5.2. Analiza esencijalnog ulja

Izolacija eteričnih ulja hidrodestilacijom vršena je u aparatu Clevengerovog tipa u trajanju od 3 h [64].

Glikozid cistanche takođe može povećati aktivnost SOD u tkivima srca i jetre, te značajno smanjiti sadržaj lipofuscina i MDA u svakom tkivu, efikasno hvatajući različite reaktivne radikale kisika (OH-, H₂O₂, itd.) i štiteći od oštećenja DNK uzrokovanih od strane OH-radikala. Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju jaku sposobnost uklanjanja slobodnih radikala, veću redukcijsku sposobnost od vitamina C, poboljšavaju aktivnost SOD u suspenziji sperme, smanjuju sadržaj MDA i imaju određeni zaštitni učinak na funkciju spermatozoida. Cistanche polisaharidi mogu pojačati aktivnost SOD i GSH-Px u eritrocitima i plućnim tkivima eksperimentalno starenja miševa uzrokovanih D-galaktozom, kao i smanjiti sadržaj MDA i kolagena u plućima i plazmi, te povećati sadržaj elastina. dobar učinak čišćenja na DPPH, produžava vrijeme hipoksije kod starijih miševa, poboljšava aktivnost SOD u serumu i odlaže fiziološku degeneraciju pluća kod eksperimentalno starenja miševa. i ima potencijal da bude lijek za prevenciju i liječenje bolesti starenja kože. U isto vrijeme, ehinakozid u Cistancheu ima značajnu sposobnost uklanjanja slobodnih radikala DPPH i može ukloniti reaktivne vrste kisika, spriječiti degradaciju kolagena izazvanu slobodnim radikalima, a također ima dobar učinak popravljanja oštećenja anjona slobodnih radikala timina.

Kliknite na dodatak Cistanche Tubulosa

【Za više informacija: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Analize ulja vršene su i gasnom hromatografijom (GC) i gasnom hromatografijom/masenom spektrometrijom (GC/MS). GC analize su obavljene pomoću plinskog hromatografa (Agilent 7890A, Palo Alto, CA, USA), opremljenog sa 30 m × 0.25 mm id sa 0,25 µm stacionarnim debljina filma HP-5 kapilarna kolona (Agilent J&W, Santa Clara, CA, USA). Korišćen je sledeći temperaturni program: od 60 ◦C do 246 ◦C brzinom od 3 ◦C min−1 i zatim držan na 246 ◦C 20 min (ukupno vreme analize 82 min). Ostali radni uslovi su bili sledeći: gas nosač helijum (čistoća veća ili jednaka 99,9999 procenata — Air Liquide, Milano, Italija); protok, 1,0 mL.min−1; temperatura injektora, 250 ◦C; temperatura detektora, 300 ◦C. Injekcija 1 µL razrijeđenog uzorka (1:100 u n-heksanu, w/w) izvedena je sa omjerom podjele 1:20, koristeći autosampler (Agilent, Model 7683B, Santa Clara, Kalifornija, SAD).

GC-MS analize su obavljene pomoću plinskog hromatografa (Agilent 6890N, Santa Clara, Kalifornija, SAD) opremljenog sa 30 m × 0,25 mm id sa 0,25 µm stacionarnog filma debljine HP{ {7}}ms kapilarna kolona (Agilent J&W, Santa Clara, CA, SAD) u kombinaciji sa masovno selektivnim detektorom koji ima uređaj za jonizaciju elektrona, EI, i kvadrupolni analizator (Agilent 5973, Santa Clara, CA, SAD). Temperaturni program i hromatografski radni uslovi (osim detektora) bili su isti korišćeni za GC-FID. Uslovi MS bili su sljedeći: temperatura MS prijenosne linije 240 ◦C; Temperatura izvora jona EI, 200 ◦C sa energijom jonizacije od 70 eV; temperatura kvadrupola 150 ◦C; brzina skeniranja, 3,2 skeniranja.s−1 u opsegu skeniranja m/z, (30 do 480). Za rukovanje i obradu hromatograma i masenih spektra korišćen je softver MSD ChemStation (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, Kalifornija, SAD). Jedinjenja su identifikovana poređenjem njihovih masenih spektra sa onima iz NIST02 bibliotečkih podataka GC/MS sistema i Adams biblioteka [32,33]. Rezultati su dalje potvrđeni poređenjem s redoslijedom eluiranja spoja sa njihovim indeksima zadržavanja na polupolarnim fazama koji su navedeni u literaturi [32]. Indeksi zadržavanja komponenti određivani su u odnosu na vremena zadržavanja serije n-alkana (dvije standardne mješavine C8–C20 i C21–C40) linearnom interpolacijom [65]. Procenat pojedinačnih komponenti izračunat je na osnovu površina GC pikova bez korekcije faktora odziva FID-a. Rezultati su prikazani kao procenat pojedinačnih pikova ± standardna devijacija dva nezavisna hromatografska ciklusa.

5.3. Antifungalna aktivnost

Procijenjena je antifungalna aktivnost eteričnog ulja S. cacaliifolia protiv filamentoznih gljivica i kvasaca. Tri klinička soja dermatofita izolirana iz noktiju i kože (Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 i Microsporum canis FF1) i četiri soja tipa dermatofita iz Colección Espanõla de Cultivos Tipo (T. mentagrophytes rub. 2794, T. verrucosum CECT 2992 i M. gypseum CECT 2908), jedan soj tipa Cryptococcus neoformans (C. neoformans YPO186), dva klinička soja Candida izolovana iz rekurentnih slučajeva vulvovaginalnog (C. krusei gumaimond) i LF2333. tri soja tipa Candida (C. albicans ATCC 10231, C. tropicalis YPO128 i C. paraphimosis ATCC 90018). Svi sojevi su pohranjeni u Sabouraud dekstroznom bujonu sa 20 posto glicerola na -80 ◦C i subkultivirani u Sabouraud dekstroznom agaru (SDA) ili krompir dekstroznom agaru (PDA) prije svakog testa, kako bi se osigurali optimalni uslovi rasta i čistoća.

Za određivanje minimalne inhibitorne koncentracije (MIC) i minimalne smrtonosne koncentracije (MLC) ulja korištena je metoda mikrodilucionog bujona prema referentnom protokolu M38-A2 [66] Instituta za kliničke i laboratorijske standarde (CLSI) ili M27-A3 [67] za filamentozne gljive i kvasce, respektivno. MIC je bila najniža koncentracija u kojoj nije uočen rast u inokuliranim epruvetama, dok je MLC bila najniža koncentracija u kojoj nije uočen rast nakon inokulacije u SDA od svih negativnih epruveta. Negativna (neinokulirana podloga) i pozitivna (inokulirana podloga sa 1 posto DMSO) kontrola su također uključene.

5.4. Anti-inflamatorna aktivnost

RAW 264.7, ćelijska linija mišjih leukemičnih makrofaga dobijena iz Američke kolekcije tipskih kultura (ATCC TIB-71), uzgajana je kao što je prethodno izvijestila naša grupa [22].

Proizvodnja NO je mjerena kvantificiranjem akumulacije nitrita u supernatantima kulture, korištenjem Griessovog reagensa [68]. Ćelije (0.6 × 106 ćelija/jažici) su uzgajane u 48-pločama za kulturu jažica. Nakon stabilizacije preko noći, makrofagi su prethodno tretirani 1 h eteričnim uljem (0.08–1,25 µL/mL) razrijeđenim u DMSO i zatim aktivirani sa 50 ng/mL LPS-a za 24 č. Urađene su pozitivne (LPS-stimulirani makrofagi) i negativne kontrole (netretirani makrofagi). Nakon ovog perioda inkubacije, jednake količine supernatanta kulture i Griessovog reagensa [1:1 od 0,1 posto (w/v) N-(1-naftil) etilendiamin dihidroklorida i 1 posto (w/v) sulfanilamida koji sadrži 5 posto ( w/v) H3PO4] su pomiješani i inkubirani 30 min, u mraku. Apsorbancija na 550 nm registrovana je u automatizovanom čitaču ploča (Agilent, Santa Clara, Kalifornija, SAD) i koncentracija nitrita je određena iz standardne krive natrijum nitrita. Naša grupa je već pokazala da DMSO u maksimalno upotrijebljenoj koncentraciji (0,4 posto) nema protuupalno i citotoksično djelovanje (podaci nisu prikazani).

RAW 264.7 (1.2 × 106 ćelija/jažici) je kultivisan u 6-pločama i ostavljen da se stabilizuje 12 h. Zatim su ćelije inkubirane sa esencijalnim uljem (0,64 µL/mL) tokom 1 h, nakon čega je usledila LPS (50 ng/mL) aktivacija tokom 24 h. Razmatrane su negativna kontrola (netretirane ćelije) i pozitivna kontrola (ćelije tretirane samo LPS-om). Ćelijski lizati su pripremljeni kako su prethodno opisali Zuzarte et al. [22].

Western blot analiza je izvršena za mjerenje nivoa proteina inducibilne sintaze azot oksida (iNOS) i ciklooksigenaze{{0}} (COX-2). Proteini su odvojeni elektroforezom na SDS-poliakrilamidu 10 posto (v/v), na 130 V tokom 1,5 h, i prebačeni na poliviniliden fluoridne membrane (prethodno aktivirane metanolom) na 400 mA tokom 3 h. Nakon blokiranja nespecifičnih IgG sa 5 posto (w/v) mlijeka u TBS-T u trajanju od 1 h na sobnoj temperaturi, membrane su inkubirane sa specifičnim antitijelima protiv iNOS (1:500; R & D Systems) ili COX{{15} } (1:5000; Abcam, Cambridge, UK) preko noći, na 4 ◦C. Zatim su membrane isprane 30 min sa TBS-T (10 min, 3 puta) i inkubirane na sobnoj temperaturi, 1 h, sa sekundarnim antitelima (1:40,000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX , SAD) konjugiran s peroksidazom hrena. Imunokompleksi su detektovani pomoću hemiluminiscentnog skenera (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, SAD). Membrane su ispitane anti-tubulinskim antitelom (1:20,000; Sigma) kako bi se garantovalo da je napunjena ekvivalentna količina proteina. Kvantifikacija proteina je izvršena korišćenjem ImageLab verzije 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, Kalifornija, SAD).

5.5. Cell Migracija

NIH 3T3, ćelijska linija mišjih embrionalnih fibroblasta (ATCC CRL-1658), kultivirana je kako je prethodno opisano u našoj grupi [69].

5.5.2. Test migracije ćelija

Migracija ćelija je izvršena korištenjem testa ogrebotine, kako su izvijestili Martinotti i kolege [70] sa malim modifikacijama. Ukratko, NIH 3T3 fibroblasti su zasijani u količini od 2,5 × 105 ćelija/mL u 12-pločama. Nakon 24 h rasta, grebanje je izvršeno u monosloju ćelije pomoću vrha pipete od 20-200 µL. Odvojene ćelije su uklonjene ispiranjem ćelija sa sterilnim PBS 1x. DMEM sa 2 posto seruma je dodat na sve ploče, u prisustvu ili odsustvu eteričnog ulja. Koristeći fazno-kontraktni mikroskop, slike su dobijene 0, 12 i 18 h nakon ogrebotine, a površina rane je izmjerena pomoću softvera ImageJ/Fiji. Prikazani rezultati dobiveni su korištenjem sljedeće jednačine

5.6. Cell Viability

Učinak različitih koncentracija eteričnog ulja na vitalnost makrofaga i fibroblasta proveden je pomoću testa redukcije resazurina. Ukratko, makrofagi ({{0}},6 × 106 ćelija/mL), ili fibroblasti (1,25 × 105 ćelija/mL) su zasijani u 48-ploče sa jažicima. Nakon stabilizacije preko noći, dodane su različite koncentracije eteričnog ulja (0,08-1,25 µL/mL) razrijeđenog u DMSO tokom 24 h. Na kraju eksperimenta, medij je uklonjen i dodan je svježi medij koji sadrži resazurin (1:10) 1 h odnosno 4 h, za makrofage i fibroblaste. Apsorbanca na 570 nm sa referentnim filterom od 620 nm registrovana je u automatizovanom čitaču ploča (Agilent, Santa Clara, Kalifornija, SAD). Vijabilnost ćelije određena je pomoću sljedeće jednačine:

gdje je AbsExp apsorpcija (razlika između 570 i 620 nm) u različitim eksperimentalnim uvjetima, a AbsCT je apsorpcija u kontrolnim ćelijama (bez eteričnog ulja).

5.7. Etopozid-indukovano starenje 

Starenje je procijenjeno korištenjem komercijalno dostupnog kompleta za bojenje beta-galaktozidazom prema protokolu proizvođača (Cell Signaling Technology). Ukratko, 2,5 × 104 fibroblasta zasijano je u 12-ploče sa jažicom i ostavljeno da se prianjaju preko noći. Zatim, starenje je izazvano inkubacijom ćelija sa 12,5 µM etopozida tokom 24 h. Etopozid je uklonjen, a ćelije su isprane sa PBS 1x. Zatim su ćelije ostavljene da se oporave 72 h u DMEM-u u odsustvu ili prisustvu eteričnog ulja S. cacaliifolia, a promjene u morfologiji su procjenjivane svakodnevno. Nakon 72 h, ćelije su fiksirane na 15 minuta korištenjem 1x otopine za fiksiranje (isporučeno u komercijalnom kompletu), nakon čega slijedi ispiranje PBS-a i inkubirane preko noći s otopinom za bojenje beta-galaktozidaze u suhom inkubatoru na 37 ◦C bez dovoda CO2. Različita polja su posmatrana pod mikroskopom za razvoj plave boje i fotografisana za analizu slike (8 slika po stanju). Izrazito obojenje plavom bojom ukazuje na aktivnost beta-galaktozidaze. Kvantitativna analiza je izvršena korišćenjem ImageJ i izračunat je procenat starih ćelija prema ukupnim ćelijama.

5.8. Statistička analiza

Rezultati su predstavljeni kao srednje vrijednosti ± SEM (standardna greška srednje vrijednosti) iz najmanje tri nezavisna eksperimenta izvedena u duplikatu. Statistički značaj za antiinflamatorne testove, testove vitalnosti ćelija i starenja određen je korištenjem jednosmjerne analize varijanse (ANOVA) nakon čega je uslijedio Dunnettov post-hoc test korištenjem GraphPad Prism verzije 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, SAD). Za testove migracije ćelija, statistička značajnost je određena dvosmernom ANOVA-om praćenom Sydakovim testom višestrukog poređenja. Smatra se da p-vrijednost < 0.05 predstavlja značajne razlike.

Doprinosi autora:Konceptualizacija, LS i AM; validacija, AS, MJG, MTC i SP; formalna analiza, JMA-S., MJG, AP i DF; istraga, JMA-S., AM i AP; resursi, AM, EC, MTC i LS; kuriranje podataka, AP; pisanje – priprema originalnog nacrta, JMA-S., AP i AM; pisanje—pregled i uređivanje, MTC, LS i AM; vizualizacija, JMA-S.; nadzor, LS i AM; administracija projekta, LS; pribavljanje sredstava, LS i MTC Svi autori su pročitali i složili se sa objavljenom verzijom rukopisa.

finansiranje:Ovaj rad je finansiran od strane COMPETE 2020—Operativnog programa za konkurentnost i internacionalizaciju i portugalskih nacionalnih fondova preko FCT—Fundação para a Ciência ea Tecnologia, u okviru projekata UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020/20020058.

Izjava o dostupnosti podataka:Podaci će biti dostupni na zahtjev.

Sukobi interesa:Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Reference

1. Bongomin, F.; Gago, S.; Oladele, R.; Denning, D. Globalna i multi-nacionalna prevalencija gljivičnih bolesti – preciznost procjene. J. Fungi 2017, 3, 57. [CrossRef] [PubMed]

2. Campoy, S.; Adrio, JL Antifungals. Biochem. Pharm. 2017, 133, 86–96. [CrossRef] [PubMed]

3. Gupta, AK; Cooper, EA Update in Antifungal Therapy of Dermatophytosis. Mycopatologia 2008, 166, 353–367. [CrossRef]

4. Matiz, C.; Friedlander, SF Infekcije potkožnog tkiva i apscesi. U principima i praksi pedijatrijskih infektivnih bolesti; Elsevier: Amsterdam, Holandija, 2012; str. 454–462.e3.

5. de Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, NY; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; de Sousa, MdGT; Benard, G.; Criado, PR Toll-like Receptors (TLR) 2 i 4 Ekspresija keratinocita kod pacijenata s lokaliziranom i diseminiranom dermatofitozom. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 2015, 57, 57–61. [CrossRef] [PubMed]

6. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT Trichophyton Rubrum izaziva fagocitne i proinflamatorne odgovore u ljudskim monocitima putem receptora sličnog naplati 2. Front. Microbiol. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

7. Sun, S.-C. Nekanonski NF-B put u imunitetu i inflamaciji. Nat. Rev. Immunol. 2017, 17, 545–558. [CrossRef] [PubMed]

8. Sharma, A.; Gupta, S. Zaštitna manifestacija herbonanoceutika kao antifungala: mogući kandidat za lijekove za dermatofitnu infekciju. Health Sci. Rep. 2022, 5. [CrossRef]

9. Guo, S.; DiPietro, LA Faktori koji utječu na zacjeljivanje rana. J. Dent. Res. 2010, 89, 219–229. [CrossRef]

10. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Hemijski sastav i antifungalna aktivnost eteričnih ulja lavande Viridis LHér. J. Med. Microbiol. 2011, 60, 612–618. [CrossRef]

11. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, MP; Lopes, L.; Rossi, A. Rezistencija dermatofita na antifungalne lijekove: Mehanizmi i prospekt. Front. Microbiol. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

12. Mourad, A.; Savršeno, JR Rat protiv kriptokokoze: Pregled antifungalnog arsenala. Mem. Inst. Oswaldo. Cruz. 2018, 113, e170391. [CrossRef] [PubMed]

13. McCarthy, MW; Kontoyiannis, DP; Cornely, OA; Savršeno, JR; Walsh, TJ Novel Agents, and Drug Targets to React Challenges Resistent Fungi. J. Infect. Dis. 2017, 216, S474–S483. [CrossRef] [PubMed]

14. Vonkeman, HE; van de Laar, MAFJ nesteroidni protuupalni lijekovi: štetni efekti i njihova prevencija. Semin. Artritis. Rheum. 2010, 39, 294–312. [CrossRef] [PubMed]

15. Bakkali, F.; Averbeck, S.; Averbeck, D.; Idaomar, M. Biološki efekti esencijalnih ulja Pregled. Food Chem. Toxicol. 2008, 46, 446–475. [CrossRef] [PubMed]

16. Christaki, E.; Bonos, E.; Giannenas, I.; Florou-Paneri, P. Aromatične biljke kao izvor bioaktivnih jedinjenja. Poljoprivreda 2012, 2, 228–243. [CrossRef]

17. Edris, AE Farmaceutski i terapeutski potencijali esencijalnih ulja i njihovih hlapljivih sastojaka: Pregled. Phytother. Res. 2007, 21, 308–323. [CrossRef] [PubMed]

18. Pinto, E.; Vale-Silva, L.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. Antifungalna aktivnost esencijalnog ulja karanfilića iz Syzygium Aromaticum na vrste Candida, Aspergillus i Dermatophyte. J. Med. Microbiol. 2009, 58, 1454–1462. [CrossRef]

19. Pinto, E.; Hrimpeng, K.; Lopes, G.; Vaz, S.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. Antifungalna aktivnost esencijalnog ulja Ferulago Capillaris protiv vrsta Candide, Cryptococcus, Aspergillus i Dermatophyte. EUR. J. Clin. Microbiol. Zaraziti. Dis. 2013, 32, 1311–1320. [CrossRef]

20. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-de-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Ro-drigues, A.; Martinezde-Oliveira, J. Antifungalna aktivnost esencijalnog ulja Thymus Pulegioides na Can-dida, Aspergillus i Dermatophyte vrsta. J. Med. Microbiol. 2006, 55, 1367–1373. [CrossRef]

21. Valente, J.; Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Antifungalno, antioksidativno i antiinflamatorno djelovanje eteričnog ulja Oenanthe Crocata L.. Food Chem. Toxicol. 2013, 62, 349–354. [CrossRef] [PubMed]

22. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Novi uvidi o anti-inflamatornom potencijalu i sigurnosnom profilu eteričnih ulja Thymus Carnosus i Thymus Camphoratus i njihovih glavnih spojeva. J. Ethnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [CrossRef]

23. Walker, JB; Sytsma, KJ; Treutlein, J.; Wink, M. Salvia (Lamiaceae) nije monofiletska: implikacije na sistematiku, radijaciju i ekološke specijalizacije Salvia i Tribe Mentheae. Am. J. Bot. 2004, 91, 1115–1125. [CrossRef] [PubMed]

24. Su, C.-Y.; Ming, Q.-L.; Rahman, K.; Han, T.; Qin, L.-P. Salvia Miltiorrhiza: tradicionalna medicinska upotreba, hemija i farmakologija. Brada. J. Nat. Med. 2015, 13, 163–182. [CrossRef] [PubMed]

25. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Pharmacological Properties of Salvia Officinalis and Its Components. J. Tradit. Dopuna. Med. 2017, 7, 433–440. [CrossRef]

27. Afonso, AF; Alves-Silva, JM; Pereira, OR; Cardoso, SM Povoljni efekti biljaka salvije: korelacija s bioaktivnim komponentama. In Recent Progress in Medical Plants Volume 44: Phytotherapeutics III; Govil, JN, Pathak, M., ur.; Studium Press: New Delhi, Indija, 2016; str. 161–198.

27. Salimikia, I.; Aryanpour, M.; Abdollahi, M.; Abdolghaffari, A.; Samadi, N.; Monsef-Esfahani, H. Phytochem-ical and Wound Healing Effects of Methanolic Extract of Salvia Multicaulis Vahl. Rat. Planta Med. 2016, 81, S1–S381. [CrossRef]

28. Gali-Muhtasib, H.; Hilan, C.; Khater, C. Tradicionalna upotreba Salvia Libanotica (istočnomediteranska kadulja) i efekti njenih eteričnih ulja. J. Ethnopharmacol. 2000, 71, 513–520. [CrossRef] [PubMed]

29. Hamidpour, M.; Hamidpour, R.; Hamidpour, S.; Shahlari, M. Hemija, farmakologija i ljekovito svojstvo žalfije (salvije) za prevenciju i liječenje bolesti kao što su gojaznost, dijabetes, depresija, demencija, lupus, autizam, srčane bolesti i rak. J. Tradit. Dopuna. Med. 2014, 4, 82–88. [CrossRef]

30. Askari, SF; Avan, R.; Tayarani-Najaran, Z.; Sahebkar, A.; Eghbali, S. Iranian Salvia Species: A Phytochemical and Pharmacological Update. Phytochemistry 2021, 183, 112619. [CrossRef]

31. Davidse, G.; Sousa Sánchez, M.; Knapp, SD; Chian Cabrera, F. Rubiaceae i Verbenaceae. 4(2): I–Xvi, 1–533. In Flora Mesoamericana; Davidse, G., Sousa Sánchez, M., Knapp, SD, Chian Cabrera, F., ur.; Botanička bašta Misurija: St. Louis, MO, SAD, 2012; str. 402–403.

32. Adams, RP Identifikacija komponenti esencijalnog ulja pomoću gasne hromatografije/kvadrupolne masene spektroskopije, 4. izdanje; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, SAD, 2007.

33. NIST/EPA/NIH Mass Spectral Library 2005.

34. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolisaharid aktivira signalni put NF-KB posredovanog receptora 4 (TLR4) i proinflamatorni odgovor u ljudskim pericitima. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [CrossRef]

35. Scrima, M.; Melito, C.; Merola, F.; Iorio, A.; Vito, N.; Giori, AM; Ferravante, A. Evaluacija aktivnosti zacjeljivanja rana Salvia Haenkei hidroalkoholnog zračnog ekstrakta na in vitro i in vivo eksperimentalnim modelima. Clin. Cosmet. Investig. Derm. 2020, 13, 627–637. [CrossRef] [PubMed]

36. Farahpour, MR; Pirkhezr, E.; Ashrafian, A.; Sonboli, A. Ubrzano zacjeljivanje topikalnim davanjem esencijalnog ulja Salvia Officinalis na modelu inficirane rane Pseudomonas Aeruginosa i Staphylococcus Aureus. Biomed. Pharmacother. 2020, 128, 110120. [CrossRef]

37. Matić, I.; Revandkar, A.; Chen, J.; Bisio, A.; Dall'Acqua, S.; Cocetta, V.; Brun, P.; Mancino, G.; Milanese, M.; Mattei, M.; et al. Identifikacija Salvije Haenkei kao Gerosupresiva korištenjem integriranog testa Senes-science-Screening. Starenje 2016, 8, 3223–3240. [CrossRef]

38. Park, CH; Shin, SH; Lee, EK; Kim, DH; Kim, M.-J.; Roh, S.-S.; Yokozawa, T.; Chung, HY magnezijum litospermat B iz Salvia Miltiorrhiza BUNGE ublažava upalu bubrega uzrokovanu starenjem i starenje putem stvaranja reaktivnog kisika posredovanog NADPH oksidazom. Phytother. Res. 2017, 31, 721–728. [CrossRef]

40. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancianti, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. Volatiles i antifungalno-antibakterijsko-antivirusno djelovanje južnoafričke Salvia Spp. Eterična ulja uzgajana u uniformnim uvjetima. Molecules 2021, 26, 2826. [CrossRef] [PubMed]

40. Abu-Darwish, MS; Cabral, C.; Ali, Z.; Wang, M.; Khan, SI; Jacob, MR; Jain, SK; Tekwani, BL; Zulfikar, F.; Khan, IA; et al. Salvia Ceratophylla L. iz južnog Jordana: Novi uvidi o hemijskom sastavu i biološkim aktivnostima. Nat. Prod. Bioprospect. 2020, 10, 307–316. [CrossRef] [PubMed]

41. Taarit, MB; Msaada, K.; Hosni, K.; Chahed, T.; Marzouk, B. Sastav esencijalnog ulja Salvia Verbenaca koja raste u divljini u Tunisu. J. Food Biochem. 2010, 34, 142–151. [CrossRef]

43. Viljoen, AM; Gono-Bwalya, A.; Kamatou, GPP; Ba¸ser, KHC; Demirci, B. Sastav esencijalnog ulja i hemotaksonomija Salvia Stenophylla i njenih saveznika S. Repens i S. Runcinata. J. Essent. Oil Res. 2006, 18, 37–45. [CrossRef]

43. Pinto, E.; Salgueiro, LR; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Gonçalves, MJ In vitro osjetljivost nekih vrsta kvasaca i filamentoznih gljiva na esencijalna ulja Salvia Officinalis. Ind. Crop. Prod. 2007, 26, 135–141. [CrossRef]

44. Tosun, A.; Khan, S.; Kim, Y.; Calín-Sánchez, A.; Hysenaj, X.; Carbonell-Barracina, A. Sastav esencijalnog ulja i protuupalno djelovanje Salvia Officinalis L (Lamiaceae) u Murin Macrophages. Trop. J. Pharm. Res. 2014, 13, 937. [CrossRef]

45. Abu-Darwish, MS; Cabral, C.; Ferreira, IV; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Al-bdour, TH; Sal-gueiro, L. Eterično ulje žalfije (Salvia Officinalis L.) iz Jordana: Procjena sigurnosti u stanicama sisara i njegovog antifungalnog i protuupalnog potencijala. Biomed. Res. Int. 2013, 2013, 1–9. [CrossRef]

47. Leporini, M.; Bonesi, M.; Loizzo, MR; Passalacqua, NG; Tundis, R. Eterično ulje Salvije Rosmarinus Spenn. iz Italije kao izvor jedinjenja za promicanje zdravlja: hemijski profil i aktivnost inhibicije antioksidansa i holinesteraze. Biljke 2020, 9, 798. [CrossRef]

47. Choi, JK; Oh, H.-M.; Lee, S.; Kwon, TK; Shin, T.-Y.; Rho, M.-C.; Kim, S.-H. Salvia Plebeia suzbija lezije kože slične atopijskom dermatitisu. Am. J. Chin. Med. 2014, 42, 967–985. [CrossRef]

48. Fahed, L.; Stien, D.; Ouaini, N.; Eparvier, V.; el Beyrouthy, M. Hemijska raznolikost i antimikrobna aktivnost eteričnih ulja Salvia multicaulis Vahl. Chem. Biodivers. 2016, 13, 591–595. [CrossRef]

49. Juliano, C.; Marchetti, M.; Campagna, P.; Usai, M. Antimikrobna aktivnost i hemijski sastav esencijalnog ulja iz Helichrysum Microphyllum Cambess. Subsp. Tyrrhenicum Bacch., Brullo & Giusso Sakupljeni u jugozapadnoj Sardiniji. Saudijska. J. Biol. Sci. 2019, 26, 897–905. [CrossRef] [PubMed]

50. He, X.; Zhang, L.; Chen, J.; Sui, J.; Yi, G.; Wu, J.; Ma, Y. Korelacija između hemijskog sastava i antigljivične aktivnosti Clausena Lansium eteričnog ulja protiv Candida spp. Molecules 2019, 24, 1394. [CrossRef]

51. Ruiz-Vásquez, L.; Ruiz Mesia, L.; Caballero Ceferino, HD; Ruiz Mesia, W.; Andres, MF; Díaz, CE; Gonza-lez-Coloma, A. Antifungalni i herbicidni potencijal eteričnih ulja Pipera iz peruanske Amazonije. Biljke 2022, 11, 1793. [CrossRef] [PubMed]

52. Fontenelle, ROS; Morais, SM; Brito, EHS; Brilhante, RSN; Cordeiro, RA; Nascimento, NRF; Kerntopf, MR; Sidrim, JJC; Rocha, MFG Antifungalna aktivnost eteričnih ulja krotonskih vrsta iz brazilskog bioma Caatinga. J. Appl. Microbiol. 2008, 104, 1383–1390. [CrossRef] [PubMed]

53. Mathela, C.; Joshi, S. Antioksidativno i antibakterijsko djelovanje esencijalnog ulja lista i njegovih sastojaka Furanodienona i Kurzerenona iz Lindera Pulcherrima (Nees.) Benth. Ex Hook. f. Farmakognozija. Res. 2012, 4, 80. [CrossRef]

54. Serra, E.; Hidalgo-Bastida, L.; Verran, J.; Williams, D.; Malić, S. Antifungalna aktivnost komercijalnih eteričnih ulja i biocida protiv Candida Albicans. Patogeni 2018, 7, 15. [CrossRef]

55. Burstein, VL; Beccacece, I.; Guasconi, L.; Mena, CJ; Cervi, L.; Chiapello, LS Imunitet kože na dermatofite: od eksperimentalnih modela infekcije do ljudskih bolesti. Front. Immunol. 2020, 11, 605644. [CrossRef]

56. Genˇci´c, MS; Aksić, JM; Živković Stošić, MZ; Ranđelović, PJ; Stojanović, NM; Stojanović-Radić, ZZ; Radulović, NS Povezivanje antimikrobnog i antiinflamatornog djelovanja eteričnog ulja smilja s njegovim kemijskim sastavom – međudjelovanje glavnih i sporednih sastojaka. Food Chem. Toxicol. 2021, 158, 112666. [CrossRef] [PubMed]

57. A´ćimović, M.; Ljujić, J.; Vulić, J.; Željazkov, VD; Pezo, L.; Varga, A.; Tumbas Šaponjac, V. Helichrysum Ital-icum (Roth) G. Donsko eterično ulje iz Srbije: hemijski sastav, klasifikacija i biološka aktivnost – može li biti pogodna nova kultura za Srbiju? Agronomija 2021, 11, 1282. [CrossRef]

58. Amorim, JL; Simas, DLR; Pinheiro, MMG; Moreno, DSA; Alviano, CS; da Silva, AJR; Dias Fernandes, P. Anti-inflamatorna svojstva i hemijska karakterizacija esencijalnih ulja četiri vrste citrusa. PLOS ONE 2016, 11, e0153643. [CrossRef]

59. Ascari, J.; de Oliveira, MS; Nunes, DS; Granato, D.; Scharf, DR; Simionatto, E.; Otuki, M.; Soley, B.; Heiden, G. Hemijski sastav, antioksidativna i antiinflamatorna aktivnost esencijalnih ulja iz muških i ženskih uzoraka Baccharis punctulata (Asteraceae). J. Ethnopharmacol. 2019, 234, 1–7. [CrossRef]

60. Singh, P.; Singh, S.; Kapoor, IPS; Singh, G.; Isidorov, V.; Szczepaniak, L. Hemijski sastav i antioksidativna aktivnost eteričnog ulja i oleorezina iz Curcuma Zedoaria rizoma, dio-74. Food Biosci. 2013, 3, 42–48. [CrossRef]

62. Jena, S.; Ray, A.; Banerjee, A.; Sahoo, A.; Nasim, N.; Sahoo, S.; Kar, B.; Patnaik, J.; Panda, PC; Nayak, S. Hemijski sastav i antioksidativna aktivnost esencijalnog ulja iz listova i rizoma Curcuma Angustifolia Roxb. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 2188–2191. [CrossRef]

63. Andji´c, M.; Božin, B.; Draginić, N.; Koˇcovi´c, A.; Jeremić, JN; Tomović, M.; Milojević Šamanović, A.; Kladar, N.; ˇCapo, I.; Jakovljević, V.; et al. Formulacija i procjena topikalnih formulacija na bazi esencijalnog ulja Helichrysum Italicum za zacjeljivanje rana kod dijabetičkih štakora. Pharmaceuticals 2021, 14, 813. [CrossRef]

63. Ahlina, FN; Nugraheni, N.; Salsabila, IA; Haryanti, S.; Da'i, M.; Meiyanto, E. Otkrivanje povratnog efekta ekstrakta galangala (Alpinia Galanga L.) protiv oksidativnog stresa u metastatskim ćelijama raka dojke i normalnim ćelijama fibroblasta namijenjenih kao ko-hemoterapeutski agens i sredstvo protiv starenja. Asian Pac. J. Cancer Prev. 2020, 21, 107–117. [CrossRef]

64. Vijeće Evrope. Evropska farmakopeja, 7. izdanje; Direktorat za kvalitet lijekova i zdravstvenu zaštitu Vijeća Evrope: Strazbur, Francuska, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

65. van den Dool, H.; Kratz, PD Generalizacija sistema indeksa zadržavanja uključujući linearnu temperaturno programiranu particionu hromatografiju gas-tečnost. J. Chromatogr. 1963, 11, 463–471. [CrossRef]

66. Institut za kliničke i laboratorijske standarde. Referentna metoda za ispitivanje osjetljivosti filamentoznih gljivica na antifungalne razrjeđivanje bujona; Odobreni standard M38-A2, 2. izdanje; Institut za kliničke i laboratorijske standarde: Wayne, PA, SAD, 2008; ISBN 1-56238-668-9.

67. Institut za kliničke i laboratorijske standarde. Referentna metoda za ispitivanje osjetljivosti kvasca na antifungalnu otopinu bujona; Odobreni standard M27-A3, 3. izdanje; Institut za kliničke i laboratorijske standarde: Wayne, PA, SAD, 2008; ISBN 1-56238-666-2.

68. Green, LC; Wagner, DA; Glogowski, J.; Skipper, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Analiza nitrata, nitrita i [15N]nitrata u biološkim tekućinama. Anal. Biochem. 1982, 126, 131–138. [CrossRef]

70. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porceda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Hemijski sastav i biološka aktivnost eteričnog ulja Teucrium Scordium L. Subsp. Scordioides (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) sa ostrva Sardinija (Italija). Nat. Prod. Res. 2021, 36, 5828–5835. [CrossRef] [PubMed]

70. Martinotti, S.; Ranzato, E. Test zarastanja ogrebotina. U ćelijama epiderme: metode u molekularnoj biologiji; Turksen, K., ur.; Humana: Njujork, Njujork, SAD, 2019; Sveska 2109, str. 225–229.

Odricanje od odgovornosti/Napomena izdavača:Izjave, mišljenja i podaci sadržani u svim publikacijama su isključivo oni pojedinačnih autora i saradnika, a ne MDPI i/ili urednika. MDPI i/ili urednik(i) odriču se odgovornosti za bilo kakvu povredu ljudi ili imovine koja je rezultat ideja, metoda, uputstava ili proizvoda navedenih u sadržaju.