Istraživanje efekata feniletanoidnih glikozida Cistanche na nealkoholnu masnu bolest jetre na osnovu mrežne farmakologije i ćelijskih eksperimenata

Abstract

Cilj: Istražiti meliorativne efekte Cistanche feniletanoidnih glikozida na nealkoholnu masnu bolest jetre (NAFLD).

Metode: Mrežna farmakologija je korištena za predviđanje potencijalnih mehanizama Cistanche feniletanoidnih glikozida protiv NAFLD-a. In vitro NAFLD model je uspostavljen indukcijom HepG2 ćelija slobodnim masnim kiselinama (FFA). Vijabilnost ćelija je procijenjena pomoću CCK-8 testa; Bojenje uljem crvenom O je korišteno za promatranje akumulacije lipida; Nivoi triglicerida (TG) i ukupnog holesterola (TC) mjereni su korištenjem kompleta za analizu; JC-1 bojenje je korišteno za procjenu potencijala mitohondrijalne membrane; intracelularni nivoi ROS-a su procenjeni sa DCFH-DA fluorescentnom sondom; apoptoza je otkrivena Hoechst 33342 bojenjem; a ekspresija proteina TNF-, PI3K, Akt i Bax mjerena je Western blot-om.

Rezultati: Identifikovano je deset aktivnih jedinjenja i 77 potencijalnih meta povezanih sa anti-NAFLD efektima, sa ključnim ciljevima uključujući TNF, NFKB1 i TLR4. Jedinjenja su pokazala dobar afinitet vezivanja za mete, posebno za TNF. U poređenju sa modelnom grupom, Cistanche feniletanoidni glikozidi značajno su smanjili akumulaciju lipida izazvanu FFA u HepG2 ćelijama (P < 0,01), sniženi nivoi intracelularnog TG, TC i ROS (P < 0,01), obnovljen potencijal mitohondrijske membrane, smanjena ekspresija mitohondrijalnog proteina, smanjena ekspresija proteina mitohondrije < 0,01 0,05) i smanjena ekspresija TNF-, PI3K i Akt proteina (P < 0,05, P < 0,01).

Zaključak: Cistanche feniletanoidni glikozidi ispoljavaju anti-NAFLD efekte poboljšavajući akumulaciju lipida izazvanu FFA, mitohondrijalnu disfunkciju, oksidativni stres i apoptozu u HepG2 ćelijama. Ovi efekti mogu biti povezani sa signalnim putem TNF/PI3K/Akt.

Ključne riječi: Cistanche feniletanoidni glikozidi; nealkoholna masna bolest jetre (NAFLD); metabolizam lipida; oksidativni stres;apoptoza; TNF/PI3K/Akt signalni put; mrežna farmakologija; ćelijski eksperiment

Cistanche Benefits in depression

Cistanche feniletanoidni glikozidi

catalog cistanche

Ekstrakt Cistanche visokog sadržaja na prodaju

Kontaktirajte nas kupite sada

1. Uvod

Nealkoholna masna bolest jetre (NAFLD) je kronična bolest jetre koju karakterizira steatoza jetre bez prekomjerne konzumacije alkohola. Prevalencija u Kini dostigla je 32,9%. Njegova patogeneza uključuje više mehanizama, uključujući inzulinsku rezistenciju, oksidativni stres i neravnotežu crijevne mikrobiote. Klinički simptomi uključuju umor, nelagodu u području jetre i bol u trbuhu, au teškim slučajevima može napredovati u nealkoholni steatohepatitis (NASH).

Trenutno su intervencije u načinu života primarni tretman za NAFLD. Iako je FDA odobrila prvi lijek za NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), 2024. godine, on ima potencijalne štetne efekte kao što su ozljeda jetre i kardiovaskularni rizici. Stoga postoji hitna potreba za pronalaženjem sigurnih i efikasnih tretmana za NAFLD.

Echinacoside in cistanche 7

Tradicionalna kineska medicina (TCM), sa svojim karakteristikama više komponenti, višestrukim ciljevima i višestrukim putevima, dobro je usklađena sa složenom patogenezom NAFLD-a i nudi jedinstvene prednosti u liječenju.

Cistanche deserticolaiCistanche tubulosasu ljekovite biljke iz porodice Orobanchaceae, navedene uShennong Bencao Jing. Njihove mesnate stabljike, bogate ljuskama, tradicionalno se koriste za toniziranje jetre i bubrega, obnavljanje esencije i krvi i vlaženje crijeva. Primarne aktivne komponente - feniletanoidni glikozidi - imaju protuupalna svojstva, snižavanje lipida i hepatoprotektivna svojstva. Međutim, još uvijek nedostaju sistematske studije o njihovom djelovanju na NAFLD.

Ova studija ima za cilj analizirati farmakološku osnovu i potencijalne mehanizme Cistanche feniletanoidnih glikozida u liječenju NAFLD-a koristeći mrežnu farmakologiju, te dalje istražiti njihove mehanizme kroz ćelijske eksperimente, pružajući teorijsku osnovu za razvoj novih lijekova.

Echinacoside in cistanche 11

2. Materijali

2.1 Mrežni farmakološki alati

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatika: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB PDB: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 Ćelijska linija

HepG2 ljudske ćelije raka jetre, kupljene od Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reagensi i lijekovi

Cistanche feniletanoidni glikozidi (serija br.. 201610, čistoća veća ili jednaka 80%, koji sadrže 44,5% ehinakozida i 16,1% verbaskozida), nabavljeni od Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Matična otopina pripremljena na 6,40 mg/ml, filtrirana i čuvana na temperaturi od 6,40 mg/m.

Dodatni reagensi uključuju:

Fetalni goveđi serum (FBS), DMEM medij, penicilin-streptomicin, komplet za bojenje Oil Red O, BCA komplet, komplet za detekciju ROS, Hoechst 33342, BSA-V, natrijum oleat, natrijum palmitat, kompleti za TG i TC test, CCK-8{1} membranski potencijal, CCK-8{1} membranski potencijal, CCK-8{1} assay antitijela za TNF-, PI3K p85, Akt, Bax, -aktin i sekundarna HRP-konjugirana antitijela.