Promjene u razinama feniletanoidnih glikozida, antioksidativne aktivnosti i drugih kvalitetnih svojstava u kriškama Cistanche Deserticola obradom parom

Fang Peng, Jun Chen, Xia Wang, Changqing Xu, Tonguing Liu i Rong Xu

Institut za razvoj ljekovitog bilja, Kineska akademija medicinskih nauka, Peking Union Medical College; 151 Malianwa Road, Peking 100193, Kina

Ningxia Yongning plantaža bilja Cistanche; Yonghuang Road, Yinchuan 750100, Kina.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Abstract

Istraživali smo uticaj vremena parenja naCistanchedeserticola YC MA seče analizom nivoa bioaktivnih jedinjenja, antioksidativne aktivnosti i gubitka težine u poređenju sa svežim, direktno sušenim u pećnici i blanširanim uzorcima. Svježi uzorci su imali izuzetno niske razine feniletanoidnih glikozida i antioksidativne aktivnosti. Niži nivoi gubitka težine i veće količine rastvorljivih šećera, polisaharida i razblaženih ekstrakata rastvorljivih u etanolu pronađeni su kada su kriške kuvane na pari, a ne blanširane. Kriške kuhane na pari 5 i 7 minuta sadrže značajno (str<0.05) higher="" amounts="" of="" acteoside,="" isoacteoside,="" and="" 2′-acetylacteoside="" than="" directly="" oven-dried="" samples.="" however,="" soluble="" sugars="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts="" decreased="" gradually="" throughout="" the="" steaming="" process.="" the="" concentration="" of="" polysaccharides="" fluctuated="" during="" the="" steaming="" process.="" the="" steaming="" time="" had="" a="" consistent="" effect="" on="" antioxidant="" properties="" evaluated="" by="" oxygen="" radical="" absorbance="" capacity="" (orac),="" 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl="" free="" radical="" scavenging="" activity="" (dpph),="" and="" ferric="" reducing="" antioxidant="" property="" (frap),="" showing="" a="" significant="" increase="" and="" reaching="" 108.62,="" 23.08,="" and="" 11.68="" micromoles="" trolox="" per="" mass="" of="" fresh="" slice="" (μmol="" te/g="" fw),="" respectively.="" the="" present="" results="" suggest="" that="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" can="" be="" subjected="" to="" approximately="" 5–7="" min="" of="" steaming="" to="" improve="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="" activity,="" while="" still="" preserving="" the="" amounts="" of="" soluble="" sugars,="" polysaccharides,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts.="" these="" results="" would="" help="" to="" improve="" the="" production="" process="" for="" fresh-cut="" chinese="" medicines="" and="" increase="" the="" understanding="" of="" their="" associated="" health="">

cistancheučinak izbjeljivanja na kožu do antioksidacije

Ključne riječi: parenje;Cistanchedeserticola; feniletanoidni glikozid; antioksidativna aktivnost; svježe rezano

CistanchedeserticolaYC MA (Orobanchaceae), poznatiji kao "pustinjski ginseng", dugo se koristi kao tonik u Kini i Japanu. Mesnate stabljike se režu na kriške za liječenje raznih bolesti uključujući impotenciju, žensku neplodnost, osjećaj hladnoće u slabinama i kolenima i gerijatrijski zatvor. Poslednjih godina, nekoliko studija je otkrilo njegovu efikasnost na eksperimentalnim modelima koji su povezani sa neurološkim poremećajima, posebno Alchajmerovom bolešću i Parkinsonovom bolešću.1) Tržište zdrave hrane postaje sve zainteresovanije za ovaj korisni prirodni dodatak ishrani. Vino i čaj od sočnih stabljika popularna su zdrava hrana koja ublažava umor i poboljšava učenje i pamćenje. C. deserticola je bogat izvor feniletanoidnih glikozida, polisaharida i rastvorljivih šećera, koji uglavnom pokazuju antioksidativni, 2,3) neuroprotektivni, 4,5) hepatoprotektivni, 6) imunitet, 7–9) laksativ,10) i antioksidans -starenje11), među kojima se antioksidativna aktivnost smatra osnovom ostalih farmakoloških djelovanja. Ehinakozid i akteozid su reprezentativni markeri za kontrolu kvalitetaCistanchesHerbau Kineskoj farmakopeji (izdanje 2015.), zbog njihove dominantne rasprostranjenosti, specifičnosti roda i značajnih bioaktivnosti. Određivanje razrijeđenih ekstrakata rastvorljivih u etanolu je takođe sadržano u kontroli kvalitetaCistanchesHerba. Cistanozid A, izoakteozid i 2′-acetilakteozid su također prijavljeni da su u izobilju u C. deserticola. 12)

Sve veća potražnja za C. deserticola uvelike je podstakla njen uzgoj. C. deserticola pripada višegodišnjoj parazitskoj biljci, koja uglavnom raste u sušnim ili polusušnim područjima sjeverozapadne Kine.13) Neposredno nakon berbe, ove jako zašećerene, teške sirove stabljike moraju se osušiti kako bi se spriječio gubitak hranljivih sastojaka i kvarenje. Svježe stabljike obično sadrže 75-85 posto vode, a nivo vode treba spustiti na ispod 10 posto radi njihovog očuvanja. U većiniCistanche-proizvodnim regionima, cele sveže stabljike se stavljaju na otvoreno polje oko 2 meseca radi prethodnog procesa sušenja. Osušeni materijal se zatim transportuje u fabrike, natapa u vodi, reže na kriške i ponovo suši. Kašnjenje u preradi narezaka može biti rezultat slabo obrazovanih ili loše opremljenih poljoprivrednika. Međutim, glavni problem je nedostatak znanja i tehnologije koja bi omogućila efikasan proizvodni proces.

Obrada visokom toplinom se široko koristi na povrću i voću i može inhibirati rast mikroba i produžiti vijek trajanja.14–16) Međutim, također može dovesti do promjena u izgledu i sastavu hranjivih tvari. Određene bioaktivne komponente,17) i farmakološke aktivnosti, kao što je antioksidativna aktivnost,18) se povećavaju u ljekovitom bilju nakon kuhanja na pari. Stoga, kuhanje C. deserticola na pari može poboljšati nekoliko zdravstvenih prednosti. Također je zabilježeno da upotreba kuhanja na pari ili blanširanja svježe rezane C. deserticola povećava količine ehinakozida i akteozida.19,20) Međutim, nije provedeno detaljno istraživanje kako bi se uporedile promjene u bioaktivnim jedinjenjima i antioksidativnoj aktivnosti svježe rezane C. deserticola tokom procesa parenja. Stoga je cilj ove studije bio ispitati utjecaj vremena kuhanja na pari (1, 3, 5, 7 min) na broj feniletanoidnih glikozida, polisaharida, rastvorljivih šećera, razrijeđenih ekstrakata rastvorljivih u etanolu, gubitak težine i antioksidativna svojstva u C. kriške deserticole u poređenju sa tri druge grupe (svježe, direktno sušene u pećnici, blanširane).

cistancheimaju efekte izbjeljivanja kože iantioksidacija

Eksperimentalno

Hemikalije

Hemikalije analitičkog kvaliteta: metanol, etanol, D-glukoza, sumporna kiselina, kalijum hidrogen fosfat i kalijum dihidrogen fosfat monohidrat nabavljeni su od Peking Chemical Works (Peking, Kina). Mravlja kiselina i fenol su kupljeni od Sinopharm Chemical Reagent Co. (Šangaj, Kina). HPLC metanol je kupljen od Fisher Scientific-a (Toronto, Kanada). Dejonizovana voda je dobijena korišćenjem Milli-Q sistema (Millipore Corp., Bedford, MA, SAD). 2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) je obezbijedila Alfa Aesar (Ward Hill, MA, SAD) i 2,2′-azobis(2-amino-propan) dihidroklorid (AAPH ) od Adamas-beta (Šangaj, Kina). 6-Metoksi-2,5,7,8- te-trametilhroman-2-karboksilna kiselina (Trolox), 2,6-di-tertbutil-p-krezol ( BHT) i fluorescein (natrijumova so) (FL) dobijeni su od TCI (Tokio, Japan), a komplet za analizu ukupnog antioksidativnog kapaciteta (T-AOC) iz Nanjing Jiancheng Instituta za bioinženjering (Nanjing, Kina). Standardi za akteozid (111530-200706) i ehinakozid (111670-200503) nabavljeni su od Nacionalnog instituta za kontrolu hrane i lijekova (Peking, Kina). Standarde za 2′-acetilakteozid, cistanozid A i izoakteozid je poklonio dr. Zhiguo Ma. Utvrđeno je da je čistoća svakog referentnog jedinjenja preko 98 procenata normalizacijom površine pika detektovane HPLC-diodnim nizom detektora (DAD).

Tretman materijala i određivanje gubitka težine

Uzorci su prikupljeni u proljeće 2014. godine na plantaži NingxiaCistanchesHerba (106.08 stepen N, 38,24 stepen E, 1124,2 m) u Kini, a identifikovao ga je jedan od nas (prof. Jun Chen). Uzorak vaučera deponovan je na Institutu za razvoj ljekovitog bilja, Kineske akademije medicinskih nauka, Peking Union Medical College. Oko 3 kg stabljika C. deserticola nasumično je sakupljeno i isprano čistom vodom. Delovi cvasti su uklonjeni keramičkim nožem, a zatim su stabljike isečene na kriške od 3 mm. Svaki 10{{30} g komad je izmjeren u težini (W0) kao replika. Procijenjeno je sedam eksperimentalnih tretmana s tri ponavljanja po tretmanu. Za kuhanje na pari, četiri serije kriški su stavljene u vodenu paru od 93 stepena na 1, 3, 5 ili 7 minuta. Za blanširanje, jedan tretman je stavljen u vodu od 96 stepeni na 5 min. Svježe i direktno sušene kriške bile su druga dva tretmana prijavljena u ovom eksperimentu. Obrađene kriške su izvagane (W1) i sušene na 60 stepeni u pećnici. Osušene kriške su zatim ponovo izvagane (W2), mljevene i usitnjene (65 mesh). Prahovi uzoraka su čuvani u vakuum vrećama na -20 stepeni do dana analize. Gubitak težine je izračunat na sljedeći način: gubitak težine nakon tretmana visokim temperaturama ( posto )=[(W0−W1)/ W0]×100, gubitak težine nakon sušenja u pećnici ( posto )=[(W0 −W2)/W0]× 100, gdje je W0 početna težina, a W1 i W2 su težine izmjerene nakon tretmana visokom toplinom i sušenja u pećnici, respektivno.

Feniletanoidni glikozidi i antioksidativna svojstva

Ekstrakcija uzoraka

{{0}}.5-g praškastog uzorka ekstrahiran je sa 25 mL 60 posto metanol-vodene otopine pomoću KQ-250DE ultrazvuka (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, Kina) na 40 kHz, 200 W i 40 stepeni u trajanju od 30 min. Nakon ekstrakcije, tretirani uzorci su centrifugirani 10 minuta na 4600×g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Kina). Supernatant je filtriran kroz filter veličine pora 0.45-µm za naknadne analize.

Određivanje feniletanoidnih glikozida

Određivanje ehinakozida, cistanozida A, akteozida, izoakteozida i 2′-acetilakteozida iz uzoraka C. deserticola obavljeno je kao što su opisali Ma et al.21) uz određene modifikacije. Analiza je izvršena korišćenjem 2695–2996 HPLC instrumenta (Waters Corp., Milford, MA, SAD) sa ultraljubičastom apsorpcijom praćenom na 330 nm. Separacija je izvršena na Merck Purospher® Star RP-C18 koloni (250 mm×4,6 mm, 5 µm) koja radi na 30 stepena. Mobilna faza pri brzini protoka od 1 mL/min sastojala se od rastvarača A (metanol) i rastvarača B ({{30}}.1 posto vodene mravlje kiseline, v/v). Gradijentno eluiranje je rađeno na sljedeći način: 28 posto A (0–10 min), 28–38 posto A (10–30 min), 38 posto A (30–45 min) i zapremina injekcije bila je 10 µL. Mješoviti rastvor koji sadrži pet referentnih standarda pripremljen je otapanjem referentnih standarda u 60 posto metanola do konačne koncentracije od 0,20 mg/mL za ehinakozid, 0,21 mg/mL za akteozid, 0,20 mg/mL za 2′-acetilakteozid, 0,05 mg/ mL za cistanozid A i 0,05 mg/mL za izoakteozid. Otopina je zatim razrijeđena na sedam različitih koncentracija da bi se uspostavile kalibracijske krive. Koncentracija feniletanoidnih glikozida u uzorcima izražena je u g/kg svježe mase (FW).

Određivanje kapaciteta apsorpcije radikala kisika (ORAC)

ORAC test je sproveden kako su opisali Huang et al.22) uz neke modifikacije. Kao pozitivna kontrola korišten je sintetički antioksidans BHT. Ukratko, 25 µL razrijeđenih ekstrakta uzoraka i 160 µL FL pomiješano je u mikroploči 96-. Smjesa je inkubirana na 37 stepeni 15 minuta, prije dodavanja 20 µL AAPH. Fluorescencija je praćena korišćenjem 485 nm (ekscitacija) i 520 nm (emisija) u 3-min intervalima tokom 72 min korišćenjem Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, SAD). Trolox (2,5–50,0 µmol/L) je korišten kao referentni standard, a rezultati su izraženi kao mikromol Troloxa po masi svježe kriške, µmol TE/g FW.

Određivanje aktivnosti uklanjanja slobodnih radikala 2,2-difenil-1-pikrilhidrazila (DPPH)

DPPH test je izveden kao što su opisali Goupy et al.23) uz neke modifikacije. Kao pozitivna kontrola korišten je sintetički antioksidans BHT. Ukratko, 1 ml razrijeđenog ekstrakta uzorka pomiješan je sa 1 mL rastvora 0.2 mmol/L DPPH metanola. Rastvori su držani u mraku na 25 stepeni 90 min, a zatim je mjerena apsorpcija na 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/L) je korišten kao referentni standard, a rezultati su izraženi kao mikromol Troloxa po masi svježe kriške, µmol TE/g FW.

Određivanje antioksidativnog svojstva redukcije željeza (FRAP)

FRAP analiza je izvedena korištenjem kompleta za T-AOC test prema uputama proizvođača.

cistancheimaju funkciju izbjeljivanja kože iantioksidacija

Rastvorljivi šećeri i polisaharidi

Priprema uzoraka rastvorljivih šećera

0.5-g praškastog uzorka ekstrahiran je sa 25 mL 80-postotnog vodenog rastvora etanola pomoću KQ-250DE ultrazvuka na 40 kHz, 150 W i 80 stepeni tokom 30 minuta. Prva ekstrakcijska otopina je filtrirana i prebačena u volumetrijsku tikvicu od 50-mL. Sedimenti su ponovo ekstrahovani, a filtrat je kombinovan sa prvom ekstraktivnom otopinom u volumetrijskoj tikvici 50-mL i napunjen do oznake sa 80 posto vodenim rastvorom etanola. Zatim je 1 mL ovog rastvora pipetirano u 10-mL staklenu epruvetu da bi se ispario etanol u kipućoj vodenoj kupelji. Dodana je destilirana voda (5 mL) da se ostatak otopi, a zatim je prebačen u volumetrijsku tikvicu 100-mL i napunjen do oznake destilovanom vodom. Konačno, 2 mL ove razrijeđene otopine korišteno je za određivanje rastvorljivih šećera.

Priprema uzoraka polisaharida

Sedimenti ekstrakcije rastvorljivih šećera su osušeni na vazduhu i ekstrahovani sa 25 mL destilovane vode KQ- 250DE ultrazvukom na 40 kHz, 150 W i 80 stepeni tokom 30 minuta. Prva ekstrakcijska otopina je filtrirana i prebačena u volumetrijsku tikvicu od 50-mL. Sedimenti su ponovo ekstrahovani, a filtrat je kombinovan sa prvim ekstraktivnim rastvorom u volumetrijskoj tikvici 50-mL i napunjen do oznake destilovanom vodom. Zatim je 5-mL otopina ovoga pipetirana u volumetrijsku tikvicu 50-mL i napunjena do oznake destilovanom vodom. Konačno, 2 mL ove razrijeđene otopine korišteno je za određivanje polisaharida.

Određivanje rastvorljivih šećera i polisaharida

Određivanje rastvorljivih šećera i polisaharida izvršeno je metodom fenol-sumporna kiselina, kako su opisali Wang et al.24) Jedan mililitar 6-postotnog rastvora fenola je dodat u 2 mL rastvora uzorka i dobro promešan. Zatim je brzo dodano 5 mL koncentrovane sumporne kiseline i mućkano 5 minuta. Smjesa je prebačena u kipuću vodenu kupelj na 15 minuta i brzo ohlađena na sobnu temperaturu radi ultraljubičaste detekcije. Apsorpcija ultraljubičastog zračenja je praćena na 490 nm u UV2550 spektrofotometru (Shimadzu Co., Kyoto, Japan). Destilovana voda je korištena kao slijepa proba. Referentna standardna bezvodna D-glukoza je precizno izmjerena i otopljena u destilovanoj vodi do konačne koncentracije od 0,10 mg/mL. Zatim je 1, 2, 3, 4, 5, 6 i 7 ml osnovnog rastvora pipetirano u sedam volumetrijskih tikvica od 10-mL i napunjeno do oznake destilovanom vodom. Zatim je korišteno sedam različitih koncentracija standardnih otopina za uspostavljanje kalibracijskih krivulja.

Razrijeđeni ekstrakti rastvorljivi u etanolu

Uzorci (4.0 g) su precizno izvagani kako bi se odredili njihovi razrijeđeni ekstrakti rastvorljivi u etanolu, prema metodi opisanoj u Kineskoj farmakopeji (izdanje 2015.).25) Uzorak u prahu je izvagan (W3) i ekstrahiran sa 100 mL 50-postotnog vodenog rastvora etanola u 250-mL konusnoj tikvici uz povremeno mućkanje 6 h i ostavljeno da odstoji 18 h. Ekstrakcijski rastvor je filtriran i 20 ml filtrata je upareno do suva, sušeno na 105 stepeni 3 h i hlađeno u eksikatoru (silika gel) 30 min. Konačno, količina je precizno izmjerena (W4). Sadržaj razrijeđenog ekstrakta rastvorljivog u etanolu izražen je kao g/kg FW uzorka. Razrijeđeni ekstrakti rastvorljivi u etanolu izračunati su na sljedeći način: razrijeđeni ekstrakti rastvorljivi u etanolu (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, gdje je W3 početna težina , W4 je težina izmjerena nakon ekstrakcije, a W5 je gubitak težine nakon sušenja u pećnici ( posto ).

Statistička analiza

Da bi se razjasnile bilo kakve razlike među tretiranim grupama, primijenjena je jednosmjerna ANOVA korištenjem SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Razlike su procijenjene Duncan testom sa granicom značajnosti od 0.05. Podaci su izraženi kao srednja vrijednost±standardna devijacija (SD) (n=3).

Rezultati i diskusija

Gubitak težine

Težina kriški C. deserticola direktno određuje njegovu komercijalnu vrijednost na tržištu ljekovitog bilja. Kao što je prikazano u Tabeli 1, gubitak težine C. deserticola analiziran je nakon tretmana visokom toplinom i sušenja u pećnici. Niži nivoi gubitka težine su pronađeni kada su kriške direktno sušene u pećnici, a ne parene ili blanširane. Blanširani uzorci imali su najveći nivo gubitka težine. Uzorci kuhani na pari imali su veći nivo gubitka težine uz duže vrijeme kuhanja na pari. Sedam minuta kuhanja na pari, najduže vrijeme da svježe rezane kriške zadrže oblik pokazalo se značajno (str.<0.05) higher="" levels="" of="" weight="" loss="" after="" oven-drying="" than="" 5="" min="" of="" steaming.="" since="" phenylethanoid="" glycosides="" had="" been="" detected="" in="" the="" hot="" water="" (data="" not="" shown),="" it="" suggested="" that="" blanching/steaming="" promoted="" more="" water-soluble="" compounds="" to="" be="" dissolved="" in="" the="" hot="" water.="" concerning="" weight="" loss="" after="" high-heat="" exposure,="" samples="" steamed="" for="" 1="" min="" exhibited="" extremely="" low="" weight="" loss.="" therefore,="" 1="" min="" of="" steaming="" was="" too="" short="" to="" make="" the="">Cistanchetkivo je bilo krhko, tako da je bilo manje sposobno da otpusti bioaktivna jedinjenja (kao što su feniletanoidni glikozidi) tokom naknadnog postupka ekstrakcije, u poređenju sa uzorcima koji su duže pareni.

Phenylethanoid Glycosides

Nivoi ehinakozida, cistanozida A, akteozida, izoakteozida i 2′-acetilakteozida u kriškama C. deserticola obrađenih različitim metodama prikazani su na slici 1. Uzorci kuhani na pari 7 minuta sadržavali su 2,16 g/kg FW ehinakozida i {{6} }.29 g/kg FW cistanozida A, povećanje od -140 i -6 puta, respektivno, u poređenju sa svježim kriškama. Sadržaj feniletanoidnih glikozida naglo je porastao kada su svježi uzorci tretirani visokom temperaturom i sušenjem, posebno akteozida, izoakteozida i 2′-acetilakteozida, dok u svježim uzorcima nisu otkriveni. Jedan od mogućih razloga za to može biti razgradnja feniletanoidnih glikozida peroksidazom i -glukozidazom.26) Ovi enzimi bi bili inaktivirani u uzorcima osušenim visokim temperaturama i smanjenim sadržajem vode, što bi dovelo do zadržavanja visokih nivoa feniletanoidnih glikozida u ekstraktima. Štaviše, feniletanoidni glikozidi su fenolna jedinjenja, koja bi se sintetizirala u svježim biljkama kao odgovor na stres visoke temperature i gubitka vlage.27)

Prijavljeno je da i kuhanje na pari i blanširanje svježe rezane C. deserticola povećavaju sadržaj ehinakozida i akteozida.19,20) Međutim, u ovoj studiji, blanširanje je dalo značajan (p<0.05) lower="" concentration="" of="" acteoside="" and="" cistanoside="" a="" than="" drying="" directly.="" regarding="" the="" total="" concentration="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides,="" the="" blanched="" samples="" were="" still="" lower="" than="" the="" directly="" oven-dried="" ones="" (1.73,="" 2.35="" g/kg="" fw,="" respectively).="" slices="" steamed="" for="" 5="" and="" 7="" min="" contained="" significantly=""><0.05) higher="" amounts="" of="" acteoside,="" isoacteoside,="" and="" 2′-acetylacteoside="" than="" directly="" oven-dried="" samples.="" in="" general,="" the="" highest="" levels="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" were="" found="" in="" the="" steamed="" samples,="" suggesting="" that="" the="" above-mentioned="" pharmacological="" activities="" produced="" by="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" c.="" deserticola="" slices="" may="" be="" enhanced="" by="" steaming="">

Nadalje, otkrili smo da je vrijeme kuhanja na pari bilo ključno za određivanje sadržaja feniletanoidnih glikozida. Ehinakozid, cistanozid A, akteozid i izoakteozid su pokazali sličan trend rasta tokom procesa parenja, koji se naglo povećao (na 1, 3 min) i dostigao maksimalne nivoe za 7 min. Nisu uočene značajne promjene u četiri gore navedena feniletanoidna glikozida tokom procesa parenja od 3 do 7 min. Naprotiv, 2′-acetil-

akteozid se značajno povećao (str<0.05) with="" processing="" time.="" notably,="" the="" levels="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" slices="" steamed="" for="" 1="" min="" were="" significantly=""><0.05) lower="" than="" directly="" oven-dried="" slices,="" except="" isoacteoside.="" therefore,="" 1="" min="" steaming="" of="" 3-mm="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" was="" not="" long="" enough="" to="" inactivate="" the="" above-mentioned="" enzymes.="" higher="" total="" levels="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides="" were="" observed="" when="" the="" slices="" were="" steamed="" for="" 5="" and="" 7="" min="" (3.20,="" 3.52="" g/kg="" fw,="" respectively)="" rather="" than="" directly="" oven="" drying.="" steaming="" from="" 5="" to="" 7="" min="" more="" effectively="" promoted="" the="" extraction="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" from="" c.="" deserticola,="" leading="" to="" a="" higher="" level="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" the="">

Antioksidativna aktivnost

Antioksidativna svojstva kriški, kako su ispitani ORAC, DPPH i FRAP, prikazana su na slici 2. Kao što se očekivalo, ORAC vrijednosti su pokazale velike varijacije među uzorcima, u rasponu od 13,34 µmol TE/g FW u svježim uzorcima, do 108,62 µmol TE/g FW na 7 minuta parenja. Tokom procesa parenja, ORAC vrijednost se povećala 4-putu između 1 i 7 minuta parenja. Slični trendovi su uočeni i u DPPH i FRAP testovima, pokazujući brzi porast tokom tretmana parom. Iako su uzorci tretirani parom u početku imali niže antioksidativne vrijednosti (na 1 min), pokazali su mnogo bolje zadržavanje antioksidativnog kapaciteta tokom procesa. U slučaju blanširanja nisu uočene značajne razlike u antioksidativnim svojstvima u odnosu na direktno sušenje u pećnici.

Antioksidativna aktivnost ORAC u sirovim stabljikama ili kriškama C. deserticola nije ranije prijavljena. Međutim, etanolni ekstrakti sirovih stabljika C. deserticola mjereni su u DPPH i FRAP testovima,28 pokazujući visoko antioksidativno djelovanje, nešto niže od 2(3)-t-butil-4-hidroksianizola (BHA) i viši od BHT. Štaviše, feniletanoidni glikozidi izolovani iz C. deserticola ispoljili su snažne aktivnosti uklanjanja DPPH, nešto niže od askorbinske kiseline29) i veće od -tokoferola.2) C. deserticola može biti potencijalni izvor prirodnih antioksidanata, jer antioksidativna svojstva izolovanih čistih jedinjenja iz C. deserticola bili su veći od onih kod nekih sintetičkih antioksidansa. Kao što je prikazano u tabeli 2, BHT je značajno pokazao (str<0.05) higher="" antioxidant="" properties="" than="" c.="" deserticola="" slices="" steamed="" for="" 7="" min.="" therefore,="" there="" is="" still="" a="" big="" gap="" between="" c.="" deserticola="" slices="" and="" synthetic="" antioxidants="" of="" equal="">

DPPH test koristi i mehanizme prijenosa atoma vodika (HAT) i prijenosa jednog elektrona (SET), dok ORAC i FRAP testovi slijede principe HAT i SET reakcija, respektivno.30) U ovoj studiji, opći trendovi antioksidativnog kapaciteta procijenjene trima testovima bile su vrlo slične. Tako smo potvrdili da su sušene kriške C. deserticola (kuhane na pari, direktno sušene u pećnici i blanširane) imale značajno (p<0.05) higher="" levels="" of="" antioxidant="" activity="" than="" fresh="" ones.="" furthermore,="" steaming="" for="" 5="" and="" 7="" min="" significantly=""><0.05) enhanced="" levels="" of="" antioxidant="" activity="" compared="" with="" directly="" oven="" drying="" and="" blanching.="" overall,="" our="" results="" showed="" that="" steaming="" of="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" slices="" was="" effective="" in="" preserving="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="">

Rastvorljivi šećeri, polisaharidi i razrijeđeni ekstrakti rastvorljivi u etanolu

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanširano. Blanširane kriške imale su vrlo niske nivoe rastvorljivih šećera, polisaharida i razblaženog ekstrakta rastvorljivog u etanolu, što je dobro odgovaralo njihovom velikom gubitku težine. Svježi uzorci su imali značajan (str<0.05) higher="" content="" of="" soluble="" sugars="" (62.89="" g/kg="" fw)="" and="" polysaccharides="" (17.36="" g/kg="" fw)="" than="" the="" other="" samples,="" suggesting="" that="" heat="" treatment="" (oven="" drying,="" steaming,="" blanching)="" on="" fresh-cut="" samples="" would="" reduce="" the="" extraction="" of="" soluble="" sugars="" and="" polysaccharides.="" heat="" treatment="" inhibited="" the="" hydrolysis="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" to="" release="" glucose,="" rhamnose,="" and="" so="" on.="" moreover,="" heat="" treatment,="" used="" as="" abiotic="" stress="" factors="" on="" fresh="" slices,="" gave="" rise="" to="" the="" synthesis="" of="" several="" phenylpropanoid="" compounds="" including="" phenylethanoid="" glycosides.27)="" particularly,="" sugars="" contained="" in="" the="" slices="" were="" dissolved="" in="" the="" hot="" water="" to="" different="" extents="" by="" steaming="" or="" blanching.="" thus,="" it="" is="" not="" surprising="" to="" see="" that="" the="" content="" of="" soluble="" sugars="" decreased="" by="" 23.88%="" in="" steaming="" and="" by="" 60.82%="" in="" blanching,="" while="" the="" content="" of="" polysaccharides="" decreased="" by="" 41.33%="" in="" steaming="" and="" by="" 53.83%="" in="" blanching,="" compared="" with="" fresh="" slices.="" it="" has="" been="" reported="" that="" the="" steaming="" process="" can="" increase="" reducing="" sugars="" and="" acidic="" polysaccharides="" in="" ginseng="" radix="" et="" rhizoma,18)="" and="" mono="" sugars,="" including="" galactose="" and="" glucose,="" in="" rehmanniae="" radix.17)="" however,="" the="" whole="" dried="" crude="" drugs="" studied="" in="" the="" above-mentioned="" literature="" were="" quite="" different="" from="" the="" fresh-cut="" slices="" used="" in="" the="" present="">

Direktno sušene kriške imale su najveći sadržaj razrijeđenih ekstrakata rastvorljivih u etanolu (89,26 g/kg FW), dok su blanširane kriške imale najmanji (47,60 g/kg FW). Iako su sve obrađene kriške C. deserticola ispunjavale standard Kineske farmakopeje (izdanje 2015.) da bi bile kvalifikovane kao Cistanches Herba, blanširane kriške bi donijele manje koristi za zdravlje od uzoraka direktno osušenih u pećnici zbog ozbiljnog gubitka razrijeđenog rastvora u etanolu. ekstrakti. Što se tiče procesa parenja, trend rastvorljivih šećera bio je vrlo sličan trendu uočenom za razrijeđene ekstrakte rastvorljive u etanolu, postepeno opadajući bez značajnih promjena uočenih od 3 do 7 minuta. Koncentracija polisaharida je fluktuirala uz blagi porast tokom cijelog perioda parenja. Primjetno je da je 7 minuta kuhanja na pari pokazalo dobro očuvanje polisaharida, ali veliki gubitak rastvorljivih šećera, dok je 5 minuta kuhanja na pari pokazalo obrnuto u odnosu na direktno sušenje u pećnici.

Zaključak

Po prvi put smo izvijestili o efektu kuhanja na pari na bioaktivna jedinjenja i antioksidativno djelovanje u svježe rezanom C. deserticola i pružili važne informacije za razvoj efikasnih procesa za tretman stabljika C. deserticola nakon berbe. Svježe kriške pokazale su najlošiju efikasnost za ekstrakciju feniletanoidnih glikozida i antioksidativnih jedinjenja, otkrivajući da su te tvari bile sklone enzimskoj razgradnji. Nasuprot tome, pareni uzorci imali su najviše razine feniletanoidnih glikozida i antioksidativnih aktivnosti. Iako je blanširanje neznatno povećalo sadržaj akteozida, izoakteozida i 2′-acetilakteozida u poređenju sa direktnim sušenjem u pećnici, vrijednosti za težinu, rastvorljive šećere, polisaharide i razrijeđene ekstrakte rastvorljive u etanolu su se dramatično smanjile. Za proces parenja, nivoi feniletanoidnih glikozida i polisaharida blago su se povećali tokom vremena. Kuvanje na pari 5 i 7 minuta značajno (str<0.05) enhanced="" total="" levels="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides="" than="" directly="" oven="" drying.="" however,="" the="" longer="" the="" steaming="" process,="" the="" greater="" the="" decrease="" in="" weight,="" soluble="" sugars,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts.="" no="" significant="" decrease="" in="" soluble="" sugars="" was="" observed="" when="" slices="" were="" steamed="" from="" 1="" to="" 5="" min="" compared="" with="" directly="" oven-dried="" samples.="" the="" steaming="" time="" had="" a="" consistent="" effect="" on="" the="" antioxidant="" properties,="" with="" a="" significant="" increase="" evaluated="" by="" the="" dpph,="" orac,="" and="" frap="" assays.="" it="" was="" concluded="" that="" c.="" deserticola="" slices="" can="" be="" successfully="" treated="" with="" 5="" to="" 7="" min="" of="" steaming="" to="" improve="" the="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="" activity,="" while="" preserving="" the="" amounts="" of="" soluble="" sugars,="" polysaccharides,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="">

cistancheje inhibitor tirozinaze koji možeantioksidacija

Priznanja

Ovaj rad je podržan od strane projekta Nacionalne fondacije za prirodne nauke Kine pod brojem granta U14032224 i 81102748, a takođe je podržan od strane Key Technologies R & D Programa iz Ningxia u okviru granta br. YKX-12. Zahvaljujemo dr. Zhiguo Mau na predstavljanju standarda, te Yuchengu Changu i Yuan Liuu na berbi i sakupljanju biljnog materijala u Ningxia Plantation of Cistanches Herba.

Sukob interesa

Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Dopunski materijali

Internetska verzija ovog članka sadrži dodatne materijale.

Reference

1) Wang T., Zhang XY, Xie WY, Am. J. Chin. med., 40, 1123–1141 (2012).

2) Xiong Q., Kadota S., Tani T., Namba T., Biol. Pharm. Bul., 19, 1580–1585 (1996).

3) Sui ZF, Gu TM, Liu B., Peng SW, Zhao ZL, Li L., Shi DF, Yang RY, Carbohydr. Polym., 85, 75–79 (2011).

4) Luo L., Wu XC, Gao HJ, Lv SZ, Wang JH, Wang XW, Chin. Pharm., 24, 2122–2125 (2013).

5) Luo L., Tuerxun A., Wang XW, Chin. J. New Drugs Clin. Rem., 29, 115–118 (2010).

6) Xiong Q., Hase K., Tezuka Y., Tani T., Namba T., Kadota S., Planta Med., 64, 120–125 (1998).

7) Wang XY, Qi Y., Cai RL, Li XH, Yang MH, Shi Y., Acta Lab. Anim. Sci. Sin., 17, 424–427 (2009).

8) Dong Q., Yao J., Fang JN, Ding K., Carbohydr. Res., 342, 1343–1349 (2007).

9) Wang XY, Qi Y., Cai RL, Li XH, Yang MH, Shi Y., Chin. Pharmacol. Bul., 25, 787–790 (2009).

10) Gao JY, Jiang Y., Dai F., Han ZL, Liu HY, Bao Z., Zhang TM, Tu PF, Mod. Brada. med., 17, 307–310, 314 (2015).

11) Xue DJ, Zhang M., Wu XH, Chen XD, Zhan YC, Chin. J. Chin. Mater. med., 20, 687–689, 704 (1995).

12) Lu D., Zhang JY, Yang ZY, Liu HM, Li S., Wu BJ, Ma ZG, J. Sep. Sci., 36, 1945–1952 (2013).

13) Xu R., Chen J., Chen SL, Liu TN, Zhu WC, Xu J., Genet. Re kiselo. Crop Evol., 56, 137–142 (2009).

14) Ornelas-Paz Jde J., Yahia EM, J. Sci. Food Agric., 94, 1078–1083 (2014).

15) Yun Z., Gao HJ, Liu P., Liu SZ, Luo T., Jin S., Xu Q., Xu J., Cheng YJ, Deng XX, BMC Plant Biol., 13, 44 (2013).

16) Gorinstein S., Leontowicz H., Leontowicz M., Namiesnik J., Najman K., Drzewiecki J., Cvikrová M., Martincová O., Katrich E., Trakhtenberg S., J. Agric. Food Chem., 56, 4418–4426 (2008).

17) Chang WT, Choi YH, Van Der Heijden R., Lee MS, Lin MK, Kong HW, Kim HK, Verpoorte R., Hankemeier T., Van Der Greef J., Wang M., Chem. Pharm. Bul., 59, 546–552 (2011).

18) Jin Y., Kim YJ, Jeon JN, Wang C., Min JW, Noh HY, Yang DC, Plant Foods Hum. Nutr., 70, 141–145 (2015).

19) Lei L., Wang XY, CN Patent 200810059282.7 (2009).

20) Tu PF, Qi XB, Jiang Y., Feng J., CN Patent 200410048303.7 (2005).

21) Ma ZG, Yang ZL, Li P., Li CH, J. Liquid Chromatogr. Relat. Technol., 31, 2838–2850 (2008).

22) Huang D., Ou BX, Hampsch-Woodill M., Flanagan JA, Prior RL, J. Agric. Food Chem., 50, 4437–4444 (2002).

23) Goupy P., Hugues M., Boivin P., Amiot MJ, J. Sci. Food Agric., 79, 1625–1634 (1999).

24) Wang LN, Chen J., Yang MH, Chen SL, Shi Y., Qi Y., Liu TN, Chin. Pharm., 18, 1620–1623 (2007).

25) „Kineska komisija za farmakopeju, Farmakopeja Narodne Republike Kine 2015.“, tom IV, China Medical Science Press, Peking, 2015., str. 202.

26) Tamura Y., Nishibe S., J. Agric. Food Chem., 50, 2514–2518 (2002).

27) Hossain MB, Barry-Ryan C., Martin-Diana AB, Brunton NP, Food Chem., 123, 85–91 (2010).

28) Chen BQ, Liu YX, Kang WY, Fine Chem., 27, 342–345 (2010).

29) Yang JH, Hu JP, Rena K., Du NS, J. Chin. Med. Mater., 32, 1067–1069 (2009).

30) Prior RL, Wu X., Schaich K., J. Agric. Food Chem., 53, 4290–4302 (2005).