Efekti Cistanche Deserticola na akutnu ozljedu pluća kod pacova sa sepsom

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

[sažetak]Cilj: Proučiti učinakCistanche deserticolana akutnompovreda pluća(ALI) kod pacova sa sepsom. Metode: Model sepse napravljen je ligacijom cekala i punkcijom. Urađeni su histopatološki pregledi i izmjereni biološki markeri ALI. Rezultati: Pod svetlosnim mikroskopom u grupi sa fiziološkim rastvorom uočen je edemmeđuprostor pluća, veliki broj eritrocita i neutrofila, te proteina plazme u alveolarnim šupljinama. Theplućamokra/suha težina, stopa neutrofila i sadržaj proteina u plućnoj alveolarnoj tečnosti lavaža, plućna vaskularna permeabilnost i plućna alveolarna permeabilnost i MDA, SOD, kao i MPO, su odgovarajuće značajno povećani. U grupi saCistanche deserticolatretmana, ovi indeksi ALI su bili značajno niži od onih u grupi sa fiziološkom otopinom.

Zaključak: Cistanche deserticolaima velike efekte na ALI kod pacova sa sepsom. Terapijski mehanizam je vjerovatno kroz inhibiciju neutrofila i oksidativnih slobodnih radikala.

【Ključne riječi】Sepsis; Akutna povreda pluća; Cistanche deserticola

Sepsa je klinička hitna i kritična bolest, a traženje efikasnih lijekova oduvijek je bio veliki problem u kliničkim i osnovnim istraživanjima. Patogeneza sepse tradicionalne kineske medicine je nedostatak pravednosti i bujnost zla. Napadajuća terapija za zli prosperitet tela je jedna od efikasnih mera lečenja.Cistancheje tradicionalni tonik kineske medicine. Farmakološke studije su potvrdile da ima zaštitne funkcije kao što je povećanje brzine ćelijske sinteze DNK i otpor radikalima bez kisika. Autor eksperimentalno posmatra efekatCistanche na oštećenju problema s plućimau sepsi, kako bi se pružila efikasna istraživanja za liječenje sepse.

Cistanche Echinacoside liječi bolesti pluća

1 Materijal i metode

1. 1 ŽivotinjaZdravlje 40 muških 5D pacova, težine 200 ~ 250 g, koje je obezbijedio Centar za eksperimentalne životinje Univerziteta nauke i tehnologije Huazhong, broj inspekcije kvaliteta: TJLA—2008—1670 nasumično je podijeljeno u 3 grupe: 8 normalnih fizioloških grupa, Ig/ Bilo je 12 štakora u mL paste od patlidžana i 12 u grupi od 5g/mLCistanchegrupa. Eksperimentalnim životinjama su davani odgovarajući lijekovi rutinskom gavažom 15 dana, dva puta dnevno (Cistancheekstrakt deserticola obezbjeđen je u pripremnoj sali tradicionalne kineske medicine ove bolnice), a doza od 200 mg/kg korištena je kod eksperimentalnih životinja prema metodi iz literature U] 12 minuta nakon ligacije i perforacije cekuma. Zbirka uzoraka.

1.2 Histološki pregled pluća pacova.Uzmite malu količinu lijevog režnja životinjeplućaiz svake grupe, fiksirati sa 10 posto formaldehida, parafinom ugraditi rez i HE boje, posmatrati običnim optičkim mikroskopom i na osnovu toga uzetiplućaproblem da se napravi 1mm3 za 25 Fiksiran je u procentnom rastvoru glutaraldehida, zatim fiksiran u 1% rastvoru tetroksida, dehidriran sa etanolom i acetonom, ugrađen u Epon 81, pripremljen ultratanki rezovi, obojeni uranijum-olovom i posmatrani transmisijskim elektronom mikroskop.

1.3 Određivanje omjera mokre/suhe težine problema s plućima pacova, omjera broja ćelija u tečnosti za ispiranje alveola i sadržaja proteina.Druga grupa pacova je podvrgnuta alveolarnom ispiranju nakon torakotomije, a tekućina za ispiranje je podvrgnuta brojanju ćelija i klasifikaciji ćelija pod mikroskopom. Coomassie brilliant blue metoda se koristi za određivanje sadržaja proteina i izračunavanjeplućaindeks permeabilnosti (protein tečnosti alveolarnog ispiranja/protein plazme, LPI).

1.4 Promjene plućne vaskularne permeabilnosti (PVP) kod pacovaPrema metodi koju su uveli Zhou et al. (2), nakon davanja, životinje u svakoj grupi su bile podvrgnute vezivanju cekalnog crijeva i perforaciji, a injekcija femoralne vene od 50 mg/kg lantana korištena je za otvaranje grudnog koša i uklanjanje pluća. Uklonite okolne probleme, potopiteplućau rastvoru formamida (količina formamida je 20mg/100g tjelesne težine), inkubirati u 45-50T inkubatoru 72h, sačekati dok se svi pigmenti u problemima ne izluže, izvaditi probleme, centrifugirati i uzeti supernatant, koristite ultraljubičasti spektrofotometar da izvršite kolorimetriju na 620nm i izračunajte sadržaj etanola prema standardnoj krivulji da odredite promjenu PVP.

1.5 Određivanje malondialdehida (MDA) u problemu pluća pacovaZa određivanje aktivnosti MDA korištena je metoda tiobarbiturne kiseline (TBA). Dodajte 4mL 1,67mol/L sumporne kiseline. 0.541 posto fosfonske kiseline na 50 ml uzorka za testiranje, dobro promiješajte, centrifugirajte 10 minuta na 3000 o/min i obradite precipitaciju još jednom kao što je gore navedeno, zatim dodajte 1 ml dvostruko destilovane vode, 1 ml otopine TBA, 95 posto bezvodnog kupka 60 minuta, ekstrakcija sa 5 mL n-butanola, tetra etoksi propana kao standarda, konačna koncentracija lnmol/L, fluorescentni spektrofotometar na 532 nm za mjerenje apsorbancije.

1.6 Određivanje superoksid dismutaze (SOD) u problemima s plućima pacovaPrema metodi u literaturi [4], aktivnost SOD je određena metodom Huangpuyin oksidaze (komplet nabavljen od Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.7 Određivanje mijeloperoksidaze (MPO) kod pacovaplućaproblem.Uzmite problem sa plućima da isperete zaostalu krv što je više moguće u izotoničnoj fiziološkoj otopini, i stavite je u fosfatni pufer koji sadrži {{0}}.5 posto cetil trimetil bromida (PH6. 0) Napravite 5 posto homogenata, i radi prema uputama za komplet.

1.8 Statističke metodeKoristite SPSS statistički softver i izmjerite podatke u (x±s) obliku, koristeći t-test i X2 test.

Cistanche

2 rezultata

2.1 Poređenje omjera mokre/suhe težineplućaproblemi, odnos broja ćelija i sadržaj proteina u tečnosti alveolarnog ispiranja u svakoj grupi prikazani su u tabeli 1.plućaOmjer mokre/suhe težine u grupi koja je primala fiziološki rastvor bio je značajno veći od onog u grupiCistanchegrupa (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistanchegrupe su bile značajno niže od onih u grupi sa slanom otopinom (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tabela 1. Poređenje omjera mokre/suhe težine plućnog problema i omjera broja ćelija i sadržaja proteina u alveolarnoj tekućini za ispiranje štakora u svakoj grupi (X ± S)

U poređenju sa normalnom fiziološkom grupom, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Poređenje morfoloških promjena plućnih problema pacova u svakoj grupi. Opšte zapažanje: Theplućau fiziološkoj grupi bili su značajno uvećani i tamnocrveni, sa različitim stepenom kongestije i edema na površini, i velikim brojem plućnih infarkta na rubu; pluća uCistanchegrupa su bile svijetlocrvene sa površinom Blaga kongestija i edem, bez očitog infarkta pluća. Posmatranje svjetlosnim mikroskopom pokazalo je da je u grupi sa fiziološkom otopinom bilo alveolarne i plućne intersticijalne kongestije i edema, velikog broja difuznih neutrofilnih infiltracija u alveolarnoj šupljini, formiranja nekih apscesa i različitog stupnja atelektaze, nekroze i kompenzacijskog emfizema. , tromba i slično formiranje prozirne membrane. Gore navedene lezije u grupi Cistanche su značajno smanjene. U fiziološkoj grupi alveolarne epitelne ćelije su nabubrile, lamelarna tjelešca su se očito ispraznila, formirale su se velike vakuole, kapilarne endotelne stanice su otečene, endotelne stanice su kontinuirano ozljeđene, međućelijski prostor se proširio, kapilare i bazalne membrane alveola su bile labave. Nepravilno zadebljanje, nejednaka debljina. U skupini Cistanche alveolarne epitelne stanice nisu bile otečene, pražnjenje lamelarnog tjelešca je smanjeno, broj formiranih vakuola bio je mali, veza između kapilarnih endotelnih stanica bila je blizu normalne, a bazalna membrana je bila malo labava i nepravilno zadebljana. U poređenju sa Ig/niL cistanche grupom, 5g/mL cistanche grupa imala je manji raspon morfoloških promjena plucnog problema, a stepen ozljede pluca je bio lakši.

2.3 Poređenje LPI i PVP štakora u svakoj grupi prikazano je u Tabeli 2. LPI i PVP grupe sa slanom otopinom bili su značajno veći od onih u grupi Cistanche (PV0.05 ili 0,01 ). LPI i PVP grupe Cistanche su bili niži, što je imalo značajan odnos doze i efekta.

2.4 Poređenje aktivnosti MDA.SOD.MPO uplućaproblemi pacova u svakoj grupi prikazani su u tabeli 3. Sadržaj MDA uplućaproblem grupe sa fiziološkim rastvorom bio je značajno veći nego kod grupeCistanchegrupa, dok su aktivnost SOD i aktivnost MPO u plućnom problemu grupe Cistanche bile značajno povećane (F<0.05 or="">

3 Diskusija

Višeorganska insuficijencija je osnovni uzrok ireverzibilnog stanja i visoke stope mortaliteta u kasnoj fazi sepse (5). Zaštita funkcije organa je od velikog značaja u smanjenju visoke kliničke stope smrtnosti od sepse. Pluća su prvi organ višestrukog zatajenja organa. 1/3 pacijenata sa sepsom umire od akutne ozljede pluća (ALI) i sindroma akutnog respiratornog distresa (ARDS). Glavni patofiziološki mehanizam ALI je akumulacija velikog broja neutrofila u plućnom problemu te se aktivira i prianja na vaskularne endotelne stanice. Istovremeno se povećava koncentracija reduciranog koenzima II oksidaze koja prenosi pojedinačne elektrone, izazivajući respiratorne eksplozije, stvarajući veliku količinu slobodnih radikala kisika, te snažnom oksidacijom uzrokujući oštećenje i funkciju staničnih membrana i membranskih struktura. Prepreke⑹. Lipidni peroksid odražava promenu slobodnih radikala kiseonika u problemu i direktno je povezan sa stepenom povrede pluća (7). U tjelesnom enzimskom i neenzimskom anti-radikalnom oksidacionom sistemu, aktivnost SOD-a održava dobru korelaciju sa stepenom problematičnog oštećenja ⑺. U poređenju sa grupom koja je primala fiziološki rastvor, aktivnosti MDA i SOD grupe Cistanche pokazale su statistički značajne razlike. Cistanche ima funkciju jačanja imunološke funkcije, sprječavanja starenja i povećanja stope ćelijske DNK sinteze. Eksperimentalni rezultati su pokazali da su plućni koeficijent, PLT, omjer neutrofila tekućine alveolarne lavaže i plućna vaskularna permeabilnost grupe Cistanche značajno smanjeni, aktivnost MDA plućnog problema smanjena, SOD značajno povećana, a aktivnost MPO smanjena. Istovremeno, morfološka opservacija je pokazala da je stepen oštećenja plućnog problema značajno smanjen, infiltracija neutrofila je smanjena, a grupa Cistanche od 5g/mL imala je manje ozljede pluća od grupe Ig/mL Cistanche, te je bila dobra odnos doze i efekta. To sugerira da Cistanche ima značajan zaštitni efekat na ALI. Mehanizam može biti: (1) Inhibirati migraciju inflamatornih ćelija upluća, smanjuju slobodne radikale kisika koje proizvode neutrofili i druge aktivirane stanice kako bi biofilm bio zaštićen; (2) Promoviše sintezu nukleinske kiseline i proteina i štiti od efekta povrede pluća; (3) Poboljšati imunološku funkciju fagocita i smanjitiplućaproblematično oštećenje uzrokovano endotoksinom. Eksperimentalni rezultati daju eksperimentalnu osnovu za liječenje akutne ozljede pluća u kliničkoj sepsi jačanjem organizma i jačanjem deficita.

reference

[1] Jin Huiming. Model sepse nakon ligacije cekuma i perforacije [J]. Kineski časopis za patofiziologiju "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Uloga faktora koji aktivira trombocite u akutnoj ozljedi pluća povezanih s pankreatitisom kod pacova [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Eksperimentalne metode moderne medicine [M]. Peking: Narodna medicinska izdavačka kuća, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Moderna klinička biohemijska laboratorijska nauka [M]. Peking: Narodna vojna medicinska štampa, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Studije šoka [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoksin u bolesti ljudi, dio 2 Biološki učinak i klinička procjena anti-endotoksinskih teorija[J]