Koliko znate o hroničnoj bolesti bubrega?
Mar 03, 2022
Kontakt: emily.li@wecistanche.com
Procjena albuminurije i njenog odnosa s krvnim tlakom kod pasa s kroničnom bubrežnom bolešću
Angela Bačić1, Marcia M. Kogika1, et.al
Ključne riječialbuminurija, pseća,hronična bolest bubrega, ELISA, hipertenzija,bubrežna funkcija
PozadinaMikroalbuminurija i hipertenzija su dugo bile povezane sa opreznom prognozom kod pacijenata sa različitim bolestima. U veterini se koriste testovi na mikroalbuminuriju za rano otkrivanjeoštećenje bubrega, ali ima malo informacija o njegovoj povezanosti s visokim krvnim tlakom kod pasa shronična bolest bubrega(CKD). Cilj: Cilj ovog istraživanja bio je procijeniti albuminuriju i njenu povezanost s arterijskom hipertenzijom kod pasa s CKD.
MetodeOdnos urinarnog albumina: kreatinina (UAC), omjera proteina u urinu: kreatinina (UPC) i sistoličkog krvnog tlaka određivani su kod 39 klinički zdravih pasa i 40 pasa sa CKD.
RezultatiUAC kod pasa sa CKD (raspon, {{0}}.002–7,99; medijan, {{10}}}.38) je statistički različit od kontrolnih pasa (raspon, 0.0005–0.01; srednja vrijednost, {{42} }.002). Mikroalbuminurija (UAC 0,03–0,3) i mikroalbuminurija (UAC 4 0.3) otkrivene su kod 32,5 posto i 50 posto pasa sa CKD, respektivno. Šezdeset posto (24/40) pasa sa CKD imalo je sistolni pritisak Z180 mmHg; kod ovih pasa, odnos UAC (raspon, 0,006–7,99; medijan, 1,72) bio je značajno veći nego kod pasa sa CKD i sistoličkim pritiskom od 180 mmHg (raspon, 0,002–4,83; medijan, 0,10). Od hipertenzivnih pasa sa CKD, oni sa UPC 41,0 obično su imali makroalbuminuriju, oni sa UPC 0,5-1,0 obično su imali mikroalbuminuriju, a oni sa UPC o 0,5 obično su imali nedostatak albuminurije.
ZaključciOdnos UAC bio je veći kod hipertenzivnih nego kod normotenzivnih pasa sa CKD. Testovi dizajnirani za otkrivanje mikroalbuminurije mogu biti korisni za hipertenzivne pse sa CKD i UPC 1.0 za otkrivanje početka i veličine albuminurije. Kada je makroalbuminurija očigledna, sam omjer UPC se može koristiti u istu svrhu.
Cistanche liječi bolest bubrega
Uvod
Proteinurija je implicirana kao nezavisni posrednik progresije bolestibubrežna bolest.1,2Kod pacova sa eksperimentalno izazvanom proteinurijom i kod ljudi sa prirodnom proteinurijomzatajenje bubrega, veličina proteinurije korelira sa brzinom progresijezatajenje bubrega.3,4 Nedavno su ukupni mortalitet i broj uremijskih kriza bili povezani sa proteinurijom kod pasa sahronična bolest bubrega(CKD).5
Mikroalbuminurija se općenito definira kao subklinička albuminurija, tj. brzina izlučivanja albumina koja je nenormalno povišena, ali se ne može otkriti standardnim laboratorijskim procedurama kao što je rutinska metoda mjerenja.6 To znači da je brzina izlučivanja albumina iznad normalnog nivoa, ali ispod uobičajenog nivoa proteinurije. Kod ljudi je mikroalbuminurija dugo bila prepoznata kao prediktivni faktor kasne kliničke proteinurije i završnog stadijuma bubrežne bolesti6kao i od razvoja dijabetičke nefropatije.7Slično, mikroalbuminurija može prethoditi proteinuriji kod pasa s nasljednom nefropatijom,8kod pasa zaraženih Dirofilaria immitis,9i kod mekodlakih pšeničnih terijera genetski predisponiranih za razvoj glomerularne bolesti.10
Koegzistencija hipertenzije i proteinurije već je prijavljena kod pasa s hiperadrenokorticizmom11–13i dijabetes melitus,14,15ali nisu objavljeni izvještaji o povezanosti sistemskog krvnog tlaka s ozbiljnošću proteinurije i/ili albuminurije kod pasa s CKD. Whittemore et al16spomenuo je da kod mačaka postoji značajna povezanost između urinarnog albumina: omjera kreatinina (UAC), hipertenzije i azotemije, a slični rezultati bi se očekivali i kod pasa, ali studija nije podržala ovaj zaključak.
Neophodno je ne samo da se dijagnostikuje albuminurija i/ili proteinurija, već da se identifikuju i kontrolišu drugi faktori koji je takođe pogoršavaju.17–19Sistemska hipertenzija, najvjerovatnije sekundarna kod pasa sabubrežna bolest,20može dovesti do glomeruloskleroze, glomerularne atrofije i proliferativnog glomerulitisa. Hipertenzivne lezije bubrežnih arteriola mogu uzrokovati degeneraciju bubrežnih tubulara i intersticijalnu fibrozu.21
Semikvantitativni testovi (npr. štapići) često potcjenjuju proteinuriju jer psi s CKD obično imaju razrijeđene uzorke urina. S druge strane, omjer UAC je u visokoj korelaciji s koncentracijom albumina u urinu mjerenom vremenskim prikupljanjem urina i ispravlja varijabilnost u diurezi i koncentraciji urina.22,23 Kod ljudi, mikroalbuminurija je definisana kao 30–300 mg albumina/g kreatinina, sa omjerom UAC od 0,03–0,3 mg/mg.24,25Stoga je cilj ove studije bio da se utvrdi prevalencija i veličina albuminurije kod pasa sa CKD i da se ispita da li je hipertenzija povezana sa povećanjem izlučivanja albumina. Da bi se postigao ovaj cilj, razvijena je kvantitativna ELISA analiza za kvantificiranje albumina u uzorcima urina pasa s CKD, a omjer UAC je određen za procjenu težine albuminurije.
Cistanche za poboljšanjefunkciju bubrega
Materijali i metode
Životinje
Sve procedure koje uključuju upotrebu životinja odobrene su od strane Etičke komisije za brigu i upotrebu životinja Fakulteta veterinarske medicine Univerziteta Sa˜o Paulo (protokol #378/2003). Kontrolnu grupu činilo je 39 klinički zdravih normotenzivnih pasa oba spola (23 mužjaka i 16 ženki), starosti 1-5 godina, različitih rasa. Grupa CKD se sastojala od 40 pasa (20 mužjaka i 20 ženki), starosti 2-18 godina, i također različitih rasa, s kliničkom dijagnozom CKD-a kategoriziranim kao stadijum 3 ili 4 prema klasifikaciji sistema stadija koju je predložio International Renal Interest. Društvo.26 Kriterijumi za uključivanje pasa u grupu sa CKD bili su: anamneza i komplementarni laboratorijski nalazi kompatibilni sa CKD, uključujući neregenerativnu anemiju, izostenuriju i hroničnu bubrežnu azotemiju (serumska koncentracija kreatinina Z2,0mg/dL za 4 2 mjeseci kod hidriranih pasa), kao i bez prethodne primjene antihipertenzivnih lijekova.
Krvni pritisak
Sistolni arterijski pritisak je meren pomoću Doplerovog detektora protoka (Doppler Ultrasound Parks Medical Model 811B, Las Vegas, NV, SAD). Širina manžetne je odabrana da bude 30-40 posto obima udova na mjestu postavljanja. Za ovu studiju, hipertenzija se smatrala prisutnom kada je srednja vrijednost najmanje 5 različitih mjerenja izvršenih uzastopno bilaZ180 mmHg.27 Psi su prije zahvata smješteni i držani u tihom okruženju kod vlasnika. Isti kliničar je izvršio mjerenje krvnog tlaka kod svih pasa u studiji.
Analiza urina
Uzorci urina su aseptično prikupljeni cistocentezom ili uretralnom kateterizacijom i dostavljeni na potpunu analizu urina, uključujući mikroskopsku procjenu sedimenta urina. Životinje čiji su uzorci urina imali makroskopske dokaze hematurije i/ili mikroskopske dokaze piurije i bakteriurije su isključene. Alikvoti supernatanta urina su zamrznuti i čuvani na –201C do 1 godine za naknadno određivanje UAC omjera.
Pročišćavanje psećeg albumina i imunizacija kunića
Prvo, liofilizirani pseći albumin (Fraction V, #A9263, Sigma, St Louis, MO, USA) dalje je pročišćen afinitetnom hromatografijom na kolonama Blue Sepharose i Q-sepharose (GE Biotech, Piscataway, NJ, USA). Nakon toga, 2 zeca su imunizirana intramuskularno sa
prečišćeni albumin u Freundovom adjuvansu u intervalima od po četrnaest dana i IgG je izolovan iz seruma.28
Elektroforeza i Western blot pročišćenog psećeg albumina
Western blotting je postignut modifikacijom prethodno opisanog protokola.29 Ukratko, nereducirani uzorci urina zdravog psa i psa s CKD, uzorak seruma zdravog psa i pročišćeni pseći albumin podvrgnuti su elektroforezi u 11 posto natrijum dodecil sulfat-poliakrilamidnih gelova.30Proteini su prebačeni na nitrocelulozne membranske listove ({{0}}.22 mm veličine pora, Sigma) na 15 V tokom 2 h, koristeći polusuhi transfer blotting sistem (BioRad, Hercules, Kalifornija, SAD). Membrane su isprane puferom za ispiranje (10 mM Tris, 150 mM NaCl, 0,1 posto [v/v] Tween 20, pH 7,5), a zatim inkubirane s otopinom za blokiranje (5 posto [v /v] želatin od riblje kože hladne vode [Sigma G7765] otopljen u puferu za pranje) 18 h na 41C. Membrane su inkubirane sa antitijelima otopljenim u puferu za ispiranje koji sadrži 0,5 posto (v/v) ribljeg želatina 2 h na sobnoj temperaturi uz miješanje. Da bi se procijenila specifičnost antitijela protiv pročišćenog psećeg albumina, membrane su inkubirane s ukupnim zečjim IgG anti-pseći albuminom. Nakon ispiranja, trake su inkubirane sa konjugatom kozjeg anti-zečjeg IgG-peroksidaze (Sigma A6154) 2 h na sobnoj temperaturi uz miješanje. Sva antitijela i konjugati su razrijeđeni u puferu za ispiranje koji je sadržavao 0,5 posto (v/v) ribljeg želatina. Reakcija je razvijena kako je prethodno opisano.31
ELISA za pseći albumin u uzorcima urina
Za mjerenje albumina u uzorcima urina, mikrotitarske ploče (Maxisorp-Nunc Immunoplate, Montreal, Kanada) su obložene preko noći na 41°C sa 100 mg/mL otopine zečjeg IgG anti-psećeg albumina otopljenog u 0.1 M karbonatni pufer (pH 9,6), a zatim blokiran sa 3 posto kazeina otopljenog u karbonatnom puferu. Standardne krivulje u šest tačaka za albumin su konstruirane korištenjem pročišćenog psećeg albumina, serijski razrijeđenog (do koncentracija od 250.0, 83,3, 27,8, 9,3, 3,1 i 1,0 ng/mL) u inkubaciji pufer (0,05 posto Tween 20 i 0,6 posto ribljeg želatina u fosfatnom puferu, pH 7,4). Uzorci urina su također odgovarajuće razrijeđeni (1:100, 1:300, 1:500, 1:1000, 1:10,000 i 1:50,000) u puferu za inkubaciju kako bi reakcije bile se javljaju unutar linearnog opsega standardne krive (1,03–250 ng/mL). Uzorci i standardi su analizirani u tri primjerka. Isto antitijelo je korišteno kao sekundarno antitijelo, ali je konjugirano sa biotinom29,32 i korišteno u koncentraciji od 3,15 ng/mL, otopljeno u puferu za inkubaciju. Ploče su zatim inkubirane sa 100 ng/mL konjugata avidin-peroksidaze (Sigma A3151) i nakon toga sa svježim reagensom za razvijanje boje, kao što je opisano na drugom mjestu.33 Koncentracija albumina u urinu za svaki uzorak ekstrapolirana je iz standardne krive, a rezultati su korigovani za početno razrjeđivanje uzorka.
Cistanche forbubreg
Odnosi UAC i proteina u urinu: kreatinin (UPC).
Ukupna koncentracija proteina u urinu (mg/dL) izmjerena je pomoću Coomassie G{{0}} testa34; svaki uzorak je analiziran u tri primjerka i vrijednosti su dobijene iz 8-tačkaste standardne krive (0.025, 0.075, {{16 }}.10, 0,50, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 i 3,0 mg/mL). Koncentracija kreatinina u urinu (mg/dL) određena je pomoću testa pikrinske kiseline35 na automatiziranom analizatoru kliničke hemije (Liasys, AMS, Rim, Italija) i provedena s kontrolama kvaliteta (Precinorm Uplus i Precipath Uplus, Roche Diagnostics, Mannheim, Njemačka). UAC je određen upotrebom koncentracije albumina (mg/dL) dobivene ELISA-om. Budući da su sve analize prijavljene kao mg/dL, UAC i UPC su izraženi bez jedinica.
Statistička analiza
Gaussova raspodjela je istraživana korištenjem Kolmogorov-Smirnov testa. UPC i UAC omjeri nisu bili normalno raspoređeni pa je za poređenje korišten Mann-Whitney test. Za statističku analizu korišten je softverski paket SigmaStat 3.1 (Chicago, IL, USA). Razlike sa P .05 smatrane su statistički značajnim.
Rezultati
Zečji IgG anti-pasji albumin bio je specifičan za pročišćeni albumin pasa na osnovu Western blotinga (Slika 1), jer je samo 1 proteinska traka relativne molekularne mase slične onoj psećeg albumina pronađena u svim stazama. ELISA protokol korišten za mjerenje koncentracije albumina u uzorcima urina bio je izuzetno osjetljiv, sa granicom detekcije od približno 0,5 ng/mL.
UPC omjer kod klinički zdravih normotenzivnih pasa (n {{0}}; raspon, 0.04–0.29; medijan, 0 .10) je bila značajno niža (P o.0{{30}}01) nego kod pasa sa CKD (n=40; raspon, 0,13–25,08 ; medijan, 1.86). Šezdeset pet posto (26/40) pasa sa CKD imalo je UPC 4 1.0, 20 posto (8/40) imalo je UPC između 0,5 i 1,0, a 15 posto (6/40) je imalo UPC o 0,5 (Tabela 1). Većina (38/40, 95 posto) pasa sa CKD imala je UPC omjer Z0,2.
Omjer UAC kod klinički zdravih pasa (raspon, {{0}}.0005–0.01; medijan, 0,002) je također bio značajno niži (P o,0001) nego kod pasa sa CKD (raspon, 0,002–7,99; medijan, 0,38) (Slika 2). Omjer UAC se kretao od 0,03 do 0,3 (mikroalbuminurija) kod 32,5 posto (13/40) pasa sa CKD i bio je 4 0,3 (makroalbuminurija) kod 50 posto (20/40) pasa sa CKD (Tabela 1 ).
Hipertenzija je otkrivena kod 24/40 (60 posto) pasa sa CKD. Psi s hipertenzijom bili su u dobi od 2 do 18 godina (srednja vrijednost plus -SD, 9,1 plus - 3,7 godina), dok su se psi s normotenzivom kretali od 2 do 12 godina (7,9 plus - 3,3 godine ).
Uzimajući u obzir mikroalbuminuriju kao raspon UAC definisanog za ljude ({{0}}.03–0,3), mikroalbuminurija je češće otkrivena kod normotenzivnih (7/16, 43,7 posto) nego kod hipertoničara (6 /24,25 posto) psi sa CKD. Suprotno tome, makroalbuminurija je češće uočena kod hipertenzivnih (15/24, 62,5 posto) nego kod normotenzivnih (5/16, 31,3 posto) pasa sa CKD. Nije uočena albuminurija kod 3/24 (12,5 posto) hipertenzivnih i 4/16 (25,0 posto) normotenzivnih pasa sa CKD (Tabela 1).
Omjer UAC kod hipertenzivnih pasa sa CKD (n {{0}}; raspon, {{10}}.006–7,99; medijan, 1,72 ) bio je značajno veći (P =.0183) nego kod normotenzivnih pasa sa CKD (n=16; raspon, 0,002–4,83; medijan, 0,10) (Slika 3). Hipertenzija je uočena kod 6/13 (46,1 posto) pasa sa mikroalbuminuricom i kod 15/20 (75 posto) makroalbuminuričnih pasa sa CKD pasa. Nije uočena značajna razlika (P =.062) u UPC omjeru između hipertenzivnog (n=24; raspon, 0,20–25,08; medijan, 3,07) i normotenzivnog (n=16; raspon, 0,13–4,70; medijan, 1,10) psi sa CKD.
Diskusija
UAC omjeri dobiveni kod klinički zdravih pasa korištenjem naše kvantitativne tehnike ELISA-a bili su slični onima prijavljenim za zdrave ljude36,37i mačke.38Magnituda albuminurije kod pasa sa CKD, prema procjeni UAC, bila je statistički veća nego kod zdravih kontrolnih pasa. Uzimajući u obzir da su psi sa CKD klasifikovani kao stadijumi 3 i 4 bolesti, veći stepen albuminurije u ovoj grupi može biti u korelaciji sa stopom progresije bubrežne bolesti kao što je ranije pokazano kod pacova i ljudi.3,4
Polovina pasa sa CKD imala je koncentraciju albumina u urinu u makroalbuminuričnom rasponu kao što bi se i očekivalo, ali 32,5 posto pasa s CKD je bilo mikroalbuminurično, a 17,5 posto je bilo normoalbuminurično. Stoga bi u potonjoj grupi korištenje rutinskih metoda za otkrivanje mikroalbuminurije moglo biti od koristi. Štaviše, testovi za otkrivanje mikroalbuminurije mogu se koristiti za praćenje liječenja, kao i za praćenje progresije bolesti ne samo kod mikroalbuminuričnih već i kod normoalbuminuričnih pasa s CKD. Upotreba ovih testova kod normoalbuminuričnih pasa mogla bi pomoći kliničarima da prepoznaju rani početak albuminurije i uvedu adekvatne terapijske mjere čim se otkrije; s druge strane, kod pasa s mikroalbuminurijama, cilj bi bio da se dodaju novi lijekovi u režim liječenja i/ili da se poveća doza postojećih lijekova kako bi se smanjila veličina albuminurije i stoga odgodila njezina progresija u makroalbuminuriju.
The data reported herein that all dogs with CKD and macroalbuminuria also had a UPC>1.0 može sugerirati da kada se makroalbuminurija već manifestira, vrijednosti UPC mogu se koristiti u svrhe koje su prethodno navedene, budući da su psi napredovali do očigledne proteinurije; bilo bi nepotrebno koristiti testove osjetljive poput ELISA. Većina pasa sa CKD sa omjerom UPC između 0.5 i 1.0 ima mikroalbuminuriju, a većina onih sa UPC< 0.5="" were="" no="" albuminuria.="" these="" findings="" suggest="" that="" upc="" values="" between="" 0.5="" and="" 1.0="" reflect="" the="" presence="" of="" microalbuminuria.="" for="" upc=""><0.5, the="" specific measurement="" of="" albuminuria="" would="" be="" recommended to="" detect="" the="" initial="" development="" of="">
Hipertenzija je dijagnosticirana kod 60 posto pasa s CKD, nalaz u skladu s prethodnim studijama.20,39,40Visok postotak (62,5 posto) pasa sa hipertenzijom je imao makroalbuminurijski CKD. Visok sistolni arterijski tlak bio je prisutan kod 46,1 posto pasa s mikroalbuminuričnom CKD. Budući da je proteinurija povezana s većim rizikom za razvoj uremičke krize, progresiju CKD i smrt,5 tretmani dizajnirani za smanjenje hipertenzije mogu usporiti progresiju zatajenja bubrega i produžiti preživljavanje kod hipertenzivnih pasa sa CKD. Poređenje između vrijednosti UAC u normotenzivnih i hipertenzivnih pasa sa CKD pokazalo se statistički značajnom, pokazujući i vjerovatnu vezu između ovih parametara i štetnih efekata koje bi visoki sistolički arterijski tlak mogao imati na razvoj albuminurije, slično onome što je pokazano za ljudi.41–43
U ovoj studiji bi se mogla postaviti pitanja u vezi sa razlikama u vrijednostima UAC između hipertenzivnih i normotenzivnih pasa sa CKD, jer se one mogu pripisati nejednakoj distribuciji životinja; međutim, svi psi su bili u stadijumu 3 i 4 bolesti, a težina anemije i azotemije bila je slična za obe grupe, u skladu sa uznapredovalim stadijumima bolesti.
U humanoj medicini, istovremeni nalaz mikroalbuminurije i hipertenzije općenito potiče usvajanje specifičnih terapijskih strategija. Upotreba inhibitora angiotenzin konvertujućeg enzima kod ljudi sa dijabetesom mellitusom tipa 1, hipertenzijom i mikroalbuminurijom može umanjiti progresivni tok do masivne proteinurije.44Ovaj isti tretman je koristan i kod mikroalbuminurijskih normotenzivnih dijabetičara.45,46Kod hipertenzivnih pacova sa ostatkombubrezi,liječenje enalaprilom održavalo je sistemski krvni tlak na normalnim razinama i dramatično ograničavalo razvoj proteinurije i glomerularnih lezija.47Naši nalazi pokazuju da se testiranje na mikroalbuminuriju može koristiti kao alat za praćenje za procjenu progresije bolesti i uspostavljanje terapijskih i preventivnih pristupa kod pasjih pacijenata, posebno kada se mikroalbuminurija postepeno pogoršava zbog hipertenzije.
U zaključku, omjer UAC kod hipertenzivnih pasa s CKD u našoj studiji bio je veći od onih u normotenzivnih pasa, što sugerira da bi visoki sistolički tlak mogao biti povezan s promjenama u glomerularnoj strukturi. Testovi dizajnirani za otkrivanje mikroalbuminurije mogu biti korisni kod hipertenzivnih pasa sa CKD i UPC 1.0 za otkrivanje početka albuminurije ili za praćenje doze antihipertenzivnih lijekova. Kada je makroalbuminurija očigledna, sam omjer UPC se može koristiti u istu svrhu.
Cistanche za poboljšanjefunkciju bubrega
Priznanja
Podržan grantom (#03/10,426-3) Fundaca˜o de Amparo a` Pesquisa do Estado de Sa˜o Paulo – FAPESP.
Otkrivanje: Autori su naveli da nemaju veze ili finansijsku uključenost sa bilo kojom organizacijom ili entitetom koji ima finansijski interes ili je u finansijskoj konkurenciji sa temom ili materijalima o kojima se govori u ovom radu.
Od: 'Procjena albuminurije i njene povezanosti s krvnim tlakom kod pasa s kroničnom bubrežnom bolešćuAngela Bačić1, Marcia M. Kogika1, et.al
-----Veterinar Clin Pathol39/2 (2010) 203–209 c 2010. Američko društvo za veterinarsku kliničku patologiju DOI:10.1111/j.1939-165X.2009.00207.x
Reference
1. Burton C, Harris KP. Uloga proteinurije u napredovanju hroničnog zatajenja bubrega. Am J Kidney Dis. 1996;27:765–775.
2. Remuzzi G. Nefropatska priroda proteinurije. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1999;8:655–663.
3. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, et al. Dugoročni korisni efekti inhibicije enzima koji konvertuje angiotenzin kod pacijenata sa nefrotskom proteinurijom. Am J Kidney Dis. 1992;20:240–248.
4. Williams PS, Fass G, Bone JM. Patologija bubrega i proteinurija određuju progresiju neliječenog blagog/umjerenog kroničnog zatajenja bubrega. QJ Med. 1988;67:343–354.
5. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Procjena povezanosti između početne proteinurije i stope morbiditeta ili smrti kod pasa s prirodnim kroničnim zatajenjem bubrega. J Am Vet Med Assoc. 2005;226:393–400.
6. Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ, et al. Mikroalbuminurija kao prediktor kliničke nefropatije kod dijabetes melitusa zavisnog od insulina. Lancet. 1982; 1: 1430–1432.
7. Mogensens CE, Christensen CK. Predviđanje dijabetičke nefropatije kod pacijenata zavisnih od insulina. N Engl J Med. 1984;311:89–93.
8. Lees GE, Jensen WA, Simpson DF, et al. Perzistentna albuminurija prethodi nastanku očigledne proteinurije kod muških pasa sa X-vezanom naslednom nefropatijom. J Vet Intern Med. 2002;16:353.
9. Grauer GF, Oberhauser EB, Basaraba RJ, et al. Razvoj mikroalbuminurije kod pasa sa srčanom crvi. J Vet Intern Med. 2002;16:352.
10. Vaden SL, Jensen WA, Longhofer SL, et al. Longitudinalno proučavanje mikroalbuminurije kod mekodlakih pšeničnih terijera. J Vet Intern Med. 2001;15:300.
11. Ortega TM, Feldman EC, Nelson RW, et al. Sistemski arterijski krvni pritisak i odnos protein/kreatinin u urinu kod pasa sa hiperadrenokorticizmom. J Am Vet Med Assoc. 1996;209:1724–1729.
12. Cavalcante CZ, Kogika MM, Simoèes DMN, et al. Mikroalbuminurija kod pasa s hiperadrenokorticizmom i odnosom s krvnim tlakom. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
13. Cavalcante CZ, Kogika MM, Santoro ML, et al. Procjena elektroforeze proteina u urinu i albuminurije kod pasa s hiperadrenokorticizmom i povezanost sa sistemskim arterijskim krvnim tlakom. J Vet Intern Med. 2008;22:798–799.
14. Struble AL, Feldman EC, Nelson RW, et al. Sistemska hipertenzija i proteinurija kod pasa sa dijabetesom melitusom. J Am Vet Med Assoc. 1998;213: 822–825.
15. Kogika MM, Cavalcante CZ, Simoèes DMN, et al. Mikroalbuminurija kod pasa sa dijabetes melitusom. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
16. Whittemore JC, Miyoshi Z, Jensen WA, et al. Povezanost mikroalbuminurije i omjera albumina i kreatinina u urinu sa sistemskom bolešću kod mačaka. J Am Vet Med Assoc. 2007;230: 1165–1169.
17. Brown SA, Walton CL, Crawford P, Bakris GL. Dugoročni efekti antihipertenzivnih režima na bubrežnu hemodinamiku i proteinuriju. Kidney Int. 1993;43:1210–1218.
18. Brown SA, Finco DR, Brown CA. Procjena efekata inhibicije enzima koji konvertuje angiotenzin enalaprilom kod pasa sa indukovanom hroničnom bubrežnom insuficijencijom. Am J Vet Res. 2003;64:321–327.
19. Grauer GF, Greco DS, Getzy DM, et al. Efekti enalaprila u odnosu na placebo kao tretman za pasji idiopatski glomerulonefritis. J Vet Intern Med. 2000;14:526–533.
20. Ross LA. Patofiziologija i liječenje sistemske hipertenzije povezane sbubrežna disfunkcija. U: Osborne CA, Finco DR, ur. Nefrologija i urologija pasa i mačaka. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins; 1995:392–399
21. Bartges JW, Willis AM, Polzin DJ. Hipertenzija ibubrežna bolest. Vet Clin North Am Small Anim Pract. 1996;26:1331–1345.
22. Bakker AJ. Detekcija mikroalbuminurije. Analiza krivulje radne karakteristike prijemnika daje prednost omjeru albumina i kreatinina u odnosu na koncentraciju albumina. Diabetes Care. 1999;22:307–313.
23. Harvey JN, Hood K, Platts JK, et al. Predviđanje brzine izlučivanja albumina iz omjera albumin-kreatinin. Diabetes Care. 1999;22:1597–1598.
24. Weir GC, Nathan DM, Singer DE. Standardi njege za dijabetes. Diabetes Care. 1994;17:1514–1522.
25. Sabharwal RK, Singh P, Arora MM, Somani BL, Ambade V. Incidencija mikroalbuminurije kod hipertenzivnih pacijenata. Indijski J Clin Biochem. 2008;23:71–75.
26. Polzin DJ, Osborne CA, Ross S. Hronična bolest bubrega. U: Ettinger SJ, Feldman E, ur. Udžbenik Veterinarske interne medicine. 6th ed. Philadelphia, PA: Saunders; 2005:1767–1785.
27. Brown S, Atkins C, Bagley R, et al. Smjernice za identifikaciju, evaluaciju i liječenje sistemske hipertenzije kod pasa i mačaka. J Vet Intern Med. 2007;21:542–558.
28. Mckinney MM, Parkinson A. Jednostavna, nehromatografska procedura za pročišćavanje imunoglobulina iz seruma i ascitesne tekućine. J Immunol Methods. 1987;96:271–278.
29. Harlow E, Lane D. Antibodies: Laboratory Manual. New York, NY: Cold Spring Harbor Laboratory; 1988: 471–510.
30. Laemli UK. Cepanje strukturnih proteina tokom sastavljanja glave bakteriofaga T4. Priroda. 1970;227:80–685.
31. Pukac LA, Carter JE, Morrisonn KS, et al. Jačanje kolorimetrijskog signala diaminobenzidina u imunoblotingu. Biotechniques. 1997;23:385–388.
32. Olovsson M, Larsson A. Obilježavanje pilećih antitijela biotinom i njihova naknadna upotreba u ELISA i imunohistohemiji. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 1993;16:145–152.
33. Santoro ML, Barbaro KC, Flores da Rocha TR, et al. Simultana izolacija trombocitnog faktora 4 i kompleksa glikoproteina IIb-IIIa iz trombocita kunića i karakterizacija specifičnih pilećih antitijela za njihovo ispitivanje. J Immunol Methods. 2004;284:55–72.
34. Bradford MM. Brza i osjetljiva metoda za kvantifikaciju mikrogramskih količina proteina koristeći princip vezivanja proteina i boje. Anal Biochem. 1976;72:248–254.
35. Lustgarden JA, Wenk RE. Jednostavna, brza, kinetička metoda za mjerenje serumskog kreatinina. Clin Chem. 1972;8:1419–1422.
36. Lima CSP, Bottini PV, Garlipp CR, et al. Preciznost omjera albumina u urinu i kreatinina kao prediktor albuminurije kod odraslih osoba sa srpastim ćelijama. J Clin Pathol. 2002;55:973–975.
37. Jefferson SA, Greene MA, Smith RF, et al. Omjer albumina u urinu i kreatinina - odgovor na vježbanje kod dijabetesa. Arch Dis Child. 1985;60:305–310.
38. Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, et al. Preživljavanje mačaka s prirodno nastalom kroničnom bolestizatajenje bubregaje povezana sa ozbiljnošću proteinurije. J Vet Intern Med. 2006;20:528–535.
39. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Povezanost između početnog sistoličkog krvnog tlaka i rizika od razvoja uremičke krize ili uginuća kod pasa s kroničnim zatajenjem bubrega. J Am Vet Med Assoc. 2003;222: 322–329.
40. Cowgil L, Kallet A. Sistemska hipertenzija. U: Kirk R, ur. Trenutna veterinarska terapija IX. Philadelphia, PA: WB Saunders; 1986:360–364.
41. Ruilope LM, Rodicio JL. Klinički značaj proteinurije i mikroalbuminurije. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1993;2:962–967.
42. Ritchie CM, Mcnight JA, Hadden DR, et al. Prevalencija hipertenzije i albuminurije u klinici za dijabetes u nastavnoj bolnici. Diabetes Res Clin Pract. 1995; 27:69–76.
43. Campos-Pastor MM, Escobar-Jimenez F, Mezquita P, et al. Faktori povezani s mikroalbuminurijom kod dijabetes melitusa tipa 1: studija poprečnog presjeka. Diabetes Res Clin Pract. 2000;48:43–49.
44. Hermans MP, Birchard SM, Colin I, et al. Dugotrajno smanjenje mikroalbuminurije nakon 3 godine inhibicije angiotenzin konvertujućeg enzima perindoprilom kod hipertenzivnih pacijenata liječenih inzulinom s dijabetesom. Am J Med. 1992;92(Suppl 4B):102S–107S.
45. Mathiesen ER, Hommel E, Giese J, et al. Djelotvornost kaptoprila u odgađanju nefropatije kod normotenzivnih inzulinsko zavisnih dijabetičara s mikroalbuminurijom. BMJ. 1993;303:81–87.
46. Marre M, Chatelier G, Leblanc I, et al. Prevencija dijabetičke nefropatije enalaprilom u normotenzivnih dijabetičara s mikroalbuminurijom. BMJ. 1999;302:210–216.
47. Anderson S, Rennke HG, Brenner BM. Terapeutska prednost pretvaranja inhibitora enzima u zaustavljanju progresivnebubrežna bolestpovezana sa sistemskom hipertenzijom kod pacova. J Clin Invest. 1986;77:1993–2000.
