Abstract

Potražnja za prirodnim supstancama s antimelanogenim djelovanjem raste zbog nedavnog interesa za izbjeljivanje kože. Intenzivno istraživanje bujona kulture Streptomyces sp. SCO-736, morska bakterija sa obale Antarktika, dovela je do izolacije novog prirodnog proizvoda nazvanog asteroid (1). Hemijska struktura je utvrđena interpretacijom MS, UV i NMR spektroskopskih podataka. Antaroide je devetočlani makrolid sa laktonskim i laktamskim dijelovima. Kako bi se ispitala njegova primjena u kozmetici za izbjeljivanje kože, ispitano je njegovo antimelanogeno djelovanje u B16F10 stanicama mišjeg melanoma. Kao rezultat toga, asteroid je pokazao snažne inhibitorne aktivnosti protiv sinteze melanina i također je oslabio formiranje dendrita izazvano hormonom koji stimulira -melanocite (-MSH). Antaroide je potisnuo ekspresiju mRNA melanogenih enzima kao što su tirozinaza, TRP-1 i TRP-2. Ovo sugerira da može poslužiti kao transkripcijski regulator melanogeneze. Zajedno, otkriće ovog novog prirodnog devetočlanog makrolida i njegove antimelanogene aktivnosti moglo bi dati novi uvid u razvoj agenasa za izbjeljivanje kože.

Prema relevantnim studijama, cistanche je uobičajena biljka koja je poznata kao "čudotvorna biljka koja produžava život". Njegova glavna komponenta je cistanozid, koji ima različite učinke kao što su antioksidans, protuupalni i promocija imunološke funkcije. Mehanizam između cistanche i izbjeljivanja kože leži u antioksidativnom dejstvu cistanche glikozida. Melanin u ljudskoj koži nastaje oksidacijom tirozina koju katalizira tirozinaza, a reakcija oksidacije zahtijeva sudjelovanje kisika, pa radikali bez kisika u tijelu postaju važan faktor koji utječe na proizvodnju melanina. Cistanche sadrži cistanozid, koji je antioksidans i može smanjiti stvaranje slobodnih radikala u tijelu, čime inhibira proizvodnju melanina.

Kliknite na Prednosti Desert Cistanche

Za više informacija:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Ključne riječi:Streptomyces sp., devetočlani makrolid, morski prirodni proizvod, inhibitor sinteze melanina, sredstvo za izbjeljivanje kože

UVOD

Pigmentacija kože je ključna za zaštitu kože, koja je najudaljeniji sloj tijela. Konkretno, melanin apsorbira ultraljubičasto (UV) i gasi štetne reaktivne vrste kisika, koje su štetne za fiziologiju keratinocita i melanocita (Costin i Hearing, 2007). Osim zaštite kože, melanin određuje boju kose, kože i očiju. Njegov abnormalni sadržaj ili distribucija može uzrokovati estetske probleme kao što su albinizam, pjege i melazma (Briganti et al., 2003.; Lee et al., 2015.).

Upotreba sredstava za izbjeljivanje kože u kozmetičke svrhe ubrzano raste, posebno u Aziji, gdje bijela i besprijekorna koža simbolizira ljepotu i plemenitost. Razvijene su i korištene mnoge tvari za izbjeljivanje kože, terapijski i kozmetički, uključujući hidrokinon, arbutin i kojičnu kiselinu. Međutim, dugotrajna izloženost ovim agensima često uzrokuje nuspojave kao što su iritacija kože, ohronoza i kontaktni dermatitis (DeCaprio, 1999; García-Gavín et al., 2010). Stoga su potrebni sigurniji i snažniji agensi za izbjeljivanje kože (Zhu i Gao, 2008; Atanasov et al., 2015; Aydogmus-Ozturk et al., 2018).

Istraživači posvećuju sve veću pažnju mikroorganizmima u jedinstvenom morskom okruženju, koji su plodni izvori bioaktivnih jedinjenja sa zanimljivim strukturnim skelama, kako bi otkrili nove sekundarne metabolite (Haefner, 2003; Fenical i Jensen, 2006).

Kao dio naše potrage za bioaktivnim morskim prirodnim proizvodima, bakterijom koja živi u hladnoj vodi, Streptomyces sp. SCO-736 je izolovan iz morskih sedimenata obale Antarktika. Ova bakterija je proizvela antarktički, triciklični seskviterpen tipa zizaene sa fenil grupom koja je citotoksična za ćelije raka A549, H1299 i U87 izazivajući zaustavljanje ćelijskog ciklusa (Kim et al., 2018). Nadalje, HPLC-UV vođena izolacija bujona kulture ovog soja dala je novo bioaktivno jedinjenje, asteroid (1, slika 1). Ovdje izvještavamo o detaljima njegove izolacije, razjašnjavanju strukture i antipigmentarnoj aktivnosti asteroida kako bismo pružili uvid u razvoj nove klase sredstava za izbjeljivanje kože.

MATERIJALI I METODE

Opći eksperimentalni postupci

Optička rotacija je određena korištenjem Kruss Optronic P{{0}} polarimetra (Krüss Optronic, Hamburg, Njemačka) sa 5-cm ćelijom. UV spektri su dobijeni UV-vidljivim spektrofotometrom (1260 Infinity Series, Agilent Technologies, Santa Clara, Kalifornija, SAD) koristeći dužinu putanje od 0,1 cm. IR spektri su mjereni spektrometrom Varian Scimitar serije (Agilent Technologies). NMR spektri su dobijeni sa 800 MHz Varian Inova spektrometrima (Agilent Technologies) koristeći deuterirani dimetil sulfoksid (DMSO-d6) za Android. Analiza masene spektrometrije bombardiranja brzim atomom visoke rezolucije (HRFABMS) provedena je korištenjem JEOL JMS-AX505WA sistema (JEOL, Tokio, Japan). Frakcije su pročišćene kvaternarnom HPLC pumpom Waters 616 (Waters, Milford, MA, USA) i Waters 996 fotodiodnim nizom (PDA) detektorom (Waters). -Melanocit stimulirajući hormon (-MSH), arbutin i DMSO su nabavljeni od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD). Medij za ćelijsku kulturu i agense obezbedio je Thermo Scientific (Waltham, MA, SAD).

Izolacija soja i fermentacija 

Soj aktinomiceta SCO-736 je izoliran iz morskih sedimenata antarktičke obale i identificiran kao član roda Streptomyces sa 99,7 posto sličnosti. Njena sekvenca gena 16s rRNA deponovana je u GenBank (pristupni broj KY087980). Ovaj bakterijski soj je kultivisan u 100 2.5-L boci sa ultra prinosom, od kojih svaka sadrži 1 l medijuma za kulturu (10 g/L rastvorljivog skroba, 2 g/L kvasca, 4 g/ L peptona, 10 g/L CaCO3, 20 g/L KBr, 8 g/L Fe2(SO4)3•4H2O rastvorenog u 750 mL prirodne morske vode i 250 mL destilovane vode), na 25 stepeni ispod trese na 150 o/min. Nakon 7 dana, bujon je ekstrahovan etil acetatom (EtOAc, ukupno 100 l) da bi se dobilo 3,5 g EtOAc ekstrakta.

Ekstrakcija i prečišćavanje 

Ekstrakt EtOAc je otopljen u maloj zapremini metanola (MeOH) i frakcionisan putem vakuumske kolonske hromatografije na silicijum dioksidu, eluiranjem stepenastim gradijentom od 10 posto do 100 posto MeOH u metilen hloridu. Frakcija sa 10% MeOH (618 mg) je podvrgnuta HPLC reverzne faze sa 48% vodenog acetonitrila (Watchers 120 ODS-BP, 250×10 mm, 5 µm, 2,0 mL/min, UV=210 nm) da bi se dobio asteroid (1, 6,7 mg), sa vremenom zadržavanja od 30 min.

Antaroide (1): smeđe ulje; [ ]D 21 plus 19,8 (c 0.45, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 225 (4.1), 245 (3.6), 310 (3.2) nm; IR (KBr) νmax 3365, 2936, 2872, 2348, 1660, 1475, 1376, 1197, 761 cm{24}}; 1H, 13C i 2D-NMR (800 MHz, DMSO-d6), vidi tabelu 1; HRFABMS [M plus H] plus m/z 362.1972 (izračunato za C20H28NO5 plus, 362.1962).

Ćelijska kultura

Ćelijska linija B16F10 od miševa C57BL/6 kupljena je od ATCC (Manassas, VA, SAD). Ćelije su održavane u standardnim uslovima kulture, u Dulbeccovom modifikovanom orlovom medijumu bez fenola (DMEM) sa dodatkom antibiotika (100 U/mL penicilina A i 100 U/mL streptomicina) i 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS) na 37 stepeni u vlažnoj atmosferi koja sadrži 5 posto CO2. Na 80 posto stanične konfluencije, adherentne ćelije su odvojene pomoću rastvora tripsina (Hyclone, South Logan, UT, SAD).

Melanin test

Jedan dan prije eksperimenta, ćelije B16F10 su posađene u ploče 48-jažica pri 2×104 ćelija/jažici, kao što je opisano na drugom mjestu (Kim et al., 2017a). Ćelije izgladnjele serumom bile su izložene 72 h različitim koncentracijama asteroida u mediju kulture koji je sadržavao 0,5 posto DMSO i 200 nM -MSH, -MSH je korišten za indukciju sinteze melanina. Ćelije tretirane samo sa -MSH i arbutinom korištene su kao negativna i pozitivna kontrola, respektivno. Melanin unutar ćelija je otopljen u 200 µL 1 M NaOH na 60 stepeni tokom 1 h u mraku, zatim je ukupan sadržaj melanina procijenjen mjerenjem apsorbancije na 405 nm čitačem mikroploče (Spectra max 190, Molecular Devices, Sunnyvale , Kalifornija, SAD).

Test vitalnosti ćelija

{{0}}(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijum bromid (MTT) je korišten za procjenu održivosti B16F1 0 ćelije (Song et al., 2018). Da bi se ispitala mitohondrijalna redukcija MTT, ćelije su inkubirane sa 0,25 mL 0,5 mg/mL MTT rastvora u DMEM tokom 2 h na 37 stepeni. Plava formazanska boja je otopljena u 300 µL DMSO tokom 30 minuta, a 150 µL rezultirajućeg supernatanta je sakupljeno za mjerenje njegove apsorpcije na 540 nm. Sva mjerenja su obavljena u tri primjerka. Rezultati su normalizovani sa rezultatom negativne kontrole (ćelije tretirane DMSO), uzimajući kontrolne vrednosti kao 100 procenata, uporedili smo vitalnost ćelije svake koncentracije asteroida.

Lančana reakcija polimeraze transkripcije u realnom vremenu (RT-PCR)

Da bismo odredili efekte asteroida na ekspresiju gena vezanih za melanogenezu, usvojili smo PCR tehniku ​​transkripcije u realnom vremenu. B16F10 ćelije su tretirane sa -MSH i sa ili bez asteroida. Nakon 24 h inkubacije, ukupna RNK je izolirana korištenjem RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Germantown, MD, SAD). Da bi se odredili nivoi mRNA tirozinaze, cDNK je amplificirana sa 1250 ng ukupne RNK sa oligo dT (Elpis-Biotech, Seul, Koreja) pomoću qPCR mašine (Applied Biosystem, Grand Island, NY, SAD). Sekvence PCR prajmera su bile sledeće. Tyrosi nase 5'- ATC GGC CAA CGA TCC CAT TT -3' (naprijed) i 5'- TAG GTG CAT TGG CTT CTG GG -3' (nazad). TRP-1 5'- CTT TCT CCC TTC CTT ACT GG-3' (naprijed) i 5'-TCG TAC TCT TCC AAG GAT TCA-3' (nazad). TRP-2 5'- TTA TAT CCT TCG AAA CCA GGA – 3' (naprijed) i 5' – GGG AAT GGA TAT TCC GTC TTA – 3' (nazad). Parametri ciklusa bili su 50 stepeni za 2 min, 95 stepeni za 10 min, 40 ciklusa na 95 stepeni tokom 15 s i 50 stepeni za 1 min.

Statistička analiza

Statistička značajnost razlika je procijenjena Studentovim t-testom ili ANOVA praćenom Bon Ferroni post-hoc analizom. Značajno se razlikuje od kontrolne vrijednosti: *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001.

REZULTATI

Razjašnjenje hemijske strukture

Antaroid je izolovan kao smeđe ulje, a njegova molekularna formula je izvedena kao C2{{20}}H27NO5 na osnovu analize ( plus )-HRFABMS pseudomolekularnog jonskog vrha na m/z 362,1972 [M plus H] plus . Njegov IR spektar pokazao je prisustvo amina (3,365 cm-1) ​​i ketonske grupe (1,660 cm-1). 1 H NMR spektar je pokazao 1,2-disupstituirani benzenski proton [H-3 (δH 7,99, 1H, d, J=8.0 Hz), H{{21 }} (δH 7.41, 1H, dd, J=8.0, 8.0 Hz), H-5 (δH 7.79, 1H, dd, J{{ 33}}.0, 8.0 Hz), H-6 (δH 7.95, 1H, d, J=8.0 Hz)], jedan dublet [H-20 (δH 0.92, 3H, d, J=6}.8 Hz)], i jedan metil singlet [H-19 (δH 2.04, 3H, s)]. Spektroskopski podaci 1 H, 13C i HSQC otkrili su dva metila [C-19 (δC 27.9), C-20 (δC 15.7)], sedam metilena [C-9 (δC 29.0) , C-10 (δC 28.5), C-12 (δC 36.3), C-13 (δC 22.6), C-14 (δC 29.1), C{{76} } (δC 26.1), C-16 (δC 31.8)], četiri metina sp2 [C-3 (δC 129.7), C-4 (δC 125.7), C-5 (δC 135.6), C-6 (δC 120.9)], jedan metan sp3 [C-17 (δC 45.9)], tri karbonila [C-1 (δC 161.1), C{{ 102}} (δC 172.2), C-18 (δC 211.8)], dva kvartarna sp2 [C-2 (δC 116.3), C-7 (δC 136.0)] i jedan kvartar sp3 ugljenici [C-11 (δC 97.2)] (Tabela 1).

Interpretacija 2D NMR rezultata nam je omogućila da definišemo strukturu asteroida. COZY križni vrhovi (H- 9/H-10 i H-12/H-13/H-14/H-15/H{ {8}}/H-17/H{{10}}) otkrili su dva spin sistema sastavljena od dvije odnosno sedam karbonskih jedinica. Acetil grupa je identifikovana na osnovu HMBC signala dugog dometa od metil singleta H-19 do C-18. Vezanost ove acetil grupe za C-17 potvrđena je HMBC signalima sa tri veze od H-19 do C-17 i od H-20 do C{{19} }. Povezivanje karbonilnih grupa C-1 i C-8 na C-2 i C-9, respektivno, takođe su uspostavljene na osnovu HMBC signala sa tri veze iz H{ {25}} do C-1 i od H-10 do C-8. Duge HMBC korelacije H-12 i H-10 prema C-11 su dozvolile C-10/C-11/C-12 prilog . COZY cross-peaks (H-3/H-4/H-5/H-6) otkrili su 1,2 disupstituirani benzenski prsten povezan sa C{{43} } do NH, prema hemijskim pomacima ugljenika C-7 (δC 136.0) i C-8 (δC 172.2). Hemijski pomaci ugljenika C-1 (δC 161.1) i C-11 (δC 97.2) sugerišu da bi ovi ugljici trebali biti vezani preko atoma kiseonika u molekulu. Na kraju, hemijski pomak C-11 i molekularna formula asteroida otkrili su vezanje hidroksi grupe na C-11. Tako je određena bruto struktura asteroida kao što je prikazano na slici 2.

Da bismo odredili stereohemiju asteroida, prvo smo izveli eksperiment elektronskog kružnog dikroizma (ECD). Nažalost, asteroidi nisu pokazali nikakav značajan Cotton efekt u istraživanim rasponima talasnih dužina (dodatna slika 6). Nismo mogli odrediti apsolutnu konfiguraciju za stereogeni centar C-17 zbog nedostatka relevantnih jedinjenja sa zadatom stereohemijom u literaturi.

Bioaktivnosti

Različiti prirodni proizvodi iz morskih izvora ispitani su za primjenu u kozmetici (Kim et al., 2017a). Da bi se procijenila primjenjivost asteroida kao sredstva za izbjeljivanje, proučavani su njihovi efekti na melanogenezu korištenjem -MSH stimuliranih B16F10 ćelija mišjeg melanoma.

Antaroide je pokazao snažnu antimelanogenu aktivnost, koja je smanjila sadržaj intracelularnog melanina u B16F10 ćelijama na način ovisan o dozi. Bio je uporediv sa onim od arbutina, dobro poznatog sredstva za izbeljivanje kože, dok na ekstracelularno oslobađanje melanina nije uticalo (slika 3).

Mikroskopska posmatranja otkrila su oslabljeno formiranje dendrita B16F10 aktiviranog -MSH, potvrđujući supresiju aktivacije melanocita od strane asteroida (slika 4). U istom eksperimentu, procjena vitalnosti ćelije pokazala je da antimelanogeni učinak asteroida nije posljedica citotoksičnosti (slika 5). Mehanizam koji leži u osnovi antimelanogene aktivnosti asteroida dalje je ispitan procjenom ekspresije mRNA ključnih enzima za melanogenezu kao što su tirozinaza, TRP-1 i TRP-2 putem PCR-a u realnom vremenu (slika 6. ). Rezultati su pokazali da asteroid može potisnuti ekspresiju ovih melanogenih enzima.

DISKUSIJA

Prirodni proizvodi mogu pružiti uvid u razvoj bioaktivnih supstanci s novim okvirima i načinima djelovanja. Devetočlani sekundarni metaboliti koji posjeduju i lakton i laktam nikada ranije nisu prijavljeni u prirodnim proizvodima srednje veličine heterocikla. Prirodni proizvodi koji sadrže laktone ili laktame srednje veličine već dugo vremena predstavljaju izazov na polju sintetike (Shiina, 2007; Ferraz et al., 2008). Konkretno, prijavljen je samo mali broj devetočlanih laktonskih ili laktamskih prirodnih proizvoda, kao što su haliholaktoni (Niwa et al., 1989), topsentolidi (Luo et al., 2006) i antimicini (van Tamelen et al. , 1961). Devetočlani laktoni, haliholaktoni i topsentolidi izolovani su iz morskih sunđera, dok su devetočlani dilaktoni i antimicini izolovani iz Streptomyces sp. Štaviše, razvoj metodologije takvih spojeva naišao je na poteškoće zbog nepovoljnih kinetičkih i termodinamičkih faktora u poređenju sa onima većih srodnika laktona (Dräger et al., 1996; Parenty et al., 2013). Ko-prisustvo laktonskih i laktamskih dijelova u prstenastom sistemu uočeno je samo kod 15-azalida koji su sintetički pripremljeni od eritromicina (Mutak, 2007). S obzirom na ograničeni broj devetočlanih prirodnih proizvoda sa laktonskim i laktamskim dijelovima koji su do sada prijavljeni, asteroid je primjer ove klase spojeva bez presedana.

Melanin se sintetiše iz L-tirozina melanogenim enzimima kao što su tirozinaza, TRP-1 i TRP-2 (Lee et al., 2013, 2015). Budući da je tirozinaza ključna u inhibiciji melanogeneze u melanocitima, njeni inhibitori se smatraju obećavajućim kandidatima za izbjeljivanje kože u kozmetici (Pillaiyar et al., 2017). Međutim, inhibitori tirozinaze kao što su hidrokinon, rododendron ili ketoni maline mogu uzrokovati štetne efekte poput leukoderme utječući na integritet melanocita (Kim et al., 2016, 2017b, 2019). Stoga su potrebni novi agensi za izbjeljivanje kože s novim načinom djelovanja i nove skele. Mnoga nedavna istraživanja su izvijestila o prirodnim tvarima koje pokazuju antimelanogenu aktivnost kroz regulaciju transkripcije melanogenih enzima (Kim et al., 2017a). Ova studija je otkrila da anti-melanogena aktivnost asteroida djeluje tako što modulira nivoe mRNA tirozinaze, TRP-1 i TRP-2, što ukazuje na njen potencijal kao agensa za izbjeljivanje kože, što zahtijeva dalje istraživanje u budućnost.

SUKOB INTERESA

Ne postoji sukob interesa koji bi trebalo proglasiti.

ZAHVALNICA

Ovo istraživanje je podržano od strane Programa osnovnih naučnih istraživanja preko Nacionalne istraživačke fondacije Koreje koju finansira Ministarstvo nauke i IKT-a u okviru granta br. NRF-2019R1F1A1059033 (za Yang I), 2018R1A5A2025286 (do Lim KM), 2017R1D12817 (Nam SJ).

REFERENCE

1. Atanasov, AG, Waltenberger, B., Pferschy-Wenzig, EM, Linder, T., Wawrosch, C., Uhrin, P., Temml, V., Wang, L., Schwaiger, S., Heiss, EH , Rollinger, JM, Schuster, D., Breuss, JM, Bochkov, V., Mihovilović, MD, Kopp, B., Bauer, R., Dirsch, VM i Stuppner, H. (2015) Otkriće i opskrba farmakološki aktivnim prirodni proizvodi biljnog porijekla: pregled. Biotechnol. Adv. 33, 1582-1614.

2. Aydogmus-Ozturk, F., Günaydin, K., Öztürk, M., Jahan, H., Duru, ME i Choudhary, MI (2018) Efekat Sideritis leptoclada protiv HT{3}} humanog malignog melanoma. Melanoma Res. 28, 502-509.

3. Briganti, S., Camera, E. i Picardo, M. (2003) Hemijski i instrumentalni pristupi liječenju hiperpigmentacije. Pigment Cell Res. 16, 101-110.

4. Costin, GE i Hearing, VJ (2007) Pigmentacija ljudske kože: melanociti moduliraju boju kože kao odgovor na stres. FASEB J. 21, 976-994.

5.DeCaprio, AP (1999) Toksikologija hidrokinona - relevantnost za profesionalnu izloženost i izloženost okoline. Crit. Rev. Toxicol. 29, 283-330.

6.Dräger, G., Kirschning, A., Thiericke, R. i Zerlin, M. (1996) Decanolides, 10-člani laktoni prirodnog porijekla. Nat. Prod. Rep. 13, 365-375.

7. Fenical, W. i Jensen, PR (2006.) Razvijanje novog izvora za otkrivanje lijekova: morske aktinomicetne bakterije. Nat. Chem. Biol. 2, 666-673.

8. Ferraz, HMC, Bombonato, FI, Sano, MK i Longo Jr., LS (2008) Prirodna pojava, biološke aktivnosti i sinteza osmo-, deveto- i jedanaestočlanih laktona u prstenu. Quim. Nova 31, 885-900.

9. García-Gavín, J., González-Vilas, D., Fernández-Redondo, V. i Toribio, J. (2010) Pigmentirani kontaktni dermatitis zbog kojične kiseline. Paradoksalna nuspojava osvjetljivača kože. Kontaktirajte Derm. 62, 63- 64.

10. Haefner, B. (2003) Droge iz dubine: morski prirodni proizvodi kao kandidati za lijekove. Drug Discov. Danas 8, 536-544.

11. Kim, D., Lee, EJ, Lee, J., Leutou, AS, Shin, YH, Choi, B., Hwang, JS, Hahn, D., Choi, H., Chin, J., Cho, SJ, Hong, YD, Ko, J., Seong, CN, Maloney, KN, Oh, DC, Yang, I., Hwang, H. i Nam, SJ (2018) Antartin, citotoksični seskviterpenoid tipa zizaane iz Streptomyces sp. izolovan od antarktičkog morskog sedimenta. Mar. Droge 16, 130.

12. Kim, K., Leutou, AS, Jeong, H., Kim, D., Seong, CN, Nam, SJ i Lim, KM (2017a) Anti-pigmentarni efekat (-)-4-hidroksisatabacina iz bakterija Bacillus sp. Mar. Droge 15, 138.

13. Kim, SE, Lee, CM i Kim, YC (2017b) Anti-melanogeni efekat metanolnog ekstrakta Oenothera laciniata u melan-a ćelijama. Toxicol. Res. 33, 55-62.

14. Kim, M., Baek, HS, Lee, M., Park, H., Shin, SS, Choi, DW i Lim, KM (2016) Rododendron i keton maline ometaju normalnu proliferaciju melanocita putem reaktivnih vrsta kisika- zavisna aktivacija GADD45. Toxicol. In Vitro 32, 339-346.

15. Kim, M., Lee, CS i Lim, KM (2019) Rhododenol aktivira melanocite i inducira morfološke promjene na subcitotoksičnim nivoima. Int. J. Mol. Sci. 20, 5665.

16. Lee, CS, Jang, WH, Park, M., Jung, K., Baek, HS, Joo, YH, Park, YH i Lim, KM (2013) Novi derivat adamantil benzil benzamida, AP736, potiskuje melanogenezu kroz inhibiciju cAMP-PKA-CREB-aktiviranog transkripcionog faktora povezanog s mikroftalmijom i ekspresije tirozinaze. Exp. Dermatol. 22, 762-764.

17. Lee, M., Park, H., Jeon, SW, Bang, JK, Chung, KY, Choi, DW, Kim, EJ i Lim, KM (2015) Novi anti-melanogeni heksapeptidi, PAL-10 i PAL-12. Arch. Dermatol. Res., 307, 249-257.

18. Luo, X., Li, F., Hong, J., Lee, CO, Sim, CJ, Im, KS i Jung, JH (2006) Citotoksični oksilipini iz morskog sunđera Topsentia sp. J. Nat. Prod. 69, 567-571.

19. Mutak, S. (2007) Azalidi od azitromicina do novih derivata azalida. J. Antibiot. 60, 85-122.

20. Niwa, H., Wakamatsu, K. i Yamada, K. (1989) Haliholakton i neohaliholakton, dva nova metabolita masnih kiselina iz morskog sunđera Halichondria okadai Kadota. Tetrahedron Lett. 30, 4543-4546.

21. Parenty, A., Moreau, X., Niel, G. i Campagne, JM (2013) Update 1 of: macrolactonizations in the total synthesis of natural products. Chem. Rev. 113, PR1-PR40.

22. Pillaiyar, T., Manickam, M. i Jung, SH (2017) Smanjenje regulacije melanogeneze: otkrivanje lijekova i terapijske opcije. Drug Discov. Danas 22, 282-298.

23. Shiina, I. (2007.) Potpuna sinteza prirodnih 8- i 9-članova laktona: nedavni napredak u formiranju prstena srednje veličine. Chem. Rev. 107, 239-273.

24. Song, I., Gu, H., Han, H., Lee, N., Cha, J., Son, Y. i Kwon, J. (2018) Efekti 7-MEGATM 500 na oksidativne stres, upala i regeneracija kože u ćelijama kože tretiranim H2O2-. Toxicol. Res. 34, 103- 110.

25. van Tamelen, EE, Dickie, JP, Loomans, ME, Dewey, RS i Strong, FM (1961) Hemija antimicina AX strukture antimicina. J. Am. Chem. Soc. 83, 1639-1646.

26. Zhu, W. i Gao, J. (2008) Upotreba biljnih ekstrakata kao lokalnih agenasa za posvjetljivanje kože za poboljšanje poremećaja pigmentacije kože. J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 13, 20-24.

Za više informacija: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501