Koža je najopsežniji organ tijela i ima višestruke funkcije

Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija

sažetak:Dermalni fibroblasti su glavni akter u lučenju mnogih proteina, uključujući kolagen, čuvajući funkciju kože. Slobodni radikali su uključeni u starenje kože i oštećenja koja uključuju različite stanične komponente. Neravnoteža između količine reaktivnih vrsta kisika (ROS) i prirodnih antioksidativnih enzima negativno utječe na homeostazu kože. Prirodna jedinjenja nedavno su se pojavila kao potencijalno sredstvo protiv starenja u regeneraciji tkiva. U ovom radu je procijenjena antioksidativna aktivnost bijelih i crnih vina, s obzirom na njihovu vjerojatnu upotrebu, kao sirovine, za izradu kozmetičkih proizvoda sa svojstvima protiv starenja. Proučavali smo metodu koja bi omogućila uklanjanje alkoholne frakcije vina i odredili njihov sastav LC-MS analizom. Zatim smo testirali moguće citotoksične efekte crnog i bijelog vina na fibroblaste pomoću 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolija (MTT ) i njihovu antioksidativnu aktivnost testom aktivnosti katalaze u uslovima stresa. Konačno, procijenili smo njihov potencijal protiv starenja putem kolorimetrijskog testa -galaktozidaze. Naši rezultati su pokazali da vinski ekstrakti pokazuju izvanrednu antioksidativnu i anti-aging aktivnost, posebno na ćelijama izloženim izrazitom stresnom događaju. Ova svojstva mogu ukazivati ​​na njihovu moguću primjenu kao kozmetički proizvodi za regeneraciju kože.

Ključne riječi:proliferacija ćelija; antioksidansi; starenje ćelija; bioaktivni molekuli; starenje kože; oksidativni stres

Molimo kliknite ovdje da saznate više

1. Uvod

Koža je najopsežniji organ u tijelu i ima višestruke funkcije, štiteći osnovna tkiva od kemijskih i mehaničkih ozljeda, UV zračenja, slobodnih radikala i infekcija. Ima ulogu u termoregulaciji, ima endokrine i biohemijske funkcije, te je organ primjene i/ili apsorpcije ksenobiotika (lijekova, otrova, kozmetike)[1-3]. U dermisu, vlakna elastina i kolagena osiguravaju pravu elastičnost kože. Starost, hormoni i štetni efekti ultraljubičastog zračenja mogu smanjiti debljinu i elastičnost dermisa, što rezultira borama i gubitkom tonusa kože[4,5]. Već je poznato da starenje kože ugrožava barijernu funkciju kože, što rezultira suhim izgledom i osjetljivošću na agresore iz okoline [6]. Reaktivne vrste kiseonika (ROS), koje nastaju gubitkom elektrona tokom aerobnog metabolizma ili nakon izlaganja faktorima okoline, su nestabilne vrste koje mogu oštetiti različite biomolekule [7,8]. Kako bi se suprotstavili njihovom učinku, prirodna antioksidativna odbrana u tijelu je u stanju da zadrži ROS unutar fiziološki prihvatljivih nivoa. Čini se, zapravo, da ROS, ako je prisutan u kontroliranim količinama, ima i fiziološko djelovanje, funkcionirajući kao signalni molekuli između stanica [9,10].cistanche genghis khanOva neravnoteža između ROS i antioksidativnih enzima, kao što su katalaza, glutation reduktaza i superoksid dismutaza, uzrokuje oštećenje proteina, lipida i DNK [11], negativno ometajući intracelularne signalne puteve keratinocita i fibroblasta i mijenjajući ekspresiju MMP. (matriksne metaloproteinaze), prokolagen i proinflamatorni citokini [12,13]. Fenolna jedinjenja kao što su resveratrol, hidroksitirosol i epigalokatehin-3-galat, prisutni u povrću, voću i derivatima, glavni su odbrambeni molekuli protiv gljivica, bakterija i virusa [14]. Blagotvorni efekti polifenola—— široko prisutnih u vinu—privukli su značajnu pažnju u farmaceutskoj i kozmetičkoj industriji posljednjih godina[15,16]. Konzumacija polifenola može imati zaštitne efekte kod akutnih i kroničnih bolesti, te u regulaciji metabolizma i proliferacije stanica [17]. Razvoj jedinstvene efikasne procedure za ekstrakciju i karakterizaciju fenolnih jedinjenja ima mnoga ograničenja, uglavnom zbog strukturne raznolikosti fenolnih jedinjenja i njihove interakcije sa drugim ćelijskim komponentama[18,19]. Moderne tehnike zelene ekstrakcije i masena spektrometrija visoke rezolucije (LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS) predstavljaju obećavajuće pristupe za upravljanje ovim bioaktivnim molekulima [20]. Stoga smo proučavali jeftinu, fleksibilnu, robusnu i efikasnu metodu koja bi omogućila uklanjanje alkoholne frakcije vina, koja se koristi kao kozmetički proizvodi. Brojni zdravstveni efekti vezani za konzumaciju vina poznati su odavno, a posebno visok sadržaj antioksidativnih polifenolnih jedinjenja čini ga korisnim u liječenju bolesti s visokim oksidativnim stresom[21,22] Lokalna primjena antioksidansa može podržati antioksidativni sistem kože od oksidativnog stresa i može je zaštititi od dugotrajnog fotostarenja [23,24]. U tom kontekstu, u ovom radu smo imali za cilj evaluaciju antioksidativnih učinaka ekstrakata crnog i bijelog vina u stanicama izloženim jakom stresnom događaju, kako bi se spriječilo starenje stanica, sugerirajući njihovo moguće uključivanje u različite lokalne formulacije s anti-agingom. svojstva, za tretman zrele i oštećene kože.

Cistanche može protiv starenja

2. Materijali i metode

Crvena i bijela vina korištena u ovoj studiji bila su Buio, s oznakom kontroliranog porijekla, dobijena od grožđa Carignano del Sulcis, proizvedena u Cantina Mesa, Sardegna, i Giunco, proizvedena od iste Cantina Mesa, dobivena od grožđa Vermentino.

Za in vitro eksperimente korišteni su in-line fibroblasti ljudske kože (HFF1) (ATCC, Manassas, VA, USA) na pasusu 5. Ćelije su uzgajane u prisustvu bazalnog medijuma za rast, sastavljenog od Dulbeccovog modifikovanog Eagleovog medijuma (DMEM) (Life Technologies Grand Island, NY, SAD) sa dodatkom 10 posto fetalnog goveđeg seruma (FBS) (Life Technologies , Grand Island, NY, SAD), 200 mM L-glutamina (Euroclone, Milano, Italija) i 200 U/mL penicilina—0,1 mg/mL streptomicina (Euroclone, Milano, Italija). Ćelije su uzgajane u termostatskim inkubatorima na 37 stepeni i 5 posto (v/v) CO2. 2.1. Priprema vinskih ekstrakata: sušač za raspršivanje

U početnim koracima istraživanja proučavali smo metodu za uklanjanje alkoholne frakcije vina, toksične za ćelije. Za proceduru sušenja korišćena je mini mašina za sušenje raspršivanjem B{{0}} (BUCHIItalia srl, Cornaredo, Italija). U početku, alikvot od 100 mL vina je sušen na ulaznoj i izlaznoj temperaturi (azot), respektivno, od 25, odnosno 70 stepeni; brzina protoka je postavljena na 15 posto . Nakon toga, porciji od 100 mL vina dodano je 0,2 g ksantan gume i minimalna količina vode koja je neophodna za solubilizaciju gume. Ulazna i izlazna temperatura (azota) bile su 135 i 70 stepeni, respektivno; brzina protoka hrane je postavljena na 12 posto.

2.2. Priprema vinskih ekstrakata: Rotavapor

Tačno smo isparili 500g i izmjerili crvena i bela vina Buchi Rotavapor卵R-10 (BUCHI Italia srl, Cornaredo, Italija) u tikvicama od 500mL, temperature 55 stepeni, brzine rotacije tikvice 5 i vakuumskih uslova jednaka 60 mmHg. U početku su 2 uzorka vina donesena potpuno suha. Zatim smo ih podvrgli kontrolisanom isparavanju, sa definisanim vremenom od 20 min, da bi se uklonila alkoholna frakcija.

2.3.HPLC analiza

Analiza tečnom hromatografijom-masenom spektrometrijom (LC-MS) izvršena je prema D'Urso et al. （2020） 【25】 sa malim modifikacijama. Ukratko, 5 μL crnog i bijelog vina prije i nakon rotacijskog isparavanja u konačnoj koncentraciji od 1 mg/mL (u Ho) ubrizgano je u sistem tečne hromatografije koji se sastoji od kvaternarnog Accela 600 pumpa i Accela autosampler, povezan sa linearnim Trap-Orbitrap hibridnim masenim spektrometrom (LTQ-Orbitrap XL, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Njemačka) sa elektrosprej jonizacijom (ESI). Kromatografsko odvajanje je sprovedeno na C18 Moon koloni (100×2,0 mm, veličina čestica 5um; Phenomenex), koristeći 0,1 posto mravlje kiseline (rastvarač A) i 0,1 posto mravlje kiseline (rastvarač B)H2O i CHSCN kao eluentne faze. Sljedeći binarni gradijent primijenjen je pri 200 μL/min∶ 0-35 min,5 do 95 posto (B) i 35-40 min, izokratskih 95 posto (B ESI parametri izvora su sljedeći: Kapilarski napon {{ 25}} V; napon cijevnog sočiva-176.47; temperatura kapilara 280 stepeni; Plašt i protok pomoćnog gasa (N2),15 i 5; Sweep gas 0; Napon spreja 5. MS spektri su dobijeni akvizicijom punog opsega pokrivajući m/z180-1400. Za studije fragmentacije, izveden je eksperiment skeniranja ovisan o podacima, odabirom prekursorskih jona koji odgovaraju najintenzivnijim pikovima u LC-MS analizi. Za kontrolu instrumenta, prikupljanje podataka i analizu podataka korišten je softver Xcalibur verzije 2.1.

2.4. Ispitivanje održivosti MTT

Da bi se procijenio njihov mogući citotoksični efekat, ekstrakti crnog i bijelog vina su testirani na HFFl u različitim koncentracijama (100,200,300,400 i 500mg/mL) od ukupno 24 do 72h, koristeći kolorimetrijski test 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2.5-difeniltetrazolijum (MTT) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, SAD). Vitalne ćelije su uspele da redukuju ovaj spoj, proizvodeći formazan koji se može kvantificirati spektrofotometrom na 570 nm. HFF1 je zasijan u koncentraciji od 5000 ćelija/jažici u 96-ploče sa jažicom. Ćelije korištene kao netretirana kontrola uzgajane su u jedinom osnovnom mediju za uzgoj. Na kraju perioda inkubacije, medij koji je sadržavao ekstrakte je uklonjen, a 10 μL MTTT u konačnoj koncentraciji od 0,65 mg/mL dodano je u svaku jažicu i inkubirano 2 sata.produžetak životnog vijeka cistancheNakon inkubacije, formazan je otopljen u DMSO i apsorbancija je detektirana spektrofotometrijskim očitanjem na 570 nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Velika Britanija). Vijabilnost kultivisanih ćelija u prisustvu različitih ekstrakata izračunata je kao procenat vitalnosti ćelija u poređenju sa netretiranom kontrolom: (OD570 tretirane ćelije)×100/(OD570 kontrola).

(1)

2.5. Antioksidativna aktivnost

Antioksidativna aktivnost vinskih ekstrakata procijenjena je ispitivanjem aktivnosti katalaze, enzima sposobnog da razgradi vodikov peroksid u vodi i kisiku. Korišteni kolorimetrijski test (Catalase Assay Kit) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, SAD) omogućava procjenu aktivnosti ovog enzima u tretiranim ćelijama spektrofotometrijskim očitavanjem. Ćelije su inducirane na starenje 1 h tretmanom sa 100 μM vodikovog peroksida (H2O2) i potom kultivirane u prisustvu ekstrakata u različitim koncentracijama (10, 200 300, 400 i 500 mg/mL) za 24,48 , i 72 h. Ćelije korištene kao pozitivna kontrola oksidativnog stresa uzgajane su u bazalnom mediju za uzgoj nakon izlaganja H2. Ćelije korištene kao kontrola uzgajane su samo u bazalnom mediju za uzgoj, bez prethodnog izlaganja H2O2. Na kraju vremena inkubacije, uzorci, i tretirani i kontrolni, inkubirani su sa reagensima prisutnim u kompletu na sobnoj temperaturi 15 minuta kako bi se procijenio razvoj boje, a apsorbancija svakog od njih je mjerena spektrofotometrijskim očitavanjem na 520 nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Velika Britanija). Aktivnost katalaze je izračunata na osnovu broja mikromola prisutnih u svakom uzorku i upoređena sa aktivnošću netretirane kontrole.

2.6. - Ispitivanje starenja galaktozidaze

Kolorimetrijska analiza -galaktozidaze (Cell Signaling, MA, SAD) korištena je za identifikaciju starenja ćelija u kulturi. HFF1 je uzgajan u 24-pločama, u prisustvu ekstrakta bijelog i crnog vina, u koncentraciji od 500 mg/mL, ukupno 72 sata. Ćelije su prethodno inducirane na starenje 1 h tretmanom sa 100 uM vodikovog peroksida (H-O2). Na kraju vremena inkubacije, medij koji je sadržavao perokside je uklonjen, a svježi medij koji je sadržavao kondicionirane koncentrate je dodan stanicama. Ćelije korištene kao netretirana kontrola uzgajane su samo u prisustvu medija za uzgoj, bez prethodnog izlaganja H2O2. Umjesto toga, ćelije prethodno tretirane peroksidima korištene su kao pozitivna kontrola starenja, uzgajane u normalnom mediju za rast. Nakon 72 h tretmana sa ekstraktima, sve ćelije su fiksirane i inkubirane sa bojom za posmatranje pod svetlosnim mikroskopom. 2.7.Statistička analiza

Statistička analiza je izvršena korištenjem Statistical Package for the Social Sciences version 13 Software (SPSSINc, Chicago, IL, USA).cistanche nzEksperimenti su izvedeni 2 puta sa 3 tehničke replike za svaki tretman. Distribucije svake grupne varijanse procijenjene su Kruskal-Wallisovim zbirom ranga i Wilcoxonovim testom predznaka, uz pretpostavku p-vrijednosti<0.05 as="" statistically="">

3. Rezultati

3.1. Ekstrakcija vina Rotavaporom poboljšava kvalitet ekstrakcije Održavajući fenolne profile vina

Prvi pokušaj dobijanja vinskog ekstrakta izveden je sušačem za raspršivanje, što je bila brza i jednostavna tehnika pogodna za uklanjanje alkoholne frakcije iz vina. U svakom slučaju, dobijeni ekstrakt nije bio prikladan za naš opseg, pa se smatralo jednostavnim i jeftinijim isparavanjem u vakuumu da bi se dobio uzorak za biološku i hemijsku analizu. Počevši od 500 g vina i radeći na 55 stepeni, nakon 20 minuta dobijeno je 262 g ekstrakta.

Kako bi se otkrilo bilo kakvo propadanje polifenola sadržanih u vinu tokom faze isparavanja, uzorci prije i nakon tretmana podvrgnuti su analizi tečnom hromatografijom. Na slikama 1 i 2 prikazani su LC-ESI-LTQ-Orbitrap MS profili crnih i bijelih vina prije i nakon isparavanja. Prikupljanje podataka je obavljeno u načinu negativne jonizacije; bilo je poznato da je način negativne jonizacije selektivniji i omogućava da se dobije veća osjetljivost za fenolna jedinjenja. U uzorcima crnog vina identificirana su 33 fenolna jedinjenja, a u uzorcima bijelog vina 26 spojeva (tablice 1 i 2). Otisak prsta je pokazao prisustvo fenolnih kiselina, katehina i srodnih proantocijanidina, stilbena i flavonoidnih glikozida u uzorcima. Profili crnog vina prije i nakon isparavanja otkrili su neznatne kvantitativne razlike (slika 1.). Kao što se i očekivalo, hromatogrami crnog vina bili su gušći u odnosu na bijelo vino, što znači da crno vino sadrži više polifenola nego bijelo. (Slika 2). Sa kvalitativne tačke gledišta, sirovi uzorci i odgovarajući ekstrakt vina bili su ekvivalentni.

3.2. Ekstrakti vina poboljšavaju vitalnost ćelija i antioksidativni odgovor

MIT test je pokazao netoksičnost ekstrakta vina za sve testirane koncentracije (slika 3) i vrijeme izlaganja, održavajući vitalnost ćelija u poređenju sa kontrolnim netretiranim ćelijama. Samo za veće koncentracije (400 i 500 mg/mL ekstrakta bijelog i 500 mg/mL ekstrakta crnog vina), ćelije su pokazale značajno smanjenu vitalnost ćelija nakon 24 h (panel A) i 48 h (panel B), u poređenju sa kontrolišu netretirane ćelije. Ćelije tretirane raznim ekstraktima također su pokazale bolju antioksidativnu aktivnost, stimulirajući aktivnost katalaze u razgradnji H-O2 u kisiku i vodi, štiteći stanice od oštećenja izazvanih oksidativnim stresom (Slika 4). Poboljšanje antioksidativne aktivnosti u tretiranim ćelijama, u poređenju sa kontrolama, bilo je vidljivo već nakon 24 h tretmana, posebno za veće koncentracije (500 mg/mL) (Slika 4A), dostižući maksimum u 48 h, statistički značajno za veće koncentracije ( Slika 4B), a zatim stabilizovana nakon 72h (Slika 4C).

3.3. Ekstrakti vina sprečavaju starenje ćelija, uprkos izloženosti jakom stresnom događaju

Slika 5 prikazuje aktivnost -galaktozidaze u različitim uslovima uzgoja. Ćelije kultivisane u prisustvu dva ekstrakta (bijeli i crveni pri 500 mg/mL) pokazale su jasno smanjenje broja plavih pozitivnih ćelija i, prema tome, starenje, u poređenju sa netretiranim kontrolnim ćelijama uzgajanim u prisustvu jedine medij za uzgoj (Ctrl) i ćelije izložene H2O2 bez ekstrakata (Ctrl H2O2).

4. Diskusija

Polifenoli su najzastupljeniji bioaktivni molekuli u vinu, koji su također nedavno u fokusu interesa u području kozmetičke primjene [26]. Polifenoli su grupa spojeva široko rasprostranjenih u biljkama, vrlo različitih sa strukturne tačke gledišta, ali odgovornih za organoleptička i nutritivna svojstva hrane i biljaka [14]. Također imaju pozitivan učinak, štiteći od raka, kardiovaskularnih bolesti, dijabetesa, osteoporoze i neurodegenerativnih bolesti [27-29]. Drugi autori su ranije opisali njihova svojstva da se suprotstave oksidativnom stresu i upalu [30]. Konkretno, dobro poznati preventivni učinak ateroskleroze ovisi o antioksidativnoj aktivnosti LDL kolesterola, čija bi oksidacija dovela do hvatanja bijelim krvnim stanicama nakon čega bi uslijedilo stvaranje ateromatoznog plaka [31,32]. U tom kontekstu, vino se nedavno pokazalo kao jedan od najboljih načina za prevenciju crijevnih infekcija, pokazujući antivirusno i antibakterijsko djelovanje protiv gram-pozitivnih i gram-negativnih mikroorganizama, kao što su salmoneloza, šigeloza, kolibaciloza, stafilokoki i streptokoki [334] .

Resveratrol se smatra jednim od najefikasnijih antioksidansa prisutnih u vinu, koji štiti kožu od slobodnih radikala i usporava proces starenja inhibicijom aktivacije tirozinaze [35]. Štaviše, utiče na proizvodnju glikozaminoglikana, koji olakšavaju i regulišu redistribuciju vode u dermisu, vraćajući mu ravnotežu i dovodeći do trajne hidratacije [36]. Osim toga, resveratrol modulira ćelijske cikluse, apoptozu i starenje, pokazujući zaštitne efekte protiv oksidativnog oštećenja DNK[37]. Galna kiselina i svi njeni derivati ​​smatraju se najvažnijim fenolnim kiselinama, sa visokom aktivnošću uklanjanja slobodnih radikala, sposobnim da interferiraju sa ćelijskim signalnim putevima i apoptozom ćelija raka [38]. Flavonoidi i antocijanini pokazuju značajno antioksidativno djelovanje.veličina penisa cistancheDobro je poznat po svojoj izrazitoj sposobnosti da smanji proliferaciju ćelija raka i da zaštiti od kardiovaskularnih bolesti, gojaznosti i dijabetesa [39,40]. Osim toga, oni su također uključeni u modulaciju neuronskih funkcija i prevenciju bolesti povezanih sa starenjem [41]. Efikasna ekstrakcija je od kritične važnosti kako bi se održala stabilnost fenolnih jedinjenja[42]. U tom kontekstu, u ovom radu ocjenjivali smo komponente dvije vrste vinskih ekstrakata dobivenih vakuumskim isparavanjem kako bi se dobio koncentrat bez alkohola. Kako bismo bili sigurni da proces isparavanja nije utjecao na kvalitetu i količinu vina, analizirani su kemijski profili uzoraka crnog i bijelog vina i upoređivani s onima nakon isparavanja. Analiza otisaka prstiju u uzorcima pokazala je prisustvo velikih količina fenolnih kiselina, katehina i srodnih proantocijanidina, stilbena i flavonoidnih glikozida (Slike 1 i 2), korisnih kao sirovina za topikalnu kozmetičku pripremu [43]. Njihov potencijalni terapeutski učinak kod mnogih kožnih poremećaja, uključujući inficirane rane i UV zračenje, vjerojatno je povezan sa sinergističkim djelovanjem ovih bioaktivnih molekula [4]. Ova jedinjenja mogu inhibirati enzime koji stvaraju ROS kao što su ksantin oksidaza i nikotinamid adenin dinukleotid fosfat(NADPH)oksidaza[45,46].

Oksidativni stres je uzrokovan viškom reaktivnih vrsta kiseonika. ROS, koji nastaje gubitkom elektrona tokom aerobnog metabolizma ili nakon izlaganja faktorima okoline, su nestabilne vrste koje mogu izazvati promjene u strukturi i funkciji biomolekula [47,48] Prirodna antioksidativna odbrana uključeni su u održavanje ROS unutar fiziološki odgovarajućih nivoa[49,50]. Svaka promjena u ovom procesu može negativno utjecati na starenje kože[51,52]. U tom kontekstu, mnogi prirodni ekstrakti su dobro poznati po svojim blagotvornim efektima u stimulaciji zacjeljivanja rana i antioksidativnim reakcijama oštećene kože nakon izlaganja stresu iz okoline [53-56]. Sada je poznato da starenje kože dovodi do oštećenja funkcije barijere, što rezultira suhim izgledom i osjetljivošću na agresore iz okoline, te stoga predstavlja veći rizik za kožne poremećaje [57,58]. Štaviše, zacjeljivanje rana je složen i dinamičan proces popravke, obnavljanja integriteta kože i homeostaze tkiva [59]. Lokalna primjena aktivnih antioksidativnih molekula može podržati antioksidativni sistem kože protiv oksidativnog stresa, štiteći je tako od dugotrajnog foto-starenja [24,60]. Dobro je poznato da bioaktivne molekule, djelujući kao antioksidansi, mogu spriječiti starenje stanica i procese starenja. Starenje ćelije je stabilna faza zaustavljanja rasta ćelije koju karakteriše lučenje sekretornih faktora povezanih sa fenotipovima starenja (SASP)[61]. SASP može modulirati susjedne ćelije, što dovodi do aktivacije signalnih kaskada uključenih u različite patološke procese [62]. Stareće ćelije su povezane sa skraćivanjem telomera i postojanim proinflamatornim miljeom, promovišući ćelijsku transdiferencijaciju [63]. U ovom kontekstu, nedavno smo pokazali da Myrtus Communis L. pokazuje važna antioksidativna i regenerativna svojstva modulacijom pluripotentnosti matičnih ćelija i upalnog odgovora[64]. Ekstrakti ove biljke, bogati polifenolima, u stanju su da zaštite ćelije od oksidativnog stresa, izazivajući ekspresiju reverzne transkriptaze telomeraze (TERT) i sprečavajući prerano starenje [65].

Drugi autori su ranije pokazali da terapijske intervencije prema ostarjelim stanicama mogu povratiti zdravlje suprotstavljanjem kronične upale i izazivanjem popravke rana[66]. Ipak, drugi autori su također otkrili da kvercetin, flavonoidi i galna kiselina mogu spriječiti ozljede uzrokovane direktnom aktivnošću uklanjanja slobodnih radikala, podržavajući sisteme detoksikacije stanica, kao što su superoksid dismutaza, katalaza i glutation peroksidaza [67]. Katalaza je jedan od najvažnijih enzima uključenih u detoksikaciju ROS-a, čija disregulacija dovodi do mnogih degenerativnih bolesti povezanih sa starenjem[68,69].cistanche prahDobro je poznato da je nedostatak katalaze povezan s ubrzanom dijabetičkom ozljedom bubrega kroz peroksizomalnu disfunkciju [70], čime utječe na biološke procese, uključujući proliferaciju stanica, diferencijaciju, migraciju i apoptozu [71]. U ovom radu pokazujemo da ekstrakti crnog i bijelog vina, u različitim koncentracijama, mogu suprotstaviti starenju stanica izazvanom oksidativnim stresom, modulirajući aktivnost katalaze, glavnog enzima uključenog u regulaciju oksidativnog stresa (Slika 4) i -galaktozidaza (Slika 5). Naši rezultati pokazuju da su ekstrakti vina u stanju da se suprotstave akumulaciji ROS, povećavajući aktivnost katalaze nakon tretmana H-O2, čime se sprečavaju hronične kožne bolesti i smanjuje broj stanica koje se stare. Uzeti zajedno, naši nalazi upućuju na to da ovi ekstrakti vina, dobiveni vakuumskim isparavanjem, mogu stoga predstavljati zanimljivu sirovinu za formulaciju novih kozmetičkih proizvoda za suzbijanje starenja kože. Dalje in vitro i in vivo studije također na pojedinačnim spojevima mogu biti od pomoći za prevođenje ovih rezultata u buduće primjene za regeneraciju tkiva.

5. Zaključci

Starenje kože je dinamičan i multifaktorski proces izazvan izlaganjem UV zračenju i povezanim stvaranjem reaktivnih vrsta kiseonika. Jedina poznata odbrana protiv fotostarenja su filteri za sunce i antioksidansi, posebno u kombinaciji, za smanjenje i neutralizaciju proizvodnje slobodnih radikala. U ovom radu pažnju smo usmjerili na antioksidativni potencijal vinskih ekstrakata, čiji flavonoidi mogu spriječiti starenje, posebno kada se primjenjuju na stanice izložene izrazitom stresnom događaju. Zahvaljujući novoj proceduri ekstrakcije, uklonili smo alkoholnu frakciju bez kvalitativnog mijenjanja flavonoidnih antioksidativnih komponenti. Sa ekonomske tačke gledišta, jasno je da je vino skuplje od nekoliko nusproizvoda. Poznato je da kozmetička industrija koristi i nekoliko sirovina skupljih od vina. Ekstrakti crvenog i bijelog vina stoga mogu predstavljati zanimljivu sirovinu za formulaciju novih kozmetičkih proizvoda za suzbijanje starenja kože poboljšavajući regeneraciju tkiva.

Ovaj članak je preuzet iz Antioxidants 2021, 10, 227. https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants