Ispitivanje dnevnih varijacija i spolnih razlika u neurofiziologiji hipokampusa i prostornom pamćenju, 2. dio

Celoćelijski patch-clamp snimci

Svi podaci su prikupljeni iz rezova koronalnog hipokampusa tokom ZT 2–6 (dan) ili ZT 13–17 (noć) na 32 stepena u standardnom ACSF-u koji sadrži sljedeće (u mM): 125 NaCl, 2,5 KCl, 1,25 Na2PO4, 2 CaCl2, 1 MgCl2, 25 NaHCO3 i 25 glukoze, sa mjehurićima 95% O2/5% CO2.

Koronalni hipokampus je važna regija mozga koja igra ključnu ulogu u procesu ljudskog pamćenja.

Istraživanja pokazuju da je koronalni hipokampus kritičan za pohranjivanje i vraćanje dugoročnih sjećanja. To je ono što ljudi zovu "putnik kroz vrijeme" koji može vratiti ljude u prošla iskustva i iskustva. Koronalni hipokampus igra važnu ulogu u našem identitetu, emocionalnoj kontroli, samorazumijevanju i međuljudskim odnosima.

Naše pamćenje se vremenom pogoršava, ali postoji nekoliko stvari koje možemo učiniti da poboljšamo svoje pamćenje. Prije svega, važno je zadržati pozitivan stav jer to može smanjiti stres i poboljšati pamćenje. Drugo, više vježbe i ishrane mogu pomoći u promicanju funkcije koronarnog hipokampusa i biti korisni za fizičko zdravlje. Konačno, trening pamćenja i korištenje alata kao što su notepad također mogu pomoći u poboljšanju pamćenja.

Sve u svemu, koronalni hipokampus igra nezamjenjivu ulogu u ljudskom pamćenju i kognitivnim performansama. Stoga treba obratiti pažnju na njegovu ulogu i održavati je u zdravom stanju koliko god je to moguće. Preduzimajući proaktivne korake, možemo poboljšati svoje pamćenje i usporiti njegovo propadanje kako bismo mogli nastaviti razmišljati jasno i živjeti smislene živote. Vidi se da moramo poboljšati pamćenje, a Cistanche deserticola može značajno poboljšati pamćenje, jer i Cistanche deserticola može regulisati ravnotežu neurotransmitera, kao što je povećanje nivoa acetilholina i faktora rasta. Ove supstance su veoma važne za pamćenje i učenje. Osim toga, meso također može poboljšati protok krvi i promovirati isporuku kisika, što može osigurati da mozak dobije dovoljno hranjivih tvari i energije, čime se poboljšava vitalnost i izdržljivost mozga.

Kliknite znati načine za poboljšanje funkcije mozga

Snimci CA1 piramidalnih neurona dobijeni su pomoću blind patch tehnike. Ukratko, patchpipette su postavljene na medijalni ili lateralni kraj područja CA1 (u zavisnosti od toga da li je kriška bila iz lijeve ili desne hemisfere) na dubini od; 50-150 mM, primijenjen je pozitivan pritisak dok je pipeta polako napredovala, medijalno ili bočno kroz sloj piramidalnih ćelija sve dok brzo povećanje otpora pipete nije ukazalo na kontakt sa neuronom, u kom trenutku je oslobođen pozitivan pritisak, dobijeno je čvrsto zaptivanje (.1 GX) i primenjen je blagi negativan pritisak da bi se postigla konfiguracija zakrpa cele ćelije.

Podaci su dobijeni korišćenjem pojačala Multiclamp700B, digitalizatora Axon Digidata 1440A i 1550B i softvera pClamp10/11 (Molecular Devices). Patch pipete (BF150–086; Sutter Instruments) su izvučene na Sutter P{{7} horizontalni instrument za povlačenje )na otpor između 2,5 i 5 MV. Ćelije su dijalizirane 5 minuta prije eksperimentalnog snimanja. Ćelije korištene za analizu imale su otpor pristupa, 30 MV koji se nije povećao za .20% tokom trajanja svakog 5-min eksperimenta.

Za eksperimente sa naponskom stezaljkom, sve ćelije su držane na 70 mV, a signali su filtrirani na 5 kHz i digitalizirani na 10 kHz. Eksperimenti IPSC-a koristili su otopinu s pipetom koja sadrži (u mM): 140 CsCl, 10 EGTA, 5 MgCl2, 2 NaATP, 0,3 Na-GTP, 10 HEPES, 0,2% biocitin (pH 7,3, 290 mm) i 5} QX{ (antagonist natrijumovih kanala) dodan u vreme upotrebe. IPSC su farmakološki izolovani perfuzijom 10 mM NBQX (antagonist AMPAR, HelloBio) i 5 mM CPP (NDMAR antagonist, Hello Bio).

EPSCseksperimenti su koristili otopinu za pipetu koja sadrži (inmM): 100 CsOH, 100 glukonsku kiselinu (50%), 0,6 EGTA, 5MgCl2, 2 Na- ATP*3H2O, 0,3 Na-GTP, 40 HEPES, 7 fosfokreatin, biocitin (0,2%) i 5 QX-314 dodati u vrijeme upotrebe. EPSC su farmakološki izolovani perfuzijom u kupatilu od 10 mM gabazina (GABAAR antagonist, Hello Bio). Odvojeni eksperimenti za mjerenje minijaturnih IPSC i minijaturnih EPSC (mIPSC/mEPSC) su snimljeni kao gore, uz dodatak 0,5 mM tetrodotoksina-gTTXod napona inhibitor, Tocris).

Za eksperimente sa strujnim stezanjem, signali su filtrirani na 10 kHz i digitalizirani na 20 kHz. Otopina za patch pipetu koja sadrži (u mM): 135 K-glukonat, 2 MgCl2, 0.1 EGTA, 10 HEPES, 4 KCl, 2 Mg-ATP, 0,5 Na-GTP, 10 fosfokreatina i biocitin (0,2%; pH 7,3, 310 mOsm i 2–4 MV). Ekscitabilnost neurona je procijenjena ubrizgavanjem progresivnih koraka depolarizujuće struje iz mirovanja (0–500 pA, D 20 pA) i brojanjem broja akcionih potencijala koji se aktiviraju tokom svakih 1000 ms trenutni korak.

Nagib odziva je dobijen izračunavanjem linearnog odnosa između frekvencije paljenja i injektirane struje između {{0}} do 400- pAsteps. Također je izmjerena frekvencija paljenja maksimalnog akcijskog potencijala (AP) (max) i struja pri kojoj se pojavio max (Imax). Sag je mjeren kao amplituda (mV) vršnog napona od injekcije hiperpolarizirajuće struje koja je postigla stabilan membranski potencijal od 90-93 mV. Ulazni otpor (MX) je mjeren kao nagib strujnog odgovora na seriju hiperpolarizujuće struje injekcije (150 do 0 pA, D 50 pA).

Reobaza je definirana kao minimalna struja potrebna za izazivanje jednog AP. Za analizu svojstava akcionog potencijala korišćeni su pojedinačni AP koje je selikovala reobaza (tablice 1, 2). AP amplituda je definirana kao razlika napona između AP praga i njegovog vrha. Prag je definiran kao napon (mV) pri kojem je AP prvi izvod (dV/dt) premašio 20 mV/s. Vrijeme porasta AP je vrijeme (ms) da AP dostigne 90% svoje amplitude vrha od 10% svog vrha. Vrijeme opadanja je vrijeme između 90% i 10% amplitude AP vrha. Polovina širine je vrijeme (ms) između polovičnih amplituda porasta i opadanja AP valnog oblika. Nakon hiperpolarizacije (AHP) bila je razlika između početne i najhiperpolarizovanije tačke koja se javlja unutar 3 ms nakon praga AP za brzi AHP (fAHP) i 10–50 ms nakon praga AP za srednji AHP (mAHP).

Vrhunski porast i pad AP definisani su kao maksimalni nagib (DmV/Dms) za porast i opadanje AP, respektivno. Osnovni membranski potencijal je izračunat kao srednji napon tokom 1400-ms sweep tokom 0-pA koraka. Inicijalni eksperimenti su rađeni u odsustvu sinaptičkih blokatora kako bi se utvrdilo kako spol i doba dana doprinose ekscitabilnosti piramidalnog neurona CA1 u intaktnom krugu. Da bi se počeo procjenjivati ​​utjecaj sinaptičke transmisije na povećanu noćnu ekscitabilnost, proveden je poseban eksperiment u prisustvu antagonista GABAA, gabazina (10 mM) i glutamatergičnih antagonista, NBQX (10 mM) i CPP (5 mM) .

Imunohistohemija

Da bi se potvrdilo da su ćelije snimljene za mjerenje postsinaptičkih struja CA1 piramidalne ćelije, sve ćelije su ispunjene biocitinom najmanje 20 min. Rezovi koji sadrže popunjene ćelije su fiksirani u 4% paraformaldehidu najmanje 24 h, zatim isprani 3 10 min u PBS-u i inkubirani 2-3 sata na sobnoj temperaturi u TBS rastvoru koji sadrži 10% NDS, 3% BSA, 1% glicin, 0,4 % Triton X-100 i streptavidin-488(1:1000).

Kriške su zatim isprane 3 10 min u PBS-u i postavljene na staklene stakalce i pokrovne stakalce sa ProLongGold Antifade medijumom za montažu koji sadrži DAPI. Slajdovi su vizualizirani na fluorescentnom mikroskopu BZ-X700 (Keyence). Sve ćelije koje se ne mogu klasifikovati kao CA1 piramidalne ćelije na osnovu lokacije i morfologije isključene su iz analize.

Analiza i statistika
Podaci su analizirani i vizualizirani korištenjem SPSS (verzija 27/28) i softvera Prism-GraphPad. Pretpostavke parametarskih testova, uključujući normalnost i homogenost varijanse su procijenjene, a ako su narušene, podaci su transformirani ili su korišteni neparametarski testovi. Osim ako nije drugačije navedeno, značaj je pripisan na p, 0.05. Sažetak svih statističkih testova je dat u tabeli ExtendedData 1-1.

Memorija lokacije objekta

Podaci OLM-a analizirani su korištenjem nezavisne dvosmjerne ANOVA sa vremenom u danu i spolom kao nezavisnim varijablama i indeksom diskriminacije kao zavisnom varijablom (slika 1D). Pearsonova korelacija je korištena za procjenu odnosa između ukupnog vremena istraživanja i rezultata indeksa diskriminacije, a analiza nepredviđenih okolnosti korištena je za određivanje distribucije dugog i niskog vremena istraživanja po spolu i dobu dana (ExtendedData Fig. 1-1B) .

Terenski snimci

Ulazno-izlazni podaci analizirani su korištenjem linearnog mješovitog modela sa fEPSP nagibom u funkciji vremena dana, pola i intenziteta stimulacije. Za LTP eksperimente, fEPSP nagibi su normalizirani na osnovnu liniju odgovora, a odgovori dobijeni tokom posljednjih 10 minuta 40-minuta nakon HFS perioda snimanja su analizirani korištenjem trosmjerne ANOVA sa ponovljenim mjerenjima (RM-ANOVA).

Elektrofiziologija cijele ćelije patch-clamp

Postsinaptičke struje (inhibitorne i ekscitatorne) su automatski otkrivene od 5-minutnog snimanja pomoću pClampovog pretraživanja šablona događaja, a zatim ručno pregledane radi otkrivanja lažnih događaja. Amplitude i intereventni interval (IEI) analizirani su korištenjem generalizirane jednadžbe procjene (GEE) koja je omogućila procjene parametara s modelima usrednjenih po populaciji, uzimajući u obzir korelacije između ponovljenih mjera unutar ispitanika (Reed i Kaas, 2010; Cook et al., 2016).

GEE model je specificirao nestrukturiranu radnu korelaciju matrice strukture, subjekat efekat ćelije i unutar-subjekt efekat postsinaptičkih događaja. Sirovi podaci su imali značajnu pozitivnu iskrivljenost sa ekstremnim vrijednostima i stoga su odrezani od gornjih i donjih outliera (10%), nakon čega je slijedila log transformacija u slučaju podataka amplitude ili log 1 1 transformacija u slučaju IEI podataka , da ispuni pretpostavke normalnih distribucija prije analize.

Svi podaci o strujnim klemama analizirani su pomoću EasyElectrophysiology (Easy Electrophysiology, RRID: SCR_021190), softverskog paketa koji koristi Neo (Garcia etal., 2014). Akcioni potencijali su prebrojani pomoću modula za brojanje akcionog potencijala sa zadanim algoritmom AutoThreshold Spike. RM-ANOVA je korištena za analizu akcionih potencijala u trenutnim koracima u kojima podaci nisu narušili pretpostavke linearnosti i normalnosti: 160–400 pA. Sva ostala svojstva membrane (tablice 1, 2) analizirana su korištenjem dvosmjerne ANOVA sa nezavisnim varijablama doba dana i spola. Svi podaci o strujnim klemama su stratificirani po položaju duž prednje-posteriorne ose prije finalne statističke analize.

Rezultati

Razlike između dana i noći u OLM performansama zavise od pola

Da bismo ispitali učinak seksa na cirkadijalne ritmove učenja i pamćenja, koristili smo test memorije lokacije objekta (OLM), koji se oslanja na mišjevu tendenciju da istražuje objekte na novim lokacijama, kako bismo procijenili prostornu memoriju hipokampusa (Barker i Warburton, 2011; Takahashiet al. ., 2013; Chao et al., 2016). Iako su prijavljene cirkadijalne i dnevne razlike u performansama na OLM (Takahashi et al., 2013; Snider et al., 2016), uticaj pola na dnevne varijacije u performansama OLM i dalje je slabo shvaćen.

Otkrili smo da OLM performanse variraju u zavisnosti od doba dana; međutim, obrazac dnevne razlike u performansama se razlikovao između spolova (p=0.023, dvosmjerna ANOVA interakcija).

Dok su mužjaci imali bolje rezultate noću u poređenju sa danom, kao što se i očekivalo (p {{0}}}}.028, jednostavni glavni efekti upoređivanja dnevne noći kod mužjaka; slika 1D), ženke miševa su radile bolje tokom dana u poređenju sa noć (p=0.004, jednostavni glavni efekti upoređujući dan i noć kod ženki; slika 1D). Nije bilo efekta doba dana ili spola na ukupno vrijeme istraživanja (p=0.926 i 0.936, dvosmjerni ANOVA glavni efekti; prošireni podaci slika 1-1A). Nije bilo veze između ukupnog istraživanja i DIscores (r(52)=0.053, ns p=0.704, Pearsonova korelacija; prošireni podaci slika 1-1B).

Magnituda LTP noću je veća od dana, bez obzira na spol
Dugotrajno potenciranje (LTP) se smatra ćelijskim korelatom učenja i pamćenja. LTP na sinapsama CA3-CA1 je veći noću u poređenju sa danom kod malemiša (Chaudhury et al., 2005; Besing et al., 2017; Davis et al., 2020), ali prema našim saznanjima, nema objavljeni izvještaji o efektima doba dana na LTP veličinu kod odraslih ženki miševa. S obzirom na naše otkriće da dnevne razlike u performansama na testu pamćenja ovisno o hipokampu ovise o spolu, zatim smo pokušali utvrditi utječe li spol na dnevne razlike u LTP-u.

Prvo, da bismo procijenili snagu bazalne sinaptičke transmisije na sinapsama CA{{0}}CA1, generirali smo I/O krivulje mjerenjem nagiba fEPSP-a od CA1 stratum radiatum kao odgovora na Schafferovu kolateralnu stimulaciju kroz niz sve većih intenziteta stimulacije ( 0.2–200 mA, D 10 mA) tokom dana i noći kod mužjaka i ženki miševa (sl. 2A,B). Iako ni spol ni doba dana nisu imali značajan utjecaj na bazalnu sinaptičku transmisiju u testiranom rasponu stimulusa (p=0.552 i 0,981, LMM glavni efekat), postojala je značajna interakcija intenziteta spola uz stimulaciju ( p, 0,001, LMM; sl. 2A, B).

Muškarci su imali veće fEPSP nagibe u poređenju sa ženama samo na 180,190 i 200mA, bez obzira na doba dana (p =0.041, 0.043 i 0.035, respektivno; jednostavni glavni efekti upoređujući mužjake i ženke u svim intenzitetima stimulansa; slika 2A). Sve u svemu, ovi rezultati pokazuju da doba dana ne utječe na bazalnu sinaptičku transmisiju i da seks utječe na odgovore samo pri najvećim intenzitetima stimulacije.

Zatim smo procijenili sinaptičku plastičnost u CA3-CA1 sinapsi mjerenjem LTP-a kao odgovor na kratku, visokofrekventnu stimulaciju (HFS; slika 2C, D). Kao što je ranije objavljeno, veličina LTP je bila veća noću u poređenju sa danom i kod mužjaka i kod ženki miševa (p =0.003, trosmjerna RM-ANOVA; slika 2C, D); međutim, nije bilo značajnog efekta ili interakcije sa seksom. Zajedno, ovi nalazi sugeriraju da doba dana utječe na sinaptičku plastičnost kod mužjaka i ženki miševa, bez utjecaja na bazalnu sinaptičku snagu.

Sinaptička inhibicija na CA1 piramidalne ćelije tokom dana je veća nego noću, bez obzira na spol

Promjene u LTP mogu se pripisati sinaptičkim mehanizmima i/ili intrinzičnim promjenama ekscitabilnosti. Stoga smo prvo pokušali utvrditi da li doba dana i spol utječu na inhibitorni i ekscitatorni sinaptički prijenos na CA1 piramidalne neurone. Da bismo ispitali sinaptičku inhibiciju na CA1 piramidalne ćelije, izmjerili smo amplitudu i učestalost spontanih IPSC-a (sIPSC) korištenjem naponske stezaljke cijele ćelije kod mužjaka i ženki miševa tokom dana i noći (slika 3A). Otkrili smo da je sIPSC interevent interval (IEI) tokom dana kraći nego noću, bez obzira na spol (doba dana: p=0.033, GEE; slika 3A, C), što ukazuje na veću učestalost inhibitornih događaja tokom dana.

Amplituda sIPSC-a tokom dana bila je veća nego noću i kod muškaraca i kod žena (doba dana:p=0.008, GEE; slika 3A, E). Ova povećana dnevna učestalost i amplituda sIPSC-a sugeriraju jaču inhibiciju CA1 piramidalnih neurona tokom dana u odnosu na noć.

Jača sinaptička inhibicija tokom dana može nastati zbog povećanja presinaptičkog oslobađanja GABA, ili zbog povećane postsinaptičke funkcije GABAAR. Da bismo razlikovali ove mogućnosti, izmjerili smo minijaturni IPSCS (mIPSC) u prisustvu tetrodotoksina blokatora natrijumovih kanala (TTX) kod mužjaka i ženki miševa tokom dana i noći (slika 4A). Iako smo otkrili da ni spol (p=0.392,GEE) ni doba dana (p=0}.760, GEE) nisu imali statistički značajan uticaj na mIPSC IEI, događaji kod muškaraca su imali tendenciju ka ispoljavanju razlika dan-noć (p= 0.068, interakcija između spola i doba dana, GEE; slika 3C).

Nedostatak razlika dan-noć kod žena ukazuje na to da su efekti u doba dana na sIPSC-e vjerovatno vođeni lokalnim interneuronskim akcionim potencijalom. Kod muškaraca, srednje vrijednosti između dana i noći razlikovale su se za;12 ms (srednja vrijednost i SEM: muški dan, 98.24 61.05 ms; muška noć, 85.78 6 1.04 ms), što sugerira da je akcija potencijalno nezavisno inhibiciono oslobađanje vezikula može biti češće noću (slika 3C). Kada smo ispitali amplitudu mIPSC, neočekivano smo otkrili značajnu interakciju između doba dana i spola (p=0.038, GEE), pri čemu su amplitude kod ženki veće od muškaraca samo tokom dana (p {{16} }.006, Wald x2 poređenja u paru; Slika 4E); međutim, ova;2-pA razlika vjerovatno nije biološki relevantna (ženki-dan: 34.68 6 1.01 pA; muški-dan: 32.67 6 1.02 pA, prosječno 6 SEM) .

Uzeti zajedno, ovi spontani i minijaturni IPSC podaci sugerišu da je inhibicija zavisna od akcionog potencijala, ali ne i spontana fuzija vezikula, na CA1 piramidalne ćelije veća tokom dana u poređenju sa noću i kod muškaraca i kod žena.

Sinaptička ekscitacija na CA1 piramidalne ćelije zavisi od pola

Zatim smo željeli utvrditi da li je spol i doba dana utjecao na spontani ekscitatorni sinaptički unos na CA1 piramidalne neurone. Prvo smo izmjerili spontane EPSC (sEPSC) koristeći snimke naponske stezaljke cijele ćelije (slika 5A). Iako nije bilo značajnog glavnog efekta doba dana na amplitudu sEPSC-a (slika 5E), bez obzira na spol (p=0.371, GEE), statistički trend za značajan glavni efekat vremena- dan je pokazao da sEPSC IEI zabilježen tokom dana može biti veći od onih zabilježenih noću (p=0.052,GEE), što sugerira veću učestalost ekscitatornih događaja noću (slika 5C). Sve u svemu, otkrili smo da žene imaju više ekscitatornog sinaptičkog unosa, sa većim sEPSCamplitudama i kraćim IEI u poređenju sa muškarcima (p=0.022 i 0.020, respektivno, glavni efekat pola, GEE; slika 5C, E).

Zatim smo ponovili ove eksperimente u prisustvu tetrodotoksina blokatora natrijumovih kanala (TTX) i izmerili minijaturne spontane ekscitatorne sinaptičke struje (mEPSC) na CA1 piramidalnim neuronima (slika 6A). Amplituda mEPSC nije varirala u zavisnosti od pola ili vremena. of-day(p= 0.227 i p= 0.150, glavni efekat pola i doba dana, respektivno, GEE; slika 6E); međutim, varijacije dan-noć u mEPSC IEI su ovisile o spolu (p= 0.021, interakcija spola po danu, GEE; slika 6C). Kod mužjaka, mEPSC IEI su bili kraći noću nego tokom dana (p= 0.002, Wald x2 poređenje u paru), što ukazuje na veću učestalost ekscitatornih događaja noću kod mužjaka miševa i stoga vjerovatno povećanje vjerovatnoće presinaptičkog oslobađanja; međutim, nije bilo značajne razlike dan-noć kod ženki (p= 0.765, Wald x2 poređenje u paru; slika 6C).

Uzeti zajedno, ovi rezultati sugeriraju da trend ka povećanju noćne sEPSC frekvencije (posebno kod žena) ovisi o akcionom potencijalu. Međutim, kod muškaraca, blokiranje akcionih potencijala otkriva noćno povećanje frekvencije koje nije viđeno u ovim EPSC-ima.

CA1 piramidalni neuroni su podražljiviji noću

Općenito, naša zapažanja sugeriraju da je sinaptička inhibicija veća noću, a sinaptička ekscitacija veća tokom dana; stoga smo zatim željeli utvrditi da li ova suprotna dnevna varijacija u sinaptičkom ekscitatornom i inhibitornom inputu rezultira dnevnim varijacijama ekscitabilnosti piramidalnog neurona CA1. U tu svrhu, zakrpili smo CA1 piramidalne ćelije u režimu strujnog stezanja sa netaknutim kolom (tj. u odsustvu sinaptičkih antagonista) i bez stezanja potencijala ćelijske membrane. Ubrizgali smo sve veće količine struje depolarizacije (0–500 pA, D 20 pA, 1000- ms trajanje) u piramidalne neurone i mjerili broj izazvanih akcionih potencijala.

Podaci su prikupljeni od neurona u cijeloj anteriorno-posteriornoj osi hipokampusa. Ranije objavljene studije otkrile su elektrofiziološku raznolikost u CA1 piramidalnim neuronima koji su zavisni od položaja preko osi (Spruston, 2008; Marcelin et al., 2012; Dougherty et al., 2012, 2013; Hönigsperger et al., 2015, 201 i John; Malik i sur., 2016; Milior i sur., 2016); stoga smo odlučili da uzmemo u obzir ovaj faktor tako što smo sve neurone klasifikovali kao "prednji" ili "posteriorni" na osnovu anatomije koronalnog preseka (Allen referentni atlas sa https://atlas.brain-map.org/; slika 7A).

Kada smo anteriorno-posteriornu osovinu uključili kao faktor u naš početni ANOVA model koji procjenjuje nekoliko akcionih potencijala po trenutnom koraku, otkrili smo da je najveći faktor koji doprinosi regija (p= 0.005, glavni efekat, četvorosmerni RM-ANOVA). Dodatno, nađene su značajne regionalne razlike za ulazni otpor (A: 64.27 6 1.95 MX, P:75.90 6 2.47 MX, p, 0,001, trosmjerna ANOVA), reobaza (A : 146.69 6 7.50 pA, P: 112.32 6 6.10 pA, p, 0,001, trosmjerna ANOVA) i Imax, ili struja pri kojoj su neuroni ispalili na maksimalnoj frekvenciji (A: 417.{101} {23}}.29 pA P: 386.90 610.82 pA, p= 0.047, trosmjerna ANOVA).

Ove razlike između prednjih i stražnjih neurona usklađene su s prethodno objavljenim studijama koje su otkrile raznolikost između dorzalnih i ventralnih CA1 piramidalnih neurona. Dok nam naša priprema koronalnog kriška nije omogućila da zaista izoliramo ventralni CA1, stražnji dijelovi će vjerovatnije uključiti neke ventralne CA1 piramidalne neurone, mi. otkrili su da stražnji neuroni imaju svojstva u skladu s prethodno objavljenim podacima u ventralCA1 piramidalnim neuronima, dok su prednji neuroni slični dorzalnim piramidalnim neuronima (Dougherty et al., 2012; Malik et al., 2016).

For more information:1950477648nn@gmail.com