Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Antinociceptivna aktivnost Cistanche salsa stolona, ​​raste u Republici Kazahstan

Elmira B. Kartbaevaa, et al

SAŽETAK

HerbaCistanche(Cistanche vrsta) u tradicionalnoj kineskoj medicini koristi se za liječenje nekoliko bolesti i simptoma, uključujući bol. Cilj ovog istraživanja bio je procijeniti antinociceptivni učinak hidroetanolaekstrakt odCistanchesalsa(CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloni u životinjskim modelima bola. Hemijski sastavHerbaCistancheje analiziran HPLC-UV. Miševi Swiss Webster (25–30 g, n=6) su oralno prethodno tretirani saHerbaCistanche(10, 30 ili 100 mg/kg) i procijenjen u formalin testu i u odgovoru lizanja izazvanog kapsaicinom ili glutamatom. kazahstanskiHerba Cistanchesastoji se uglavnom od fenilpropanoidnih glikozida, iz kojihechinacoside, acteoside, itubulozidB su glavni sastojci. KadaHerbaCistanchedavan miševima, imao je efekat u obe faze formalinskog testa (77 procenata aktivnosti na 30 mg/kg za fazu 1 i 62 procenata aktivnosti na 100 mg/kg za fazu 2) ukazujući na analgetska i antiinflamatorna svojstva. kazahstanskiHerbaCistancheuspio je smanjiti vrijeme lizanja životinja nakon injekcije glutamata (smanjenje od 81 posto na 30 mg/kg) i kapsaicina (smanjenje od 81 posto na 100 mg/kg). Zaključujemo da bi fenoli prisutni u hidroetanolnom ekstraktu C. salsa mogli biti odgovorni za njegov farmakološki profil. Kako bismo nabavili kvalitetnu sirovinu za tradicionalnu kinesku medicinu, preporučili smo da se ova kazahstanska vrsta standardizira korištenjemehinakozid i acteosidekao markeri.

Ključne riječi:Herba Cistanche,HPLC-UV,Echinacoside, Acteoside, Tubulozid, Standardizacija

Uvod

Cistanchesalsa(CA Mey) Beck, Orobanchaceae, je parazitska biljka iz Republike Kazahstan gdje se koristi kao industrijska sirovina (Sarsenbayev et al., 2011; Grudzinskaya i Gemedzhieva, 2012). Naučna vrijednost ove biljke u tradicionalnoj kineskoj medicini odnosi se na liječenje problema s bubrezima (od bolova do insuficijencije), impotencije, ženske neplodnosti, morbidne leukoreje, obilne metroragije i senilne konstipacije (Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional ChineseDrugs,1977; Chinese Medicinal Herbal, 1988). Hemijski sastav stolona drugih vrstaCistancheKineski naučnici su ga već detaljno proučavali. Identifikovana su sledeća fenolna jedinjenja:echinacoside, tubulozid, acteoside, pored lignana, iridoida i kompleksnog polisaharida (Yong andTu, 2009; Zhang i sur., 2003; Xie i sur., 2005; Jiang i sur., 2009; Suiet al., 2011; Liu i sur., 2013; Zhou et al., 2014).

Shimoda et al. (2009) su pokazali da ova biljka ima hipoholesterolemijski efekat dok Yang i sar. (2013) utvrdili su njegovu hepatoprotektivnu aktivnost. Nan et al. (2013) su izvijestili o protuupalnim djelovanjem njegovih ekstrakata. Kompleksni polisaharid prethodno izolovan iz ove biljke pokazao je imunomodulatorne efekte (Wang et al., 2009).

Iako postoji znatna količinaCistanchestolona u Republici Kazahstan, ne postoji popularna upotreba ove biljke od strane kazahstanskog stanovništva, iako je susjedi u Kini intenzivno koriste. Zbog činjenice da u današnje vrijeme postoji značajan problem u vezi sa zamjenom/falsifikovanjem ljekovitog bilja i sve veće potrebe za standardizacijom lijekova za upotrebu u tradicionalnoj kineskoj medicini, ova studija je osmišljena kako bi se utvrdio fenolni hemijski sastav ove sirovine biljke koja raste u susjednom Kazahstanu. kao i da procijeni njegovu upotrebu kao antinociceptivnu za potencijalno ublažavanje boli – što karakteriše jednu od njegovih glavnih upotreba u tradicionalnoj kineskoj medicini.

materijali i metode

Biljni materijal

Cistanchesalsa (CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloni su sakupljeni u pustinji Moinkum, selo Bakanas, jula 2014. godine u Almatiju. Biljni materijal je identificirao dr. G. Sitpayeva sa Instituta za botaniku i fitointrodukciju, Ministarstvo obrazovanja i nauke Republike Kazahstan gdje je deponovan pod brojem 01-04/306.

Hemijska analiza

Stoloni C. salsa (2 g) su podvrgnuti mikrotalasnoj ekstrakciji. U početku je materijal bio samljeven na 0.001–2.000 mm, a zatim stavljen u hermetičku posudu da se ekstrahira 10 min. na 100–1100 ◦C sa 80 posto etanola (odnos 1:10). Ekstrakt hidroetanolice (CSHE) je analiziran pomoću HPLC-MS. Sirovi ekstrakt je otopljen u metanolu (9,6 mg/ml) i filtriran kroz teflonsku membranu od 0,45 mm prije analize. Tečni hromatograf serije HP 1100 (kompanija Agilent Technologies, Inc., Kalifornija, SAD), opremljen protočnim vakuumskim degazerom, četverokanalnom pumpom s gradijentom pritiska i automatskim injektorom. Fenolna jedinjenja su hromatografski odvojena kolonom Zorbax Eclipse XDB-C18, 2,1 × 50 mm, ispunjenom oktadecilsilil silika gel polimerom (1,8 ). Kromatografska analiza je obavljena uz protok mobilne faze od 0,2 ml/min, radni pritisak eluenta od 175–200 kPa, temperatura peći na koloni od 30 ◦C, zapremina uzorka od 2 ml, način unosa gradijentnog eluenta: 0–36 min 10 posto A – 90 posto B;36 min – 100 posto B (eluent A: metanol, eluent B: 0,2 posto otopina mravlje kiseline). Detekcija je izvršena UV na talasnim dužinama od 254, 334, 350, 410, 450 i 550 nm. Za identifikaciju hemijskih jedinjenja u ekstraktu korišćeno je poređenje dobijenih vremena retencije, UV i masenog spektra sa referentnim jedinjenjima. Kvantitativna analiza je izvršena korištenjem standardaverbascosideiechinacosideanalizirane pod istim hromatografskim uslovima. Njihove kalibracione krive omogućile su izračunavanje količine jednog drugog fenilpropanoidnog glikozida u etanolnom ekstraktu ove biljke. Metoda nije potvrđena.

Životinje

Swiss Webster miševi (20-25 g, stari dva mjeseca) su korišteni u ovoj studiji (donator Instituto Vital Brazil, Niterói, RJ, Brazil). Životinje su držane u standardnim uslovima (ciklus svjetlo-mrak od 12 h, 22 ± 2 stepena i 70-80 posto vlažnosti. Hrana i voda ad libitum). Životinje su primale samo vodu kako bi se izbjegle smetnje hrane u apsorpciji tvari 12 sati prije početka eksperimenata. Aklimatizacija na laboratorijske uslove je trajala najmanje 1 h prije svakog testa. Svi protokoli vođeni su u skladu sa Smjernicama o etičkim standardima za ispitivanje eksperimentalnog bola na životinjama i slijedili su principe i smjernice usvojene od strane Nacionalnog savjeta za kontrolu eksperimenata na životinjama (CONCEA), koje je odobrio Institut za biomedicinske nauke/UFRJ, Etički Komiteta za istraživanje životinja i dobio broj DFBCICB015-04/16. Svi eksperimentalni protokoli su izvedeni tokom svjetlosne faze. Broj životinja po grupi bio je minimalan i prema pravilima iz CONCEA. Na kraju svakog eksperimenta, miševi su ubijeni predoziranjem ketaminom/ksilazinom.

Tretmani

U ovoj studiji, CSHE je procijenjen na 10, 30 i 100 mg/kg. Ekstrakt je otopljen u dimetil sulfoksidu (DMSO, FisherBiotech) kako bi se pripremio osnovni rastvor od 100 mg/ml. PBS je korišten kao razrjeđivač za pripremu različitih doza. Rastvori koji sadrže 10, 30 i 100 mg/kg hidroetanolnog ekstraktaCistanchesalsabili pripremljeni. Standardni lijekovi koji su korišteni bili su morfin 2,5 mg/kg (Merck, razrijeđen u fiziološkom rastvoru fosfatnog pufera (PBS)), acetilsalicilna kiselina 200 mg/kg (Sigma Aldrich, rastvoren sa 5 M natrijum hidroksida (NaOH) u 0,9 postotni fiziološki rastvor) i kapsazepin 10 nMolper paw. Negativnoj kontrolnoj grupi dat je fiziološki rastvor plus DMSO (u istoj koncentraciji kao kod najvećeg tretmana ekstraktom). Svi tretmani (testirani ekstrakt i standardi) su davani oralnim putem. Jedini izuzetak bio je kapsazepin koji se davao intraplantarnom injekcijom.

Akutni bol izazvan formalinom

Rastvor 2,5 posto formalina (37 posto formaldehida) je ubrizgan (20 ul) u plantarnu regiju desne zadnje šape miševa 60 minuta nakon tretmana (hidroetanolni ekstraktCistanchesalsaili acetilsalicilna kiselina 200 mg/kg ili morfin 2,5 mg/kg) (Matheus et al., 2005). Životinje su pojedinačno stavljene u prozirnu staklenu komoru, a trajanje vremena u sekundama koje su proveli ližući svoju pawafter injekciju formalina je zabilježeno i analizirano u dva odvojena perioda, ranoj fazi neurogene boli (0-5 min nakon injekcije) i kasnoj fazi- upalni bol (15-30 min nakon injekcije).

Nocicepcija izazvana kapsaicinom

Ovaj test je baziran na metodi koju su opisali Sakurada et al., uz neke modifikacije (Sakurada et al., 1992). Kapsaicin (20 ul)C18H27NO3 (Galena, Campinas, SP) je ubrizgan u plantarnu regiju desne zadnje šape miševa (1,6 ug/šapa) jedan sat nakon tretmana (hidroetanolni ekstraktCistanchesalsa ili kapsazepin10 nMol/šapa). Životinje su pojedinačno stavljene u staklenu komoru i trajanje(a) lizanja šape je zabilježeno između 0 i 5 minuta nakon injekcije kapsaicina, a zatim analizirano.

Nocicepcija izazvana glutamatom

U metodi koju su opisali Beirith et al. (2002), rastvor glutamata u PBS (20 ul) (l-glutaminska kiselina, Sigma-Aldrich, 3,7 ng/šapa) ubrizgan je u plantarnu regiju desne zadnje šape miševa jedan sat nakon tretmana (hidroetanolni ekstraktCistanchesalsa ili morfin 2,5 mg/kg). Životinje su stavljene pojedinačno u staklenu komoru, a trajanje lizanja šape (sekunde) je zabilježeno između 0 i 15 minuta nakon injekcije glutamata, a zatim analizirano.

Statistička analiza

Hemijski podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost ± SD za pet eksperimenata. Sve farmakološke eksperimentalne grupe sastojale su se od najmanje šest miševa. Analiza jednosmjerne varijanse (ANOVA) praćena Dunnettovim testom omogućila je vizualizaciju statističke značajnosti između grupa koristeći softver GraphPad Prism 5.0. pvrijednosti su se smatrale značajnim kada su bile manje od 0.05 (p <>

Rezultati

CistancheKromatogram ekstrakta salsa hidroetanola (dva različita razrjeđenja) prikazan je na slici 1. Tabela 1 pokazuje određivanje fenolnih spojeva zajedno sa njihovim odgovarajućim vremenima zadržavanja u hromatogramu.

Učinak CSHE na akutni bol izazvan formalinom

U testu akutnog bola izazvanog formalinom, CSHE na 10, 30 i 100 mg/kg je bio u stanju da smanji lizanje šape u prvoj fazi testa poznatoj kao faza neurogenog bola, ova smanjenja su bila 60, 77 i 58 posto, respektivno. . Pored toga, oni su takođe bili efikasni u smanjenju upalnog bola izazvanog tokom druge faze testa, procenat inhibicije upalnog bola bio je 42, 46 i 62 procenta, respektivno (slika 2). Morfijum (2,5 mg/kg) i acetilsalicilna kiselina (200 mg/kg) dali su sledeće rezultate: 55 procenata /33 procenta i 31 procenat /54 procenata za prvu i drugu fazu, respektivno.

Učinak CSHE na nocicepciju izazvanu glutamatom

CSHE je smanjio lizanje izazvano glutamatom u tri testirane doze, 10, 30 i 100 mg/kg za 76, 81 i 53 procenta, respektivno (slika 3). Morfin od 2,5 posto rezultirao je smanjenjem od 76 posto

Učinak CSHE na nocicepciju izazvanu kapsaicinom

Kako bi se provjerilo da li bi CSHE utjecao na nocicepciju preko receptora TRPV1, testiran je na modelu bola izazvanog kapsaicinom. Antinociceptivni efekat kroz ovaj model uočen je za CSHE u tri testirane doze, za 76, 79, odnosno 81 procenat (slika 4). Kapsazepin 10 nMol/šapa rezultirao je smanjenjem od 60 posto.

Diskusija

Ukupno deset fenilpropanoidnih glukozida identifikovano je u hidroetanolnom ekstraktu C. salsa (raste u Kazahstanu).Echinacoside(10,98 mg/g),acteoside(9,44 mg/g) i tubulozid B (7,94 mg/g) su glavna identifikovana jedinjenja. Dobijeni podaci su u korelaciji sa dostupnom literaturom za vrsteCistancheraste u različitim regijama Azije (Zhou et al., 2014.; Xieet al., 2005.; Jiang et al., 2009.).Echinacosideiacteosidesu glavne komponente koje čine osnovu za standardizaciju službenih vrstaCistanchedeserticola andCistanchetubulosa, naveden u kineskoj farmakopeji 2005. Predlažemo da se ova jedinjenja mogu koristiti i za standardizacijuCistanchesalsa stoloni iz Kazahstana, jer su oni glavni u proučavanom hidroetanoekstraktu.

Prema farmakološkim rezultatima ove studije, moguće je sugerirati da je CSHE djelotvoran agens protiv neurogenog bola i upale kao što je uočeno u formalinskom testu. Prema našim saznanjima,Cistanchesalsa nikada nije testirana u odnosu na svoje antinociceptivno djelovanje. Studija iz 2002. saCistanchedeserticola (Lin et al., 2002.) je pokazala da ova biljka pokazuje antinociceptivne i antiinflamatorne aktivnosti kada se analizira na modelima kao što su totalno grčenje, formalin i edem šapa. Iako nije bilo pokušaja da se istraže glavni sastojci ekstrakta koji su bili aktivni, smatrali su da su ekstrakt butanola i vodeni sloj aktivni. Nije iznenađujuće da su ova otapala na skali polariteta koja odgovara fenilpropanoidnim glikozidima koji se nalaze uCistanchesalsa. Štaviše, Lin i saradnici su ustanovili da je antinociceptivno djelovanjeCistancheekstrakti deserticole nisu nastali zbog djelovanja jedinjenja na receptore opijata ili vezani za imunološki sistem. U našem istraživanju, ekstrakti bogati fenilpropanoidima pokazali su aktivnost u obje faze formalinskog testa. Uočena aktivnost je zapravo rezultat farmakološkog cilja koji je ispitivan, a ne bilo kakve moguće motoričke promjene kao što je dokazano terotarod testom. Rezultati testa na formalin ukazuju na potencijal neurogenog bola, kao i boli inducirane inflamatornim medijatorima. U početku smo odlučili da istražimo put neurogenog bola. Budući da slična jedinjenja iz drugih vrsta koje su prethodno proučavane nisu pokazala nikakvu aktivnost opijatnih receptora, odlučili smo da testiramo druge modele, kao što su modeli glutamata i kapsaicina.

Glutamat je ekscitatorni neurotransmiter koji ima važnu ulogu u modulaciji bola u perifernom i centralnom nervnom sistemu. Ovo djelovanje je posredovano ligandom upravljanim jonotropnim glutamatnim receptorima (iGluRs) i metabotropnim glutamatnim receptorima. iGluR se mogu podijeliti na N-metil-d-aspartat (NMDA) i -amino-3-hidroksi-5-metilizoksazol-4-propionsku kiselinu (AMPA) (Kolber, 2015). Istraživanja su pokazala da se pri antagonizaciji NMDA i AMPA receptora sa ketaminom, odnosno kainatom, primjećuju antinocicepcijski efekti. Međutim, antagonisti koji su do sada ciljali na ove receptore izazvali su značajan štetni učinak i iz tog razloga su provedena nova istraživanja koja se fokusiraju na mGluRshoping da bi lijekovi posredovani preko ovog receptora izazvali manje nuspojava (Palazzo et al., 2014). Rezultati testiranja CSHE pokazali su da je ovaj tretman bio efikasan u smanjenju bola izazvanog glutamatom. Međutim, još uvijek nije poznato da li je ovaj efekat posredovan jonotropnim i/ili metabotropikreceptorima. Morfin je jedan od dostupnih lijekova koji djeluju na glutamatergički prijenos (Deyama et al., 2007.). U literaturi je objavljeno da aktivacija glutamatnih receptora povećava odgovore na TRPV1 (Szteyn et al., 2015). Iz tog razloga, moguće je da bi učinak uočen za CSHE mogao biti posljedica aktivnosti na TRPV1, a ne nužno kroz direktan odgovor na glutamatne receptore.

Sljedeći korak ovog istraživanja bio je provođenje testa lizanja šape koristeći kapsaicin kao algetik, koji je agonist TRPV1 receptora. Rezultati su pokazali da je CSHE zaista smanjio bol kroz TRPV1 receptor.

U slučaju CSHE, gotovo u svim testiranim metodologijama, mogli smo uočiti da je doza od 30 mg/kg postigla bolje rezultate od 100 mg/kg. To može biti zbog zasićenja otopine što dovodi do precipitiranih jedinjenja i efektivno manje količine biološki dostupnih lijekova.

Potvrda utvrđenog hemijskog sastava za kazahstanski ekstrakt CSHE bila je važan korak jer su glavni sastojci prisutni u njemu već na neki način potvrdili svoje antinociceptivno/protuupalno djelovanje. Na primjer,echinacosideje uspostavljena kao jedan od aktivnih principa odgovornih za antinociceptivno djelovanje ehinacee (Hostettmann, 2003). Također, prethodna studija Schapoval i saradnika (Schapoval et al., 1998.) je istaklaacteosidekao jedan od glavnih aktivnih principa u etanolnom ekstraktu pripremljenom sa Stachytarpheta cayennensis kako je procijenjeno edemom šape i modelima vruće ploče. Backhouse i saradnici (Backhouse et al., 2008) također smatrajuacteosideda bude aktivni princip Buddleja globosa koristeći nekoliko modela procjene bola, uključujući formalinski test. Nove formulacije se sada razvijaju koristeći najsavremenije znanje kako bi se povećala stabilnost i produžilo antinociceptivno djelovanjeacteoside(Isacchi et al., 2016).

Zaključak

Deset supstanci fenolne prirode identifikovano je u stolonima KazahstanaCistanchesalsa HPLC/MS analizom. Ova jedinjenja mogu biti odgovorna za antinociceptivnu aktivnost uočenu u eksperimentalnim modelima koji su ovde izvedeni. Uzimajući u obzir da je na teritoriji Kazahstana rodCistanchezastupljen je uglavnom po vrstamaCistanchesalsu, možemo preporučiti njenu berbu i standardizaciju upotrebeechinacosideiacteosidekao standardne spojeve, za nabavku kvalitetne sirovine za tradicionalnu kinesku medicinu.

Etička razotkrivanja

Zaštita ljudi i životinja. Autori izjavljuju da su primijenjene procedure bile u skladu sa propisima relevantnog etičkog komiteta kliničkih istraživanja i sa etičkim kodeksom Svjetskog medicinskog udruženja (Deklaracija iz Helsinkija).

Povjerljivost podataka.

Autori izjavljuju da se u ovom članku ne pojavljuju podaci o pacijentima.

Pravo na privatnost i informirani pristanak. Autori izjavljuju da se u ovom članku ne pojavljuju podaci o pacijentima.

Doprinosi autora

EBK je izvršio sakupljanje biljke, pripremu ekstrakta i analizu hemijskih rezultata kao i pisanje rada; GRD, izvršio sva farmakološka ispitivanja; ZBS, dizajnirao studiju u saradnji sa FB; LNI i ENB, učestvovali u farmakopejskom dizajnu studije za uključivanje dobijenih rezultata u kazahstansku farmakopeju; IIT, izvršio HPLC analize; PDF, koji je dizajnirao farmakološku studiju i FB, organizirao je tim kako bi napisao ovaj rad.

Sukobi interesa

Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Priznanja

Autori iz Brazila zahvaljuju gospodinu Alanu Minhu na tehničkoj pomoći i Instituto Vital Brazil na donacijama korištenih životinja. Oni takođe žele da odaju priznanje grantovima od CNPq i Fundac¸ ão Carlos Chagas Filho de Apoio à Pesquisa do Estadodo Rio de Janeiro. Autori iz Irske žele da odaju priznanje Programu za istraživanje institucija trećeg nivoa, ciklus 5, za TBSI i da učvrste značaj SFI programa ISCA-Brazil (grantno. SFI/13/ISCA/2843) koji je doprineo kolaborativni rad između Brazila i Irske. Autori iz Kazahstana žele da odaju priznanje KazNMU za finansijsku podršku dozvoljenu za izvođenje ovog rada.

Iz: 'Antinociceptivna aktivnost Cistanche salsa stolona, ​​raste u Republici Kazahstan' Elmira B. Kartbaevaa, et al.

---EB Kartbaeva et al. / Revista Brasileira de Farmacognosia 27 (2017) 587–591

Reference

Backhouse, N., Delporte, C., Apablaza, C., Farias, M., Goïty, L., Arrau, S., Negrete, R., Castro, C., Miranda, H., 2008. Antinociceptivna aktivnost Buddleja globose (matico) u nekoliko modela bola. J. Ethnopharmacol. 119, 160–165.

Beirith, A., Santos, ARS, Calixto, JB, 2002. Mehanizmi koji su u osnovi nocicepcije i edema šape uzrokovanih injekcijom glutamata u mišju šapu. Brain Res. 924, 219–228.

Kineska akademija medicinskih nauka, 1988. Institut za ljekovito bilje, Kinesko ljekovito bilje, vol. 4., 2. izd. Narodna medicinska izdavačka kuća, Peking.

Deyama, S., Yamamoto, J., Machida, T., Tanimoto, S., Nakagawa, AT, Kaneko, S., Satoh, M., Minami, M., 2007. Inhibicija glutamatergične transmisije morfijumom u bazolateralnoj amigdaloidno jezgro smanjuje averziju uzrokovanu bolom. Neurosci. Res. 59, 199–204.

Grudzinskaya, LM, Gemedzhieva, NG, 2012. Lista ljekovitih biljaka u Kazahstanu. Izdavačka kuća Instituta za botaniku i fitointrodukciju RK, Almati.
Hostettmann, K., 2003. Istorija biljke: primjer ehinacee. Forsch Komp. Klas. Nat. Suppl. 1, 9–12.
Isacchi, B., Bergonzi, MC, Iacopi, R., Ghelardini, C., Galeotti, N., Bilia, AR, 2016.
Liposomska formulacija za povećanje stabilnosti i produženje anti-neuropatske aktivnosti verbaskozida. Planta Med. 83, 412–419.
Jiang, Y., Li, SP, Wang, YT, Chen, XJ, Tu, PF, 2009. DiferencijacijaHerbaCistanchespomoću otiska prsta sa tečnom hromatografijom visokih performansi - detekcija niza dioda - masena spektrometrija. J. Chromatogr. 1216, 2156–2162.
Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional Chinese Drugs, 1977. 1. izdanje, Shanghai Scientific & Technologic Publisher, Shanghai.
Kolber, BJ, 2015. mGluRs od glave do pete u bolovima. Prog. Mol. Biol. Transl. 131, 281–324.
Lin, LW, Hsieh, MT, Tsai, FH, Wang, WH, Wu, CR, 2002. Anti-nociceptivna i protuupalna aktivnost uzrokovana Cistanche deserticola kod glodara. J. Ethnopharmacol. 83, 177–182.
Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB, Tu, PF, 2013. Hemijski sastojci iz Cistanche Sinensis (Orobanchaceae). Biochem. Syst. Ecol. 47, 21–24.
Matheus, ME, Berrondo, LF, Vieitas, EC, Menezes, FS, Fernandes, PD, 2005. Procjena antinociceptivnih svojstava ekstrakta stabljika Brillantaisia ​​palisotii Lindau. J. Ethnopharmacol. 102, 377–381.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF, 2013. Feniletanoidni glikozidi s protuupalnim djelovanjem iz stabljika Cistanche deserticola uzgojenih u pustinji Tarim. Fitoterapia 89, 167–174.
Palazzo, E., Marabese, I., de Novellis, V., Rossi, F., Maione, S., 2014. Supraspinalni metabotropni glutamatni receptori: meta za ublažavanje bolova i dalje. EUR. J. Neurosci. 39, 444–454.
Sakurada, T., Katsumata, K., Tanno, K., Sakurada, S., Kisara, K., 1992. Test kapsaicina kod miševa za procjenu antagonista tahikinina u kičmenoj moždini. Neuropharmacology 31, 1279–1285.
Sarsenbayev, KN, Isabaev, SO, Kolosov, NG, 2011. Zbornik radova sa međunarodne naučne konferencije „Savremeno ekološko stanje regiona Aralskog mora, izgledi za rešavanje problema“, Kizilorda, str. 195–200.
Schapoval, EES, Vargas, MRW, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, Henriques, AT, 1998. Antiinflamatorna i antinociceptivna aktivnost ekstrakata i izolovanih jedinjenja iz Stachytarpheta cayennensis. J. Ethnopharmacol. 60, 53–59.
Shimoda, H., Tanaka, J., Takahara, Y., Takemoto, K., Shan, SJ, Su, MH, 2009. Hipoholesterolemijski efekti ekstrakta Cistanche tubulosa, kineske tradicionalne sirove medicine, kod miševa. Am. J. Chin. Med. 37, 1125–1138.
Sui, ZF, Gu, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Le, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Jedinjenje ugljikohidrata rastvorljivo u vodi iz tijelaHerbaCistanche: izolacija i njegov učinak uklanjanja slobodnih radikala u koži. Ugljikohidrati. Polym. 85, 75–79.
Szteyn, K., Rowen, MP, Gomez, R., Du, J., Carlton, SM, Jeske, NA, 2015. A-kinaza sidrenja proteina 79/150 koordinira metabotropsku senzibilizaciju glutamatnog receptora perifernih senzornih neurona. Pain 156, 2364–2372.
Wang, XY, Qi, Y., Cai, RL, Li, XH, Yang, MH, Shi, Y., 2009. Efekat polisaharida Cistanche deserticola (CDPS) na aktivaciju makrofaga. Brada. Pharmacol. Bik. 25, 787–789.
Xie, JN, Zhao, MB, Wu, FW, Tu, PF, 2005. Hromatografski otisak prsta Cistanche deserticola pomoću HPLC. Brada. Trad. Biljka. Drugs 36, 268–271.
Yang, FR, Wen, DS, Fang, BW, Lou, JS, Meng, L., 2013. Prevencija ekstrakta Cistanche salsa na fibrozu jetre izazvanu tetrahloridom ugljenika kod pacova. Brada. Biljka. Med. 5, 199–204.
Yong, J., Tu, PF, 2009. Analiza hemijskih sastojaka u vrstama Cistanche. J. Chromatogr. 1216, 1970–1979.
Zhang, X., Li, X., Rena, K., Du, NS, 2003. RP-HPLC određivanje ehinakozida iacteosideinHerbaCistanchesuzgajaju na različitim parazitskim vrstama i staništima. Brada. J. Pharm. Anal. 23, 254–256.
Zhou, J., Zhang, Q., Bing Sun, J., Li Sun, X., Zeng, P., 2014. Dvofazna mikroekstrakcija tečne faze šupljih vlakana na bazi magnetofluida za istovremeno određivanjeechinacoside, tubulozid B, acteosidei izoakteozid u plazmi štakora nakon oralne primjene ekstrakta Cistanche salsa tečnom hromatografijom visokih performansi. J. Pharm. Biomed. Anal. 94, 30–35.