Uloga BATF3 u diferencijaciji Tu9 i L patologijama vođenim T-ćelijama MucOsal (2. dio)
Jun 13, 2022
Za više informacija molimo kontaktirajtedavid.wan@wecistanche.com
DISKUSIJA
T#9 ćelije su važne za razvoj upalnih i alergijskih bolesti. Međutim, program transkripcije i inflamatorni pokretači koji pokreću diferencijaciju TH9 ćelija ostaju nepotpuno shvaćeni. U ovoj studiji smo identificirali proinflamatorni citokin TL1A kao moćan induktor mišje i humane T-9 diferencijacije i identificirali BATF3 kao važan faktor transkripcije uključen u diferencijaciju TH9 ćelija. Mreža transkripcije koju je inducirao TL1A uključivala je faktore transkripcije BATF i BATF3 i nekoliko BATF reguliranih gena (dopunska slika 7). In vivo, u eksperimentima usvajanja transfera,Tμ9-TL1A ćelijebili su izrazito proupalni, što je dovelo do upale crijeva i pluća. Proinflamatorna sklonost T-9-TL1A ćelija zavisila je od proizvodnje IL-9. Transferi Batf3-/T i 9-TL1A ćelija su rezultirali smanjenom upalom sluznice i ekspresijom citokina in vivo.
Iako su Tμ9 ćelije identificirane kao posebna podskupina T-pomoćnika, faktor transkripcije koji djeluje kao glavni regulator ili samo identificira TH9 fenotip nije identificiran. Umjesto toga, nekoliko transkripcijskih faktora djeluje zajedno kako bi regulisalo diferencijaciju T-9 ćelija. Pokazalo se da BATF funkcionalno sarađuje sa IRF4 i da se vezuje za kompozitne elemente unutar promotorskih regija odgovornih gena. BATF zajedno sa IRF4 je bio nedavno predložen kao "pionirski faktor" u diferencijaciji Tp17 ćelija doprinoseći početnoj dostupnosti hromatina i olakšavajući pristup drugim faktorima transkripcije.36 Primetili smo da TL1A ima direktan uticaj na ekspresiju BATF i da sinerguje sa TGF{{9} } i IL-4 da maksimalno induciraju BATF ekspresiju posebno rano u diferencijaciji TH9. U prilog ovoj ideji, stimulacija samo sa TL1A dovodi do vezivanja BATF-a za II9 promotor, dok nema direktnog efekta na vezivanje drugih faktora transkripcije (IRF4 i BATF3). Kako god,TH9-TL1Auslovi sinergistički poboljšavaju vezivanje BATF3 i IRF4, kao i acetilaciju histona H3, permisivne modifikacije hromatina koja je u korelaciji sa aktivnošću promotora ll9.14 U skladu sa prethodno objavljenim podacima, BATF je neophodan za ekspresiju IL-9 i IL-10 pod uslovima T,9.15 TL1A je barem djelimično u stanju da prevaziđe zahtev za BATF u indukciji IL-9 i IL-13 najverovatnije kroz poboljšanje druge transkripcije faktori koji bi mogli nadoknaditi gubitak BATF-a. Jedan kandidat za funkcionalnu kompenzaciju je BATF3 koji je transkripcijski induciran TL1A. Predloženo je da su BATF i BATF3 funkcionalno zamjenjivi za razvoj Tu17 i Tp2 i prekomjerna ekspresija BATF3 u BATF-'- T ćelijama može obnoviti proizvodnju IL-17 u TH17 ćelijama i IL-4 i IL{{ 23}} u T#2 ćelijama.18323738 Međutim, uloga BATF3 u razvoju Tu ćelija u fiziološkim uslovima i potencijalnoj interakciji između BATF i BATF3 tokom diferencijacije TH9 nije definisana. Ovdje pokazujemo da TL1A olakšava vezivanje BATF3 za ll9 promotor. Kao funkcionalna posljedica, BATF3 doprinosi proizvodnji IL-9 pod T-9 uslovima, posebno u kontekstu stimulacije TL1A. Iznenađujuće, BATF3 je neophodan za ranu diferencijaciju Tu9 ćelija, ali može biti potreban za stabilizaciju ili održavanje fenotipa TA9 i lučenja IL-9 u kasnijim vremenskim tačkama. Naši nalazi o ulozi BATF3 u diferencijaciji TH9 su u suprotnosti s prethodnim izvještajima da je BATF3 neophodan za diferencijaciju Tu1, TA2 i Tu17.2'3'Za razliku od BATF-a, BATF3 samo doprinosi sekreciji IL-9 i ne za druge TH9 citokine kao što su IL-10 i IL-13, što sugerira da se BATF3 specifično vezuje za ll9 promotor i inducira lučenje IL-9. Potrebne su dalje studije da bi se odredili dodatni BATF3 ciljni geni tokom diferencijacije TH9 i njegova uloga u drugim Tu podskupovima.
Kliknite ovdje da saznate više o Cistancheu
Slika 7. Nedostatak Batf3 dovodi do smanjene upale sluzokože koju pokreću TH9-TL1A ćelije. Naivne WTor Batf3-/cells su diferencirane u T_9-TL1A ćelije i ubrizgane Rag1-7 miševima. a Reprezentativne H&E bojenje pluća (gornji paneli) i debelog crijeva (donje ploče). Skala: 200 mm. b Histološki rezultati za pluća.c Ukupan broj ćelija (lijevo, u sredini), učestalost CD4* T ćelija (desno). Podaci predstavljaju srednje vrijednosti±SD.n=10/group.d Intracelularno bojenje IL{{11} }, IL-13 i IL-17 iz slezene, MLN i pluća nakon ex vivo restimulacije sa PMA plus lonomicinom. Podaci predstavljaju srednje vrijednosti±SD.n=5/grupi. Prikazan je jedan reprezentativni eksperiment od tri nezavisna eksperimenta.*str<0.05,><0.01 as="" determined="" by="" student's="">
Iako je opisano da drugi proinflamatorni citokini ili medijatori kao što su IL-1, OX40 i TSLP poboljšavajuTH9 diferencijacija, čini se da je TL1A jedinstven u povećanju regulacije BATF-a, čime se otvara hromatin za regrutovanje drugih transkripcionih faktora, uključujući BATF3.353940 Naši podaci o sekvenciranju RNK podržavaju ovaj zaključak koji identifikuje podskup gena zavisnih od BATF-a koji su značajno povećani od strane TL1A. Nadalje, naši podaci o sekvenciranju RNK otkrivaju da BATF3 reguliše aktivnost faktora transkripcije, ćelijsku proliferaciju i intracelularnu transdukciju signala sugerirajući važnu ulogu BATF3 tokom diferencijacije T#9. In vivo, Batf3-'- TA9-TL1A ćelije su rezultirale smanjenom upalom sluznice i ekspresijom citokina. Nismo uočili poremećenu migraciju Batf3-'- TH9-TL1A ćelija u crijevo, što je u suprotnosti sa BATF-'- CD4 plus T ćelijama koje ne uspijevaju regulirati intestinalne migracijske markere i ne naseljavaju crijeva.4' Naši podaci podržavaju ulogu BATF3 u patofiziološkoj funkciji TA9-TL1A ćelija.
IL-9 i TA9 ćelije su nedavno povezane sa patogenezom IBD-a.*-10 IL-9 plus CD4 plus T ćelije su obogaćene kod pacijenata sa UC i visokim serumskim nivoima IL{{ 5}} u korelaciji sa teškom bolešću kod pacijenata sa CD-om.-10U eksperimentalnom modelu haptenom izazvane bolesti nalik UC, IL-9-i PU.1-miševi s nedostatkom su zaštićeni od crijevnih upala i anti-IL-9 antitijela su zaštitna u modelu hronične prevencije. stepen Međutim, nismo primetili nikakve efekte TL1A na ekspresiju PU.1 u uslovima T9. Pokazali smo da TL1A stimulacija rezultira povećanjem regulacije BATF i BATF3, ali ne i PU.1. Iako je PU.1 opisan kao glavni regulator diferencijacije TH9, potreban je samo za ekspresiju podskupa TH9 gena i miševa što sugerira da se vezivanje PU.1 ne mijenja u BATF-potpunoj nezavisnosti PU.1 i BATF-a. 75
Pokazali smo da su T,9-TL1A ćelije visoko patogene in vivo i izazivaju upalu crijeva i pluća. Upala crijeva uTH9-TL1Aprimaoci su uglavnom bili ograničeni na tanko crijevo. Nadalje, uočili smo povećan broj CCR6* i CD103 ćelija kod TH9-TL1A primatelja in vivo. Ovi podaci dosljedno pokazuju da se hemokinski receptor CCR6 i integrin CD103 eksprimiraju na TH9 ćelijama i olakšavaju migraciju na upalna mjesta i površine sluznice.15,42 Povećani broj CCR6 plus ćelija u Tμ9-TL1A primateljima in vivo je u skladu s našim zapažanjima uglavnom upale tankog crijeva jer se pokazalo da osa CCR6/CCL20 specifično olakšava migraciju T,17 ćelija u tanko crijevo i vjerovatno je da se slični mehanizmi primjenjuju na Tμ9 ćelije.3 Naši nalazi su također konzistentni sa nedavnim nalazima povišenih nivoa IL-9 u serumu kod pacijenata sa CD-om, posebno sa teškim bolestima.?
TL1A pojačava diferencijaciju T,1, TH2 i TA17 i iako nismo vidjeli nikakve naznake globalnog pomaka sa T9 ćelija na druge TH podskupove in vitro, moglo bi sugerirati da TH9 ćelije diferencirane sa TL1A mogu biti nestabilne in vivo i "trans" -diferencirati" u druge podskupove. Potencijal trans-diferencijacije TH9 ćelija je kontroverzan i može zavisiti od konteksta, modela bolesti i imunološkog statusa domaćina. U EAE dolazi do transdiferencijacije TH9 u ćelije koje proizvode IFN-Y, međutim, fenotip T,9 izgleda da je stabilan u modelima raka.339 Iznenađujuće, in vivo T9-TL1A ćelije su nastavile proizvoditi IL{ {18}} i nizvodni citokini kao što su IL-17 i IL-13 i nisu se transdiferencirali. Ovu ideju podržavaju i naši podaci koji pokazuju da je sam tretman anti-lL-9 dovoljan da blokira patogene efekte T9-TL1A ćelija. Sam tretman anti-Lil-9 antitijelima smanjio je proizvodnju IL-13 i oslabio upalu crijeva i pluća nazad na nivoe TH9. Za razvoj alergijske upale pluća potrebna je korporacija TH2 i TH9 ćelija. Međutim, čini se da je naš model kronične, nealergijske upale pluća uglavnom vođen T.9 ćelijama koje proizvode IL-9-, iako ne možemo isključiti doprinos ne-T stanica koje proizvode IL-9- u patogenezi u našoj model.
Ukratko, TL1A je snažan induktor mišje i humane diferencijacije T9 i mi smo razjasnili uključene signalne puteve. S obzirom na proinflamatorna svojstva TH9-TL1A ćelije in vivo, ciljanje TL1A-BATF3-IL-9 ose može biti obećavajući terapijski pristup kod patologija izazvanih T19- kao što je IBD ili alergijska bolest pluća.
METODE
Miševi C57BL/6, C57BL/6 Rag1-/, B6.SJL-Ptprc" Pepc/BoyJ(CD45.1),(B6.Cg-Nfkb1*m130l/J), Stat 6-/-(B6.129S2(C)-Stat6"miGr"/J), p50-/-B6.Cg-Tg(TcraTcrb)425Cbn/ (OT-I),Batrf/( B6.129s-Batm1.1kmm/), i Bat3-/(B6.129 S(C)-Batf3m1km"/) miševi su kupljeni od Jackson Laboratory. Dr3-/- n miševi su opisani na drugom mjestu.4 Miševi su održavani pod SPF uslovima. Sve studije na životinjama odobrene su od strane Odbora za njegu i korištenje životinja medicinskog centra Cedars-Sinai. Izolacija i diferencijacija T-ćelija Naivne T ćelije (CD62LhichcD44'o"CD25~; klonovi MEL-14, IM7, PC61.5; eBioscience) su izolovane iz slezene i MLN pomoću EasySeptM Mouse CD4 plus kompleta za izolaciju (matične ćelije Tehnologije) praćeno sortiranjem ćelija (MoFlo, Beckman Coulter). Ćelije su uzgajane u RPMI-1640 mediju (10 posto FBS) sa anti-CD3 (145-2C11;BD Biosciences), anti-CD28(37.51 ; eBioscience) (TH0 uslovi) i mišji TL1A (100 ng/ml; R&D sistemi) pod T-9 uslovima (ljudski TGF- 1 [3 ng/ml], Biolegend, IL{{66} } [20ng/ml, PeproTech).Nakon 2 dana, dodat je IL-2(20 U/ml). Za procjenu proliferacije ćelije, sortirane ćelije su označene karboksifluorescein sukcinimidil esterom (CFSE; Invitrogen), diferencirane za 5 dana, a razrjeđenje CFSE je procijenjeno protočnom citometrijom. Da bi se procijenila antigen-specifična T,9 diferencijacija, naivne CD4 plus T ćelije OT-Il miševa su stimulirane 3 dana sa 1 ug/ml OVA;23-339 peptida u prisustvo singenih APC (odnos 1:3). Pripremljen je iscrpljivanjem CD90.2T ćelija iz splenocita (stem Cell Technologies) nakon čega slijedi tretman mitomicinom C. izolacija humanih CD4 plus T ćelija i diferencijacija Krv je dobijena od zdravih dobrovoljaca nakon informiranog pristanka u skladu sa procedurama koje je ustanovio Cedars-Sinai Institutional Review Board (IRB # 3358, 2673). Naivne CD4 plus T ćelije (CD4 plus CD25-CD45RA plus CD45RO7) su izolovane iz PBMC koristeći EasySepl Human CD4 T cell Enrichment Kit (Tehnologija matičnih ćelija) nakon čega je usledilo sortiranje ćelija. Ćelije su kultivisane sa anti-CD3 (5 ug/ml) i anti-CD28 (2 ug/ml) sa humanim TL1A (100ng/ml; Fitzgerald) u uslovima TH9 (ljudski TGF- 1 [5 ng/ml] , ljudski IL-4 [10 ng/ml]). ELISA Koncentracija citokina u supernatantima kulture je analizirana ELISA-om za mišji ili ljudski IL-9, IL-10 i IL-13 (eBioscience). Intracelularno bojenje Ćelije su restimulirane sa 50 ng/ml PMA (forbol 12-miristat 13-acetat), 500 ng/ml jonomicina i monenzina (eBioscience) tokom 4 h, obojene anti-CD4 (RM{{ 117}},eBioscience), fiksiran i permeabiliziran korištenjem FoxP3 pufera za bojenje (eBioscience), i obojen antitijelima protiv mišjeg IL-9 (RM9A4, BioLegend),IL-10(JES{{123} }E3),IL{{125}(13A),IL{{127}A (eBio17B7), IL{{130}F (eBio18F10),IFN-y(XMG1.2),IL{{136} } (BVD6-24G2),IL-22 (1H8PWSR),Ki67(SolA15),BATF(MBM7C7), IRF4 (3E4),ljudski IL-9(MH9A4, sve eBioscience), i BATF3(841792, R&D Systems). Uzorci su analizirani pomoću CyAnADP protočnog citometra (Dako Cytomation) i softvera FlowJo (TreeStar Inc.).
Kvantitativni RT-PCR
Ukupna RNK je izolovana korišćenjem RNeasy kompleta i reverzno transkribovana u cDNK sa Omniscript RT kitom (oba Qiagen). qPCR je izveden korišćenjem Mastercycler" ep realplex² sistema (Eppendorf). Platinasti kvantitativni PCR SuperMix-UDG(Invitrogen) i prajmer su bile sonde i TaqMan sonde koristi se za Actb, I9, I10, 13 i BATF (IDT) (Dopunska tabela 7). RT² SYBR"Green qPCR Mastermix (Qiagen) i setovi prajmera korišteni su za Actb i Batf3 (IDT). mRNA ekspresija ciljnih gena je normalizirana na ekspresiju Actb. Relativna genska ekspresija je izračunata ovom metodom.
2-AACt hromatinska imunoprecipitacija
Chloe je izvedena korištenjem EZ ChIP kompleta za imunoprecipitaciju hromatina (Millipore) nakon čega je uslijedila qPCR analiza. Ukupno, 1×10 stepeni ćelije su stimulirane, fiksirane, ultrazvučne i imunoprecipitirane korištenjem 2 ug antitijela klase ChIP: anti-BATF(sc-100974), anti-BATF3(sc-162246), normalni miš lgG(sc-2025), anti-IRF4(sc-6059), normalan kozji lgG(sc-2028)(sva Santa Cruz Biotehnologija), anti-acetil-histon H3({{17 }}), i normalan zečji lgG (Milli-pore). Imunoprecipitirana DNK je reverzno umrežena, pročišćena pomoću spin kolona i analizirana qPCR (prajmer sekvence: Dodatna tabela 7). Da bismo kvantifikovali imunoprecipitiranu DNK, napravili smo standardnu krivu iz serijskih razblaženja ulazne DNK. Podaci su predstavljeni kao procenat ulazne DNK na osnovu normalizacije u odnosu na količinu ulazne DNK.
RNA sekvenciranje (GEO pristupni brojevi: GSE60362 i GSE106926)
RNA-Seg niskog unosa (TH9 vs. TH9-TL1A): Clontechov SMARTer Ultra"Low Input RNA Kit za sekvenciranje v3 je korišten za generiranje dvolančanih cDNK biblioteka od 1,5 do 2,5 ng ukupne RNK iz svakog uzorka prema preporukama proizvođača. Dvolančane cDNK biblioteke su pojedinačno fragmentirane i ligirane pomoću lon Torrent lon Xpress" Barkod adaptera koristeći lon Xpress" Plus Fragment Library Kit s ograničenim modifikacijama, uključujući konačne biblioteke odabrane veličine sa čišćenjem dvostrukih zrnaca i V volumenom RNA-Seq biblioteke su procijenjene za koncentraciju i dužinu korištenjem Invitrogen QubitdsDNA HS Assay Kit i AgilentKomplet DNK visoke osjetljivosti, respectively. Samples were multiplexed to obtain >Po 10 miliona čitanja za sekvenciranje. Objedinjene biblioteke su amplificirane na lon Sphere" i sekvencionirane korištenjem lon PIM Sequencing 200 Kit v2,lon Torrent".
mRNA-Seg (WT vs.Baft3-7T,9-TL1A): Illumina TruSeq Stranded mRNA library preparation kit was employed for RNA-Seq. Of total RNA, 1 ug per sample was used for poly-A mRNA selection using streptavidin-coated magnetic beads. cDNA was synthesized from enriched and fragmented RNA using reverse transcriptase (Super-Script ll, Invitrogen) and random primers. The cDNA was converted into double-stranded DNA, and enriched with PCR for library preparation. The PCR-amplified library was purified using Agencourt AMPure XP beads(Beckman Coulter). The concentration of the amplified library was measured with a NanoDrop spectrophotometer and on an Agilent 2100 Bioanalyzer. Samples were multiplexed to obtain >20 miliona čitanja/uzorak i sekvencirano na NextSeq 500 platformi (Illumina) korištenjem 75-bp jednostranog sekvenciranja.
Analiza podataka. Sirova čitanja su filtrirana i obrezana pomoću FASTX kompleta alata (http://hannonlab.cshl.edu/fastx{{0}}toolkit/) i usklađena korištenjem Tophat verzije 2.0.8 sa UCSC-om GRCm38/mm10 referentna oznaka genoma miša (http://genome.ucsc.edu). Broj čitanja gena generiran je korištenjem HTSeq (v0.5.4), a zatim normaliziran skraćenom sredinom metode normalizacije M-vrijednosti sa edgeR (v3.0.8) u Bioconductoru u R(v2.15), koji koristi ponderisanu skraćenu srednju vrijednost omjere log izraza. Za sve analize korišćeni su samo signali kvaliteta (prag: deset brojanja na milion u najmanje dva od četiri uzorka). Izvršena je analiza bez nadzora korištenjem top 100 rangiranih gena prema interkvartilnom rasponu, a zatim je generirano hijerarhijsko grupiranje korištenjem (v2.11) korištenjem dvosmjernih Pearsonovih korelacija kako bi se vizualizirali nepristrasni obrasci ekspresije gena koji prožimaju. Nadzirana analiza korištenjem modificiranog Fisherovog egzaktnog testa u edgeR-u i granične stope lažnog otkrivanja od 10 posto korištenjem Benjaminijeve i Hochbergove procedure korištena je za određivanje diferencijalnih izraza između TH9 i T.9-TL1A ili WT i Batf{{23} }T,9-TL1A. Analiza obogaćivanja putanje je izvršena korištenjem DAVID6.7 (http://david.abcc.ncifcrf.gov/) sa pragom brojanja =5 i pragom lakoće rezultata=0.05.
Model prijenosa T-ćelija
CD4 plus CD62LighcD44"cD25- T ćelije iz CD45.1 miševa su diferencirane u T9 ili T,9-TL1A ćelije tokom 3 dana. Mužjaci Rag{{10}}/miševi primaoci ubrizgane su ip sa 0,5×10 stepeni TH9, ili TH9-TL1A ćelija. Miševi su vagani 6-8 sedmica. Za eksperimente neutralizacije, miševima je ubrizgana ip kontrola anti-IL-9 ili lgG2b antitijela (oba 50 ug/dozi; R&D Systems) tri puta sedmično tokom 4 sedmice i dva puta sedmično za preostalo vrijeme počevši od dana prijenosa T-ćelija.Tkiva su fiksirana formalinom, ugrađena u parafin i obojena H&E ili AB-PAS.Upalu je ocenio semikvantitativnim sistemom bodovanja od strane obučenog patologa koji je zaslepljen eksperimentalnim uslovima.45,46 LPMC su izolovani iz debelog creva kao što je prethodno opisano.7 Plućno tkivo je digestirano 45 minuta na 37 stepeni C sa 10 ml HBSS-a koji sadrži 15 ug/ml Liberase" (Roche) i 25 ug/ml DNase I (Sigma) i filtriranje kroz 40- μm ćelijsko cjedilo nakon čega slijedi liza crvenih krvnih zrnaca. Jednoćelijske suspenzije su obojene anti-CD4, anti-CD45.1(A20), anti-CCR6 (29-2L17) i anti-CD103(2E7, sve eBioscience) i anti-Ki{{52 }}(SolA15, BD PharMingen) antitijela za protočnu citometriju ili restimulirana anti-CD3c/anti-CD28 antitijelima tokom 3 dana. Nivoi citokina u supernatantima mjereni su ELISA testom.
Statistika
Statistička značajnost je izračunata korištenjem SPSS softvera (IBM SPSS Statistics 20, IBM Machines Corp., Armonk, NY, USA). Podaci su analizirani korištenjem jednosmjerne analize varijanse (ANOVA) nakon čega je uslijedio post hoc neupareni dvostrani Student t-test, ili Mann-Whitney U test kako je naznačeno. Razlike su smatrane značajnim na str<>
ZAHVALNICA
Ovaj rad su podržali NIH (DK056328 za SRT) i Fondacija F. Widjaja (SRT i KSM). Anita Vibsig Neutzsky-Wulff je dobila postdoktorske stipendije od The Carlsberg Foundation (Danska) i Lundbeck Foundation (Danska). Jordan Nunnelee dobio je nagradu za studentska istraživanja od Crohn's and Colitis Foundation of America. Cedars-Sinai MIRIAD IBD Biobanka je podržana od strane F. Widjaja Foundation Instituta za istraživanje upale crijeva i imunobiologije, NIH/NIDDK grantovi P01 DK046763, U01 DK062413 i The Leona M and Harry B Helmsley Charitable Trust.
DOPRINOSI AUTORA
MT,HH,LT,MW,BS,MW, BS,MW,JN,JS, AN-W,RB,YW,JT,VF i KM. vršili eksperimente, analizirali podatke i kritički pregledali rukopis. AP, J. T i YW izvršili su analizu podataka RNA-Seq. MT, ST i KM su osmislili eksperimente. MT i KM su napisali rukopis.
DODATNE INFORMACIJE
Internetska verzija ovog članka (https://doi.org/10.1038/s41385-018-0122-4) sadrži dopunski materijal, koji je dostupan ovlaštenim korisnicima.
Konkurentni interesi: Autori izjavljuju da ne postoje suprotstavljeni interesi.
Napomena izdavača: Springer Nature ostaje neutralan u pogledu jurisdikcijskih zahtjeva u objavljenim mapama i institucionalnim vezama.
REFERENCE
1. Dardalhon, V. et al. IL-4 inhibira TGF-beta-indukovane Foxp3 plus T ćelije i, zajedno
sa TGF-beta, stvara IL-9 plus IL-10 plus Foxp3(-) efektorske T ćelije. Nat. Immunol. 9, 1347-1355(2008).
2. Veldhoen, M. et al. Transformirajući faktor rasta-beta "reprogramira" različite
pokretanje T pomoćnih 2 ćelija i promovira podskup koji proizvodi interleukin 9-. Nat. Immunol.9, 1341-1346 (2008).
3. Jager,A, Dardalhon,V,Sobel, RA, Bettelli,E.&Kuchroo, VK Th1, Th17 i Th9
efektorske ćelije indukuju eksperimentalni autoimuni encefalomijelitis sa različitim patološkim fenotipovima.J.Immunol.183,7169-7177(2009).
4. Licona-Limon, P. et al. Th9 ćelije pokreću imunitet domaćina protiv gastrointestinalnog trakta
infekcija crvima. Imunitet 39,744-757(2013).
5. Purwar, R. et al. Robustan tumorski imunitet na melanom posredovan interleukinom-9-
koje proizvode T ćelije. Nat. Med. 18, 1248-1253 (2012).
6. Gerlach, K. et al. TH9 ćelije koje izražavaju faktor transkripcije PU.1 pokreću T ćelije-
posredovani kolitis putem signalizacije IL-9 receptora u epitelnim stanicama crijeva. Nat Immunol.15,676-686(2014).
7. Nalleweg, N. et al. IL-9 i njegov receptor su pretežno uključeni u
patogeneza UC. Gut.64, 743-755 (2015).
8. Feng, T. et al. Nivoi interleukina 9 u serumu predviđaju ozbiljnost bolesti i kliničku sliku
efikasnost infliksimaba kod pacijenata sa Crohnovom bolešću. Inflamm. Bowel Dis. 23, 1817-1824(2017).
9. Matusiewicz,M., Neubauer,K,Bednarz-Misa,I, Gorska,S.&Krzystek-Korpacka,M.
Sistemski interleukin-9 u inflamatornoj bolesti crijeva: povezanost sa zacjeljivanjem sluznice kod ulceroznog kolitisa. Svijet J. Gastroenterol. 23,4039-4046(2017).
10. Optuženi, C. et al. Značaj nivoa seruma II-9 u inflamatornom crijevu
bolest. Int. J. Immunopathol. Pharmacol. 28, 569-575 (2015).
11. Jash, A. et al. Nuklearni faktor aktiviranih T ćelija 1(NFAT1)-indukovana permisivna
modifikacija hromatina olakšava transaktivaciju interleukina-9 (IL-9) posredovanu nuklearnim faktorom kapaB (NF-kappaB). J. Biol. Chem. 287, 15445-15457(2012). 12. Staudt, V.et al. Interferon-regulatorni faktor 4 je od suštinskog značaja za razvoj
program T pomoćnih 9 ćelija. Imunitet 33, 192-202 (2010).
13. Goswami, R. et al. STAT6-zavisna regulacija razvoja Th9.J. Immunol.
188,968-975(2012).
14. Chang, HCet al. Transkripcijski faktor PU.1 je neophodan za razvoj
T ćelije koje proizvode IL-9-i alergijska upala. Nat. Immunol. 11, 527-534 (2010).
15. Jabeen, R. et al. Razvoj Th9 ćelija zahteva transkripciju regulisanu BATF-om
mreže. J. Clin. Invest. 123,4641-4653(2013).
16. Kaplan, MH Mreža faktora transkripcije u Th9 ćelijama. Semin. Imunopathol.
39,11-20(2017).
17. Echlin, DR, Tae, HJ, Mitin, N. & Taparowsky, EJB-ATF funkcionira kao negativan
regulator transkripcije posredovane AP-1 i blokira ćelijsku transformaciju pomoću Ras i Fos. Oncogene 19, 1752-1763 (2000).
18. Murphy, TL, Tussiwand, R. & Murphy, KM Specifičnost kroz saradnju:
BATF-IRF interakcije kontrolišu imunoregulatorne mreže. Nat. Rev. Immunol. 13, 499-509(2013).
19. Sopel, N., Graser, A., Mousset, S. & Finotto, S. Transkripcijski faktor BATF
modulira odgovore posredovane citokinom u T ćelijama. Citokinski faktor rasta Rev. 30,39-45 (2016).
20. Edelson, BT et al. Periferne CD103( plus ) dendritske ćelije čine jedinstvenu podskupinu
razvojno povezane sa CD8 alfa( plus ) konvencionalnim dendritskim ćelijama.J. Exp. Med. 207, 823-836(2010).
21. Hildner, K. et al. Nedostatak Batf3 otkriva kritičnu ulogu CD8alpha＋ dendrita
ćelije u citotoksičnom imunitetu T ćelija. Science 322, 1097-1100 (2008).
22. Meylan, F. et al. Receptor DR3 iz porodice TNF je neophodan za različite T ćelije-
posredovane upalne bolesti. Imunitet 29,79-89 (2008).
23. Fang, L, Adkins, B, Deyev, V. & Podack, ER Osnovna uloga TNF receptora
superfamilija 25 (TNFRSF25) u razvoju alergijske upale pluća. J. Exp.Med.205, 1037-1048(2008).
24. Pappu, BP et al. Interakcija TL1A-DR3 reguliše funkciju Th17 ćelija i Th17-
posredovana autoimuna bolest. J. Exp. Med. 205, 1049-1062 (2008).
25. Bull, MJ et al. Receptor smrti 3-TNF sličan proteinu 1A pokreće put
nepovoljna patologija kostiju kod inflamatornog artritisa.J. Exp.Med. 205, 2457-2464 (2008).
26. Thomas, LS et al. Član TNF porodice TL1A inducira lučenje IL-22 u
izvršio ljudske Th17 ćelije putem IL-9 indukcije. J. Leukoc. Biol. 101, 727-737 (2017).
27. Richard, ACet al. Ligand porodice TNF TL1A i njegov receptor DR3 promovišu T
ćelijski posredovana alergijska imunopatologija povećanjem diferencijacije i patogenosti T ćelija koje proizvode IL-9-.J.Immunol.194,3567-3582(2015). 28. Tan, C. et al. Th9 ćelije specifične za antigen pokazuju jedinstvenost u svojoj kinetici
proizvodnja citokina i kratko zadržavanje na mjestu upale. Immunol. 185, 6795-6801(2010).
29. Wilhelm, C.et al. IL-9 reporter o sudbini pokazuje indukciju urođenog IL-
9 odgovor na upalu pluća. Nat. Immunol. 12, 1071-1077 (2011).
30. Banias, G.et al. Uloga TL1A i njegovog receptora DR3 u dva modela kronične bolesti
mišji ileitis. Proc. Natl Acad. Sci. SAD 103, 841-8446 (2006).
31. Betz, BCet al. BATF koordinira više aspekata funkcije B i T ćelija
za normalne odgovore antitela.J. Exp.Med. 207, 933-942(2010).
32. Schraml, BU et al. AP-1 faktor transkripcije BATF kontroliše T(H)17 različite
iniciranje. Nature 460, 405-409 (2009).
33. Glasmacher, E. et al. Genomski regulatorni element koji usmjerava sastavljanje i
funkcija imuno-specifičnih AP-1-IRF kompleksa. Nauka 338, 975-980 (2012). 34. Li, P. et al. BATF-JUN su kritični za IRF4-posredovanu transkripciju u T ćelijama. Priroda
490,543-546(2012).
35. Yao, W.et al. Interleukin-9 je neophodan za alergijsku upalu disajnih puteva posredovanu
od strane citokina TSLP.Immunity 38,360-372 (2013).
36. Ciofani, M. et al. Potvrđena regulatorna mreža za specifikaciju Th17 ćelija. Cell
151,289-303(2012).
37. Tussiwand, R.et al. Kompenzatorni razvoj dendritičkih ćelija posredovan BATF-om
IRF interakcije. Priroda 490, 502-507(2012).
38. Iwata, A. et al. Kvalitet TCR signalizacije određen diferencijalnim afinitetima
pojačivači za kompozitni kompleks BATF-IRF4 faktora transkripcije. Nat. Immunol.18,563-572(2017).
39. Vegan, F. et al. Transkripcijski faktor IRF1 diktira zavisnost od IL-21-
antikancerogene funkcije TH9 ćelija. Nat. Immunol. 15,758-766(2014).
40. Xiao, X. et al. OX40 signalizacija pogoduje indukciji T(H)9 ćelija i disajnih puteva
upala. Nat. Immunol. 13, 981-990 (2012).
41. Wang, C. et al. BATF je potreban za normalnu ekspresiju gut-hominga
receptore T pomoćnih ćelija kao odgovor na retinoičnu kiselinu. J. Exp. Med. 210, 475-489(2013).
42. Kara, EE et al. Različite ose receptora hemokina regulišu promet Th9 ćelijama
na alergijska i autoimuna upalna mjesta. J. Immunol. 191, 110-117 (2013).
43. Esplugues, E.et al. Kontrola TH17 ćelija se dešava u tankom crevu. Priroda 475,
514-518(2011).
44. Shih, DQ et al. Inhibicija novog fibrogenog faktora Tella poništava uspostavljanje
fibroza debelog crijeva. Mucosal Immunol.7,1492-1503 (2014).
45. Ostanin, DV i dr. Model prijenosa T stanica kroničnog kolitisa: koncepti, razmatranja i trikovi trgovine. Am. J. Physiol. Gastrointest. Fiziol jetre. 296, G{2}}G146 (2009).
46. Chin, JEet al. Regrutacija leukocita u disajnim putevima kod miševa ovisi o alfa4-
integrini i adhezioni molekul vaskularnih ćelija-1. Am. J. Physiol. 272, L{2}}L29 (1997).
47. Weigmann, B. et al. Izolacija i naknadna analiza mišje lamine propria
mononuklearne ćelije iz tkiva debelog creva. Nat. Protoc. 2, 2307-2311 (2007).