Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Pridružena bolnica za tumore, Medicinski univerzitet Xinjiang, Urumqi 830011, Kina; 2. Farmaceutski fakultet, Medicinski univerzitet Xinjiang, Urumqi 830054, Kina)

sažetak:Cilj: Proučiti odnose strukture i aktivnosti feniletanoidnih glikozida u biljkama Cistanche salsa na antioksidativno djelovanje. Metode: Sistemima ispitivanja DPPH • antioksidativna aktivnost šest feniletanoidnih glikozida iz biljakaCistanchesalsa je određena da istraži vezu između antioksidativnih aktivnosti i strukturnih karakteristika feniletanoidnih glikozida. Rezultati: Antioksidativna aktivnost feniletanoidnih glikozida bila je varijanta sa efektom zavisnim od doze. Pokazalo se da je redoslijed jačine antioksidativne aktivnosti šest komponenti2 ^Acetilakteozid > Acteoside Tubuloside BN Izoakteozid > Echinacoside > Cistanoside A. Zaključak: Antioksidativna aktivnost feniletanoidnih glikozida povezana je sa brojem fenolnih hidroksila, steričnom smetnjom, 2-acetilom na srednjoj glukopiranozi i lokacijom fenolnog hidroksila. Dodatno, može biti povezano sa j3-nezasićenim ketonom fenola-2-propenila.

Ključne riječi: Cistanche salsa (CA Mey.) G, Beck; Feniletanoidni glikozidi; Antioksidativna aktivnost; Struktura-aktivnost; DPPH

Echinacoside

Tradicionalna kineska medicinaCistancheje Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, osušena mesnata stabljika s ljuskama i listovima. Prvi put je objavljena u "Shen Nong's Materia Medica". Učestalost pojavljivanja je najveća, odmah iza ginsenga u receptima kineske medicine protiv starenja i starenja, a ima reputaciju "pustinjskog ginsenga". Feniletanoil glikozidi su karakteristične komponenteCistancherod biljaka. Trenutno je više od 30 takvih spojeva izolovano iz ovog roda. Farmakološke studije su u osnovi jasno pokazale da su ova jedinjenja glavna materijalna osnova zaCistancheza vršenje farmakoloških aktivnosti).

Dibenzopikrilni radikal (DPPH •) je relativno stabilan slobodni radikal sa slobodnim elektronom na svom N. Rastvor DPPH-a u metanolu je ljubičaste boje sa maksimumom apsorpcije na 517 nm. Kada postoji čistač slobodnih radikala, njegova apsorpcija postepeno nestaje zbog njegovog uparivanja jednog elektrona. Njegov stepen promene boje je kvantitativno povezan sa brojem elektrona koje prihvata. Stoga, korištenje spektrofotometrije za otkrivanje promjene apsorbancije DPPH nakon reakcije s otopinom uzorka može se koristiti za ispitivanje sposobnosti uzorka da ukloni slobodne radikale i da se odupre oksidaciji (3). Trenutno postoje izvještaji o antioksidativnim istraživanjima glikozida fenetil alkohola u pireu od patlidžana u uklanjanju slobodnih radikala, ali ne postoji analiza odnosa strukture i aktivnosti između njegovih antioksidativnih svojstava i aktivnih supstanci. U ovom radu, DPPH • metoda analize slobodnih radikala je prvi put korišćena za ispitivanje antioksidativne aktivnosti 6 monomera glikozida fenetil alkohola u Rouhuanrongu. Na osnovu strukturnih karakteristika i rezultata određivanja aktivnosti ovih jedinjenja, preliminarno se zaključuje o komponentama glikozida fenetil alkohola. Odnos strukture i aktivnosti antioksidativne aktivnosti.

1 Aparati i materijali

Echinacoside, cistanche glikozid A,verbascoside, izovebazinski glikozid, 2,-acetil verbaskozid, referentna supstanca antocijana B u epruveti (izolovana i pripremljena iz Cistanche salsa, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr podaci u skladu sa literaturnom vrednošću, sadržaj je određen HPLC područjem metodom normalizacije, čistoća je veća od 95 posto, strukturna formula je prikazana na slici 1 i tabeli 1); Difenil pikril radikal (DPPH •) je kupljen od Sigme; ostali reagensi Svi su domaći čisti.

SpectraMax M5 multifunkcionalni detektor biološke aktivnosti pune talasne dužine (Anthos Co. Austrija), 96-ploča za kulturu bunara (Costar), AB104-N elektronska vaga]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Slika 1. Strukturne formule šest glikozida fenetanola u Cistancheu

Tabela 1 Supstituenti u 6 jedinjenja fenetanol glikozida u Cistancheu

Napomena: Ac je acetil, Cf je trans-kafeoil, Glc * pD-gluviolanoza, a Rha je aL-ramnoza

2 Priprema test rastvora

DPPH • Pripremite osnovni rastvor sa koncentracijom od 1.3 x 10'2mol/L sa etanolom, čuvajte u frižideru, razblažite osnovni rastvor sa etanolom do 1-3 xl{{7} }^mol/L neposredno prije upotrebe; 6 vrsta fenetil alkoholnih glikozida Referentna supstanca i vitamin C su formulisani u rastvor sa koncentracijom 0.05-50.0 ptg/mL sa etanolom.

Acteoside

3 metode i rezultati

3. 1 Metoda Prvo dodajte 10 |xL uzorka u jažice za uzorke, dodajte 10|jl etanola u prazne jažice, a zatim dodajte 190 jiL DPPH • sa koncentracijom od 1,3 xlO^mol/L, i stavite ih u tamni na sobnoj temperaturi 30 minuta. Koristite SpectraMax M5 multifunkcionalni detektor biološke aktivnosti pune talasne dužine za merenje apsorbancije (A) na 517 nm. Svaka apsorpcija je mjerena 3 puta paralelno i uzimana je prosječna vrijednost. Stopa čišćenja se izračunava na sljedeći način: stopa čišćenja ( posto )=(prazni uzorak-A)/prazno polje x 100 posto

3.2 Rezultati Rezultati određivanja prikazani su u Tabeli 2. Iz Tabele 2 se može vidjeti da šest glikozida fenetil alkohola u različitim koncentracijama imaju različite stupnjeve efekta uklanjanja na DPPH •, a njihova sposobnost uklanjanja slobodnih radikala ima značajnu dozu- odnos efekta sa koncentracijom. Glikozid na DP PH • Veličina efekta čišćenja raste sa povećanjem koncentracije.

Tabela 2 Brzina čišćenja uzoraka sa različitim koncentracijama na DPPH • («=3)

Napomena: Pozitivna kontrola je askorbinska kiselina (vitamin C), broj uzorka je 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glikozid A. Učinci šest glikozida fenetil alkohola u istoj koncentraciji kao i vitamin C pozitivne kontrole su nešto niži od učinka vitamina C.

verbascoside

4 Diskusija

Rezultati ove studije dodatno su potvrdili da glikozidi fenetil alkohola općenito imaju antioksidativno djelovanje. Analizirajući i upoređujući njihove hemijske strukture, verbaskozid, izo-verbazin glikozid, 2'-acetil verbasin glikozid i anortozit B u cijevi su svi glikozidi, dok ehinakozid icistancheA su trigliceridi, sa velikom steričkom smetnjom. Povećani efekat steričke smetnje čini ehinakozidom i solanakozidom A teškim pristupom slobodnim radikalima, tako da je njihov antioksidativni kapacitet relativno slab; strukturna razlika između ehinakozida i striata: ehinakozid A je samo. R5 prvog je fenolna hidroksilna grupa, a potonjeg je metoksi grupa. Smatra se da je o-fenolna hidroksilna grupa važna funkcionalna grupa za antioksidativno djelovanje. Difenol hidroksilna grupa nestaje, a antioksidativni učinak je značajno smanjen. Analizom strukture jedinjenja i kombinovanjem rezultata merenja, dolazi se do zaključka da je antioksidativna aktivnost fenetil glikozida u pasti od patlidžana povezana sa brojem aglikona i fenolnih hidroksilnih grupa na fenilakriloilnoj grupi, veznim položajem fenolne grupe. hidroksilnu grupu, veličinu sterične smetnje jedinjenja i centralnu glukozu 2 Postoji određena veza između supstitucije acetilne grupe na poziciji, što takođe može biti povezano sa fragmentom a,/3 nezasićene ketonske strukture na stiren acil grupu, ali ima malo veze sa supstitucijskim položajem fenilakriloil grupe.

DPPH • je relativno stabilan slobodni radikal sa središtem na N, sa jakom apsorpcijom na 517 nm. Nakon dodavanja ispitivane supstance, detekcijom promene apsorpcije na 517 nm nakon što DPPH • radikali reaguju sa rastvorom uzorka, može se verificirati sposobnost uzorka da ukloni slobodne radikale i antioksidaciju. Eksperimenti pokazuju da korišćenje DPPH • za uspostavljanje in vitro modela oštećenja slobodnih radikala ne zahteva komplikovanu opremu i skupe reagense. Jednostavan je i lak za upotrebu, osjetljiv, pouzdan i ponovljiv. To je dobra metoda za skrining hvatača slobodnih radikala.

Vitamin C je trenutno prepoznat kao visoko aktivan i široko korišten antioksidans. Stoga je ovaj eksperiment izabrao vitamin C kao pozitivnu kontrolu za antioksidativni kapacitet glikozida fenetil alkohola u uklanjanju slobodnih radikala.

reference

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Istraživanja o hemijskim sastojcima Cistanche Research progress[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Napredak u istraživanju farmakoloških aktivnosti biljaka Cistanche[J]. Kineska herbalna medicina, 2003, 34(9): U prilogu 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Jednostavna metoda za skrining hvatača slobodnih radikala [J]. Kineska herbalna medicina, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Određivanje antioksidativne aktivnosti Chuanlinga, Rhodiola Rosea i Huang Zhi-a difenil-piratskom radikalnom spektrofotometrijom [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.