WT1 pulsirana humana CD141+ vakcina dendritičkih ćelija ima visok potencijal u imunoterapiji usmjerenoj na solidne tumore

sažetak:

Dendritske ćelije (DC) su moćne ćelije koje igraju kritičnu ulogu u imunitetu protiv tumora, a njihova upotreba u imunoterapiji raka otključava skrivene mogućnosti kao efikasnog terapeutika. Da bismo maksimalno iskoristili puni potencijal DC-a, razvili smo DC vakcinu pod nazivom CellgramDC-WT1 (CDW). CDW je pulsiran sa WT1, antigenom koji se obično eksprimira u solidnim tumorima, i induciran sa zoledronatom kako bi se pomoglo sazrijevanju DC. Iako se naša prethodna studija fokusirala na korištenje Rg3 kao induktora DC sazrijevanja, problemi s kontrolom kvaliteta i pristupom doveli su nas da odaberemo zoledronat kao bolju alternativu. Nadalje, CDW je lučio IL-12 i IFN-, koji su inducirali diferencijaciju naivnih T ćelija u aktivne CD8+ T ćelije i izazvali odgovor citotoksičnih T limfocita (CTL) protiv ćelija raka sa WT1 antigenima. Potvrđujući identitet i funkciju CDW, vjerujemo da je CDW poboljšana DC vakcina i ima obećavajući potencijal u polju imunoterapije raka.

cistanche tubulosa-poboljšava imuni sistem

Ključne riječi:

DC vakcina; CD141; dendritske ćelije; zoledronat; aktivacija T-ćelija; imunoterapija raka; solidni tumor; antigeni raka; Wilmsov tumor1 (WT1); antigeni povezani sa tumorom

1. Uvod

Rak je vodeći uzrok smrti širom svijeta, i dok tradicionalni načini liječenja uključuju operaciju, kemoterapiju i zračenje, oni često uzrokuju neželjene nuspojave zbog nemogućnosti razlikovanja između kancerogenih i normalnih stanica [1]. Međutim, nedavni napredak u polju imunoterapije omogućio je razvoj vakcina protiv raka, koje imaju za cilj da aktiviraju imunološki sistem organizma da specifično cilja ćelije raka i posljedično minimizira nuspojave [2]. Vakcine protiv raka prvenstveno koriste antigene povezane s tumorom ili tumor-specifične antigene da aktiviraju antigen-specifične limfocite imunog sistema [3]. Aktivirani limfociti, pretežno T ćelije, preuzimaju efektorske funkcije kao što su citotoksičnost i proizvodnja citokina za kontrolu progresije raka [4]. Različite vrste vakcina protiv raka koriste specifičan skup imunoloških ćelija, kao što su prirodne ćelije ubice (NK) [5] i dendritske ćelije (DC) [6]. Od njih, DC su ćelije koje predstavljaju antigen (APC) i igraju ključnu ulogu u aktiviranju imunološkog odgovora putem T ćelija. Glavna karakteristika DC uključuje sposobnost hvatanja antigena i procesiranja proteina u peptid koji će biti predstavljen T ćelijama pomoću molekula glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC). Međutim, DC se sastoji od heterogene populacije sa svakom podskupom koja nosi različite fenotipove i funkcije [7].

cistanche biljka koja povećava imuni sistem

DC se uglavnom dijele na klasične/konvencionalne DC (cDC), plazmacitoidne DC (pDC) i DC izvedene iz monocita (mo-DC). Postoje dvije široke grupe cDC: tip 1 DC (cDC1), koji prvenstveno predstavlja antigene koristeći MHC klase I da izazove CTL odgovor od CD8+ T ćelija (CTL), i tip 2 DC (cDC2), koji koristi MHC klase II za promociju odgovora CD4+ T ćelija (pomoćne T ćelije) [8]. Plazmacitoidni DC su jedinstveni podskup DC koji su specijalizovani za izlučivanje interferona tipa I (IFN) [9]. Mo-DC je prvenstveno uključen u upalu i potiče TH17 imuni odgovor [10] (Slika 1A). Trenutno se mo-DC najviše koristi u polju istraživanja imunoterapije protiv raka [11–13]. Iako se mo-DC dobro podnosi i bezbedan, niska terapijska efikasnost je ometala njegovu široku upotrebu. Ograničenje mo-DC je demonstrirano in vitro, gdje pokazuju ograničenu sposobnost migriranja u limfne čvorove kako bi aktivirali jake citotoksične T limfocitne (CTL) odgovore [14]. Kako bi se prevazišla ograničenja trenutnih načina DC vakcine, cDC1 je odabran u ovoj studiji, jer ima najvišu sposobnost prezentacije antigena i pokazuje visok CTL odgovor. Iako su studije o cDC1 vakcinama u porastu, cDC1 još nije istražen u kliničkom ispitivanju [15].

Dobili smo mononuklearne ćelije (MNC) iz koštane srži, a zatim izolovale CD34+ ćelije (hematopoetske matične ćelije) koristeći MACS® tehniku ​​razdvajanja ćelija. Ćelije su proliferirane korištenjem faktora stimulacije kolonije granulocita-makrofaga (GM-CSF), faktora matičnih stanica (SCF) i liganda receptora 3 tirozin kinaze sličnog Fms (FLT3), koji direktno inducira diferencijaciju u DC [16] i diferencijaciju u DC je induciran sa GM-CSF i interleukinom 4 (IL-4). Nezreli DC prepoznaje WT1 protein kao antigen i sazrijeva pomoću zoledronata. WT1 (Wilmsov tumor1) antigen je visoko izražen u različitim malignitetima i raznim solidnim tumorima. Stoga se WT1 koristi kao jedna od meta imunoterapije za rak [17]. Zoledronat je lijek iz klase bisfosfonata, koji se široko koristi za liječenje osteoporoze i metastaza u skeletu. Dodatno, zoledronat inhibira enzim farnezil difosfat sintazu, koji igra ulogu u mevalonatnom putu iu kasnijoj prenilaciji malih proteina GTPaze, kao što je Ras [18]. Sazreli DC se zatim finalizira kao DC vakcina (slika 1A). Općenito, zreli DC luče različite citokine da induciraju aktivaciju imunih ćelija [19] i vezuju se direktno za T ćelije radi prezentacije antigena [20]. T ćelije su reagovale sa DC kako bi postale pomoćne T ćelije (CD4+) kako bi pomogle imunološkom odgovoru ili citotoksičnim T ćelijama (CD8+) da direktno iniciraju efekte protiv raka [21] (Slika 1B). Sastav DC vakcine je potvrđen protočnom citometrijom, a funkcija vakcine je analizirana testom lučenja citokina, promjenom T ćelija i testom citotoksičnih T limfocita (CTL).

cistanche tubulosa-poboljšava imuni sistem

Kliknite ovdje za pregled proizvoda Cistanche Enhance Immunity

【Zatražite više】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Rezultati

2.1. Profili protočne citometrije koji ilustriraju DC vakcinu sa visokom CD141+ ekspresijom

Da bi se potvrdio identitet DC, analizirani su različiti markeri, uključujući CD141 (najviše korišteni cDC1 marker), CD1c (marker cDC2) i CD303a (marker pDC). Pored toga, analizirani su i HLA-DR, CD80 i CD86, koji su aktivacijski markeri. Za razliku od 70% cDC2 pronađenog u ljudskom DC krvi, DC koji je proizveden uglavnom se sastojao od cDC1 (CD141+ ćelije), a dvostruko pozitivno pojavljivanje CD141+CD1c+ u aktiviranom DC je bilo takođe potvrđeno [22,23]. Nadalje, rezultati su pokazali značajno visok nivo aktivnosti za DC (Slika 2A, B). Promjene ćelijske morfologije su također praćene korištenjem kompletne krvne slike (CBC) za različite vremenske točke u proizvodnji DC. Dok većina ćelija proliferira kao monociti u fazi proliferacije (Tabela 1), faza diferencijacije je rezultirala postepenim smanjenjem monocita do nivoa nestanka pri kraju procesa proizvodnje.

Slika 2. Identifikacija CDW podskupova. Fenotipske karakteristike DC. Tokom procesa diferencijacije, DC je pulsiran sa WT1 proteinom i tretiran sa 1 µM zoledronatom tokom 3 h. Podaci pokazuju ekspresiju stimulativnog markera i podtip DC predstavnika humanog DC (n=5) (A). Rezultati su prikazani u obliku tačaka (B).

Tabela 1. Tokom procesa proliferacije i diferencijacije od CD34+ ćelija do DC, fenotipske promjene su analizirane pomoću CBC.

2.2. Plazmatski nivo IL-12 i IFN-citokina određen ELISA-om

Od mnogih citokina koje luči DC, najreprezentativniji su IL-12 i IFN-. IL-12 reguliše upalu povezujući urođene i adaptivne imune odgovore. Većina efekata izazvanih IL-12- je posredovana sekrecijom IFN-a i pokazalo se da su kritični za indukciju Th1 ćelija. IFN- igra ključnu ulogu u aktivaciji ćelijskog imuniteta i, posljedično, stimulaciji antitumorskog imunološkog odgovora [24–26]. Kako bi se potvrdila efikasnost CDW, nivoi sekrecije IL-12 i IFN-a analizirani su interakcijom sa T ćelijama. Dok su samo T ćelije i T ćelije tretirane nepulziranim DC uslovima rezultirale nivoima sekrecije koji su bili slični jedni drugima, kada su grupe upoređene sa grupom T ćelije + CDW, indukcija CDW na T ćelijama dala je dvostruko veći nivo IL -12(Slika 3A) i značajno povećao nivo IFN- (Slika 3B).

Slika 3. Poređenje indukcije CDW na T ćelijama putem analize citokina. Izlučivanje IL-12 (A) i IFN- (B) mjereno je samo u T ćelijama (aktivirani IL-2 i Trans ACT), T ćelija + nepulsirana DC i T ćelija + CDW kokultura supernatant pomoću ELISA testa (n=3). ELISA je izvedena korištenjem supernatanta u vrijeme završetka. Analiza je obavljena putem SigmaPlot-a. *** p < 0.001.

2.3. Učinak zoledronata na diferencijaciju i sazrijevanje cDC1 u CDW

U prethodnoj studiji, Rg3 [27], ginsenozid pronađen u Panax ginsengu, korišten je za indukciju sazrijevanja DC; međutim, konačni proizvod se sastojao od sloja nečistoća, što je uzrokovalo poteškoće u kontroli kvaliteta. Za prevazilaženje ovog problema korišćen je zoledronat kao zamena za Rg3, a analiziran je i njegov uticaj na indukciju DC sazrevanja. Najznačajnija razlika između efekata ove dvije supstance je sposobnost zoledronata da proizvede izuzetno visoku ekspresiju površinskog markera cDC1 (CD141+ ćelija) (slika 4A). Stoga, kako je poznato da je cDC1 najsuperiorniji podtip DC u prezentaciji antigena, zoledronat je odabran za indukciju sazrevanja DC [18]. Takođe je procenjeno optimalno vreme tretmana zoledronatom za izazivanje sazrevanja DC. Iako je tretman od 24 sata dao dovoljan udio CD141+ ćelija, udio CD141+ ćelija u rezultatu tretmana od 3 sata bio je veći za otprilike 20%, a CD86 (ko- stimulativni marker) u 3 h tretmana takođe je veći za 30%. Uz to, uzimajući u obzir mehanizam djelovanja zoledronata, kraće vrijeme tretmana od 3 h u odnosu na 24 h smatralo se efikasnijim u proizvodnji višeg kvaliteta DC (Tabela 2).

Slika 4. Učinak zoledronata na diferencijaciju i sazrijevanje cDC1 u proizvodnji DC vakcine. Efekti zoledronata u DC vakcini. U procesu proizvodnje DC vakcine, 3 sata tretmana zoledronatom indukuje diferencijaciju i sazrevanje DC do cDC1 i daje viši nivo CD141 markera. Markeri fenotipa su analizirani protočnom citometrijom kako bi se uporedili Rg3 (n=4) i zoledronat (n=5), koji su korišteni za indukciju DC sazrijevanja. *** p < 0.001.

Tabela 2. Utjecaj vremena tretmana zoledronatom (3 h i 24 h) na površinske markere.

2.4. Odgovori T ćelija specifičnih za antigen WT1 izazvane CDW vakcinacijom

Slika 5. CDW povećava CD8+ T ćelije da promoviše citotoksičnost protiv ćelija raka. Efekat CDW-a na odgovor T ćelija procenjen putem CTL-a. IL-2 i Trans-Act su stimulatori T ćelija i korišteni su za stimulaciju T ćelija. Aktivirane T ćelije su kultivisane sa DC za prvu indukciju koja traje sedam dana i drugu indukciju koja se proteže na 10 dan. Promjene u podtipu T ćelija analizirane su protočnom citometrijom (A). T ćelije kultivisane 10-14 dana su kultivisane zajedno sa ćelijama raka koje eksprimiraju WT1 u skladu sa odgovarajućim omjerima u 96-ploči sa bunarima. Nakon -72 h, stopa preživljavanja ćelija raka je analizirana korištenjem CCK8 (B–D). T ćelije inducirane CDW grupom (B). Grupa samo T ćelija (aktivirani IL-2 i Trans ACT) (C). T ćelije inducirane nepulziranom DC grupom (D). * p < 0,05, *** p < 0,001.

2.5. Potvrda o sigurnosti CellgramDC vakcine

U obje grupe primjene (3,4 × 104 ćelija/životinja ili 1,7 × 105 ćelija/životinja), nisu uočene abnormalnosti u pogledu smrti ili općih simptoma kao posljedica primijenjene supstance.

Tokom perioda posmatranja nisu uočene toksikološki značajne promene u grupama koje su davale lek (3,4 × 104 ćelija/životinja ili 1,7 × 105 ćelija/životinja) kao rezultat primenjene supstance. Opažanja su uključivala tjelesnu težinu (Slika 6A), analizu urina (Slika 6B), unos hrane, oftalmološki pregled, hematološki pregled, biohemijski pregled krvi, težinu organa, autopsiju i lokalni test tolerancije (Dodatak 1, Tabele S1-S9). Različiti testovi su potvrđeni poređenjem DC izvedene iz stabljike (CellgramDC) i DC izvedene iz monocita (mo-DC). Preživljavanje i veličina tumora miševa su također testirani. Veličina tumora u grupi mo-DC smanjena je za više od 50% u odnosu na mo-DC grupu, a stopa preživljavanja je također povećana, što potvrđuje snažan antikancerogeni učinak (Dodatak 2).

Slika 6. Studija toksičnosti subkutane doze CellgramDC kod C57BL/6 miševa. Da bi se testirala sigurnost i toksični odgovor CellgramDC, ženke i mužjaci miševa soja C57BL/6 su subkutano ubrizgavali CellgramDC ukupno šest sedmica (jedna injekcija sedmično). Sigurnost Cell gramDC testirana je supkutanom injekcijom u ženke i mužjake miševa u trajanju od ukupno šest sedmica (jedna injekcija sedmično). Grupe za davanje sastojale su se od dvije grupe: 10 miševa kojima je ubrizgano 3,4 × 104 ćelija/životinji i 15 miševa kojima je ubrizgano 1,7 × 105 ćelija/životinji. Negativna kontrolna grupa se sastojala od 15 miševa i intravenozno joj je injiciran rastvor sastavljen od ekscipijensa, rastvora plazme-A/humanog serumskog albumina (HSA) 90% + DMSO 10% i fiziološkog rastvora tokom šest nedelja (jedna injekcija nedeljno). Kako bi se testirao reverzibilni toksični odgovor, pet miševa iz svake grupe za poređenje, negativne kontrolne grupe i 1,7 × 105 ćelija/grupi za davanje životinja dobilo je dvije sedmice perioda oporavka. Tokom perioda oporavka praćeni su provjera težine (A), analiza urina (B), opći simptomi, mjerenje unosa hrane i oftalmološki pregled. Nakon perioda opservacije urađeni su hematološki testovi, biohemijski testovi krvi i mjerenje težine organa, kao i vizuelni i histopatološki pregledi na obdukciji.

Potvrdili smo stabilnost i efikasnost CellgramDC-a. CDW koji je pulsiran sa WT1 i tretiran zoledronatom također će biti testiran na toksičnost i efikasnost i očekuju se poboljšani rezultati.

3. Diskusija

U CDW vakcini koja je proizvedena, cDC1 je bio najveći u odnosu i pokazao je visok nivo aktivnosti. cDC1 su ćelije sa najvišom sposobnošću prezentacije antigena i odgovorne su za glavnu funkciju DC. Uzimajući u obzir kako cDC1 čini rijetku podskupinu DC [~0.03% PBMC] [28], dominacija CD141+ populacije u CDW-u je jasna prednost u povećanju efikasnosti vakcina. Nadalje, cDC1 u CDW je lučio citokine (IL-12 i IFN-) na visokom nivou i bio je sposoban inducirati diferencijaciju naivnih T ćelija u aktivne CD8+ T ćelije. U našoj prethodnoj studiji, Rg3 je korišten kao faktor sazrijevanja, ali s obzirom na poteškoće u nabavci i kontroli kvaliteta finalnog proizvoda, zoledronat je korišten kao zamjena za prevazilaženje ovih izazova. DC induciran zoledronatom je proučavan kako bi se analizirala njegova uloga kao indukatora aktivacije V 9 δ T ćelija [29]. Zoledronat je klasa bisfosfonata, a bisfosfonati induciraju aktivnost δ T ćelija da brzo i u izobilju proizvode proinflamatorne citokine [30], uzimajući to u obzir, osmislili smo naš eksperiment kako bismo testirali efekte kratkotrajnog liječenja. U našoj studiji, zoledronat (u poređenju sa Rg3) je inducirao aktivaciju CD8+ T ćelija u CDW i takođe je povećao nivo cDC1. Prvo kliničko ispitivanje provedeno je za DC izazvan Rg3 (NCT 046158-45) iz naše prethodne studije, ali rezultati nisu prijavljeni. Međutim, očekujemo poboljšane rezultate u budućim kliničkim ispitivanjima koristeći DC izazvan zoledronatom s obzirom na trenutne nalaze.

cistanche biljka koja povećava imuni sistem

Nedavno je bilo mnogo studija u vezi imunoterapije protiv raka, a najistraživanije terapije su CAR-T [31,32] i CAR-NK [33,34]. Ove terapije su potvrdile svoju efikasnost i vrlo su očekivane u liječenju raka. Međutim, CAR-T je ograničen na liječenje raka krvi, koji čini vrlo mali udio svih tipova raka [35]. Nadalje, pacijenti mogu patiti od nuspojava liječenja, kao što je sindrom oslobađanja citokina (CRS) [36]. Kako bi se ovi nedostaci prevazišli, istražuje se imunoterapija pomoću NK ćelija. NK ćelije su visoko potentni limfociti i ciljaju rak preko višestruko široko izraženih aktivirajućih liganada. Kao rezultat toga, NK ćelije mogu riješiti ograničenja autologne terapije CAR T stanicama. Međutim, postoji nekoliko potencijalnih nedostataka u korištenju NK ćelija, kao što su poteškoće u ćelijskoj kulturi, neposrednost vršne aktivnosti ćelijske kinetike i kraća intrinzična dugovječnost, kao i ograničeni fenotip pamćenja u životnom vijeku i odgovoru [34,37 ,38]. Druga istraživanja uključuju kombinovane terapije koje koriste DC ili T ćelije i inhibitore imunih kontrolnih tačaka kao što su anti-PD1 (protein programirane ćelijske smrti1) [39] ili anti-PD-L1 (programirani ligand smrti1) [40]. Zajednička primjena ovih lijekova omogućava ciljanje imunosupresivnog tumorskog mikrookruženja i dalja istraživanja su u toku kako bi se povećala efikasnost ovih terapija.

Prednosti cistanche tubulosa- jača imunološki sistem

Istraživanja za razvoj DC vakcine za imunoterapiju su u stalnom porastu, a mnoga su napredovanja napravljena u ovoj oblasti. DC igra centralnu i kritičnu ulogu u naprednom imunološkom sistemu, a DC vakcina može ponuditi prednost u odnosu na druge načine imunoterapije za rak. Budući da DC ne ubija direktno ćelije raka, normalne ćelije nisu pogođene, eliminišući neželjene nuspojave. Nadalje, pulsirajući DC sa WT1, antigenom koji se obično eksprimira u mnogim solidnim tumorima [17], DC vakcina može ciljati modele solidnih tumora. Prije nego što smo se odlučili za WT1 proteinski antigen, eksperimentirali smo s različitim tipovima antigena. Korišćenjem proizvoda zagarantovanog kvaliteta, kao i raznih antigena kao što su peptid, captivator ili pop mix, antigen sa najvećim efektom bio je kada se koristi kao protein. Shodno tome, koristili smo WT1 protein za pulsiranje antigena. Najšire proučavan pristup u DC terapiji koristi mo-DC pulsiran sa WT1 u kombinaciji s kemoterapijom [12]. Sigurnost i imunogenost mo-DC potvrđena je kroz klinička ispitivanja [13]. Dok druga istraživanja DC vakcine razvijaju svoje vakcine koristeći DC izvedene iz monocita iz krvi, mi smo predvidjeli da će DC izveden iz matičnih ćelija imati povećan potencijal. Osim toga, poznato je da cDC ima veću snagu od mo-DC, što nas tjera na ovo istraživanje. Stoga, CDW može biti bolja alternativa mo-DC, jer je njegova primarna komponenta cDC1, DC podtip sa najefikasnijom sposobnošću unakrsnog predstavljanja. Iako je citotoksična aktivnost bila slična u T ćelije + nepulsirana DC grupa i CDW grupa, pretpostavljamo da je to zato što je nepulsirani DC također tip cDC1 ćelije. Bez obzira na to, CDW može efikasno izazvati snažan antitumorski imuni odgovor povećanjem populacije cDC1. Kroz pretkliničku studiju testirali smo toksičnost ponovljenih doza DC vakcine. Proces razvoja i proizvodnje CDW-a je verifikovan i nadamo se da ćemo sprovesti dalje studije kako bismo testirali poboljšane efekte CDW-a. Dok je djelotvornost potvrđena in vitro, provedena je studija toksičnosti doze za validaciju djelotvornosti in vivo. Nakon što se jave rezultati kliničkih ispitivanja uz korištenje CDW-a, namjeravamo voditi naše istraživanje u smjeru koji će unaprijediti trenutna istraživanja.

Reference

1. Padma, VV Pregled ciljane terapije raka. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher, V. Vakcine protiv raka i onkolitički virusi ispoljavaju znatno niže nuspojave kod pacijenata sa rakom nego druge sistemske terapije: komparativna analiza. Biomedicines 2020, 8, 61. [CrossRef] [PubMed]

3. Smith, CC; Selitsky, SR; Chai, S.; Armstead, PM; Vincent, BG; Serody, JS Alternativni tumor-specifični antigeni. Nat. Rev. Cancer 2019, 19, 465–478. [CrossRef] [PubMed]

4. Lu, H.; Zhao, X.; Li, Z.; Hu, Y.; Wang, H. Od CAR-T ćelija do CAR-NK ćelija: Metoda imunoterapije u razvoju za hematološke maligne bolesti. Front. Oncol. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. Chu, J.; Gao, F.; Yan, M.; Zhao, S.; Yan, Z.; Shi, B.; Liu, Y. Prirodne ćelije ubice: obećavajuća imunoterapija za rak. J. Transl. Med. 2022, 20, 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Sabado, RL; Balan, S.; Bhardwaj, N. Imunoterapija na bazi dendritičkih ćelija. Cell Res. 2017, 27, 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Patente, TA; Pinho, MP; Oliveira, AA; Evangelista, GCM; Bergami-Santos, PC; Barbuto, JAM Ljudske dendritične ćelije: njihova heterogenost i potencijal kliničke primene u imunoterapiji raka. Front. Immunol. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. Collin, M.; Bigley, V. Podskupovi ljudskih dendritičkih ćelija: ažuriranje. Imunologija 2018, 154, 3–20. [CrossRef]

9. Fitzgerald-Bocarsly, P.; Dai, J.; Singh, S. Plazmacitoidne dendritične ćelije i tip I IFN: 50 godina konvergentne istorije. Cytokine Growth Factor Rev. 2008, 19, 3–19. [CrossRef]

10. Segura, E.; Touzot, M.; Bohineust, A.; Cappuccio, A.; Chiocchia, G.; Hosmalin, A.; Dalod, M.; Soumelis, V.; Amigorena, S. Ljudske inflamatorne dendritične ćelije indukuju diferencijaciju Th17 ćelija. Imunitet 2013, 38, 336–348. [CrossRef]

11. Geskin, LJ; Damiano, JJ; Patrone, CC; Butterfield, L.; Kirkwood, JM; Falo, LD Tri metode punjenja antigena u vakcinama dendritičnih ćelija za metastatski melanom. Melanoma Res. 2018, 28, 211. [CrossRef] [PubMed]

12. Guo, Z.; Yuan, Y.; Chen, C.; Lin, J.; Ma, Q.; Liu, G.; Gao, Y.; Huang, Y.; Chen, L.; Chen, L.-Z.; et al. Trajni potpuni odgovor na vakcinu dendritičnih ćelija napunjenu neoantigenom nakon anti-PD-1 terapije kod metastatskog karcinoma želuca. Npj Precis. Oncol. 2022, 6, 34. [CrossRef] [PubMed]

13. Bol, KF; Schreibelt, G.; Rabold, K.; Wculek, SK; Schwarze, JK; Dzionek, A.; Teijeira, A.; Kandalaft, LE; Romero, P.; Coukos, G.; et al. Klinička primjena imunoterapije raka zasnovana na prirodno cirkulirajućim dendritskim stanicama. J. Immunother. Cancer 2019, 7, 109. [CrossRef] [PubMed]

14. Koya, T.; Datum, I.; Kawaguchi, H.; Watanabe, A.; Sakamoto, T.; Togi, M.; Kato, JT; Yoshida, K.; Kojima, S.; Yanagisawa, R.; et al. Dendritske ćelije prethodno pulsirane sa Wilmsovim tumorom 1 u optimizovanoj kulturi za vakcinaciju protiv raka. Pharmaceutics 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. Zhou, Y.; Slone, N.; Chrisikos, TT; Kyrysyuk, O.; Babcock, RL; Medik, YB; Li, HS; Kleinerman, ES; Watowich, SS Efikasnost vakcine protiv primarnog i metastatskog karcinoma sa in vitro generisanim CD103+ konvencionalnim dendritskim ćelijama. J. Immunother. Rak 2020, 8, e000474. [CrossRef]

16. Cueto, F.; Sancho, D. Os Flt3L/Flt3 u biologiji dendritičnih ćelija i imunoterapiji raka. Rakovi 2021, 13, 1525. [CrossRef]

17. Yanagisawa, R.; Koizumi, T.; Koya, T.; Sano, K.; Koido, S.; Nagai, K.; Kobayashi, M.; Okamoto, M.; Sugiyama, H.; Shimodaira, S. WT{1}}pulzirana vakcina dendritičnih ćelija u kombinaciji sa hemoterapijom za resecirani karcinom pankreasa u fazi I studije. Antikancer. Res. 2018, 38, 2217–2225. 18. Orsini, G.; Failli, A.; Legitimo, A.; Adinolfi, B.; Romanini, A.; Consolini, R. Zoledronska kiselina modulira sazrijevanje dendritskih ćelija ljudskih monocita. Exp. Biol. Med. 2011, 236, 1420–1426. [CrossRef] [PubMed]

19. Schmidt, SV; Nino-Castro, AC; Schultze, JL Regulatorne dendritske ćelije: Postoji više od samo imunološke aktivacije. Front. Immunol. 2012, 3, 274. [CrossRef]

20. Tai, Y.; Wang, Q.; Korner, H.; Zhang, L.; Wei, W. Molekularni mehanizmi aktivacije T ćelija dendritskim ćelijama u autoimunim bolestima. Front. Pharmacol. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. Alfei, F.; Ho, P.-C.; Lo, W.-L. Donošenje odluka u tumorima upravlja antitumorskim imunitetom T ćelija. Oncogene 2021, 40, 5253–5261. [CrossRef] [PubMed]

22. Granot, T.; Senda, T.; Carpenter, DJ; Matsuoka, N.; Weiner, J.; Gordon, CL; Miron, M.; Kumar, BV; Griesemer, A.; Ho, S.-H.; et al. Dendritične ćelije pokazuju dinamiku sazrevanja podskupa i tkivno specifičnu tokom ljudskog života. Imunitet 2017, 46, 504–515. [CrossRef] [PubMed]

23. Breton, G.; Lee, J.; Zhou, YJ; Schreiber, JJ; Keler, T.; Puhr, S.; Anandasabapathy, N.; Schlesinger, S.; Caskey, M.; Liu, K.; et al. Cirkulirajući prekursori ljudskih CD1c+ i CD141+ dendritskih ćelija. J. Exp. Med. 2015, 212, 401–413. [CrossRef] [PubMed]

24. Tugues, S.; Burkhard, SH; Oh, I.; Vrohlings, M.; Nussbaum, K.; vom Berg, J.; Kulig, P.; Becher, B. Novi uvidi u supresiju tumora posredovanu IL-12-. Cell Death Differ. 2015, 22, 237–246. [CrossRef]

25. Ashour, D.; Arampatzi, P.; Pavlović, V.; Förstner, KU; Kaisho, T.; Beilhack, A.; Erhard, F.; Lutz, MB IL-12 iz endogenog cDC1, a ne vakcine DC, potreban je za indukciju Th1. JCI Insight. 2020, 5, e135143. [CrossRef]

26. Jorgovanović, D.; Song, M.; Wang, L.; Zhang, Y. Uloge IFN-a u progresiji i regresiji tumora: Pregled. Biomark. Res. 2020, 8, 49. [CrossRef]

27. Sin, K.-j.; Choi, KR; Lee, SJ; Lee, H. Imunogena ćelijska smrt izazvana ginsenozidom Rg3: Značaj u antitumorskoj imunoterapiji zasnovanoj na dendritskim ćelijama. Immune Netw. 2016, 16, 75–84. [CrossRef]

28. Jongbloed, SL; Kassianos, AJ; McDonald, KJ; Clark, GJ; Ju, X.; Angel, CE; Chen, C.-JJ; Dunbar, PR; Wadley, RB; Jeet, V.; et al. Ljudske CD141+ (BDCA-3)+ dendritične ćelije (DC) predstavljaju jedinstvenu mijeloidnu podskupinu DC koja unakrsno predstavlja antigene nekrotičnih ćelija. J. Exp. Med. 2010, 207, 1247–1260. [CrossRef]

29. Noguchi, A.; Kaneko, T.; Kamigaki, T.; Fujimoto, K.; Ozawa, M.; Saito, M.; Ariyoshi, N.; Goto, S. Imunoterapija zasnovana na V 9 δ T ćelijama aktivirana zoledronatom je izvodljiva i obnavlja oštećenje δ T ćelija kod pacijenata sa solidnim tumorima. Citoterapija 2011, 13, 92–97. [CrossRef]

30. Hewitt, RE; Lissina, A.; Green, AE; Slay, ES; Price, DA; Sewell, AK Bisfosfonatni odgovor akutne faze: Brza i obilna proizvodnja proinflamatornih citokina od strane gd T ćelija periferne krvi kao odgovor na amino bisfosfonate inhibiraju statini. Clin. Exp. Immunol. 2005, 139, 101–111. [CrossRef]

31. jun, CH; O'Connor, RS; Kawalekar, OU; Ghassemi, S.; Milone, MC CAR T ćelijska imunoterapija za ljudski rak. Nauka 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; Sterner, RM CAR-T ćelijska terapija: Trenutna ograničenja i potencijalne strategije. Blood Cancer J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. Xie, G.; Dong, H.; Liang, Y.; Ham, JD; Rizwan, R.; Chen, J. CAR-NK ćelije: obećavajuća ćelijska imunoterapija za rak. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34. Zhang, L.; Meng, Y.; Feng, X.; Han, Z. CAR-NK ćelije za imunoterapiju raka: Od klupe do kreveta. Biomark. Res. 2022, 10, 12. [CrossRef] [PubMed]

35. Marofi, F.; Motavalli, R.; Safonov, VA; Thangavelu, L.; Yumashev, AV; Aleksandar, M.; Shomali, N.; Chartrand, MS; Pathak, Y.; Jarahian, M.; et al. CAR T ćelije u solidnim tumorima: Izazovi i mogućnosti. Stem Cell Res. Ther. 2021, 12, 81. [CrossRef]

36. Santomasso, B.; Bachier, C.; Westin, J.; Rezvani, K.; Shpall, EJ Druga strana terapije CAR T-ćelijama: sindrom oslobađanja citokina, neurološka toksičnost i finansijski teret. Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Knjiga 2019, 39, 433–444. [CrossRef]

37. Liu, S.; Galat, V.; Galat, Y.; Lee, YKA; Wainwright, D.; Wu, J. NK ćelijska imunoterapija raka: od osnovne biologije do kliničkog razvoja. J. Hematol. Oncol. 2021, 14, 7. [CrossRef]

38. Streltsova, M.; Ustiuzhanina, M.; Barsov, E.; Kust, S.; Velichinskii, R.; Kovalenko, E. Telomeraza reverzna transkriptaza povećava proliferaciju i životni vijek ljudskih NK ćelija bez imortalizacije. Biomedicines 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Garris, CS; Arlauckas, SP; Kohler, RH; Trefny, MP; Garren, S.; Piot, C.; Engblom, C.; Pfirschke, C.; Siwicki, M.; Gungabeesoon, J.; et al. Uspješna imunoterapija raka protiv PD-1 zahtijeva preslušavanje T ćelija i dendritičnih ćelija koje uključuje citokine IFN- i IL-12. Imunitet 2018, 49, 1148–1161.e7. [CrossRef]

40. Thongchot, S.; Jirapongwattana, N.; Luangwattananun, P.; Chiraphapphaiboon, W.; Chuangchot, N.; Sa-Nguanraksa, D.; O Charoenrat, P.; Thuwajit, P.; Yenchitsomanus, P.-T.; Thuwajit, C. Adoptivni transfer anti-nukleolinskih T ćelija u kombinaciji sa PD-L1 inhibicijom protiv trostruko negativnog raka dojke. Mol. Cancer Ther. 2022, 21, 727–739. [CrossRef]