sažetak:Izloženost ultraljubičastom (UV) zraku uzrokuje fotostarenje kože što dovodi do bora i opuštanja kože putem proizvodnje reaktivnih vrsta kisika (ROS). Zbog toga je zaštita od fotostarenja važna karakteristika kozmetičkih i dermatoloških proizvoda. Biomaterijali dobijeni od prirodnih proizvoda su veoma poželjni kao budući mogući sastojci jer su ovi biomaterijali često sigurni i efikasni. U ovoj studiji željeli smo okarakterizirati zaštitnu aktivnost kože Pradosia multisite, koja se tradicionalno koristi za liječenje opekotina od sunca i eritema. Odredili smo efekte uklanjanja slobodnih radikala, antimelanogene i hidratantne efekte metanolnog ekstrakta Pradosia multisite (Pm-ME) u keratinocitima (HaCaT ćelije), melanocitima (B16F10 ćelije) i fibroblastima (humani dermalni fibroblasti (HDF)) na necitotoksične koncentracije. Pradosia multisite metanolni ekstrakt sadrži kumarinsku kiselinu kao glavnu komponentu, a ekstrakt je pokazao zaštitnu aktivnost protiv citotoksičnosti izazvane UVB- i H2O2-. Ovaj ekstrakt je takođe potisnuo ekspresiju metaloproteinaza (MMP) i ciklooksigenaze (COX)-2 u HaCaT ćelijama. Smanjenje ekspresije Sirt{10}} pod UVB- i H2O2-tretiranim uslovima otkriveno je u HaCaT ćelijama pomoću Pm-ME. Ovaj ekstrakt je pokazao značajnu aktivnost uklanjanja slobodnih radikala prema testu 2,20 -kazino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonska kiselina) dijamonijum soli (ABTS). Pm-ME je također povećao nivoe ekspresije sintaze hijaluronske kiseline (HAS) i transglutaminaze-1 (TGM-1) u HaCaT ćelijama, što ukazuje na pretpostavljenu hidratantnu aktivnost. Zanimljivo je da je ekspresija gena za kolagen tip 1 (Col1A1) i njegova promotorska aktivnost, kako je procijenjeno testom reporter gena, povećana u HDF i HEK293 ćelijama. Slično, Pm-ME je pomogao oporaviti nivoe kolagena nakon tretmana UVB i H2O2 u HDF-ovima, kao i smanjio sintezu i izlučivanje melanina iz stanica melanoma B16F10, što može ukazivati ​​na korisnu kozmetičku vrijednost za izbjeljivanje. P38 inhibitor SB203580 i JNK inhibitor SP600125 potisnuli su ekspresiju MMP-9 i COX-2 u H2O2-tretiranim HaCaT ćelijama. Slično, ERK inhibitor U0126 inhibirao je HAS-2 u HaCaT ćelijama tretiranim Pm-ME/H2O2-. Ovi nalazi sugeriraju da bi inhibicija JNK i p38 i aktivacija ERK mogla biti meta Pm-ME. Stoga, Pm-ME može ispoljiti svojstva protiv fotostarenja i antimelanogena putem regulacije protein kinaze aktivirane mitogenom, što bi moglo biti korisno u kozmetičkoj industriji.

Prema relevantnim studijama,cistancheje uobičajenobiljkakoja je poznata kao "čudotvorna biljka koja produžava život". Njegova glavna komponenta jecistanozid, koji ima različite efekte kao nprantioksidans, protuupalno, iunapređenje imunološke funkcije. Mehanizam između cistanche iizbjeljivanje koželeži u antioksidativnom dejstvu cistanche glikozida. Melanin u ljudskoj koži proizvodioksidacijatirozina koji kataliziratirozinaza, a reakcija oksidacije zahtijeva sudjelovanje kisika, pa radikali bez kisika u tijelu postaju važan faktor koji utičemelaninproizvodnja. Cistanche sadrži cistanozid, koji je antioksidans i može smanjiti stvaranjeslobodni radikaliu tijelu, čime se inhibira proizvodnja melanina.

Kliknite na dodatak Cistanche Tubulosa za izbjeljivanje

Pitajte za više:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Uvod

Koža je najveći organ u tijelu, koji služi kao barijera između organizma i okoline, te je odgovoran za održavanje homeostaze kože i konačno određivanje opstanka organizma [1]. Koža je organizovana od epidermisa, dermisa sa adneksalnim strukturama i potkožnog masnog tkiva [2]. Osim toga, koža je važna za kontinuiranu komunikaciju s imunološkim, neuralnim i endokrinim sustavom [3], uglavnom pruža zaštitu od patogena, kemikalija, fizičkih ozljeda i ultraljubičastog (UV) zračenja [4]. Ultraljubičasti spektri su podijeljeni u tri zone, UVC (200 do 280 nm), UVB (280 do 320 nm) i UVA (320 do 400 nm) [5]. Od toga, UVB se pretežno apsorbira u gornjim slojevima epiderme kože, kao i papilarnom dermisu, dok UVA prodire u retikularni dermis sa 1000 puta manjom efikasnošću izazivanja različitih bioloških efekata u odnosu na UVB [5]. Iako je UVC vrlo reaktivan i apsorbira ga stratum corneum, uglavnom ga uklanja ozonski omotač i atmosfera. Kao glavni izvor UV zračenja, UVB može dovesti do proizvodnje reaktivnih vrsta kisika (ROS) kao što je vodikov peroksid (H2O2) putem aktivacije enzima koji stvaraju ROS uključujući NADPH oksidazu, ksantin oksidazu i D-aminokiselinsku oksidazu [6– 8] i indukcija fotostarenja kože, što dovodi do bora i opuštanja kože [9,10]. Osim toga, prijavljeno je da odgovor na oksidativni stres indukuje različita oštećenja ćelijskih komponenti kao što su lipidi ćelijskih membrana, proteini i nukleinske kiseline [11]. Ove oštećene stanice kože mogu pokrenuti upalne reakcije koje dovode do eventualnog oštećenja koja se manifestira na kronično izloženoj koži [12].

Oksidativni stres inducira aktivaciju inflamatornih i redoks-osjetljivih transkripcijskih faktora, nuklearnog faktora (NF)-κB i proteina aktivatora (AP)-1, i njihovih uzvodnih signalnih enzima uključujući proteinske kinaze aktivirane mitogenom (MAPK) kao što su ekstracelularne signalno regulirana kinaza (ERK), p38 i c-Jun-N-terminalna kinaza (JNK) u AP-1 putu, ili kao inhibitor κB (IκB), IκB kinaze (IKK / ), i AKT u NF-κB putu povezan s indukcijom upale i stvaranjem bora [13]. Ekstracelularnim signalom regulirana kinaza normalno posreduje u ćelijskim odgovorima koji se odnose na faktore rasta, JNK i p38-posredovane ćelijske odgovore vezane za citokine i fizički stres [14]. Proteinske kinaze aktivirane mitogenom također mogu inducirati proizvodnju proteolitičkih matriksnih metaloproteinaza (MMP) [15], koje induciraju razgradnju kolagena i tako smanjuju elastičnost kože [16]. Što se tiče ovih komponenti, antioksidativne komponente ili ekstrakti kao što su ginsenozid, kurkumin, epikatehin, aziatikozid, zijuglikozid I, magnolol, galna kiselina, hidroksihavikol, hidroksicimetna kiselina, glicirizinska kiselina, mangiferin, Mirko, ružmarinska kiselina, OGtyF1K hidroalkoholni ekstrakt sljedbenika Spartium junceum L. korišten je za razvoj proizvoda protiv starenja kože [17–21]. Budući da je oksidativni stres poznat kao glavni uzrok ljudskih bolesti i procesa starenja koji utječe na dugovječnost, sekundarni bioaktivni metaboliti u ljudskoj ishrani saantioksidativna svojstvasmatraju se vrednim sastojcima [22,23].

Ostali geni povezani sa fotostarenjem uključuju ciklooksigenazu-2 (COX-2) i Sirt-1. Ciklooksigenaza-2 je obično prekomjerno izražena u premalignim UV-indukovanim lezijama kože [24], a njena inhibicija može smanjiti malignu transformaciju u epidermisu [25]. Sirt-1 ekspresija može spriječiti apoptozu ćelije i povećati preživljavanje ćelija [26]. Drugi mehanizam zaštite od UVB zračenja je proizvodnja melanina, pigmenta koji se sintetizira u melanocitima i dalje luči u keratinocite u sloju epiderme [1]. Melanin se proizvodi oksidacijom L-tirozina i njegovom slijedećom konverzijom u L-dihidroksifenilalanin (L-DOPA) [6] katalizacijom sa bakar-ovisnim enzimom tirozinazom [27]. Uprkos svojoj zaštitnoj funkciji, prekomjerna proizvodnja melanina može dovesti do staračkih pjega [28], melizme i hiperpigmentacije [29]. Zbog trenutnog trenda koji svijetli ten smatra standardom ljepote, preparati za izbjeljivanje kože koji postižu ili izbjeljivanje hiperpigmentiranih lezija ili izbjeljivanje kože postali su vrlo poželjni u farmaceutskoj i kozmetičkoj industriji [29]. Stoga je značajan trud uložen u razvoj preparata koji smanjuju sintezu melanina [30]. Budući da je starenje kože povezano s gubitkom vlažnosti kože, važna stavka za održavanje zdrave kože je adekvatna hidratacija [31]. Hijaluronska kiselina (HA), glikozaminoglikan visoke molekularne težine sa hidrofilnim svojstvima, doprinosi hidrataciji i plastičnim svojstvima kože regulacijom ekspresije sintaza hijaluronske kiseline (HAS) [32]. Drugi važan gen u koži je kolagen, koji pruža podršku epidermalnim strukturama [33], pa je stoga odgovoran za snagu i otpornost kože [34] i čija degradacija dovodi do opuštanja kože i bora. Osim toga, transglutaminaza-1 (TGM-1) je epidermalni konstitutivno izražen enzim koji katalizuje formiranje omotača rožnatih epidermalnih ćelija, pomažući u sprječavanju gubitka vode [35,36].

Porodica Sapotaceae rasprostranjena je uglavnom u tropskim i suptropskim regijama Azije i Mezoamerike. Mnoge vrste porodice Sapotaceae proizvode jestive plodove visoke ekonomske vrijednosti. Ovi plodovi se koriste u medicinske svrhe. Posebno, sjemenke su bogate hranjivim tvarima, biljnim mastima, proteinima i drugim korisnim spojevima. Na primjer, mamey ulje se tradicionalno koristi u njezi kože, za liječenje opekotina od sunca i eritema [37]. Pradosia music je član porodice Sapotaceae čije se ulje tradicionalno koristilo za liječenje ožiljaka na koži [38]. Međutim, njegova svojstva tek treba da budu naučno dokazana. Stoga je cilj ovog istraživanja bio utvrditi potencijalnu vrijednost P. mutisii u njezi kože, kozmetologiji i farmakologiji.

2. Rezultati

2.1. Pm-ME karakterizacija i njen uticaj na vitalnost ćelije

Pm-ME nije blokirao održivost do 100 µg/mL, ali je blago smanjio održivost na 200 µg/mL u HaCaT, B16F10 i ljudskim dermalnim fibroblastima (HDF) ćelijama, prema 3-(4,{{ 7}}dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijum bromid (MTT) test (Slika 1a–c). Koristeći tečnu hromatografiju ultravisokog pritiska (UHPLC) i tečnu hromatografiju (LC)/masenu spektrometriju, utvrđeno je da je glavno jedinjenje u Pm-ME kumarinska kiselina na 4,27 minuta (Slika 1d).

2.2. Zaštitni efekat Pm-ME od oštećenja UVB i H2O2

Kako bi se utvrdilo da li Pm-ME štiti HaCaT ćelije od oštećenja uzrokovanog fotostarenjem UVB- i H2O2-, ćelije su prethodno tretirane različitim koncentracijama Pm-ME (0-100 µg/mL) prije izlaganja UVB ili H2O2. Slika 2a pokazuje da je UVB zračenje smanjilo broj adherentnih HaCaT ćelija, dok je Pm-ME povećao adherenciju ćelija. Osim toga, ćelijsko oštećenje izazvano H2O2 je oporavljeno pomoću Pm-ME pri 100 µg/mL (slika 2b). Kako bi se razjasnilo da li je Pm-ME oslabio formiranje bora posredovano UVB- i H2O2-, nivoi ekspresije MMP-1 i MMP-9 su izmjereni nakon tretmana UVB ili H2O2 u prisustvu ili odsustvu Pm-ME. Pm-ME je inhibirao ekspresiju MMP-1 i MMP-9 u oba uslova (slika 2c,d). Zatim smo ispitali da li Pm-ME potiskuje inflamatorne odgovore izazvane slobodnim radikalima mjerenjem nivoa mRNA COX-2. U uslovima tretiranim UVB- ili H2O2-, nivoi mRNA COX-2 su bili snažno potisnuti Pm-ME pri 100 µg/mL (Slika 2e,f). Zatim smo izmjerili nivoe mRNA gena protiv starenja, Sirt-1, kako bismo utvrdili njegov utjecaj na fotostarenje. I UVB i H2O2 smanjili su ekspresiju Sirt-1, dok je Pm-ME značajno obnovio svoju ekspresiju pri 50 i 100 µg/mL (slika 2g,h). Budući da je Pm-ME potisnuo određene molekularne i ćelijske odgovore u HaCaT ćelijama tretiranim UVB ili H2O2, zatim smo ispitali da li ovaj ekstrakt ima direktnu antioksidativnu aktivnost koristeći 2,2′-kazino-bis (3-etilbenzotiazolin{{57 }}sulfonska kiselina) ABTS test, u kojem je Pm-ME pokazao aktivnost uklanjanja slobodnih radikala ovisno o dozi (slika 2i).

2.3. Efekti Pm-ME hidratacije i povećanja kolagena

Pm-ME je pojačao ekspresiju gena vezanih za hidrataciju, kao što su HAS-2 i TGM-1 u HaCaT ćelijama (slika 3a). Da bismo utvrdili da li Pm-ME može poboljšati ekspresiju gena za kolagen (Col1A1), prvo smo tretirali HDF ćelije sa Pm-ME (0–100 µg/mL), a zatim odredili nivo ekspresije Col1A1. Kao što pokazuje Slika 3b, uočena je povećana ekspresija gena Col1A1 u uslovima tretmana Pm-ME ovisno o dozi. Ovi rezultati su dalje potvrđeni korišćenjem testa reporter gena sa Col1A1-Luc konstruktom transfektovanim u ćelijama HEK293 i HDF ćelijama. Očekivano, Pm-ME je povećao promotorsku aktivnost gena Col1A1 na način ovisan o dozi u obje ćelije (Slika 3c,d). Pored toga, utvrđeno je da Pm-ME obnavlja nivoe gena kolagena koji su se smanjili i pod UV zračenjem i pod uslovima tretmana H2O2 (Slika 3e,f).

2.4. Anti-melanogeni efekat Pm-ME

Pošto je naša ciljna koncentracija odgovarala 100 µg/mL, utvrdili smo da li je Pm-ME u stanju da potisne lučenje melanina i njegov ćelijski sadržaj. Da bi se to utvrdilo, stanice melanoma B16F10 stimulirane su hormonom koji stimulira -melanocite (-MSH) u prisustvu ili odsustvu Pm-ME ili arbutina (pozitivna kontrola). Zatim su izmjereni nivoi melanina. Pm-ME je smanjio lučenje melanina do 75 posto pri 100 µg/mL (slika 4a,b). Pm-ME je također smanjio sadržaj melanina u MSH-tretiranim B16F10 ćelijama do 30 posto pri 100 µg/mL, dok sadržaj melanina od 50 µg/mL nije značajno smanjen u poređenju sa pozitivnom kontrolom (-MSH) (Slika 4c) . Konačno, da bismo utvrdili učinak Pm-ME na aktivnost enzima koji proizvode melanin, izvršili smo test enzima tirozinaze. Zanimljivo je da je Pm-ME (0-400 µg/mL) značajno smanjio aktivnost tirozinaze pri koncentracijama većim od 200 µg/mL, dok je Kojična kiselina (KA), kontrolirani lijek, snažno smanjila aktivnost tirozinaze (Slika 4d).

2.5. Molekularni mehanizmi Pm-ME-posredovanog antifotostarenja i hidratantnih efekata

3. Diskusija

Zbog svog bogatstva nutrijentima i vitaminima, različite vrste iz porodice Sapotaceae koriste se u tradicionalnoj medicini [39]. Međutim, potencijalna upotreba P. mutisii u kozmetičkoj i farmaceutskoj industriji tek treba da se istraži. Iz tog razloga smo proučavali zaštitnu aktivnost P. mutisii u keratinocitima i fibroblastima u uslovima oštećenja kože. Ocijenili smo i njegovu pogodnost za kozmetičke preparate. Budući da je testiranje toksičnosti za identifikaciju potencijalnih rizika kod ljudi neophodan i kritičan korak kako u industriji lijekova tako iu kozmetičkoj industriji [40], citotoksičnost P. mutisii je testirana na HaCaT, B16F10 i HDF ćelijama. Pradosia mutisii je pokazala nisku toksičnost do 200 µg/mL i bez toksičnosti pri 100 µg/mL u HaCaT, B16F10 (Slika 1a,b) i HDF ćelijama (Slika 3c). Koristeći UHPLC/MS analizu (slika 1c), pokazalo se da Pm-ME ima visoku koncentraciju kumarinske kiseline, fenolne kiseline [41,42]. Polifenoli su sekundarni metaboliti biljaka i općenito su uključeni u odbranu od UV zračenja ili infekcije patogenima. U ljudskom tijelu se pokazalo da polifenoli štite od razvoja raka, kardiovaskularnih bolesti, dijabetesa, osteoporoze i neurodegenerativnih bolesti [1]. Pokazalo se da kumarinska kiselina ima antioksidativna i protuupalna svojstva [43].

Ultraljubičasto zračenje je jedan od glavnih uzroka stvaranja slobodnih radikala (npr. ROS) u koži. Slobodni radikali mogu dovesti do starenja kože i raka ako se akumuliraju tokom dugog perioda [44]. Poznato je da oksidativni stres i oštećenje uzrokovano slobodnim radikalima mogu ugroziti opstanak, proliferaciju, diferencijaciju i metabolizam stanica [45,46]. U skladu s prethodnim izvještajima [47,48], također smo otkrili da UVB zračenje izaziva oštećenje ćelija u HaCaT ćelijama. Oštećenja su uključivala smanjenu proliferaciju, povećanu apoptozu i molekularne odgovore uključujući ekspresiju gena povezanih s upalom, stvaranjem bora i starenjem (Slike 2 i 3). Budući da su UVB-inducirani radikali glavni faktori koji oštećuju stanice, tkiva i organe, otkriveno je da su neka endogena jedinjenja kao što su melatonin i njegov metabolit [49–52] i bilirubin [53] uključeni u uklanjanje toksičnih radikala ispoljavanjem antioksidansa. , foto-zaštitna svojstva i svojstva protiv starenja u našim tijelima. Do sada su se ovi spojevi razvijali i kao visoko vrijedni biomaterijali koje farmaceutska industrija može primijeniti na naše tijelo [54]. Ipak, vitamin C, koenzim Q10 i -tokoferol postaju top globalni prodajni proizvodi za zdravlje ljudi zbog svojih značajnih antioksidativnih svojstava. Istraživačke laboratorije u farmaceutskim i kozmetičkim kompanijama nastavljaju da stavljaju veliki naglasak na identifikaciju i razvoj efikasnih antioksidativnih lijekova i prirodnih spojeva. U našoj studiji uočili smo da Pm-ME ima jaku antioksidativnu aktivnost kada je testiran pomoću ABTS testa (slika 2i). Slično, Pm-ME je preokrenuo supresiju prianjanja ćelija izazvanu slobodnim radikalima, indukciju nuklearnog oštećenja i izmijenjenu ekspresiju gena kao što su MMP-1, MMP-9 i COX{{27} } pod UVB i H2O2 uslovima na način koji zavisi od doze (Slika 2a–f). Posebno, Pm-ME je obnovio nivoe Sirt-1 gena (Slika 2g,h), koji je uključen u prevenciju apoptoze i povećanje preživljavanja ćelija u uslovima oksidativnog stresa [26]. Ovi rezultati snažno su implicirali da je starenje stanica povezano s oksidativnim stresom putem smanjenja ekspresije Sirt1. Antioksidativna svojstva Pm-ME omogućila su oporavak ekspresije Sirt1. Ovo može dovesti do zaštite od oštećenja kože i starenja pod prirodnim UVB zračenjem in vivo. Osim toga, postoji mogućnost da Pm-ME također može zaštititi ćelijske odgovore izazvane UVC-om, budući da naši uvjeti UV zračenja mogu biti kontaminirani UVC-om, iako smo koristili sistem filtera da očistimo sve valne dužine ispod 290 nm. Koncept da antioksidativni biomaterijali mogu poboljšati ćelijska i molekularna oštećenja u uslovima oksidativnog stresa pokrenuo je komercijalnu proizvodnju različitih proizvoda kao što su BIOGF1K, ginsenoside Ro, EGCG, ekstrakt Fraxinus chinensis i određeni sintetički antioksidansi. Efekti protiv bora i fotostarenja biomaterijala u ovim i drugim proizvodima su naširoko prijavljeni u kozmetičkoj industriji [48,55,56].

Održavanje adekvatne hidratacije kože [31] i stvaranje novog kolagena [57] važni su procesi za zdravu kožu. Ekspresija gena za hidrataciju (HAS2, TGM-1) (slika 3a) i kolagena (Col1A1) je značajno povećana pomoću Pm-ME (slika 3b-d) i pomogla je da se povrati nivo kolagena nakon izlaganja UVB i tretmana H2O2 (Slika 3e,f). Stoga, ovo sugerira da Pm-ME može biti efikasan sastojak u održavanju zdrave kože. Potiskivanje melanina od strane Pm-ME je također korisno za njegovu upotrebu u kozmetičkim preparatima. Iako je melanin vrijedan u zaštiti kože od UV zračenja, jer mnoge žene preferiraju posvjetljivanje kože, izbjeljivanje antimelanogenim djelovanjem je korisna karakteristika u kozmetičkim materijalima [29]. Pm-ME (100 µg/mL) je pokazao snažnu inhibitornu aktivnost tokom melanogeneze, što je procijenjeno određivanjem nivoa melanina iz izlučenog medijuma i smanjenjem prikazanog nivoa sekrecije melanina (Slika 4a–c). Štaviše, Pm-ME (200 µg/mL) je značajno potisnuo aktivnost enzima tirozinaze (slika 4d), što implicira da je veća koncentracija direktno efikasna za suzbijanje aktivnosti enzima, dok je niža koncentracija uključena u regulaciju lučenja melanina. Stoga, zbog svojih antioksidativnih, anti-fotostarenje, protiv bora, stimulacije hidratantne kreme i antimelanogenih aktivnosti, Pm-ME se može smatrati dobrim kozmetičkim kandidatom. Kako bismo dalje istražili ovu mogućnost, planiramo procijeniti njegovu kliničku efikasnost u budućim studijama.

Proveli smo studije kako bismo utvrdili molekularne mehanizme pomoću kojih je Pm-ME ispoljavao antioksidativno i hidratantno djelovanje u keratinocitima. Fokusirali smo se na enzime povezane s MAPK (ERK, JNK i p38), jer ovi enzimi igraju ključnu ulogu u starenju i melanogenezi keratinocita i melanocita kože [58,59]. Na primjer, ERK put posreduje ćelijske odgovore na transformirajući faktor rasta- 1 povećanjem kolagena [60] i puteva sinteze HA u keratinocitima [61]. JNK igra ključnu ulogu u apoptozi keratinocita izazvanoj oksidativnim stresom [62]. Enzim p38 je važan u održavanju homeostaze ljudske kože [63]. Putevi JNK i p38 posreduju u ćelijskim odgovorima na citokine i fizički stres [14]. Ovi putevi se aktiviraju UVB- i ROS-indukovanim stresom. Ovi putevi mogu povećati proizvodnju proteolitičkih MMP i COX{18}} gena [15], koji su povezani s degradacijom kolagena i upalom kože, respektivno [64]. Značajno je da je oksidativni stres blokirao fosforilaciju ERK, dok su p38 i JNK fosforilirani kada su tretirani H2O2 (Slika 5a). Nasuprot tome, Pm-ME je povećao fosforilaciju ERK i smanjio fosforilaciju p38 i JNK (slika 5a), što implicira da ovi enzimi mogu različito učestvovati u farmakološkim aktivnostima posredovanim Pm-ME. Da bi se dalje razumjela funkcionalna uloga MAPK u anti-fotostarenju, anti-melanogenom i antiinflamatornom djelovanju Pm-ME u UVB-ozračenim i H2O2-stimuliranim keratinocitima, korišteni su specifični inhibitori MAPK. Rezultati sa slike 5b snažno sugeriraju da je inhibicija p38 i JNK od strane Pm-ME rezultirala djelovanjem protiv bora i protuupalnim djelovanjem, jer inhibitor p38 (SB203580) i JNK inhibitor (SP600125) blokiraju ekspresiju MMP{{45 }} i COX-2, respektivno. Štaviše, fosforilacija ERK izazvana Pm-ME inducirala je ekspresiju gena vezanih za vlaženje jer je tretman Pm-ME pokrenuo ekspresiju HAS-2, dok ju je U0126 potisnuo (Slika 5c). Ovi rezultati sugeriraju da su enzimi povezani s MAPK doprinijeli PM-ME-posredovanom djelovanju protiv starenja, protiv bora i protuupalnih aktivnosti. Poznato je da UVB zračenje povećava druge signalne kaskade, kao što su one povezane sa NF-κB i STAT3 [65,66]. Još uvijek se mora istražiti može li Pm-ME regulirati ove signalne puteve.

Zaključno, otkrili smo da Pm-ME bogat kumarinskom kiselinom pokazuje antioksidativno djelovanje, djelovanje protiv bora, stimulaciju hidratacije i antimelanogenost u stanicama kože ozračenim UVB-om ili tretiranim H2O2. Pm-ME je povećao fosforilaciju ERK na način ovisan o dozi, ali je smanjio fosforilaciju p38 i JNK (Slika 6). Naši rezultati snažno sugeriraju da Pm-ME može biti efikasan biomaterijal za zaštitu kože. Budući da je Pm-ME pokazao vrlo obećavajuće djelovanje i na kancerogene ćelije kože (HaCaT i B16F10 ćelije) i na normalne ljudske keratinocite tokom stanja oksidativnog stresa, stoga predlažemo korisnu ulogu Pm-ME upotrebe u kozmetičkim preparatima. Međutim, ćelije melanoma imaju abnormalne karakteristike kao što su poremećena kontrola ćelijskog ciklusa, aberantni obrasci ekspresije gena i ograničeni kapaciteti diferencijacije [67], a dodatni rad sa primarnim melanocitima treba pratiti da bi se tačno razumela antimelanogeneza aktivnost Pm-ME i njegovih molekularni mehanizam. Osim toga, biljke iz iste porodice (Sapotaceae) ili roda (Pradosia spp.) će biti testirane na slične aktivnosti zaštite kože.

Zatražite više: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501