Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 98. bolnica kineske narodnooslobodilačke vojske, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Univerzitet tradicionalne kineske medicine Zhejiang, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Ortopedska bolnica tradicionalne kineske medicine Fuyang, grad Hangzhou, provincija Zhejiang, Hangzhou 311400, Zhejiang, Kina

Abstract

Cilj: Uočiti efekatCistanchevodeni ekstrakto izlječenjuosteoporozafrakture kod pacova i istražiti njihov mehanizam. Metode: ženke pacova SD klase SPF su nasumično podijeljene u kontrolnu grupu, modelsku grupu i tretiranu grupu i modelirane prema srodnim metodama. 24 sata nakon modeliranja preloma, kontrolnoj grupi i modelnoj grupi dat je normalan fiziološki rastvor, a liječenoj grupi je stavljena sonda saCistanchevodeni ekstrakt jednom dnevno. Nakon 2 sedmice i 6 sedmica intervencije, uzeta je krv iz abdominalne aorte radi otkrivanja interleukina. Nivoi TP (IL-1 B) i transformirajućeg faktora rasta-B l (TGF-8 1), prikupljanje uzoraka prijeloma u isto vrijeme, mikro-CT skeniranje nakon fiksacije, mjerenje R0 I zapreminska frakcija kostiju kalusa (BV/TV) i drugi srodni parametri Nakon dekalcifikacije, dehidracije i ugradnje, napravljen je u voštane blokove za upotrebu. Rezultati: 6 sedmica nakon uspostavljanja modela osteoporoze, mineralna gustina kostiju pacova u modelnoj grupi i tretiranoj grupi bila je niža od one u kontrolnoj grupi (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistanchemože potaknuti izlječenjeosteoporozafrakture, a njegov mehanizam može biti povezan s njegovom inhibicijomosteoporozafrakture. Nakon seruma štakora IL-1 B i podstiču lučenje TGF-8 1, koji može poboljšati osteoporozu i podstaći zacjeljivanje prijeloma.

Ključne riječi: osteoporotski prijelom, Cistanche, zarastanje prijeloma, pacov

Osteoporoza je bolest kod koje je smanjena gustina kostiju, razrušena fina struktura koštanog tkiva, a povećana je krhkost kostiju. Pacijenti u svakodnevnom životu mogu uzrokovati prijelome pod blagom vanjskom silom. To je uobičajena klinička bolest i bolest koja se često javlja. Štaviše, ova vrsta prijeloma je uglavnom starijih pacijenata, često povezana s drugim bolestima, a većina prijeloma je umješana, slabe stabilnosti, a ponekad dolazi do sporog ili nesraslog zarastanja prijeloma, a postoji i visoka invalidnost i smrtnost. Trenutno se njegovo liječenje uglavnom odvija kroz operaciju, ručnu restauraciju i liječenje osteoporoze. Nedostaju ciljani lijekovi za liječenje pacijenata saosteoporozafrakture. Tradicionalna kineska medicina ima dugu povijest liječenja osteoporoze i ima pozitivan učinak. Mnogi tradicionalni kineski lijekovi dokazano poboljšavaju stanje kostiju. Siromašnost takođe može podstaći zarastanje preloma. Rongrong se obično koristi kao reprezentativan lijek za ishranu janga bubrega i ima učinak ishrane jetre i bubrega. Tradicionalna kineska medicina vjeruje da bubreg upravlja kostima, a liječenje prijeloma je također neodvojivo od bubrega i suštine. Savremena farmakologija je utvrdila da pepeo od mesa ima i određeni estrogenski efekat. Ova studija namjerava koristiti mjerenje gustine kostiju, Micro-CT i serumski interleukin-13 (IL-10), praćenje nivoa transformirajućeg faktora rasta-P KTGF-P 1) i vodeni ekstrakt paste od hernija mesa na izlečenje odosteoporozafrakture kod pacova

Cistanche

1Materijal i metode

1.1 Eksperimentalne životinje i oprema za reagense: 52 SPF ženke SD pacova težine 210~250g uzgajane su u Centru za eksperimente na životinjama Univerziteta tradicionalne kineske medicine Zhejiang. Kompleks joda, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., serija broj 20160720; Penicilin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., serijski broj F3117217; IL-18 komplet (broj serije: 20160715), TGF-8 1 komplet (broj serije: 20160722); Dvoenergetski rendgenski skener gustine kostiju, 0STE0C0RE2; Micro-CT, Skyscan1176O

1.2 Ekstrakcija odCistanchevodeni ekstrakt: natopiti zemljucistanche(Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutical Factory) 10 puta ultračiste vode u trajanju od 0,5 sati, dekocija iz tiganja 1,5 sat, ponovite ekstrakciju 2 puta i koncentrat mješovite ljekovite tekućine na rotacionoj pari do koncentracije od 1,5 g /ml i čuvati u frižideru na 4 stepena za kasniju upotrebu.

1.3 Priprema za modeliranje: Točke su sljedeće.

1.3. 1 Model osteoporoze: štakori su adaptivno uzgajani 1 tjedan prije modeliranja i nasumično podijeljeni u kontrolnu grupu, modelsku grupu i tretiranu grupu, sa 16 štakora, 18 pacova i 18 štakora, a svaka grupa je zasnovana na vremenskoj tački 2 sedmice i 6 sedmica. Svaka je bila podijeljena u dvije grupe. I tretirana grupa i grupa modela su anestezirane sa 1 posto pentobarbital natrijuma (0.4ml/100g), koža je anestezirana, dezinficirana, drapirana, a koža je izrezana. Bilateralni jajnici štakora su uklonjeni. Kontrolna grupa je imala samo rez. Nemoj

Uklanjanje jajnika

1.3. 2 Model frakture: 6 sedmica nakon što je model osteoporoze pripremljen, model prijeloma će biti pripremljen. Nakon što se pacovi u svakoj grupi anesteziraju, mjeri se mineralna gustina kostiju srednje butne kosti. , Incizija, napraviti model poprečnog prijeloma srednje butne kosti, fiksirati Kirschner žicom od 1 mm, sterilizirati i zašiti kožu reza

1.4 Intervencija lijekovima: Rendgenska detekcija femura je izvršena nakon modeliranja, pacovi koji nisu uspjeli u pripremi modela su eliminisani, a 80,000 jedinica penicilina je ubrizgano intramuskularno nakon modeliranja kako bi se spriječila infekcija. 24 sata nakon operacije, tretiranoj grupi je davan vodeni ekstrakt mesne paste od hernija (koncentracija 1,5g/ml, lg/kg, jednom dnevno). Kontrolnoj grupi i grupi modela date su istu količinu normalnog fiziološkog rastvora.

1.5 Uzimanje uzoraka: Uzorci pacova su prikupljeni 2 i 6 sedmica nakon intervencije. Nakon anestezije 1 posto pentobarbital natrijum, 5-10ml krvi je sakupljeno iz abdominalne aorte da se pripremi serum i pohranjeno u -20B frižider. rezervni. Zatim su pacovi žrtvovani, a uzorci preloma femura su sakupljeni i stavljeni u 10 posto neutralnog formaldehida na 72 sata.

1.6 Indikatori testiranja: Bodovi su kako slijedi.

1.6. 1 Mineralna gustina kostiju: Svi pacovi nakon modela osteoporoze su anestezirani prije modela frakture, a zatim je izmjerena mineralna gustina kostiju srednje butne kosti. Tri grupe pacova su primile uzorke nakon 2 i 6 sedmica intervencije, a uzorci su fiksirani 72 sata, a zatim je ponovo mjerena gustina kostiju.

1.6. 2 Mikro-CT: Mikro-CT skeniranje se izvodi nakon što je uzorak fiksiran 72 sata, sa 200 slika iznad i ispod kraja prijeloma kao područje od interesa (R01), ugao skeniranja 360 stepeni, struja 555uA, napon 42kV, filter Al 0.2mm, rezolucija 8.73um, nakon završene trodimenzionalne rekonstrukcije slike i analize kalusa. Parametri detekcije su sljedeći: frakcija volumena kosti BV/TV, faktor trabekularnog modela kosti (Tb. Pf); indeks strukturnog modela (SMI) itd."

1.6.3 Određivanje serumskih IL-1P i TGF-P1: Odmrznite serum pacova iz frižidera na -20 stepena i izvršite detekciju korak po korak u skladu sa IL-13 i TGF" 1 uputstva za komplet.

1.7 Statističke metode: za obradu koristiti softver za statističku analizu SPSS.19. Eksperimentalni podaci izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (G±s) i mineralna gustina kostiju tri grupe pacova. Mikro-CT parametri JL-1 P JGF- P 1 nivoi su prosječni jednosmjernom analizom varijanse, a koriste se parna poređenja između grupa Inspekcija, nivo inspekcije je P<0.>

2 rezultata

2.1 Gustoća kostiju tri grupe: vidi tabelu 1.

Tabela 1. Rezultati mineralne gustine kostiju u srednjem femuru svake grupe pacova (x±s, g/cm²)

Napomena: U poređenju sa grupom modela, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Mikro-CT dvodimenzionalni poprečni presek: sagitalni dvodimenzionalni presek bira slike uzdužne ose femura u svakoj vremenskoj tački u svakoj grupi (vidi sliku 1), a horizontalni dvodimenzionalni poprečni presek sekcija odabire 100. sliku ispod linije preloma za poređenje (slika 2) ), sa slike se vidi da se kalus svake grupe postepeno povećavao tokom vremena, ali je bio plastičan u različitim stepenima 6 nedelja nakon preloma; istovremeno se vidi da je kalus u kontrolnoj grupi bio veliki, a korteks kalusa debeo i puzao preko linije preloma nakon 6 nedelja, dok je kalus u grupi modela U kalusu je bilo manje kosti kod 2 sedmice, a korteks kalusa je bio labav nakon 6 sedmica. Iako volumen kalusa u tretiranoj grupi nije bio velik nakon 2 sedmice, koštana masa u kalusa bila je veća od one u grupi modela. Kalus je bolje oblikovan nakon 6 sedmica. A linija loma nije očigledna.

Kontrolna grupa Grupa modela Grupa tretmana

Slika 1 Sagitalni poprečni presjek srednje femura svake grupe

Slika 2 Horizontalni presjek srednje femura svake grupe

2.3 Micro-CT trodimenzionalna rekonstrukcija: trodimenzionalna rekonstrukcija kalusa na frakturiranom kraju femura prikazana je na slici 3. Na slici 3 se može vidjeti da se kalus formirao duž periosta na oba kraja prijeloma linija 2 sedmice nakon prijeloma u svakoj grupi, pramenovi prijeloma u svakoj grupi su i dalje bili čisti, posebno u grupi modela i grupi koja je tretirana, dok je kalus u kontrolnoj grupi bio debeo i debeo, uglavnom sa pločama 6 sedmica nakon prijeloma . Trabekularne kosti su bile dominantne i linija preloma je nestala, dok je grupa modela bila labave kosti i linija preloma je bila nejasna, ali je tretirana grupa imala više kalusa, pravilne i debele trabekularne kosti, a linija preloma nije bila očigledna.

Slika 3 Trodimenzionalna rekonstrukcija R0I kalusa na frakturiranom kraju

2.4 Mikro-CT parametri: Koristite softver za analizu kalusa na kraju frakture. Pogledajte tabelu 2 za povezane parametre.

Tabela 2 Poređenje mikro-CT parametara svake grupe (x±s)

Kontrolna grupa Grupa modela Grupa tretmana

Napomena: U poređenju sa grupom modela, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Serum IL-1 P .TGF-P 1 nivo: vidi tabelu 3.

Tabela 3 Poređenje nivoa IL-1 P JGF-0 1 u svakoj grupi G±s, n=8)

Napomena: U poređenju sa grupom modela, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Posljednjih godina, tradicionalni kineski lijekovi Yinyangdian, Drynaria fortune i njegovi spojevi (Qing's pills, Liuwei Dihuang pills, itd.) dokazano su u kliničkoj praksi da značajno poboljšavaju osteoporozu. Ova vrsta kineske medicine i spojevi se uglavnom koriste za ishranu jetre i bubrega. Ovo je u skladu sa principom ishrane bubrega i obnavljanja mišića u srednjem i kasnom stadijumu preloma. "Deset dana. Mesna pasta za udove prvi put je objavljena u "Shen Nong's Materia Medica". , Tople prirode, ima funkciju hranjenja bubrega i jačanja janga, obnavljanja esencije i srži, hranjenja krvi i hidratacije suhoće, te ugodne boje i produžava život.

U ovoj studiji, mineralna gustina kostiju tretirane grupe bila je veća od one u modelnoj grupi nakon 2 i 6 nedelja intervencije (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporozazarastanje preloma. On direktno odražava koštani sadržaj kalusa. Ovo pokazuje da Rouganrong može imati učinak promicanja osteogeneze. Analiza može biti efikasna u mesnoj pasti od hernije. Sastojci imaju efekat regulacije BMP2, a BMP2 je jedan od članova porodice TGF-8. A ovaj rezultat potvrđuju i drugi parametri mikro-CT skeniranja (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp i SMI odražavaju biomehanička svojstva kalusa, a vrijednosti u liječenoj grupi su značajno bolje od grupe modela, što također dalje sugerira da Roudongrong ima učinak poboljšanja gubitka koštane mase, promicanja osteogeneze i ubrzavanja zacjeljivanja prijeloma.

Što se tiče nivoa IL-1B i JGF-P 1 u serumu, nakon 2 sedmice i 6 sedmica intervencije, ustanovljeno je da je nivo IL-1P u tretiranoj grupi bio niži od druge dvije grupe sa 2 sedmice i sa 6 sedmica. Iako je nivo IL-1 B u liječenoj grupi bio viši od kontrolne grupe, još uvijek značajno niži od grupe modela (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchemogupoboljšati gubitak koštane mase, pospješuju osteogenezu i ubrzavaju zacjeljivanje prijeloma. Može smanjiti nivo IL-13 inosteoporozafrakturiraju pacove i inhibiraju lom. Postiže se aktivnost koštanih ćelija; osim toga, to može biti povezano i sa činjenicom daCistanchemože povećati nivo TGF-B 1 kod frakturiranih pacova, promovirati osteogenu diferencijaciju i sazrijevanje i oblikovanje kalusa.

Ukratko, na osnovu analize mineralne gustine kostiju, parametara mikro-CT skeniranja i nivoa IL-1 P, TGF"1 u serumu, ustanovljeno je da vodeni ekstraktCistanchemogupoboljšati gubitak koštane maseipospješuju zacjeljivanje osteoporotskih fraktura. Mehanizam može biti povezan sa ovim. Može inhibirati lučenje serumskog ILT 8 i podsticati lučenje TGF-B 1 kod pacova nakonosteoporozafrakture, čime se poboljšava osteoporoza i potiče zacjeljivanje prijeloma.

4 Reference

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang, et al. Smjernice za dijagnozu i liječenje osteoporoze kod starijih osoba u Kini (2018) [J], Kineski časopis za osteoporozu, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2]Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang, et al. Terapijski učinak i mehanizam alkoholnog ekstrakta mesne kile na ovariektomiranih pacova sa osteoporozom[J]. Časopis Univerziteta Jilin (Izdanje medicine), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. Ekstrakt srčanog drveta iz Dalbergia sissoo potiče zacjeljivanje prijeloma i njegovu primjenu kod pacova s ​​osteoporozom izazvanih ovariektomijom [J]. Časopis za farmaciju i farmakologiju, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM, et al. Mikrokompjuterska tomografija procena napredovanja zarastanja preloma kod miševa[j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian, et al. Konsenzus stručnjaka o stepenovanoj dijagnozi i liječenju primarne osteoporoze tradicionalnom kineskom medicinom u provinciji Zhejiang (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Napredak istraživanja u prevenciji i liječenju osteoporoze pojedinačnim i složenim kineskim lijekovima[J]. Kineski medicinski vodič, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng, et al. Efekat pirea iz porodice pustinjskog mesa na ekspresiju proteina BMP-2 kod brzo starenih osteoporotičnih miševa[J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116