Efekti parodontalnog liječenja kod pacijenata sa parodontitisom i zatajenjem bubrega: pilot studija Ⅰ
Jun 25, 2024
sažetak:Parodontitis ihronična bolest bubregasu obojehronične upalne bolestii dijele neke zajedničke faktore rizika. Ova 3-mjesečna pilot studija imala je za cilj da razjasni da li je nekirurška parodontalna terapija korisna u kliničkim, biohemijskim i mikrobiološkim stanjima kod pacijenata sa parodontitisom i zatajenjem bubrega.Zatajenje bubregapacijenti sa umjerenim do teškim parodontitisom su regrutovani iz dvije bolnice. U liječenoj grupi je primijenjena nekirurška parodontalna terapija, a kontrolna grupa je dobila samo upute o oralnoj higijeni. Procjena ishoda obavljena je 1 i 3 mjeseca nakon tretmana. Za analizu podataka na nivou pacijenta korišteni su neparametarski testovi. Procjene na nivou parodontalne lokacije analizirane su Studentovim t-testom i uparenim t-testom. Statistička značajnost je postavljena na p-vrijednost < 0.05. Studiju je završilo ukupno 11 ispitanika. Nije bilo značajne razlike između grupa u mortalitetu od svih uzroka,kardiovaskularni događaji, infekcije, sistemski parametri i serumski biomarkeri. U poređenju sa kontrolnom grupom, klinički paradontalni parametri, nivo interleukina-1 (IL-1) gingivalne crevikularne tečnosti i parodontalni patogeni pokazali su značajno poboljšanje u liječenoj grupi. Nehirurško parodontološko liječenje nije promijenilo sistemske ishode kod pacijenata sa zatajenjem bubrega, ali je promijenilo lokalno mikrookruženje.
NOVE BILJE ZAPARODONTIS I HRONIČNA BOLESTI BUBREGA
Ključne riječi: nekirurško parodontalno liječenje; bubrežna dijaliza; zatajenje bubrega
1. Uvod
Parodontitis je kronična upalna bolest koja uzrokuje gubitak parodontalnog tkiva bakterijskom infekcijom [1]. Parodontalni patogeni, kao što su Porphyromonas gingi valis (P. gingivalis), Treponema denticola (T. denticola) i Tannerella forsythia (T. forsythia), koji se akumuliraju na površini zuba mogu ne samo izazvati lokalnu već i sistemsku upalnu reakciju [2,3]. Izazivanje sistemske produkcije proinflamatornih citokina porijeklom iz parodontalne regije može također pogoršati ozbiljnost sistemskih bolesti uključujući kardiovaskularne bolesti (KVB), dijabetes, hroničnu bolest bubrega (CKD), reumatoidni artritis, hroničnu opstruktivnu bolest pluća (KOPB) itd. [4].
CKD karakterizira oštećenje bubrežne funkcije i s tim povezane komplikacije [5]. Završna bubrežna bolest (ESRD), najteži oblik CKD, definiše se kao pacijenti sa procijenjenom brzinom glomerularne filtracije (eGFR) < 15 mL/min na 1,73 m2 i potrebom za redovnom dijalizom [5,6]. Visoka prevalencija CKD opterećuje finansijske izdatke i zdravstveni sistem na Tajvanu i širom svijeta [7]. CKD je povezana s perzistentnom i kroničnom sistemskom upalom koja povećava rizik od KVB, posebno kod pacijenata sa dijabetesom [8]. U međuvremenu, KVB je najčešći uzrok smrtnosti kod pacijenata sa CKD.
Povezanost između parodontitisa i CKD prijavljena je u posljednjoj deceniji [9,10]. Obje bolesti imaju kronične upalne karakteristike i dijele neke zajedničke faktore rizika [10]. Povišeni sistemski inflamatorni citokini, kao što su interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), C-reaktivni protein (CRP) i faktor nekroze tumora- (TNF-), koje se mogu pripisati parodontitisu, dokumentovane su prethodnim studijama [11,12]. To može uzrokovati vaskularnu endotelnu disfunkciju i daljnje kardiovaskularne događaje [13,14]. Nedavni konsenzus izvještaj sugerira da parodontalno liječenje može smanjiti sistemski inflamatorni odgovor i incidencu kardiovaskularnih događaja [13].
Do sada su objavljene ograničene studije randomiziranog kontroliranog kliničkog ispitivanja (RCT) koje uspoređuju ishode kod pacijenata s ESRD nakon nekirurškog parodontalnog liječenja ili nijedno [15,16]. Još uvijek postoji mnogo neizvjesnosti u vezi između intervencije parodontitisa i rizika od komplikacija HBB. Stoga smo u ovoj studiji imali za cilj istražiti kliničke, biohemijske i mikrobiološke efekte nekirurškog parodontalnog liječenja kod pacijenata sa parodontitisom i ESRD-om.
2. Materijali i metode
2.1. Dizajn studija
Ovo je 3-mjesečna pilot studija provedena u Univerzitetskoj medicinskoj bolnici u Tajpeju (TMUH) i Shuang-Ho bolnici (TMU-SHH) pridruženoj TMU od septembra 2017. do decembra 2019. Za raspodjelu uključenih učesnika, postignuta je randomizacija po kompjuterski generisanoj listi. Samo kliničari i članovi osoblja u studiji bili su svjesni dodjele grupe, tj. grupe za liječenje ili kontrolne grupe. Etičko odobrenje je dobijeno od TMU-JIRB, Medicinskog univerziteta u Tajpeju (N201604007). Studija je sprovedena prema Helsinškoj deklaraciji, slijedeći smjernice CONSORT-a.
2.2. Parodontalni učesnici
Kao preliminarna studija, svi pacijenti na hemodijalizi koji su bili dobro informisani i potpisali informirani pristanak na odjelu za hemodijalizu dvije bolnice poslani su na stomatološki skrining radi ispunjavanja uslova. Kriterijumi uključivanja bili su sljedeći: održavana hemodijaliza tri puta sedmično najmanje 3 mjeseca [17]; starosti 20 ili više od 20 godina; najmanje 5 prirodnih retainabilnih zuba; i generalizirani umjereni do teški parodontitis prema AAP/CDC kriterijima [18]. Kriterijumi za isključenje bili su: aktivna infekcija pod terapijom antibioticima u protekle 4 sedmice radi prevencije utjecaja antibiotika na osnovno stanje [19]; nije u mogućnosti da dobije stomatološki tretman ili završi cijeli tok studije. Pacijenti sa drugim sistemskim bolestima, kao što su dijabetes ili kardiovaskularne bolesti, nisu isključeni iz ove studije. Prikupili smo demografske i medicinske podatke iz elektronske evidencije u dvije bolnice. Medicinske informacije uključivale su osnovni krvni pritisak, indeks tjelesne mase (BMI), berba dijalize, povijest bolesti, pušenje i laboratorijske rezultate.
2.3. Parodontalni pregled
Učesnici su bili podvrgnuti kompletnom parodontološkom pregledu na početku i nakon 3 mjeseca. Dodatni parodontološki pregled za tretiranu grupu obavljen je 4 do 6 sedmica nakon tretmana. Prikupljeno je sljedećih 5 parodontalnih parametara: indeks plaka, dubina parodontalnog sondiranja (PD), dubina recesije gingive (REC), klinički gubitak pričvršćivanja (CAL) i krvarenje pri sondiranju (BOP). Snimljeno je šest mjernih mjesta po zubu za indeks plaka, PD, REC, CAL i BOP. Parodontalnu sondu (PQ-W, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) koristila su dva iskusna parodontologa za parodontalni pregled.
2.4. Parodontalna intervencija
Ispitanici u obje grupe primili su prikupljanje podataka i upute o oralnoj higijeni na početku i 3 mjeseca. Amoksicilin (2 g) za profilaksu infekcija je propisan prije parodontološkog pregleda i zakazivanja terapije [20]. U liječenoj grupi, ispitanici su primili standardnu nekiruršku parodontalnu terapiju za uklanjanje supragingivalnog i subgingivalnog biofilma i zubnog kamenca od strane certificiranih parodontologa. Ponovna procjena parodontalnog stanja izvršena je 4 do 6 sedmica nakon tretmana. U pokušaju da se iskorijene ili smanje nivoi etiopatogenih bakterija u preostalim dubokim džepovima, izvršena je isporuka subgingivalnog minociklinskog gela (Sun Star, Osaka, Japan) na mjestima gdje je dubina parodontalnog džepa ostala veća ili jednaka 5 mm [21].
2.5. Biohemijsko ispitivanje
Uzeti su uzorci krvi za hemijsku analizu krvi. Inflamatorni biomarkeri uključujući visokoosjetljivi CRP (hs-CRP), TNF-, IL-1, IL-6 i Pentraxin 3 (PTX3) u serumu i gingivalnoj pukotinskoj tekućini (GCF) mjereni su na početku i 3-mjesečne posjete [22,23]. GCF uzorci su sakupljeni pomoću periopaper traka (HARCO Electronics, Irvine, Kalifornija, SAD) iz najdubljeg parodontalnog džepa. Prema metodi našeg prethodnog istraživanja [24], prije uzorkovanja, ispitna površina je osušena na zraku i izolirana gazom. Prva papirna traka je uvučena u gingivalni džep 1 mm subgingivno na 5 s i odmah odbačena kako bi se izbjegla kontaminacija pljuvačke. Druga papirna traka je umetnuta na odabrano mjesto na sljedećih 30 sekundi. Preostala papirna traka je umočena u 200-µL posudu sa slanim rastvorom puferovanom fosfatom i čuvana na -80 ◦C. Rutinske hemije krvi analizirane su u centralnoj laboratoriji u bolnici. Nivoi citokina su analizirani pomoću ELISA pomoću komercijalno dostupnih kompleta (R&D Systems, Minneapolis, MN, SAD).
2.6. Microbiological Analysis
Subgingivalni biofilm je uzet sa 3 najdublja parodontalna mjesta korištenjem sterilne parodontalne kirete na početku i 3-mjesečnim posjetama za obje grupe. Uzorci subgingivalnog biofilma su zatim suspendovani u TE puferu, vorteksirani i sonikirani. DNK je ekstrahovan iz uzoraka subgingivalnog biofilma. Uzorci subgingivnog biofilma su pomešani sa puferom RDD i benzonazom i inkubirani na 37 ◦C tokom 30 minuta, nakon čega je usledila digestija sa Proteinazom K i inkubirana 30 minuta na 56 ◦C [25,26]. Zatim su homogenizovani u puferu za lizu. Pročišćavanje DNK je izvedeno korištenjem QIAamp DNA Microbiome Kit (Qiagen), prema uputama proizvođača. Zatim je izvršena amplifikacija gena 16S rRNA i izgradnja biblioteke prema protokolima koje je obezbijedila Illumina. Nextera XT Index kit je korišten za dodavanje Illumina sekvencijskih adaptera i dvoindeksnih barkodova na amplikonske mete. Kvantifikacija i kvalitet biblioteka sekvenciranja provjereni su pomoću QSep100 analizatora (BiOptic Inc., New Taipei City, Taiwan). Na kraju, biblioteke su normalizovane i objedinjene u ekvimolarnom odnosu i sekvencionirane sa Illumina Miseq platformom sa V3 hemijom.
2.7. 16. Analiza sekvence gena S rRNA
Prethodna obrada neobrađenog čitanja uključuje uklanjanje univerzalnih prajmera i nekvalitetnih baza pomoću cutadapt-a (v1.18) [27]. Zatim su uparena očitavanja obrađena i analizirana DADA2/phyloseq radnim tokom u R okruženju. Taksonomska dodjela inferiranih varijanti sekvence amplikona (ASV) izvedena je korištenjem SILVA referentne baze podataka (v132) s minimalnim pouzdanošću pokretanja od 80 [28]. Višestruko poravnanje sekvenci ASV-a izvedeno je pomoću DECIPHER-a (v2.8.1), a filogenetsko stablo je konstruirano korištenjem RAxML-a (v8.2.11) [29,30]. Informacije o tablici učestalosti, taksonomiji i filogenetskom stablu korištene su za kreiranje phyloseq objekta za nizvodne analize bakterijske zajednice koristeći phyloseq (v1.24.2) [31]. Indeksi -diverziteta su izračunati korištenjem funkcije procjene bogatstva iz phyloseq paketa. R paket GUniFrac korišten je za izračunavanje različitih verzija UniFrac udaljenosti određivanjem različitosti zajednice između grupa (-diversity) [32]. Analiza obogaćivanja mikrobiote je provedena primjenom metode veličine efekta linearne diskriminantne analize (LDA) i vizualizirana kao kladogram korištenjem GraPhlAn [33,34].
Naši primarni ishodi bili su smrtnost od svih uzroka, kardiovaskularni (CV) događaji i infekcijski događaji. Unaprijed specificirani sekundarni ishodi uključivali su hemoglobin A1c (HbA1c), srčanu funkciju i procjenu perifernih krvnih žila. Uz to, prikupljeni su paradontalni parametri, serum/GCF inflamatorni biomarkeri i subgingivalni mikrobi.
