Kapsule na bazi Cistanche ublažavaju kronični nebakterijski prostatitis kod pacova modulacijom crijevne mikrobiote, serumskih metabolita i signalnog puta SPHK1/S1P1/PI3K/Akt
Jul 04, 2025
3.5. Serumska metabolomska analiza CBC-a kod EAP pacova
3.5.1 Multivarijantna statistička analiza fekalne metabolomike
Analiza glavnih komponenti (PCA) otkrila je jasno razdvajanje grupa pod modom pozitivnih jonanormalne, modelne i visoke doze CBC grupe, saGrupiranje CBC grupe bliže normalnoj grupii dalje od grupe modela. U režimu negativnih jona, uočeno je djelomično preklapanje između normalne i modelne grupe, dok su uzorci tretirani CBC i dalje pokazali dobru diskriminaciju (Slika 5).
Diskriminantna analiza parcijalnih najmanjih kvadrata (PLS-DA) potvrdila je snažan efekat klasifikacije u sve tri grupe pod oba načina jonizacije. The200-put permutacijski testpotvrdio pouzdanost modela, sa aQ² presek ispod 0,05, što ukazuje da nema prekomjernog ugradnje. Opadajući trend uVrijednosti R² i Q²duž X-ose dodatno je potvrđena stabilnost modela (slika 6).
ČAJ NA FORMULI NA BAZI CISTANCHE
3.5.2 Identifikacija diferencijalnih metabolita na koje utiče CBC
Diferencijalni serumski metaboliti su filtrirani na osnovuVIP > 1od PLS-DA,fold promjena veća ili jednaka 1, ip < 0,05. Nakon isključivanja egzogenih jedinjenja,10 značajnih endogenih metabolitaidentifikovane (tabela 9).
3.5.3 Analiza obogaćivanja KEGG puta
KEGG analiza obogaćivanja diferencijalnih metabolita je pokazala daCBC tretman može modulirati ključne metaboličke puteveuključeni u hronični prostatitis. Obogaćeni putevi uključivali su:
Metabolizam sfingolipida
Metabolizam retinola
Metabolizam glicina, serina i treonina
Metabolizam glicerofosfolipida
Metabolizam arahidonske kiseline(Slika 7)
Poznato je da ovi putevi igraju važnu uloguregulacija imuniteta, oksidativni stres i upala.
3.5.4 Korelacija između diferencijalnih metabolita i crijevne mikrobiote
Spearmanova korelacijska analiza provedena je između 10 diferencijalnih metabolita i značajno izmijenjenih bakterijskih taksona. Značajne korelacije uključuju:
PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): u pozitivnoj korelaciji saLactobacillusiRomboutsia ilealis, negativno saNeglectibacter timonensis
SM[d16:2/20:4-2OH]: u pozitivnoj korelaciji saParaprevotella claraiRomboutsia ilealis
PS[18:1/20:0]: u pozitivnoj korelaciji saRomboutsia ilealis, negativno saOscillospiraceae
lysoPA(0:0/18:0): u negativnoj korelaciji saLactobacillusiRomboutsia ilealis, pozitivno saNeglectibacter timonensis
Ureidoizobuterna kiselina: u negativnoj korelaciji saParaprevotella clara
16(R)-HETEi(2R,3R)-2-aminooktadekan-1,3-diol: u pozitivnoj korelaciji saNeglectibacter timonensis
Sfingozin: u negativnoj korelaciji saRomboutsia ilealis, pozitivno saNeglectibacter timonensis
lysoPA(18:0/0:0)iRetinoil-glukuronid: u negativnoj korelaciji saBifidobacterium animalisiRomboutsia ilealis(Slika 8)
Ove korelacije sugerišusnažna veza između metabolomskih promjena izazvanih CBC-om i modulacije crijevne mikrobiote.
3.6 Regulacija SPHK1/S1P1/PI3K/Akt puta od strane CBC-a
Western blot analiza je to pokazalaEkspresije proteina SPHK1 i S1P1 bile su značajno povišene u grupi modelau poređenju sa normalnom grupom. CBC (visoke doze) značajnosmanjene nivoe proteina SPHK1 i S1P1. Nije uočena značajna razlika u ekspresiji SPHK2 među grupama (Slika 9, Tabela 10).
Osim toga,PI3K i Aktnivoi ekspresije su značajno smanjeni u grupi modela, dokp-PI3K i p-Aktnivoi su značajno povećani, što ukazuje na aktivaciju puta. CBC tretmanvraćeni nivoi PI3K i Aktiinhibirao njihovu fosforilaciju, smanjujućiomjeri p-Akt/Akt i p-PI3K/PI3K.
Ovi rezultati ukazuju na toCBC inhibira signalni put SPHK1/S1P1/PI3K/Akt, što doprinosi njegovom antiinflamatornom dejstvu.
4. Diskusija
Hronični nebakterijski prostatitis (CNP) predstavlja više90% svih dijagnoza prostatitisai povezan je sa složenom etiologijom, uključujućipatogena mikrobna infekcija, oksidativni stres, imunološka disregulacija i autoimuni odgovori [20–21].
Nedavni dokazi ukazuju na toupala i autoimunostsu centralne za patogenezu CNP [22-24]. Theeksperimentalni model pacova autoimunog prostatitisa (EAP)., koji oponaša ljudski CNP u histopatologiji i imunološkom odgovoru, stoga je odabran [25].
U našim prethodnim farmakohemijskim studijama seruma, CBC komponente su pronađene uveća količina u fecesu nego u serumu, implicirajućicrijevna interakcija kao primarni način djelovanja(pogledajte materijale za poboljšane publikacije CNKI).
CBC poboljšava patologiju prostate i inflamatorne indekse
HE bojenje je pokazalo da je CBC ublažioinfiltracija limfocita, restauriranacinarna struktura, i povećanasekrecije žlezda. CBC značajnosmanjen broj leukocitau homogenatima prostate i restauriranigustina lecitina- oba ključna CNP dijagnostička markera [26–28]. Upala dovodi do oštećenja epitela i smanjenog lučenja lecitina, dok aktivirani makrofagi gutaju lecitinska tijela [29]. CBC je efikasno preokrenuo ove patološke promjene.
CBC takođesmanjeni proinflamatorni citokini(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) ipovišeni protuupalni IL-10, podržavajući njegovo snažno protuupalno djelovanje.
CBC reguliše disbiozu crijevne mikrobiote
CNP je usko povezan saneravnoteža crijevne mikrobiote, što može smanjitikratkolančane masne kiseline (SCFA)i ugrožavaju crijevnu barijeru, dozvoljavajućiLPS translokacijai izazivanje upale prostate putemmolekularni obrasci povezani s mikrobima (MAMP) [30].
Studije to pokazujuCistanche polifenolipoboljšati neravnotežu mikrobiote i modulirati ključne taksone uključene uupalna bolest crijeva (IBD)[31]. U ovoj studiji,Lactobacillus i Bifidobacterium animalissu iscrpljeni kod EAP pacova, ali su se oporavili nakon CBC tretmana. Poznato je da ovi probiotici ublažavaju urogenitalnu upalu [32-33]. Nasuprot tome,Veillonella, često obogaćen autoimunim stanjima [34], bio je povišen kod EAP pacova i smanjen nakon CBC primjene. Slično,Prevotellaceae, povezan s rakom prostate [35], obogaćen je u EAP grupi i smanjen CBC-om.
CBC modulira ključne metaboličke puteve
Otkrivena metabolomikaelevacija sfingozinakod EAP pacova, značajno smanjen CBC, što ukazuje na uključenost umetabolizam sfingolipida. Sfingolipidi su ključni strukturni i signalni molekuli uključeni urast ćelija, apoptozu i imunološku regulaciju [36].
sfingozin-1-fosfat (S1P), sintetizovan odSPHK1/2, je moćan lipidni medijator koji se vezuje zaS1P receptori (S1PRs)za regulaciju trgovine imunološkim ćelijama i umiješan je uupalnih i autoimunih bolesti[37–39]. S1PR modulatorFTY720 (fingolimod)pokazalo se da smanjuje upalu i oštećenje tkiva u EAP modelima [40].
S1P također aktivira nizvodne puteve kao što suPI3K/Akt, koji su povezani s kroničnom upalom. U našoj studiji, CBCsniženi SPHK1 i S1P1, i inhibiranoPI3K i Akt fosforilacija, što ukazuje na regulatorni efekat na ovu kritičnu osu.
Zaključak
Ova studija, integracijasekvencioniranje crijevne mikrobiote i neciljana metabolomika, to pokazujeKapsule na bazi Cistanchea (CBC)efektivno:
Poboljšajteoštećenje tkiva prostate
Suppressinflamatornih citokina
Vratikorisna crijevna flora
Regulirajtemetabolizam sfingolipida
InhibitSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalizacija
Ovi nalazi pružajuuvjerljivi dokaziza potencijal CBC-a kao avišeciljna biljna terapija za kronični nebakterijski prostatitis, i ponuditi anaučne osnove za njegovu proširenu kliničku primjenu.
