Poređenje humoralnog i ćelijskog CMV imuniteta kod pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega

sažetak:Hronična bolest bubrega može promijeniti antivirusni imunitet T-ćelija. U trenutnoj studiji, procijenili smo kod 63 pacijenta prije transplantacije bubrega kako su humoralni i ćelijski imunitet protiv citomegalovirusa (CMV) povezani korištenjem interferona (IFN)-ELISpot (T-Track® CMV, Mikrogen, Neuried, Njemačka). Kohorta se sastojala od 24 pacijenata sa negativnim i 39 sa pozitivnim CMV IgG. Dok nijedan od pacijenata sa negativnim CMV IgG nije pokazao uočljive odgovore na T-Track® CMV, 26 od 39 pacijenata sa pozitivnim CMV IgG imalo je pozitivne ELISpot odgovore. Medijan odgovora na CMV pp65 u CMV seronegativnoj grupi bio je {{10}} jedinica formiranja mjesta (SFU) po 200,000 PBMC (opseg 0–1) i u seropozitivnoj grupi 43 SFU (opseg 0–750). Dakle, 13 od 39 pacijenata sa pozitivnim CMV serostatusom (33%) imalo je neotkriveni imunitet T ćelija i može biti pod povećanim rizikom od reaktivacije CMV. CMV pp65-specifični ELISpot odgovori bili su 29.3-put veći kod seropozitivnih pacijenata sa u odnosu na bez dijalize i 5.6-put više kod pacijenata sa u odnosu na bez imunosupresivne terapije, ali pacijenata sa dijaliza i imunosupresivna terapija su pokazale, očekivano, niže odgovore na fitohemaglutinin, pozitivna kontrola. Ovaj nalaz može biti uzrokovan (subkliničkom) CMV-DNKemijom i "pojačivačem" T ćelija specifičnih za CMV.

Ključne riječi: humani citomegalovirus; ELISpot; interferon-; dijaliza; imunosupresivna terapija

cistanche tubulosa-poboljšava imuni sistem

1. Uvod

Kod primalaca transplantiranog bubrega, infekcija herpesvirusima, posebno citomegalovirusom (CMV), može dovesti do teških bolesti kao što su intersticijski pneumonitis, hepatitis, kolitis i encefalitis [1], te može izazvati odbacivanje alografta [2]. Nasuprot tome, kod imunokompetentnih osoba tok infekcije je obično asimptomatski ili blag, sa simptomima sličnim onima kod mononukleoze [3]. Stoga je neophodno što preciznije procijeniti rizik od CMV infekcije/reaktivacije kod transplantiranih pacijenata ili pacijenata koji čekaju transplantaciju. Osim određivanja humoralnog imuniteta protiv CMV, odnosno imunoglobulina (Ig) G ili M, ćelijski imuni odgovor protiv CMV se sve više procjenjuje in vitro metodama, kao što su protočna citometrija ili ELISpot [4]. Poznato je da je humoralni imunitet smanjen kod pacijenata na dijalizi i/ili pod imunosupresijom. Na primjer, ponovljeni pregledi su kod 18 od 168 hemodijaliziranih pacijenata sa CMV seropozitivnošću (11%) pokazali privremenu promjenu u negativnost [5]. Nadalje, CMV-specifični T-ćelijski imunitet otkriven je kod pacijenata sa transplantacijom bubrega bez CMV IgG antitijela [6]. Pregled Sestera et al. [7] su naglasili važnu ulogu CMV-specifičnog imuniteta T-ćelija kod primalaca transplantiranih solidnih organa. Međutim, također je dobro utvrđeno da oštećena funkcija bubrega mijenja funkciju T stanica, što dovodi do smanjenog antimikrobnog odgovora [8]. Stoga, uprkos prethodnoj CMV infekciji, ili specifična antitijela ili T ćelije mogu pasti ispod određene granice i postati (privremeno) neotkriveni. Visoko osjetljivi ELISpot test može otkriti sekreciju citokina na nivou jedne ćelije [9], a izvodljivo je izmjeriti antivirusni imunitet kod primatelja transplantata [10]. Kvantifikacija ćelijskog CMV imuniteta može pomoći u stratifikaciji rizika od CMV infekcije ili reaktivacije i na taj način voditi preventivno i profilaktičko antivirusno liječenje nakon transplantacije [11–24]. Specifični imunitet protiv CMV-a može biti važan ne samo kod primaoca transplantacije, već i kod pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega. Na listi čekanja vrši se stratifikacija rizika pacijenata—također s obzirom na CMV pozitivnost/negativnost. Oštećena funkcija bubrega može uticati na staničnu imunološku funkciju, a postoji malo podataka o korelaciji između humoralnog i ćelijskog imuniteta u ovoj kohorti [25]. U trenutnoj studiji bavili smo se pitanjem korelacije humoralnog i ćelijskog CMV imuniteta kod 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega. Nadalje, analizirali smo da li je bilo koja kovarijacija kao što su CMV IgG, CMV IgM, dob, spol, uzrok zatajenja bubrega, dijaliza, prethodna transplantacija bubrega ili imunosupresivna terapija imala utjecaj na CMV-specifične ELISpot odgovore.

cistanche tubulosa-poboljšava imuni sistem

2. Materijali i metode

2.1. Pacijenti

Od marta do juna 2021. uzastopno smo uključili 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega (tabela 1). Nije bilo kriterijuma za isključenje. Grupa je sadržavala 38 muškaraca i 25 žena; srednja starost je bila 54 godine (raspon 19–78). Devetnaest pacijenata je primilo peritonealnu dijalizu, a 31 hemodijalizu. Dvanaest pacijenata je liječeno imunosupresivima. Studiju je odobrio lokalni etički komitet Univerzitetske bolnice u Esenu, Njemačka (21-9883-BO), a svi volonteri su dali informirani pristanak da učestvuju u studiji. Studija je sprovedena u skladu sa etičkim standardima navedenim u Helsinškoj deklaraciji iz 1964. i njenim kasnijim izmjenama ili uporedivim etičkim standardima.

Tabela 1. Karakteristike 63 bolesnika koji čekaju transplantaciju bubrega

2.2. ELISpot test

Periferna krv je sakupljena u epruvete s heparinom od 9 mL, a PBMC je izoliran i podešen na 2 miliona PBMC po mililitru. Ukupno, 200,000 PBMC je dodato u svaku jažicu 8-jažica ELISpot traka i stimulirano 19 h na 37 ◦C u duplikatu sa dva T-aktivirana® CMV proteina, neposrednim ranim antigenom{{ 8}} (IE-1) i fosfoprotein 65 (pp65), prema uputama proizvođača (T-Track® CMV, Mikrogen GmbH, Neuried, Njemačka; ranije Lophius Biosciences GmbH, Regensburg, Njemačka) [10,26 ]. Paralelno, kultivirane su negativne kontrole (ćelije sa podlogom) i pozitivne kontrole (stimulirane mitogenom fitohemaglutininom, PHA). Dobijene tačke, od kojih svaka predstavlja jednu ćeliju koja oslobađa interferon (IFN), kvantifikovane su korišćenjem ELISpot čitača ploča (AID Fluorospot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strassberg, Nemačka). Rezultati su generisani prema algoritmu koji je dao proizvođač. Koristeći navedeni algoritam, izračunava se aritmetička sredina kvadratnog korijena transformiranih 2-repliciranih tačaka i kvadrira [26]. Negativne kontrole su oduzete od vrijednosti specifičnih za CMV, što je rezultiralo jedinicama koje formiraju mrlje (SFU). SFU veći ili jednak 10 definiran je kao pozitivan.

2.3. CMV Serostatus 

CMV IgG was determined using the Anti-CMV-IgG® (DiaSorin, Saluggia, Italy) assay on the LIASON XL platform, following the manufacturer's instructions. In addition, an Anti-CMV IgM® (DiaSorin) was used to detect CMV primary infection. Using this platform, CMV IgG < 12 IU/mL is considered negative, from 12 to 14 IU/mL borderline, and >14 IU/mL pozitivno.

cistanche biljka koja povećava imuni sistem

2.4. Statistička analiza

Statistička analiza je izvršena sa softverom GraphPad Prism 8.0.1 (San Diego, CA, USA) i IBM SPSS Statistics 23 (New York, NY, SAD). Za analizu numeričkih varijabli primijenjena je Spearmanova korelacija. Da bismo procenili uticaj kategoričkih kovarijata, koristili smo Fišerov egzaktni test, Mann-Whitney ili Kruskal-Wallisov test, prema potrebi. Nadalje, izvršili smo multivarijantnu analizu koristeći multinominalnu logističku regresiju. Ovdje smo uključili dob kao kontinuirano i CMV IgG i dijalizu i imunosupresivnu terapiju kao dihotomne varijable, tj. da ili ne. Dvostrane p vrijednosti < 0.05 se smatraju značajnim.

3. Rezultati

Ukupnu kohortu od 63 bolesnika s kroničnom bubrežnom bolešću činila su 24 bolesnika s negativnim i 39 sa pozitivnim CMV IgG. Nijedan od pacijenata sa negativnim CMV IgG nije pokazao detektabilne IFN-odgovore na CMV IE-1 ELISpot (Slika 1A) ili na CMV pp65 ELISpot (Slika 1B). Medijan odgovora na CMV IE-1 protein bio je 0 SFU po 200,000 PBMC (raspon 0–{{16 }}) i na CMV pp65 protein {{20}} SFU (opseg 0–1), respektivno (Slika 1A, B, Tabela 2). Kod pacijenata sa pozitivnim CMV IgG, ćelijski odgovori su bili značajno viši (p < 0.0001). Medijan odgovora na CMV IE-1 bio je 2 SFU (opseg 0–555), a na CMV pp65, bio je 43 SFU (opseg 0–750). Fisherov egzaktni test je pokazao da su ELISpot odgovori na CMV IE-1 i na pp65 bili značajno (p < 0,05) u korelaciji sa CMV IgG odgovorima (slika 1C).

Slika 1. Distribucija ELISpot odgovora specifičnih za CMV kod 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega. Kohorta se sastojala od 24 sa negativnim (zeleni kružići) i 39 sa pozitivnim CMV IgG (plavi kružići). Panel (A) prikazuje ELISpot odgovore nakon stimulacije sa CMV neposrednim ranim antigenom 1 (IE-1) i panel (B) nakon stimulacije sa CMV fosfoproteinom 65 (pp65). Horizontalne linije označavaju srednje vrijednosti. Isprekidana linija predstavlja graničnu vrijednost za pozitivne odgovore (10 jedinica koje formiraju tačku, SFU). Ćelijski in vitro odgovori kod pacijenata bez i sa CMV IgG upoređivani su Mann-Whitney testom. Panel (C) sumira korelaciju između humoralnih (IgG) i ćelijskih (ELISpot) CMV-specifičnih odgovora (Fisherov egzaktni test). Slika 1. Distribucija ELISpot odgovora specifičnih za CMV kod 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega. Kohorta se sastojala od 24 sa negativnim (zeleni kružići) i 39 sa pozitivnim CMV IgG (plavi kružići). Panel (A) prikazuje ELISpot odgovore nakon stimulacije sa CMV neposrednim ranim antigenom 1 (IE-1) i panel (B) nakon stimulacije sa CMV fosfoproteinom 65 (pp65). Horizontalne linije označavaju srednje vrijednosti. Isprekidana linija predstavlja graničnu vrijednost za pozitivne odgovore (10 jedinica koje formiraju tačku, SFU). Ćelijski in vitro odgovori kod pacijenata bez i sa CMV IgG upoređivani su Mann-Whitney testom. Panel (C) sumira korelaciju između humoralnih (IgG) i ćelijskih (ELISpot) CMV-specifičnih odgovora (Fisherov egzaktni test).

Tabela 2. Potencijalne kovarijate ELISpot odgovora specifičnih za CMV kod svih pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega (n=63).

Štaviše, Spearmanova korelaciona analiza odgovora na dva CMV proteina IE-1 i pp65 kod CMV seropozitivnih pacijenata pokazala je, kako se očekivalo, pozitivnu korelaciju (r=0.41, p=0.009 ) (Slika 2). Trinaest od 39 pacijenata sa pozitivnim CMV IgG (33%) pokazalo je negativan ELISpot odgovor na oba CMV antigena. Osamnaest pacijenata je odgovorilo samo na CMV pp65, ali ne i na IE-1, a osam je odgovorilo na oba antigena.

Slika 2. Spearmanova korelacijska analiza imuniteta T ćelija prema CMV IE-1 i pp65 kod CMV IgG pozitivnih pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega (n=39). Isprekidane linije predstavljaju graničnu vrijednost za pozitivne odgovore (10 jedinica koje formiraju tačku, SFU) za svaki od CMV antigena. Statistika kvadranta je prikazana u gornjem lijevom panelu, a rezultati Spearmanove korelacijske analize su u donjem lijevom panelu.

Uzeto zajedno, samo 67% pacijenata sa pozitivnim CMV serostatusom imalo je detektabilni imunitet T ćelija, tj. samo 26 od 39 pacijenata sa pozitivnim CMV IgG je takođe imalo pozitivan odgovor na T-Track® CMV. Svi ovi pacijenti su imali pozitivan odgovor na CMV pp65, a osam je imalo pozitivan odgovor na IE-1 i pp65. Univarijantna analiza za potencijalne kovarijate kod 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega pokazala je da nijedan nije imao značajan uticaj na CMV-specifične ELISpot odgovore, osim na CMV IgG. Spearmanova analiza korelacije nije pokazala korelaciju sa godinama (IE-1: r {{10}}.02, p=0.9; pp65: r {{15 }}.16, p=0.2). Nadalje, podijelili smo kohortu na mlađe i starije osobe, podijeljene sa srednjom dobi (54 godine), i uporedili oba pomoću Mann-Whitney testa (Slika 3A). Iako su CMV-specifični T-ćelijski odgovori imali tendenciju da budu viši kod starijih pacijenata, razlika je izbjegla statistički značaj (IE-1: p=0.15; pp65: p=0.30). Kod mlađih naspram starijih pacijenata, primijetili smo medijan odgovora od 0 naspram 0 SFU prema IE-1 i 1 naspram 3 SFU prema pp65. Odgovarajuće srednje vrijednosti bile su 1,9 prema 35,9 i 55,9 prema 105,4 SFU. Mann-Whitney test također nije pokazao značajan utjecaj CMV IgM, spola i prisutnosti ili odsustva dijalize, prethodne transplantacije bubrega ili imunosupresivne terapije (Tabela 2). Konačno, Kruskal-Wallisov test je pokazao da uzrok zatajenja bubrega ili broj prethodnih transplantacija nije imao značajan utjecaj.

Slika 3. Distribucija CMV-specifičnih ELISpot odgovora kod 63 pacijenta koji čekaju transplantaciju bubrega, podijeljeno prema dobi (A), prisutnosti ili odsustvu dijalize (B), imunosupresiji (C) ili peritonealnoj dijalizi u odnosu na hemodijalizu (D). Horizontalne linije označavaju srednje vrijednosti. Isprekidana linija predstavlja granicu za pozitivne odgovore (10 jedinica za formiranje tačaka, SFU). Ćelijski in vitro odgovori na CMV neposredni rani antigen 1 (IE-1), CMV fosfoprotein 65 (pp65) i pozitivnu kontrolu fitohemaglutinin (PHA) su upoređeni Mann-Whitney testom. PD, peritonealna dijaliza; HD, hemodijaliza.

Slika 3. Nastavak.

Utjecaj dijalize i imunosupresivne terapije na specifične odgovore CMV-pp65 izbjegao je statistički značaj (p=0.1 i p=0.2, respektivno) (Slika 3B,C). Dok su specifični odgovori CMV-pp65 kod pacijenata na dijalizi i imunosupresiji bili veći, uočili smo suprotno za pozitivnu kontrolu s PHA. Ova razlika za PHA kontrolu bila je značajna kod pacijenata sa imunosupresijom u odnosu na pacijente bez imunosupresije (p=0.01). Nadalje, medijan odgovora na CMV pp65 bio je manji kod 19 pacijenata na peritonealnoj dijalizi nego kod 31 pacijenta na hemodijalizi (3 naspram 17 SFU, Slika 3D). Detaljni podaci o dvanaest pacijenata koji su primali imunosupresivnu terapiju predstavljeni su u tabeli 3. Dva pacijenta koja su primila depleciju T ćelija sa anti-timocitnim globulinom prije više od pet godina, oba su pokazala detektabilne odgovore T ćelija na CMV pp65. Štaviše, CMV pp{20}}specifični odgovori su uočeni kod svih pacijenata sa prethodnom transplantacijom jetre (n=2) i sa 2-3 prethodne transplantacije bubrega (n=3).

Tabela 3. Karakteristike dvanaest pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega koji su primali imunosupresivnu terapiju

Također smo izvršili multivarijantnu analizu, koja je uključivala CMV IgG, starost, dijalizu i imunosupresivnu terapiju. Pronašli smo značajne rezultate za sljedeće varijable: IE{{0}} ELISpot: CMV IgG (p=0.01); pp65 ELISpot: CMV IgG (p < 0,0001), starost (p < 0,0001) i imunosupresivna terapija (p=0.048). Kao sljedeći korak, posebno smo analizirali podgrupu od 39 pacijenata sa pozitivnim CMV IgG (Tabela 4). Slično ukupnoj kohorti, CMV-specifični ELISpot odgovori bili su jači kod pacijenata na dijalizi i na imunosupresivnoj terapiji (Slika 4). Specifični SFU za CMV pp65 bili su 29.3-put veći kod pacijenata sa u odnosu na dijalizu (medijan od 44 naspram 1,5) i 5.6-put veći kod pacijenata sa imunosupresivnom terapijom u odnosu na bez (medijan od 157 naspram 28). Međutim, i ovaj nalaz nije bio značajan. Opet, PHA kontrole su pokazale suprotnost kulturama stimuliranim CMV pp65, smanjeni odgovor kod pacijenata na dijalizi ili imunosupresiji.

Slika 4. Distribucija CMV-specifičnih ELISpot odgovora kod 39 CMV IgG pozitivnih pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega, podijeljeno ili prisustvom ili odsustvom dijalize (A) ili imunosupresije (B). Horizontalne linije označavaju srednje vrijednosti. Isprekidana linija predstavlja granicu za pozitivne odgovore (10 jedinica za formiranje tačaka, SFU). Ćelijski in vitro odgovori na CMV neposredni rani antigen 1 (IE-1), CMV fosfoprotein 65 (pp65) i pozitivnu kontrolu fitohemaglutinin (PHA) su upoređeni Mann-Whitney testom.

Tabela 4. Potencijalne kovarijate ELISpot odgovora specifičnih za CMV kod CMV IgG pozitivnih pacijenata koji čekaju transplantaciju bubrega (n=39).

4. Diskusija

U ovoj studiji testirali smo 63 pacijenta s kroničnom bubrežnom bolešću na njihovu korelaciju humoralnog i ćelijskog CMV imuniteta. Uočili smo da se grupa pacijenata sa CMV IgG seropozitivnošću može podijeliti na jednu trećinu bez detektabilnog ćelijskog imuniteta i dvije trećine sa ćelijskim imunitetom. Ćelijski odgovori na CMV pp65 proteine ​​bili su znatno obilniji od odgovora na CMV IE-1, što se moglo otkriti kod 26 odnosno osam od 39 CMV IgG seropozitivnih pacijenata. Kod pacijenata sa CMV IgG seropozitivnošću, ali s neotkrivenim T-ćelijskim odgovorima, antivirusna profilaksa nakon transplantacije bubrega može biti prikladna terapijska opcija. Da bismo bolje procijenili snagu ELISpot odgovora u trenutnoj kohorti, uporedili smo je sa rezultatima transplantiranih bubrega i jetre iz našeg centra, čiji su podaci djelimično objavljeni [10,26]. Obje prethodne studije uključivale su primaoce transplantata srednjeg rizika (donor (D)−/primalac (R)+, D+/R+) i visokorizične (D+/R−). Snaga ELISpot odgovora na T-Track® CMV kod primalaca transplantiranih bubrega i u jetri bila je slična trenutnim podacima. Kod primalaca transplantacije bubrega, medijan CMV IE{17}} specifičnih odgovora od 1,5 SFU na 200,000 limfocita i medijan CMV pp65 specifičnih odgovora od 40,5 SFU na 200,000 limfocita 000 je otkriven ( {27}}) [10]. Kod primalaca presađene jetre, pronašli smo medijan CMV IE{29}} specifičnih odgovora od 4 SFU na 200,000 limfocita i medijan CMV pp65 specifičnih odgovora od 41 SFU na 200,000 limfocita (n { {37}}) [26]. Kada normaliziramo naše trenutne podatke o PBMC-u na limfocite i primjenjujući faktor konverzije od 1,29 kako je izračunato iz sirovih podataka kasnije studije Glige et al. [26], odgovori su i dalje bili na sličnom nivou (konvertovani podaci trenutne studije: CMV IE-1 i pp65: 3 i 55 SFU na 200,000 limfocita, respektivno). U poređenju sa prethodnom studijom na pacijentima na hemodijalizi [25], stopa pozitivnih ELISpot odgovora kod CMV seropozitivnih pacijenata bila je niža u trenutnoj studiji. Studija Banasa i sar. primijećeni pozitivni T-Track® CMV rezultati kod 90% (60/67) CMV-seropozitivnih pacijenata na hemodijalizi. Štaviše, otkrili su IE{54}}reaktivne ćelije u uzorcima krvi pacijenata sa negativnom CMV serologijom. Ova prethodna studija posmatrala je medijan CMV IE-1 specifičnih odgovora od 9,7 SFU na 200,000 limfocita i medijan CMV pp65 specifičnih odgovora od 165 SFU na 200,000 limfocita, respektivno. Moguće je da su laboratorijski zavisne razlike, npr. u ELISA testu koji se koristi za kategorizaciju pacijenata ili u definiciji mrlja, možda razlog za različite rezultate. Prethodna studija koristila je drugi ELISpot čitač od našeg, za koji je poznato da ima veliki uticaj na broj spotova.

cistanche koristi za muškarce - jača imuni sistem

Kliknite ovdje za pregled proizvoda Cistanche Enhance Immunity

【Zatražite više】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Nadalje, u multicentričnoj studiji na 96 primatelja transplantacije bubrega srednjeg rizika (D−/R+, D+/R+) koji su također testirani pomoću T-Track® CMV [11], CMV-specifični ELISpot odgovori su bili viši. U studiji Banasa et al., medijan CMV IE-1 specifičnih odgovora od 9-25 SFU na 200,000 limfocita i medijan CMV pp65 specifičnih odgovora od 114-206 na 200,{{17} } limfocita je otkriveno, u zavisnosti od vremenske tačke. Dakle, brojevi spotova mjereni grupom Banasa et al. Čini se da je generalno veći, bilo kod pacijenata na hemodijalizi ili kod pacijenata sa transplantiranim bubregom. Ova razlika jasno pokazuje da granične vrijednosti uvijek moraju biti potvrđene od strane odgovarajuće laboratorije. Vjerovatno smo kao pozitivne definirali samo pacijente sa jakim T-ćelijskim odgovorima, koji su vjerojatnije zaštićeni od reaktivacije CMV-a. Pored toga, analiza kovarijata je pokazala da je CMV IgG značajno povezan sa ELISpot odgovorima specifičnim za CMV. Nadalje, dijaliza i imunosupresivna terapija mogu utjecati na ćelijski CMV-specifični imunitet. CMV seropozitivni pacijenti koji su primali dijalizu ili imunosupresivnu terapiju imali su 29.3-puta ili 5.{23}} puta veće odgovore na CMV pp65 od onih bez dijalize (tj. pacijenata na listi čekanja prije transplantacije bubrega) ili bez imunosupresivnog tretmana. Nasuprot tome, PHA odgovori su bili smanjeni kod pacijenata na dijalizi ili imunosupresiji. Ovo otkriće o imunitetu na CMV je na prvi pogled neočekivano jer bi i dijaliza i imunosupresija trebali dovesti do oštećenja funkcije T-ćelija. Međutim, imunosupresija je pronađena, kao što se očekivalo, nakon stimulacije mitogenom PHA. Ovi podaci su u skladu s prethodnom studijom naše grupe koja pokazuje da su pacijenti sa multiplim mijelomom imali oslabljene odgovore T ćelija na širok spektar mitogena i antigena opoziva, ali ne i na CMV [27]. Detaljno, odgovori T ćelija na četiri mitogena PHA, konkavalin A, mitogen pokeweed i anti-CD3 i sedam antigena opoziva tuberkulin, tetanus toksoid, Candida albicans, herpes simplex virus tip 1, virus varičele zoster i virus gripe A i B bili su značajno niži kod pacijenata sa multiplim mijelomom (n=169) nego kod odgovarajućih zdravih kontrola (n=100). Međutim, odgovori T-ćelija na CMV nisu se značajno razlikovali, a postotak pozitivnih odgovora specifičnih za CMV kod pacijenata bio je značajno veći nego u kontrolama.

cistanche koristi za muškarce - jača imuni sistem

Uzeti zajedno, trenutni podaci pokazuju da CMV-specifični ćelijski imunitet može biti očuvan ili povećan uprkos općoj supresiji imuniteta T ćelija (PHA odgovor). Nadalje, naša studija na drugoj imunokompromitovanoj kohorti (pacijenti s multiplim mijelomom) [27] sugerira da imunosupresija ne utječe podjednako na sve antimikrobne imune odgovore. Prethodne studije pokazuju da starost značajno utiče na imunološki odgovor pojedinca na CMV [26,28,29]. Trenutna studija bi mogla potvrditi ove nalaze kada se radi multivarijantna analiza. Pored starosti, dijaliza (posebno hemodijaliza) utječe na ćelijski CMV imunitet. Prethodna studija je pokazala da hemodijaliza dovodi do izraženije upale u odnosu na peritonealnu dijalizu, što može uzrokovati prerano starenje imunološkog sistema [30]. Štaviše, CMV infekcija igra glavnu ulogu u imunološkom starenju pacijenata sa završnom stadijumom bubrežne bolesti [31]. Zaključno, kod CMV-seropozitivnih pacijenata sa hroničnom bolešću bubrega, ELISpot specifična za CMV pp65 može odrediti podložnost reaktivaciji CMV-a. Kod jedne trećine ovih pacijenata pretpostavlja se povećani rizik zbog odsustva specifičnih odgovora T-ćelija. Broj mrlja specifičnih za CMV povećan je kod pacijenata koji su primali dijalizu i imunosupresivnu terapiju, što može biti u korelaciji sa (subkliničkom) CMV-DNAemijom i "pojačivačem" T ćelija specifičnih za CMV. Međutim, ovu hipotezu treba potvrditi u većim, nezavisnim studijama.

Reference

1. Azevedo, LS; Pierrotti, LC; Abdala, E.; Costa, SF; Strabelli, TM; Campos, SV; Ramos, JF; Latif, AZ; Litvinov, N.; Maluf, NZ; et al. Infekcija citomegalovirusom kod primaoca transplantata. Klinike 2015, 70, 515–523. [CrossRef]

2. Martin-Gandul, C.; Mueller, NJ; Pascual, M.; Manuel, O. Utjecaj infekcije na kroničnu disfunkciju alografta i preživljavanje alografta nakon transplantacije solidnog organa. Am. J. Transplant. 2015, 15, 3024–3040. [CrossRef]

3. Marcelin, JR; Beam, E.; Razonable, RR Infekcija citomegalovirusom u primaoca transplantirane jetre: ažuriranja kliničkog upravljanja. Svijet J. Gastroenterol. 2014, 20, 10658–10667. [CrossRef] [PubMed]

4. Godard, B.; Gazagne, A.; Gey, A.; Baptiste, M.; Vincent, B.; Pegaz-Fiornet, B.; Strompf, L.; Fridman, WH; Glotz, D.; Tartour, E. Optimizacija elispot testa za otkrivanje CD8+ T limfocita specifičnih za citomegalovirus. Hum. Immunol. 2004, 65, 1307–1318. [CrossRef] 5. Korcakova, L. Antitijela na citomegalovirus: Pregled rezultata ponovljenih pregleda kod 208 hemodijaliziranih pacijenata. Taština. Lek. 1995, 41, 454–457.

6. Litjens, NHR; Huang, L.; Dedeoglu, B.; Meijers, RWJ; Kwekkeboom, J.; Betjes, MGH zaštitni citomegalovirus (CMV)- Specifični T-ćelijski imunitet je čest kod pacijenata sa transplantacijom bubrega bez serumskih anti-CMV antitijela. Front. Immunol. 2017, 8, 1137. [CrossRef]

7. Sester, M.; Leboeuf, C.; Schmidt, T.; Hirsch, HH "ABC" imuniteta T ćelija specifičnog za virus u transplantaciji solidnih organa. Am. J. Transplant. 2016, 16, 1697–1706. [CrossRef]

8. Lindemann, M.; Witzke, O.; Lütkes, P.; Fiedler, M.; Kreuzfelder, E.; Philipp, T.; Roggendorf, M.; Grosse-Wilde, H. ELISpot test kao osjetljivo sredstvo za otkrivanje ćelijskog imuniteta nakon vakcinacije protiv gripa kod primalaca transplantiranih bubrega. Clin. Immunol. 2006, 120, 342–348. [CrossRef]

9. Czerkinsky, C.; Andersson, G.; Ekre, HP; Nilsson, LA; Klareskog, L.; Ouchterlony, O. Reverse ELISPOT test za klonsku analizu proizvodnje citokina. I. Popis ćelija koje luče gama-interferon. J. Immunol. Metode 1988, 110, 29–36. [CrossRef]

10. Gliga, S.; Korth, J.; Krawczyk, A.; Wilde, B.; Horn, PA; Witzke, O.; Lindemann, M.; Fiedler, M. T-Track-CMV i QuantiFERON CMV testovi za predviđanje zaštite od reaktivacije CMV kod primalaca transplantiranih bubrega. J. Clin. Virol. 2018, 105, 91–96. [CrossRef]

11. Banas, B.; Steubl, D.; Renders, L.; Chittka, D.; Banas, MC; Wekerle, T.; Koch, M.; Witzke, O.; Muhlfeld, A.; Sommerer, C.; et al. Klinička validacija novog enzimsko-vezanog imunosorbentnog testa zasnovanog na in vitro dijagnostičkoj analizi za praćenje citomegalovirus-specifičnog ćelijsko posredovanog imuniteta kod primaoca transplantacije bubrega: multicentrična, longitudinalna, prospektivna, opservacijska studija. Transpl. Int. 2018, 31, 436–450. [CrossRef]

12. Walker, S.; Fazou, C.; Crough, T.; Holdsworth, R.; Kiely, P.; Veale, M.; Bell, S.; Gailbraith, A.; McNeil, K.; Jones, S.; et al. Ex vivo praćenje odgovora T-ćelija specifičnih za humani citomegalovirus CD8+ pomoću QuantiFERON-CMV. Transpl. Zaraziti. Dis. 2007, 9, 165–170. [CrossRef]

13. Ruan, Y.; Guo, W.; Liang, S.; Xu, Z.; Niu, T. Dijagnostičke performanse praćenja imunog sistema citomegalovirusa (CMV) pomoću ELISPOT i QuantiFERON-CMV testa u transplantaciji bubrega: članak usklađen sa PRISMA-om. Medicina 2019, 98, e15228. [CrossRef] [PubMed]

14. Sester, U.; Gartner, BC; Wilkens, H.; Schwaab, B.; Wossner, R.; Kindermann, I.; Girndt, M.; Meyerhans, A.; Mueller-Lantzsch, N.; Schafers, HJ; et al. Razlike u nivoima T-ćelija specifičnih za CMV i dugoročna osjetljivost na CMV infekciju nakon transplantacije bubrega, srca i pluća. Am. J. Transplant. 2005, 5, 1483–1489. [CrossRef] [PubMed]

15. Chanouzas, D.; Small, A.; Borrows, R.; Ball, S. Procjena testa oslobađanja interferona-gama T-SPOT.CMV kod primalaca transplantiranih bubrega: kohortna studija sa jednim centrom. PLOS ONE 2018, 13, e0193968. [CrossRef] [PubMed]

16. Barabas, S.; Spindler, T.; Kiener, R.; Tonar, C.; Lugner, T.; Batzilla, J.; Bendfeldt, H.; Rascle, A.; Asbach, B.; Wagner, R.; et al. Optimizovani IFN-gama ELISpot test za osetljivo i standardizovano praćenje efektorskih ćelija koje reaguju na CMV protein i ćelijski posredovanog imuniteta. BMC Immunol. 2017, 18, 14. [CrossRef] [PubMed]

17. Shin, KH; Lee, HJ; Chang, CL; Kim, EJ; Lim, S.; Lee, SJ; Ryu, JH; Yang, K.; Choi, BiH; Lee, TB; et al. Imunitet T ćelija specifičan za CMV predviđa ranu viremiju nakon transplantacije jetre. Transpl. Immunol. 2018, 51, 62–65. [CrossRef]

18. Rogers, R.; Saharia, K.; Chandorkar, A.; Weiss, ZF; Vieira, K.; Koo, S.; Farmakiotis, D. Kliničko iskustvo s novim testom koji mjeri citomegalovirus (CMV)-specifičan CD4+ i CD8+ T-ćelijski imunitet pomoću protočne citometrije i intracelularnog bojenja citokina za predviđanje klinički značajnih CMV događaja. BMC Infect. Dis. 2020, 20, 58.

19. Thompson, G.; Boan, P.; Baumwol, J.; Čakera, A.; MacQuillan, G.; Swaminathan, S.; Lavanda, M.; Flexman, J.; James, I.; John, M. Analiza QuantiFERON-CMV testa, CMV viremija i antivirusni tretman nakon transplantacije solidnih organa u Zapadnoj Australiji. Patologija 2018, 50, 554–561. [CrossRef]

20. Kumar, D.; Mian, M.; Singer, L.; Humar, A. Interventna studija koja koristi ćelijski posredovani imunitet za personalizaciju terapije za infekciju citomegalovirusom nakon transplantacije. Am. J. Transplant. 2017, 17, 2468–2473. [CrossRef]

21. Manuel, O.; Husain, S.; Kumar, D.; Zayas, C.; Mawhorter, S.; Levi, ME; Kalpoe, J.; Lisboa, L.; Ely, L.; Kaul, DR; et al. Procjena citomegalovirus-specifičnog imuniteta posredovanog ćelijama za predviđanje citomegalovirusne bolesti kod visokorizičnih primatelja transplantiranih organa: multicentrična kohortna studija. Clin. Zaraziti. Dis. 2013, 56, 817–824. [CrossRef] [PubMed]

22. Kumar, D.; Chin-Hong, P.; Kayler, L.; Wojciechowski, D.; Limaye, AP; Osama Gaber, A.; Lopte.; Mehta, AK; Cooper, M.; Blanchard, T.; et al. Prospektivna multicentrična opservaciona studija ćelijski posredovanog imuniteta kao prediktora za infekciju citomegalovirusom kod primalaca transplantiranih bubrega. Am. J. Transplant. 2019, 19, 2505–2516. [CrossRef]

23. Lisboa, LF; Kumar, D.; Wilson, LE; Humar, A. Klinička korisnost citomegalovirusnog imuniteta posredovanog ćelijama kod primatelja transplantata s viremijom citomegalovirusa. Transplantacija 2012, 93, 195–200. [CrossRef]

24. Chiereghin, A.; Potena, L.; Borgese, L.; Gibertoni, D.; Squarzoni, D.; Turello, G.; Petrisli, E.; Piccirilli, G.; Gabrielli, L.; Grigioni, F.; et al. Praćenje citomegalovirusnog (CMV) specifičnog ćelijski posredovanog imuniteta u primaocima transplantiranih srca: klinička korist QuantiFERON-CMV testa za upravljanje posttransplantacijskom CMV infekcijom. J. Clin. Microbiol. 2018, 56, e{6}}. [CrossRef]

25. Banas, B.; Steubl, D.; Renders, L.; Wekerle, T.; Koch, M.; Witzke, O.; Muhlfeld, A.; Sommerer, C.; Habicht, A.; Hugo, C.; et al. Klinička validacija T-Track (R) Cmv za procjenu funkcionalnosti Cmv-specifičnog ćelijski posredovanog imuniteta kod primalaca transplantiranih bubrega. Transplant. Int. 2016, 29, 20.

26. Gliga, S.; Fiedler, M.; Dornieden, T.; Achterfeld, A.; Paul, A.; Horn, PA; Herzer, K.; Lindemann, M. Poređenje tri ćelijska testa za predviđanje tijeka CMV infekcije kod primalaca transplantiranih jetre. Vakcine 2021, 9, 88. [CrossRef]

27. Lindemann, M.; Schuett, P.; Moritz, T.; Ottinger, HD; Opalka, B.; Seeber, S.; Nowrousian, MR; Grosse-Wilde, H. Ćelijska in vitro imunološka funkcija kod pacijenata s multiplim mijelomom nakon kemoterapije visokih doza i autologne transplantacije perifernih matičnih stanica. Leukemia 2005, 19, 490–492. [CrossRef] [PubMed]

28. Yan, Z.; Maecker, HT; Brodin, P.; Nygaard, UC; Lyu, SC; Davis, MM; Nadeau, KC; Andorf, S. Starenje i neslaganje sa CMV povezani su sa povećanom imunološkom raznolikošću između monozigotnih blizanaca. Immun. Starenje 2021, 18, 5. [CrossRef]

29. Zielinski, M.; Tarasewicz, A.; Zielinska, H.; Jankowska, M.; Moszkowska, G.; Debska-Slizien, A.; Rutkowski, B.; Trzonkowski, P. CD28 pozitivni, citotoksični T limfociti specifični za citomegalovirus kao novi biomarker povezan s viremijom citomegalovirusa u bubrežnih alorecipijenata. J. Clin. Virol. 2016, 83, 17–25. [CrossRef]

30. Ducloux, D.; Legendre, M.; Bamoulid, J.; Rebibou, JM; Saas, P.; Courivaud, C.; Crepin, T. Imuni fenotip povezan sa ESRD zavisi od modaliteta dijalize i statusa gvožđa: kliničke implikacije. Immun. Starenje 2018, 15, 16. [CrossRef] 31. Betjes, MG; Huisman, M.; Weimar, W.; Litjens, NH Ekspanzija citolitičkih CD4+CD28- T ćelija u završnoj fazi bubrežne bolesti. Kidney Int. 2008,74, 760–767. [CrossRef] [PubMed]