Polisaharidi iz Cistanchea mogu značajno odgoditi starenje plućne funkcije

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Sun Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Institut za medicinu, Univerzitet Yangzhou, Yangzhou 225001)

Starenjeje proces u kojem tkiva i organi tijela podliježu funkcionalnoj i morfološkoj degeneraciji, pa čak i starenju tijekom života. Pluća su direktno povezana s vanjskim okruženjem i prihvataju cirkulaciju krvi iz cijelog tijela. Najosjetljivija je na razne štetne faktore u okolini i tijelu. To je jedan od najranijih organa u tijelu gdje dolazi do starenja. Uloga slobodnih radikala u procesu starenja potvrđena je istraživanjima mnogih naučnika. Ovaj eksperiment koristi ozon za stvaranje eksperimentalnog modela starenja za promatranjeUčinci polisaharida iz Cistanchea na toleranciju hipoksije, antioksidativnu funkciju i ultrastrukturu pluća starijih miševa. Uticaj. Očekuje se da će to postaviti temelje istraživanja zapolisaharidi iz Cistancheau odlaganju plućnih degenerativnih promjena i zdravstvenoj zaštiti respiratornog sistema starijih osoba.

Svrha ovog istraživanja je promatranje degenerativnih promjena u ultrastrukturi stanica plućnog tkiva kod eksperimentalnih miševa koji stare i utjecajpolisaharidi iz Cistancheana njemu. Korištenje kontinuirane inhalacije ozona (Ozone, Ob) tokom 4 sedmice za induciranje metode modela starenja pluća, korištenje polisaharida iz Cistanche 50 i 100 grama za primjenu modelnih miševa tokom 6 sedmica da bi se otkrila tolerancija na hipoksiju, pluća i superoksid u serumu kod starijih miševa Dismutaza (SOD) ) aktivnost i sadržaj malondialdehida (MDA). Promjene organela i ultrastrukture plućnog tkiva uočene su pod elektronskim mikroskopom. Rezultati Eksperimentalni miševi koji starenje uzrokovano ozonom značajno su smanjili toleranciju hipoksije; SOD u plućima i serumu je smanjen, a MDA povećan. U poređenju sa modelnom grupom, polisaharid iz Cistanchea može značajno produžiti vreme tolerancije hipoksije kod starenja miševa (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">Polisaharidi iz Cistanchea mogu značajnoodgodi eksperiment Fiziološka degeneracija i ćelijska morfologija plućaseksualno ostarjelih miševa.

1 materijal

1.1 Životinje

3 čista miša mon-age ICR soja, 18~22g, ¥^ svaka polovina, obezbeđena od Centra za eksperimentalne životinje Univerziteta Yangzhou, broj sertifikata: Su Dongzhi 98002^

1.2 Lijekovi i reagensi

Polisaharidi iz Cistanchea: Obezbeđuje Institut za istraživanje divljih biljaka Nanjing, pripremljeni sa destilovanom vodom do 2,5 g·LT, 5.0 gL-1; SOD, MDA test setove obezbjeđuje Institut za istraživanje biomedicinskog inženjerstva Nanjing Juli.

1.3 Instrument

UV755B ultraljubičasti spektrofotometar, proizvod šangajske fabrike analitičkih instrumenata; generator ozona, proizvod tvornice medicinskih instrumenata Wuxi; H-300 transmisioni elektronski mikroskop, proizvod Hitachi, Japan.

2 Metod

2 1 Priprema eksperimentalnog modela starenja pluća sa oštećenjem mirisa ICR miševi su uzeti iz dnevnog i eksperimentalnog dizajna, a miševi u grupi modela i grupi za tretman su nasumično grupirani.

Eksperimentalni model starenja kreiran je 4 sedmice u kontinuitetu. U isto vrijeme, kontrolnoj grupi (uzmite normalne miševe kupljene u istoj seriji) i modelnoj grupi dato je 20 ml-kg ^d'1 sa normalnim fiziološkim rastvorom, polisaharidom iz grupe tretmana Cistanche I i II polisaharidom iz Cistanche 50, 100 mg-kg-1-d-' je dato intragastričnom primjenom, a period primjene je bio 6 sedmica. Nakon posljednje primjene, izvršeni su različiti indeksni testovi.

2.2 Metoda ispitivanja tolerancije hipoksije (2)

Svaka grupa miševa stavljena je u bocu za mljevenje od 250 ml koja je sadržavala 20 g soda krečnjaka. Vazelin je zapečaćen, a vrijeme od stavljanja miševa u bocu do gušenja i smrti zabilježeno je pod normalnom temperaturom i pritiskom.

2.3 Pluća i krv

Određivanje sadržaja SOD^MDA za svaku grupu miševa 1 h nakon posljednje primjene, uklonite očne jabučice i sakupite krv za odvajanje seruma; zatim su miševi žrtvovani, plućno tkivo je izvađeno i fiziološki rastvor je dodat u stakleni homogenizator da se pripremi 100 g -f1 homogenata plućnog tkiva, određena je aktivnost SOD pluća i seruma metodom Huangsuyin oksidaze i određen sadržaj MDA metodom kondenzacije tiobarbiturne kiseline.

2.4 Metoda pripreme uzorka za elektronski mikroskop (3)

Eksperiment je podijeljen na kontrolnu grupu, grupu modela i grupu s visokim dozama. Metode modeliranja i administracije su iste kao gore. Nakon posljednje primjene, 3 miša iz svake grupe su nasumično odabrana, i oni se ubijaju vratom, a uzimaju se desna strana. Tkivo apeksa pluća, 0.4 mmol, L-1 glutaraldehid, i 0.04 mmol, dvostruka fiksacija sa L'1 OfeO4, dehidratacija acetonskog gradijenta, Epon 812 ugradnja, olovo-uranijum elektronsko bojenje, Hitachi H-300 transmisioni elektronski mikroskop sa povećanjem od 10,000 do 20,000 Posmatrajte promjene i strukturne promjene glavnih organela pod višestrukim.

2.5 Rezultati statističke obrade izraženi su u desetinama s tla, a poređenje dvaju srednjih vrijednosti uzorka koristi t-test.

3 rezultata

3.1 Učinak polisaharida iz Cistanchea na toleranciju hipoksije kod starijih miševa

Jedan sat nakon posljednje primjene miševa u svakoj grupi, testirano je vrijeme tolerancije hipoksije. Rezultati su pokazali da je vrijeme u kojem su stariji miševi mogli tolerirati hipoksiju bilo značajno kraće nego kod normalnih miševa. Vrijeme je značajno produženo u odnosu na modelsku grupu, ali nema značajne razlike u odnosu na kontrolnu grupu, što ukazuje da polisaharid iz Cistanchea može značajno poboljšati toleranciju hipoksije kod starijih miševa, vidi tabelu 1.

3.2. Utjecaj polisaharida Cistanche na antioksidativnu funkciju starenja miševa

Krv (serum) i plućno tkivo (plućni homogenat) miševa u svakoj grupi su sakupljeni nakon posljednje primjene, a određivani su SOD i MDA. Rezultati Aktivnost serumske i plućne SOD kod starijih miševa je smanjena, a sadržaj MDA povećan. U poređenju sa kontrolnom grupom, razlika je bila značajna. Polisaharidi iz Cistanchea mogu povećati aktivnost seruma i SOD pluća kod starijih miševa i smanjiti sadržaj MDA. U poređenju sa kontrolnom grupom, nema značajne razlike, a razlika sa grupom modela starenja je značajna, vidi tabele 2 i 3.

3.3 Učinak polisaharida iz Cistanchea na unutarćelijsku tamu alveolarnih epitelnih stanica⑷

Metoda izrade elektronskog mikroskopa je ista kao i ranije. Morfometrijska analiza: Pod elektronskim mikroskopom, svaki uzorak je posmatran u 10 vidnih polja kako bi se izmjerile organele. Rezultati su pokazali da su mitohondrije i lamelarna tijela grupe modela smanjeni, bazalna membrana je zadebljana, a polizomi povećani. U poređenju sa kontrolnom grupom, postojale su značajne razlike. Polisaharidi iz grupe visokih doza Cistanche su to poboljšali. U poređenju sa modelskom grupom, razlika je bila značajna i u osnovi je bila bliska kontrolnoj grupi. Pogledajte karticu 4.

3.4 Promjene u ultrastrukturi epitelnih stanica pluća kod eksperimentalno starenja miševa i utjecaj polisaharida Cistanche

Stari model miševa se može vidjeti pod elektronskim mikroskopom: epitelne ćelije alveolarnog tipa I su jednoslojni spljošteni tip debljine oko {{0}}.2 pm. Jezgro je malo i gusto. Postoji nekoliko mitohondrija, Golgijev kompleks i raštrkani endoplazmatski retikulum u perinuklearnoj citoplazmi. Relativno rijetka, s manje mikrofilamenata i mikrotubula. Histološke promjene pluća starijih miševa promatrane su pod elektronskim mikroskopom. Glavne promjene bile su tipizirane II alveolarne epitelne ćelije. Mikroresice na slobodnoj površini ćelija su se smanjile ili nestale, lamelarna tijela su oslabljena, lamelarna struktura je zamagljena, a nekoliko ćelija ima male lamelarne ćelije. Tijelo nestaje i to je šuplja ili homogena amorfna trakasta supstanca sa niskom gustinom elektrona. Mitohondrije i grubi endoplazmatski retikulum su smanjeni u tijelu ćelije. Bazalna membrana alveolarnih epitelnih ćelija je očigledno zadebljana, a proliferacija ćelija dijafragme i fibroblasta se može videti u alveolarnom intersticiju (slika 1,2). Iako su unutrašnja nuklearna membrana i oticanje mitohondrija uočeni u grupi polisaharida Cistanche, stepen je značajno smanjen u poređenju sa modelnom grupom (slika 3.4). Posmatranje pod elektronskim mikroskopom grupe koja je uzimala lijekove pokazala je da su epitelne ćelije tog tipa bile ravne, sa glatkom površinom, bez jezgra, a neke su bile debljine oko 0,1. U perinukleusu je bilo nekoliko organela, a čestice radijuma su bile vidljive. Ćelije tipa II imaju kratke resice na površini, veliki broj mitohondrija, grubi endoplazmatski retikulum i Golgijev kompleks u citoplazmi (Slika 5,6)

Model starenja oštećenja ozonom temelji se na teoriji slobodnih radikala o starenju. Oštećenje radikala bez kiseonika igra važnu ulogu u procesu starenja pluća. Pluća su jedini organ koji komunicira sa spoljašnjim okruženjem. U određenom vremenskom periodu životinje se kontinuirano udišu ozonom. Pluća su prva izložena ozonu i najosjetljivija su na oštećenja. Nakon što ozon uđe u tijelo, on brzo stvara visoko aktivne superoksidne anjonske slobodne radikale. Višak slobodnih radikala premašuje tjelesnu sposobnost uklanjanja, uništavaju i troše enzime za uklanjanje slobodnih radikala (kao što je SOD) u tijelu, a zatim uzrokuju starenje organa, pa čak i tijela. U ovom eksperimentu je značajno smanjena antihipoksijska sposobnost miševa uzrokovanih ozonom, aktivnost antioksidativne supstance SOD u serumu i plućnom tkivu, a značajno povećan metabolit peroksidacije lipida MDA. Uz upotrebu Rongrong Duojing 50,100 mg-kg1 kontinuirane infuzije eksperimentalnih miševa koji stare, miševi koji stare imaju očiglednu toleranciju na hipoksiju. Povećana je aktivnost superoksid dismutaze za uklanjanje slobodnih radikala. Sadržaj metabolita lipidne peroksidacije je smanjen, što ukazuje da polisaharidi iz Cistanchea mogu poboljšati antioksidativnu funkciju starenja miševa.

Lamelarna tijela u citoplazmi alveolarnih epitelnih stanica n-tipa često se koriste za mjerenje funkcije epitelnih stanica. Sekreti lamelarnih tijela izgladnjelih nazivaju se alveolarni surfaktanti, koji postoje na granici zrak-tečnost alveola i mogu smanjiti površinsku napetost alveola. Promjene starenja lamelarnih tijela mogu dovesti do smanjenja alveolarnih površinski aktivnih tvari. Površinski napon alveola je relativno visok, a sila retrakcije alveola je povećana, što rezultira skupljanjem alveola. Opažanja elektronskim mikroskopom su otkrila da su alveolarne epitelne ćelije n-tipa starijih miševa značajno promijenjene. Vidi se da su lamelarna tjelešca oslabljena, struktura zamućena, mitohondrije otečene i reducirane, grubi endoplazmatski retikulum je također smanjen, a bazalna membrana značajno zadebljana. Iako se slične strukturne promjene mogu vidjeti nakon primjene Polisaharida iz Cistanchea, stepen je značajno smanjen, što ukazuje da Polisaharid iz Cistanchea može značajno poboljšati ili odgoditi morfološke degenerativne promjene u lamelarnim tijelima epitelnih ćelija pluća i mitohondrijalnu degeneraciju kod starijih miševa. Većina ćelijske strukture je u osnovi netaknuta, što odlaže promjene ultrastrukture pluća. Rezultati ove studije sugeriraju da polisaharidi iz Cistanchea mogu smanjiti strukturne i funkcionalne promjene uzrokovane ozonom izazvanim oksidativnim oštećenjem pluća, odgoditi starenje pluća i pružiti eksperimentalne dokaze za primijenjena istraživanja.