Antidepresivi i aktivnosti za poboljšanje kognitivnih sposobnosti tradicionalne kineske biljke Cistanche

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Dongfang Wang,1 Haizhen Wang,2 i Li Gu2

1. Uvod

Depresija i srodni poremećaji raspoloženja, s procjenom od 12 do 17 posto populacije koja doživi barem jednu epizodu u životu, su među vodećim uzrocima mentalnih invaliditeta i smatraju se jednim od najvećih svjetskih problema javnog zdravlja [1]. Od posebne važnosti, značajan dio pacijenata s depresijom pati od gubitka pamćenja, problema s koncentracijom, smanjene energije ili umora, gubitka interesa ili zadovoljstva u hobijima i aktivnostima, poteškoća sa spavanjem, ranog jutarnjeg buđenja ili prekomjernog spavanja. Iako su neuralni supstrati za abnormalnost depresije i srodnih sindroma nejasni, općenito je prihvaćeno da oštećenje neuroplastičnosti i ćelijske otpornosti dovodi do patofiziologije depresije i uspješno liječenje može ovisiti o intervenciji razine neurotransmitera [2]. Pristup liječenju depresije u osnovi je baziran na klasičnom monoaminskom sistemu

hipoteza, koja tvrdi da disregulacija monoamina, posebno serotonina (5-HT) i norepinefrina (NE) doprinosi patogenezi depresije, a intervencija neurotransmiterskog sistema agonistima dopamina i dopamin-noradrenergičkim modulatorima ublažila bi simptome velike depresije poremećaj [3]. Iako se široko propisuju, kurativna efikasnost antidepresiva je upitna, a nuspojava se ne može zanemariti jer značajan dio pacijenata ne reaguje na manipulaciju monoaminskim sistemom [4]. Nedavno, nove teorije o patogenezi depresije ukazuju na to da više sistema, uključujući upalne puteve, put oksidativnog stresa, osovinu hipotalamus-hipofiza-nadbubrežna žlijezda (HPA), metabolički i bioenergetski sistem, neurotrofne puteve, glutamatni sistem, opioidni sistem i holinergičkog sistema, usko su povezani sa pojavom depresije [3]. Dokazi pokazuju da je višestruka ciljana intervencija proizvela bolju efikasnost od jedne pojedinačne ciljne intervencije [5]. Hitno su potrebne nove terapije zasnovane na teoriji višestruke sistemske disregulacije.

Biljni proizvodi su navodno konzumirali više od polovine američke populacije [6]; Interes i potražnja za biljem ili biljnim proizvodima kao dopunskim načinom liječenja depresije rastu u cijelom svijetu. Utvrđeno je da više ljekovitih biljaka pokazuje blagotvorno djelovanje na ublažavanje depresije. Bilje za koje se navodi da poseduju efekat suzbijanja depresije i poboljšanja kognitivnih funkcija su morska krkavina [7], Ginkgo biloba [8], Piper nigrum [9], Hypericum perforatum [10], Griffonia simplicifolia [11]. Kombinovana primena ferulinske kiseline i piperina pokazala je sinergistički efekat sličan antidepresivu kod miševa manipulisanjem monoaminergičkim sistemom [7]. Albiflorin je karakteriziran visokim selektivnim afinitetom prema neurotransmiterskim receptorima i transporterima i značajno povećanim ekstracelularnim koncentracijama 5-HT i NE u hipotalamusu štakora koji se slobodno kreću [12]. Ljekovita biljka Melissa officinalis L. ublažila je depresivno ponašanje miševa tako što je utjecala na nivo serotonergičkog neurotransmitera [13]. Ove biljke ili dekocije, razvijene kao alternativni lijekovi za depresiju, pomažu u ublažavanju simptoma depresije i pružaju novi izvor za razvoj antidepresiva.Herb Cistanchevrste, rasprostranjene u sušnim zemljama i pustinjama sjevernog dijela Kine, tradicionalno su kinesko ljekovito bilje i široko se koristi za liječenje raznih bolesti više od 1,000 godine u Kini. Višestruka efikasnostherb Cistanchedekocija se kreće između afrodizijačkih [14], imunostimulirajućih [15], antioksidativnih [16] i hepatoprotektivnih [17] svojstava. Dekocije C. deserticola indukuju steroidogene enzime testisa [18], potiču erektilni odgovor penisa i skraćuju period latencije erektilne reakcije kod kastriranih pacova [19].Herb Cistancheprijavljeno je da inhibira aktivnosti dopaminergičkih neurona regulacijom gena inhibitorne apoptoze i neurotrofnih faktora [20]. Dekocije C. tubulosa su popravile kognitivnu disfunkciju uzrokovanu A 1-42 blokiranjem taloženja amiloida i oživjele holinergičku i hipokampalnu dopaminergičku neuronsku funkciju [21]. Neuroprotektivno svojstvoherbal Cistancheimplicira terapeutski potencijal kod kognitivnih bolesti. Depresija je uobičajeni mješoviti način emocionalnih reakcija sa zaboravom i kognitivnim padom kao uobičajenim simptomima [22].Herb Cistancheobično se koristio kao tradicionalna kineska medicina za liječenje zaborava; štaviše, nedavni izvještaj pokazuje da je početna primjena kukuruznog brašna sa C. tubulosa kod odraslih osoba korisna za promociju dugovječnosti i poboljšanje učenja i pamćenja povezanog s mirisom kod modela Drosophila koji nisu kralježnjaci [23]. Ove činjenice ukazuju na poboljšanje kognitivnih sposobnosti biljke Cistanche; ovdje, u ovom istraživanju, po prvi put smo okarakterisali antidepresivno svojstvo i njegov odnos sa aktivnostima poboljšanja kognitivnih sposobnosti u modelu sisara regulacijom monoaminskog sistema i HPA ose. Rasvjetljavanje svojstva antidepresiva i preliminarnog mehanizma biljke Cistanche moglo bi proširiti spektar primjeneherb Cistanche, koji bi se mogao razviti kao alternativni lijek za depresiju.

2. Materijali i metode

2.1. Biljni materijal i priprema decokcija. C. deserticola YC

Ma je ​​dobijen iz Nei Mongolske autonomne regije, Kina; C. tubulosa je dobijen iz autonomne regije Xinjiang Uygur, Kina. Prije dekocije, biljka (C. deserticola YCMa ili C. tubulosa) je pregledana kako bi se otkrio sadržaj ehinakozida i verbaskozida pomoću HPLC (tečna hromatografija visokih performansi) (Milford, MA, Waters, SAD) i prihvatljivog proizvoda (prema Farmakopeji Narodne Republike Kine) korišteno je za eksperimente na životinjama. Dekocija je dobijena na osnovu metode isparavanja vode koju je razvio Centar za istraživanje prehrambenog i zdravstvenog inženjerstva pri Državnom ministarstvu obrazovanja, Univerziteta Sun Yat-sen. Osušeni Cistanche deserticola YCMa od 125 g je smrvljen i prosijan putem 120-mrežastog sita, a zatim je prah otopljen u 3 L ultra čiste vode, zagrijan

na 100∘C 2 h, zatim ohlađen na sobnu temperaturu i prosijan; supernatant je recikliran. Talog je zatim rastvoren u 2 L ultra čiste vode i zatim zagrevan 1,5 h i ohlađen kao što je gore pomenuto da bi se supernatant reciklirao; sediment je zatim korišten za recikliranje supernatanta. Sadržaj svih supernatanta je obogaćen rotacionim vakuumskim isparivačima na 60∘C; konačno je koncentracija sirovog lijeka postavljena na 0,5 g/ml i proizvod je pohranjen na -20∘C.

2.2. Echinacoside and Verbascoside Assay HPLC analizom.

HPLC (tečna hromatografija visokih performansi) je korištena za mjerenje kvalitativnog i kvantitativnog eseja ehinakozida i verbaskozida; verbaskozid (čistoća > 93 procenta) i ehinakozid (čistoća > 93 procenta) kupljeni su od Nacionalnog instituta za kontrolu hrane i lijekova (Peking, Kina) i korišteni kao standardna kontrola.

2.3. Briga o životinjama i eksperimentalno ponašanje.

Subjekti su bili SPF (bez specifičnih patogena) mužjaci Kunming miševa težine 21-25 grama, koje je nabavio Centar za medicinske eksperimentalne životinje provincije Guangdong. Životinje su bile smještene u plastičnim kavezima (deset po kavezu); Uslovi okoline su postavljeni na sledeći način: vlažnost 40∼70 procenata, sobna temperatura 21 ± 1∘C, i period od 12 h: 12 h svetlo-mrak. Sve eksperimente na životinjama odobrio je Komitet za etiku na životinjama Univerziteta Sun Yat-sen.

2.4. Test ovjesa repa.

Test ovjesa repa urađen je prema protokolu koji su opisali Cryan et al. [24] sa skromnim promjenama. Ukratko, 21. dana, miševi su obješeni za rep pomoću metalnih vješala vezanih najlonskim kateterom, sa glavom na visini 50 mm od poda. Miševi su obješeni na udicu na ljepljive trake 10-20 mm od kraja repa i izolirani akustički i vizualno klapnama. Pokreti tijela miša su zabilježeni, a respiratorni pokreti su zanemareni. Prije dana eksperimenta, miševi su suspendirani na 8 minuta radi adaptacije.

3. Rezultati

3.1. Određivanje sadržaja glavnih bioaktivnih sastojaka u uzorcima C. deserticola YCMa i C. tubulosa. Feniletanoidni glikozidi kao što su ehinakozid i verbaskozid općenito se smatraju glavnim bioaktivnim sastojcima; stoga je sadržaj ehinakozida i verbaskozida u uzorcima C. deserticola YCMa i C. tubulosa određen HPLC. HPLC hromatogrami su prikazani na slici 1, a rezultati pokazuju da je ukupan sadržaj feniletanoidnih glikozida iz C. deserticola YCMa bio približno dvostruko veći od C. tubulosa. Težine ehinakozida i verbaskozida, respektivno, čine 1,27 ± 0.009 posto i 0,52 ± 0.0{ {21}}3 posto praha pripremljenog od C. deserticola YCMa i 19,81 ± 0,66 posto i 2,45 ± 0, 12 posto praha pripremljenog od C. tubulosa. Težine ehinakozida i verbaskozida, respektivno, čine 0.90 ± 0.001 posto i 0.20 ± 0.001 posto dekocije C. deserticola YCMa i 5.90 ± 0.12 posto i 0.54 ± 0.54 posto postotak praha pripremljenog od C. tubulosa (Tabela 1).

3.2. Dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa ublažila je nivo stresa i depresije. Test suspenzije repa (TST) je brza i klasična metoda za procjenu antidepresivnog djelovanja lijekova kod miševa [24]; u ovom istraživanju, nepokretan status, uzrokovan kratkotrajnim i neizbježnim stresom vješanja za rep, korišten je kao osobina koja odražava nivo depresije kod miševa. Provjerili smo da li dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa može poništiti nepokretnost i podstaći pojavu ponašanja vezanog za bijeg. U poređenju sa kontrolnim grupama, period nepokretnosti stresne grupe je povećan za 27,4 posto; u poređenju sa stresnim grupama, grupe tretirane srednjom, visokom koncentracijom odvarka biljke C. deserticola YCMa pokazale su statistički značajno smanjenje perioda nepokretnosti svaka za 44,1 posto i 56,1 posto; grupe tretirane srednjom, visokom koncentracijom

Dekocija biljke C. tubulosa pokazala je statistički značajno smanjenje perioda nepokretnosti za 41,9 posto i 47,7 posto (Slika 2). Ovi rezultati pokazuju da dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa može smanjiti nivo stresa i depresije kod miševa, a dekocija C. deserticola YCMa je ​​pokazala nešto veću efikasnost od dekocije C. tubulosa.

3.3. Dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa poboljšala je prostorno učenje i pamćenje miševa. Ljudi (i adolescenti i odrasli) koji pate od depresije skloni su teškoćama u učenju [28]; dokazano je da dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa ublažava nivo stresa i depresije; zatim smo odabrali da procijenimo može li izvarak C. deserticola YCMa i C. tubulosa utjecati na prostorno učenje i pamćenje koristeći Morrisov model vodenog lavirinta, koji se široko primjenjuje u procjeni prostornog učenja i funkcije pamćenja povezanih područja mozga [29] . Tragovi kretanja su klasifikovani u četiri tokom latencije pretraživanja; pravolinijska putanja je pokazala da su miševi precizno odredili položaj platforme za spašavanje, putanja tendencije je pokazala da su miševi pokazali u osnovi ispravnu orijentaciju, a putanja oštrih je pokazala da su miševi ili bili u ranom periodu obuke ili su patili od demencije, pokušavajući da locirati ciljno mjesto na osnovu instinkta; nasumična putanja pretraživanja pokazala je da miševi imaju nisku sposobnost pozicioniranja i da su besciljno pretraživali ciljno mjesto. Podaci su prikupljeni prema kriterijima.

Utjecaj dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa na sposobnost učenja prostora i pamćenja kod miševa koji su pod stresom obuzdavanjem prikazan je na slici 3. Nakon testa suspenzije repa, miševi su pokazali značajno produžen period latencije. U poređenju sa stresnim grupama, miševi tretirani umjerenom, visokom dozom C. deserticola YCMa i niskom, visokom dozom dekocije C. tubulosa pokazali su skraćeni period latencije; učestalost kada su miševi plivali skrivenom platformom je značajno povećana u grupama tretiranim umjerenom, visokom dozom C. deserticola YCMa dekocije. Ovi rezultati ukazuju na to da su miševi pod stresom imali koristi od primjene dekocije biljke Cistanche i pokazali su poboljšanje prostornog učenja i pamćenja.

3.4. Dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa je regulisala aktivnost monoamin oksidaze. MAO katalizira oksidativnu deaminaciju amina kao što su tiramin, kateholamin i 5-hidroksitriptamin (5-HT) u mozgu i perifernim tkivima; inhibicija MAO aktivnosti rezultira djelotvornošću antidepresiva [30]. Pokušali smo da objasnimo antidepresivni efekat C. deserticola YCMa i C. tubulosa; tada je određena MAO aktivnost u mozgu. Nakon testa ovjesa repa, aktivnost MAO je značajno povećana; MAO aktivnost u grupama liječenim suspenzijom repa, a zatim slijedi umjerena, visoka doza

decokcija iz C. deserticola YCMa pokazala je značajan pad za približno 13,9 posto ~12,3 posto; MAO aktivnost u grupama liječenim suspenzijom repa, a zatim visokodoziranom dekocijom iz C. tubulosa pokazala je značajan pad za oko 13,2 posto (Slika 4). Podaci su pokazali da dekocija iz C. deserticola YCMa i C. tubulosa može inhibirati aktivnost MAO i može doprinijeti antidepresivu

efekat, a dekocija C. deserticola YCMa pokazala je jaču efikasnost od C. tubulosa.

3.5. Primjena dekocija C. deserticola YCMa i C. tubulosa rezultirala je povećanjem centralne koncentracije dopamina i smanjenjem koncentracije kortikosterona u serumu. Nivo DA i NE u

mjeren je centralni nervni sistem da bi se odredila ekscitabilnost nerva. Nakon 4 nedelje testa suspenzije repa, u poređenju sa grupama koje su bile pod stresom, nivo DA u grupama tretiranim umerenom dozom C. deserticola YCMa se značajno povećao za svaku za 43,5 procenata; nivo DA u grupama tretiranim umerenom dozom C. tubulosa je takođe značajno povećan (Slika 5(a)). Nivo NE je blago povećan u grupama koje su tretirane dekocijama obe biljke u poređenju sa grupama koje su bile pod stresom, i nije nađena statistička razlika (Slika 5(b)). Ovi rezultati bi mogli objasniti molekularni mehanizam antidepresivnog djelovanja biljke Cistanche.

Adrenokortikotropni hormon (ACTH), polipeptidni hormon koji proizvodi i luči prednja hipofiza, stimuliše lučenje glukokortikosteroida djelovanjem na koru nadbubrežne žlijezde, zona fasciculata [31]; kortikosteron, steroidni hormon koji proizvodi korteks nadbubrežne žlijezde, uključen je u regulaciju fizioloških procesa kao što su podizanje energije, imunološke reakcije i reakcije na stres [32], pa smo odlučili proučavati učinak odvarka bilja na HPA os. Izmjerena je i koncentracija ACTH i kortikosterona u serumu. Nakon 4 sedmice testa suspenzije repa, koncentracija ACTH i kortikosterona u grupi koja je bila pod stresom je značajno povećana (Slika 6). Nisu primijećene značajne promjene u grupama koje su tretirane odvarom od biljke Cistanche u poređenju sa grupom koja je bila pod stresom (Slika 6(a)). U poređenju sa stresnom grupom, koncentracija kortikosterona u serumu u grupama liječenim umjerenom, visokom dozom dekocije C. deserticola YCMa je ​​značajno smanjena; koncentracija kortikosterona u grupama liječenim visokim dozama C. tubulosa bila je smanjena, ali ne i do značajne statističke razlike C. deserticola YCMa i C. tubulosa bi mogle smanjiti koncentraciju kortikosterona u serumu i mogle bi biti uključene u regulaciju HPA osi, a dekocija C. deserticola YCMa pokazala je jaču efikasnost od C. tubulosa.

4. Diskusija

U ovoj studiji definirane su antidepresivne aktivnosti i poboljšanje pamćenja i učenja biljke Cistanche, što bi moglo baciti novo svjetlo na funkciju biljke Cistanche i dati naznake za proširenje terapijske primjene. Prethodne studije pokazuju da je biljka Cistanche multifunkcionalni kineski lijek s biološkim djelovanjem protiv starenja, antioksidansa, estrogena, antiosteoporotičnog, afrodizijačkog i antiinflamatornog djelovanja [33]. Herb Cistanche je prepoznat kao lijek za nedostatak bubrega, neplodnost i kronični zatvor (Kineski farmakopejski komitet, 2010.). Dekocija biljke Cistanche sastoji se od hlapljivih ulja, neisparljivih feniletanoidnih glikozida (PeG), iridoida, lignana, alditola, oligosaharida i polisaharida. Ehinakozid i verbaskozid se općenito smatraju glavnim bioaktivnim sastojcima [34]. Postoje četiri glavne vrste Cistanche uključujući C. deserticola YCMa, C. tubulosa, Cistanche Sinensis G. Beck i Cistanche salsa var. albiflorashi et al. [35]; odabrali smo C. deserticola YCMa i C. tubulosa kao naš model za određivanje sadržaja PeGs, a C. deserticola YCMa je ​​imala veći sadržaj PeGs (Slika 1), što može objasniti veću efikasnost C. deserticola YCMa. Rezultati pokazuju da sadržaj glavnih bioaktivnih sastojaka određuje efikasnost biljke Cistanche.

Prethodne studije pokazuju da su biljni proizvodi Cistanche korisni u liječenju neurodegenerativnih poremećaja povećanjem faktora rasta nerava (NGF) u hipokampusu miševa [36, 37], ali nije prijavljeno istraživanje o antidepresivnim i kognitivnim aktivnostima učenja biljke Cistanche u modeli sisara. U ovoj studiji, dekocija biljke Cistanche pokazala se efikasnom za ublažavanje nivoa stresa i značajno povećanje ponašanja preživljavanja u testu ovjesa repa (Slika 2) i poboljšanje prostornog učenja i kapaciteta pamćenja u modelu vodenog lavirinta (Slika 3). Lin et al. dokazao da je biljka Cistanche poboljšala olfaktorno pamćenje u modelu voćne mušice [23]; fokusirali smo naše istraživanje na učinak antidepresiva i usvojili drugačiji životinjski model; rezultat je pokazao da je biljka Cistanche poboljšala varijantnu vrstu kognitivne funkcije, odnosno sposobnost prostornog učenja kod miševa. Prema teoriji monoamina, iskustvo stresa i depresija su usko povezani sa nivoom monoaminskih neurotransmitera u mozgu, kao što su DA, NE, 5-HT i epinefrin [38]. I otkrili smo da dekocija biljke Cistanche može potkopati aktivnost MAO (slika 4) i povećati centralnu koncentraciju DA (slika 5(a)). Iznenađujuće, centralna koncentracija 5-HT je bila smanjena tretmanom dekocijom od biljne cistanche (podaci nisu prikazani), jer su prethodna istraživanja pokazala da je smanjena centralna 5-HT aktivnost povezana s depresijom [39]. Disregulacija osovine hipotalamus-hipofiza-nadbubrežna žlijezda često je povezana s depresijom [40], intervencija na sistemu glukokortikoidnih receptora (GR) uspješno je preokrenula depresivni fenotip kod miševa [41], a otkrili smo da biljka Cistanche značajno ublažava serum

koncentracija CORT (Slika 6(b)). Modulacija monoaminskog sistema i HPA ose doprinose antidepresivnom efektu biljke Cistanche. Ehinakozid je mogao slobodno da prođe krvno-moždanu barijeru i da deluje na centralni nervni sistem [42], što može objasniti zašto je dekokcija biljke Cistanche imala antidepresivnu funkciju. Po prvi put smo okarakterisali svojstvo antidepresiva i njegov odnos sa aktivnostima poboljšanja kognitivnih sposobnosti u modelu miša, a preliminarni mehanizam je istražen. Ipak, mehanizam antidepresivnog svojstva Cistanchea nije razjašnjen na molekularnom nivou, te su potrebna dalja istraživanja kako bi se razjasnio sveobuhvatni antidepresivni mehanizam biljke Cistanche.

S obzirom na to da je dekokcija biljke Cistanche mješavina jedinjenja, može postojati više načina da dekokcija biljke Cistanche djeluje antidepresivno i podstiče sposobnost učenja. Oksidativni stres utječe na mnoge ćelijske funkcije neurona, a prekomjerna proizvodnja reaktivnih vrsta kisika (ROS) uzrokuje oštećenje stanica, apoptozu i smrt [43]. Ehinakozid ekstrahovan iz stabljike C. salsa pokazuje neuroprotektivni efekat smanjenjem proizvodnje ROS i apoptoze posredovane mitohondrijama [44]; akteozid, izuzetno jak antioksidativni spoj, mogao bi biti dijelom odgovoran za neuroprotektivni učinak [45]. Osim tradicionalne metode dekokcije, primjena modernih farmaceutskih metoda kao što su glikozidne kapsule s kontroliranim otpuštanjem može pojačati učinak biljne dekocije, jer se bioaktivni sastojci mogu probaviti i razgraditi u gastrointestinalnom traktu [37].

5. Zaključci

U ovoj studiji smo otkrili da dekocije C. deserticola

YCMa i C. tubulosa su ispoljile antidepresivno dejstvo i poboljšale prostorno učenje i sposobnost pamćenja u modelu miša, a dekocije C. deserticola YCMa i C. tubulosa su imale značajan uticaj na HPA osu;

C. deserticola YCMa pokazala je jaču farmakološku funkciju. C. deserticola i C. tubulosa mogu imati potencijal razvoja kao alternativnih lijekova za terapiju depresije.

Reference

[1] RC Kessler, KA McGonagle, S. Zhao et al., "Doživotna i 12-mjesečna prevalencija DSM-III-R psihijatrijskih poremećaja u Sjedinjenim Državama: rezultati Nacionalnog istraživanja komorbiditeta," Arhiv generalnog Psihijatrija, vol. 51, br. 1, str. 8–19, 1994.

[2] HK Manji, GJ Moore, G. Rajkowska i G. Chen, "Neuroplastičnost i ćelijska otpornost kod poremećaja raspoloženja", Molekularna psihijatrija, vol. 5, br. 6, str. 578–593, 2000.

[3] JD Rosenblat, RS McIntyre, GS Alves, KN ​​Fountoulakis i AF Carvalho, "Izvan monoamina-novi ciljevi za depresiju otpornu na tretman: sveobuhvatan pregled," Current Neuropharmacology, vol. 13, br. 5, str. 636–655, 2015.

[4] K. Wilson i P. Mottram, "Poređenje nuspojava selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina i tricikličnih antidepresiva kod starijih depresivnih pacijenata: meta-analiza," International Journal of Geriatric Psychiatry, vol. 19, br. 8, str. 754–762, 2004.

[5] S. Vezmar, B. Miljković´, K. Vucičević´ et al., "Farmakokinetika i efikasnost fluvoksamina i amitriptilina u depresiji", Journal of Pharmacological Sciences, vol. 110, br. 1, str. 98–104, 2009.

[6] CH Halsted, "Dodaci prehrani i funkcionalna hrana: 2 strane novčića?" American Journal of Clinical Nutrition, vol. 77, str. 1001S–1007S, 2003.

[7] J.-S. Tian, ​​C.-C. Liu, H. Xiang et al., "Istraživanje antidepresivnog efekta ulja sjemenki morske krkavine kroz metabolomički pristup baziran na GC-MS u kombinaciji sa multivarijantnom analizom," Food and Function, vol. 6, br. 11, str. 3585–3592, 2015.