slepih kontrola su oduzeti. Nivoi FN proteina su normalizovani na ukupnu količinu proteina ćelijskog lizata koja je određena kao što je prethodno navedeno.

Određivanje epidermalne regeneracije u in vitro modelu zacjeljivanja rana

Eksperimenti su izvedeni kako je prethodno opisano [34]. Za tretman modela zacjeljivanja rana, bakuchiol ili retinol su razrijeđeni u DPBS-u i dodani u konačnoj koncentraciji od 100μM u područje rane (5 μL po rani). Referentne rane su dopunjene istom količinom DPBS-a koji sadrži 0,1 posto DMSO bez bakuhiola ili retinola. Dodatne rane su ostale neobrađene kao dodatna kontrola. Modeli za zacjeljivanje rana inkubirani su 43 sata na 95 posto vlažnosti, 5 posto CO2 i 37 stepeni. Nakon toga, uzorci su brzo zamrznuti u izopetanu prethodno ohlađenom tečnim azotom i čuvani na -80 stepeni. Reepitelizacija je procijenjena u hematoksilinom i eozinom obojenim kriostatskim sekcijama mjerenjem dužine regeneriranog epidermisa pomoću Leica DMLS mikroskopa (10×), Leica MC 170 HD CCD kamere i softvera Leica LAS V4.9 (Leica Microsystems, Wetzlar, Njemačka). Kvantifikacija je izvedena na slijepi način.

In vivo studije I i II

Za obje in vivo studije, preporuke trenutne verzije Helsinške deklaracije i smjernice Međunarodne konferencije o harmonizaciji dobre kliničke prakse su uočene kao primjenjive na kozmetičku studiju. Protokol studije I odobrio je Nezavisni etički komitet Frajburga (feki kod 08/2610). U obje studije, svi volonteri su dali pismeni, informirani pristanak. Ispitanici su imali zdravu kožu, pripadali su tipu kože od I do III po Fitzpatrick-u i početak, odnosno promjena hormonskog lijeka je bio kriterij isključenja.

Tokom 10-dnevnog perioda predkondicioniranja i tokom cijelog perioda istraživanja, od ispitanika se tražilo da se suzdrže od izlaganja UV zračenju u područjima testiranja. Aktivnosti koje podstiču znojenje bile su zabranjene 24 sata prije zakazanih provjera.

Istraživač je pokazao ispravnu primjenu formulacija koristeći količinu koja je odgovarala uobičajenom režimu njege kože ispitanika.

Studija I: Ex vivo određivanje nivoa FN proteina

Od 52 ispitanice, koje su bile uključene u ovu studiju kontrolisanu vozilom, 33 ispitanika je završilo studiju, a podaci 31 ispitanika (30–64 godine, srednja starost: 50,9 godina) su uključeni u analizu podataka. Do odustajanja je došlo zbog pandemije SARS-CoV-2 i ličnih razloga (13 ispitanika), kao i zbog reakcija nekompatibilnosti (pet ispitanika, uzrokovanih liječenjem retinolom). Reakcije inkompatibilnosti posredovane retinolom, kao i problemi s uzorkovanjem uzrokovali su različit broj ispitanika testiranih za svako stanje (pogledajte rezultate za detalje).

Sedam dana prije zakazanih pregleda zabranjena je upotreba proizvoda za njegu kože, sredstava za čišćenje i sapuna na podlakticama. Prvog dana studija ustanovljena su četiri testna područja na unutrašnjoj strani podlaktica. Na dvije testne površine primijenjene su dvije formulacije veruma koje sadrže {{0}}.5 posto bakuhiola ili 0.15 posto retinola, respektivno. U mišljenju objavljenom od strane Znanstvenog odbora za sigurnost potrošača 2016. godine, primijenjena koncentracija retinola smatrana je kozmetičkim tretmanom [35]. U druga dva testna područja korišteno je odgovarajuće vozilo ili je područje ostavljeno neobrađeno. Pozicioniranje lokacija tretmana je promijenjeno. Nakon 4 sedmice primjene test formula dva puta dnevno, volonteri su se vratili u institut za testiranje. U svakom ispitnom području stvorena su tri usisna blistera (7 mm u promjeru) kao što je prethodno opisano [36, 37]. Ukratko, prilagođene vakuumske čašice stavljene su na ispitna područja i primijenjen je vakuum od 550–850 mbar. Nakon otprilike 90-150 min, kada su se formirali usisni plikovi, vakuum je oslobođen i tekućina je aspirirana iz blistera pomoću 24-igle za mjerenje. Tečnosti su odmah zamrznute na -80 stepeni na suvom ledu do analize. Nivoi FN proteina su kvantifikovani u uzorcima tečnosti za usisavanje pomoću komercijalno dostupnog ELISA kompleta (R&D Systems). Mjerenja su obavljena korištenjem Spark multimode čitača mikroploča (Tecan). Nivoi FN su normalizovani na ukupne nivoe proteina u uzorcima tečnosti za usisavanje blistera koji su određeni kao što je prethodno navedeno.

Studija II: In vivo određivanje poboljšanja stanja kože

Ukupno, 43 volonterke su bile uključene u ovu studiju poređenja podijeljenih lica kontroliranom vozilom. Prema medicinskim procjenama, ispitanici su imali mješoviti tip kože (suha, normalna, masna i mješovita koža). 34 ispitanika (39–66 godina, srednja starost: 56,2 godine) završilo je istraživanje i uključeno u analizu. Odustajanje je uzrokovano tehničkim problemima i neusklađenošću (osam ispitanika), kao i reakcijama nekompatibilnosti (jedan ispitanik, uzrokovan tretmanom nosačem i bakuhiolom).

Dvije sedmice prije početka studije i tokom cijelog perioda istraživanja, volonteri su morali da se uzdrže od upotrebe proizvoda za samotamnjenje ili intenzivnih kozmetičkih tretmana lica (npr. uklanjanje površinskih slojeva kože). Tokom 10-dnevnog perioda predkondicioniranja i tokom studije, ispitanici su zamoljeni da se uzdrže od izvođenja trajne šminke, tretmana trepavica i obrva, maski za oči i flastera. Tri dana prije prve procjene, ispitanici su zamoljeni da se uzdrže od upotrebe proizvoda za njegu lica. Uveče prije zakazanog ocjenjivanja ispitanici su morali prekinuti nanošenje dekorativne kozmetike.

U prvih 7 dana 10-dnevne faze predkondicioniranja, subjekti su primili teglu kreme koja je sadržavala kremu za sredstvo za ispitivanje (bez informacija o sadržaju) i nanijeli je dva puta dnevno na cijelo lice. Na početku, volonteri su vršili samoocjenjivanje. Posebno su vizualno procijenili cjelokupni izgled svoje kože lica promatrajući njenu svježinu i blistavost, kao i sve znakove starenja kože. Pritom je primijenjena vizuelna analogna skala u rasponu od 1 (veoma umoran, ostario) do 10 (veoma svjež, bez znakova stare kože). Zatim su subjekti dobili dvije zaslijepljene tegle kreme koje su sadržavale verum (sredstvo koje sadrži 0,5 posto bakuchiola) odnosno vozilo, bez ikakvih specifikacija o sadržaju. Tokom perioda istraživanja od 12 sedmica, jedna strana lica je tretirana dva puta dnevno sa verumom, dok je druga strana lica tretirana dva puta dnevno vehikulom. Dodjela tretmana na testna mjesta je promijenjena. Nakon 12 sedmica redovne upotrebe, volonteri su ponovo izvršili samoocjenjivanje kao što je gore navedeno.

Statistička analiza

Statističke analize su obavljene pomoću Microsoft Excel-a za Office 365 (Microsoft Corporation, Redmond, Washington, Sjedinjene Države), SAS softverskog paketa za Windows V9.4 (SAS Institute GmbH, Heidelberg, Njemačka) i GraphPad Prism V8 (GraphPad Software, San Diego , Kalifornija, Sjedinjene Američke Države).

Normalna distribucija podataka je procijenjena korištenjem Shapiro-Wilkovog testa. Ako je normalna distribucija potvrđena, izvršena je ponovljena analiza varijanse (RM-ANOVA) sa post hoc poređenjem u parovima. Ako je hipoteza normalnosti odbačena, Blom-transformisani rangovi originalnih podataka su procenjeni korišćenjem RM-ANOVA sa post-hoc poređenjem u parovima, ili su originalni podaci procenjeni korišćenjem Wilcoxon test ranga predznaka. Svi statistički testovi su bili dvostrani na nivou značajnosti alfa=0.05.

REZULTATI

In vitro studije

Određivanje antioksidativnih efekata

Da bismo analizirali (i) antioksidativne efekte bakuhiola i retinola, izvršili smo dva različita testa koristeći DPPH kao detektorski molekul.

Antioksidativni kapacitet

Antioksidativni kapacitet je određen mjerenjem redukcije DPPH putem njegovog raspadanja apsorpcije. Trolox visokog standarda pokazao je značajno povećan antioksidativni kapacitet u odnosu na kontrolu (p=0.0000 za sve naznačene vremenske tačke) potvrđujući ispravno mjerenje (Slika 2a). Što se tiče kontrole, apsorbancija u uzorcima tretiranim bakuchiolom je također značajno smanjena u svim ispitivanim vremenskim tačkama (10 min: p=0.0003, 30 i 60 min: p=0.0000 ) pokazuju povećani antioksidativni kapacitet. Nasuprot tome, retinol nije pokazao značajan antioksidativni kapacitet u poređenju sa kontrolom.

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】