Part 3:Distinct Roles For The Deacetylase Domain Of HDAC3 in The Hippocampus And Medial Prefrontal Cortex in The Formion And Extinction Of Memory

za vise information:ali.ma@wecistanche.com

Pls kliknite ovdje natrag na 2. dio

KlikniteCistanches i Cistanche da poboljšaju pamćenje

Priznanja

Posebna zahvala dr. Norbertu J. Fortinu na pomoći u statističkoj analizi.

Izvori finansiranja: Ovaj rad je podržan od strane Nacionalnog instituta za zloupotrebu droga i Nacionalnog instituta za mentalno zdravlje grantova (DA025922, DA036984, MH101491) MAW i NIDA i National Institute on Aging (NIA) grantove (F32 DA043998 i T32 AG000096-33) ya.

Reference

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Nuklearni receptor corepressor i histone deacetylase 3 guvern circadian metabolic physiology. Priroda. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Konsolidacija prepoznavanja objekata i kontekstasjećanjeuključuju različite regije sljepoočnog režnja. Nauči Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Expression of histone deacetylases in cellular compartments of the mouse brain and theeffects of ischemia. Transl Stroke Res. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Hippocampal focal nokaut CBP-a utiče na specifične modifikacije histona, dugoročno potetiranje, i dugoročnosjećanje. Neuropsihofarmakologija. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Inhibitor klase I HDAC RGFP963 pojačava učvršćivanje cued izumiranja straha. Nauči Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Distribucija histone deacetylases 1–11 u mozgu štakora. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Rekombinantni AAV virusni vektori pseudotipirani virusnim kapsidima iz serotipa 1, 2, i 5 prikazuju differential efficiency and cell tropism after delivery to different regions of the central nervous system. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Farmakologija, neuroanatomija i neurogenetika jedno-probnog prepoznavanja objekata kod glodara. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Jedno-probno prepoznavanje objekata kod štakora i miša: metodološka i teoretska pitanja. Behav Brain Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Jesu li dorsalni i ventralni hipokampus funkcionalno različite strukture? Neuron. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Enzimska aktivnost povezana sa II HDAC-ima klase zavisna je od multiproteinog kompleksa koji sadrži HDAC3 i SMRT/N-CoR. Mol Cell. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, See RE. Uloga dorsomedijalnog prefrontalnog korteksa, basolateralne amigdale, i leđnog hipokampusa u kontekstualnom ponovnom ulagu kokaina u štakore. Neuropsihofarmakologija. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Interakcije basolateralne amigdale sa leđnim hipokampusom i dorsomedijalnom prefrontalnom korteksom reguliraju ponovno unošenje kokaina u štakora izazvane drogom. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Histone acetylation: molekularna mnemonika na hromatin. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. SMRT i N-COR corepressori aktiviraju kofaktori za histone deacetylase 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Montaža kompleksa represije SMRT-histone deacetylase 3 zahtijeva kompleks prstena TCP-1. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Mnoge uloge histone deacetylases u razvoju i fiziologiji: implikacije za bolest i terapiju. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. HDAC inhibicija modulira hipokampus-ovisan dugoročnosjećanjeza lokaciju objekta na CBP-ovi ovisan način. Nauči Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Cell-type-specific inactivation of hippocampal CA1 remeti prepoznavanje objekata zavisnih od lokacije u mišu. Nauči Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Prefrontal cortex lezije diferencijalno ometaju sklonost kondicioniranog mjesta pojačanog kokainom, ali ne i uvjetovanu averziju okusa. Behav Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Prevodim histone kod. Nauka. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Moždano kolo i ponovno unošenje ponašanja koje traži kokain. Psihofarmakologija (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Rescuing umanjenje dugoročnog potenziacije kod fyn-deficient miša uvođenjem Fyn transgene. Proc Natl Acad Sci U S A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Chromatin modifikacije i njihova funkcija. Ćeliju. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Kadet JL. Transkripcioni odgovori na pojačavanje efekata kokaina u pacovskog hipokampusa i korteksa. Genes Brain Behav. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Context and Auditory Fear are Differentially Regulated by HDAC3 Activity in the Lateral and Basal Subnuclei of the Amygdala. Neuropsihofarmakologija. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Raspirivanje skrivene katalitičke aktivnosti klase kičmenjaka IIa histone deacetylases. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Infralimbni korteks regulira učvrsćivanje izumiranja nakon samoimenacije kokaina. Nauči Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Inaktivacija infralimbicnog, ali ne i prelimbnog korteksa umanjuje učvrsćivanje i dohvaćanje izumiranja straha. Nauči Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Odloženo sećanje na izumiranje straha kod štakora sa lezijama ventralnog medijalnog prefrontalnog korteksa. Nauči Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Epigenetski mehanizmi: česta tema u kralješcima i kralješcimasjećanjeFormaciju. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Promoter-Specific Effects ofDREADD Modulation on Hippocampal Synaptic Plasticity andFormacija memorije. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Modulacija modifikacije hromatina olakšava izumiranje sklonosti uvjetovanog mjesta izazvanog kokainom. Biol Psihijatrija. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP u nukleusu akumbens regulira histone acetylation izazvan kokainom i kritičan je za ponašanja povezana s kokainom. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. HDAC3-selektivni inhibitor pojačava izumiranje ponašanja koje traži kokain na uporan način. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiologija pavlovski strah do stanja. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos, ali ne i Cart (kokain i transkript reguliran amfetaminom) je preispričan nekoliko lijekova zlostavljanja: komparativna studija koja koristi kvantitativno polimeraznu lančanu reakciju u mozgu štakora. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 i hipoteza molekularne kočnice. Neurobiol Learn Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 je kritični negativni regulator oddugotrajno formiranje memorije. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Dorsalne, ali ne i ventralne, hipokampalne lezije ometaju regeneraciju mesta kokaina. Neuroreport. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Histone deacetylase 3 je epigenomska kočnica u alternativnoj aktivaciji makrofaga. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Perspektive o memoriji za prepoznavanje objekata nakon hipokampalnih oštećenja: lekcije iz studija kod štakora. Behav Brain Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Disocijacija u učincima lezija jezgre i ljuske na ponašanje apetita Pavlovian pristup i potenciacija uvjetovanog pojačanja i aktivnosti lokomotora D-amfetaminom. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Uloga histonske acetilacije u formiranju memorije i kognitivnih mana. Neuropsihofarmakologija. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histone deacetylases u sjećanju i spoznaji. Sci Signal. 2014; 7:12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Infralimbni prefrontalni korteks je odgovoran za inhibicije traženja kokaina kod ugašenih štakora. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Kola izumiranja zbog straha i ovisnosti se preklapaju u prefrontalnom korteksu. Nauči Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Novi matematički model za relativnu kvantifikaciju u realnom vremenu RT-PCR. Nucleic Acids Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. U realnom vremenu RT-PCR kvantifikacija faktora rasta nalika insulinu (IGF)-1, IGF-1 receptora, IGF-2, IGF-2 receptora, receptora insulina, receptora hormona rasta, IGF-vezanih proteina 1, 2 i 3 u vrsti goveda. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Uloga ventromedijalne prefrontalne kore u oporavku ugašenog straha. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Prefrontalni mehanizmi u izumiranju uvjetovanog straha. Biol Psihijatrija. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Usporedba stopa asocijativnih promjena tokom akvizicije i izumiranja. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 je negativan regulator formiranja memorije povezanog sa kokainom. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Aktivnost glukokortikoida povezana s membranom je neophodna za modulaciju dugoročne memorije putem modifikacije hromatina. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Farmakološka selektivnost unutar klase I Histone Deacetylases predviđa učinke na sinaptičku funkciju i spašavanje memorije. Neuropsihofarmakologija. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 uređuje transkripcioni program bitan za sinaptičku plastičnost i memoriju. Ćeliju. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Inaktivacija ventromedijalne prefrontalne kore smanjuje izražavanje uvjetovanog straha i umanjiva naknadno opoziv izumiranja. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Povećanje acetilacije histona u hipokampus-infralimbnoj mreži pojačava izumiranje straha. Biol Psihijatrija. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulacija dugoročne memorije za prepoznavanje objekata putem HDAC inhibicije. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Deacetylase-nezavisna funkcijaHDAC3 u transkripciji i metabolizmu zahtijeva jezgro nuklearnih receptora. Mol Cell. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Diskretne kinolinske kiseline lezije pacova prelimbic medijalni prefrontalni korteks utiču na kokain- i MK-801-, ali ne i na morfij- i amfetamin-induciranu nagradu i psihomotornu aktivaciju kako se mjeri sa mjestom preferencija uvjetovanje paradigme. Behav Brain Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Funkcionalna heterogenost pacovske medijalne prefrontalne kore: efekti diskretnih pododrednih lezija na uvjetovanu prednost mjesta izazvane drogom i sensitizaciju ponašanja. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Neuron specifična hromatin regulatorna podjenica BAF53b je neophodna za sinaptičku plastičnost i memoriju. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Neuron specifično preuređenje hromatina: karika koja nedostaje u epigenetičkim mehanizmima koji su u podlozi sinaptičke plastičnosti, memorije, i intelektualnih poremećaja invaliditeta. Neurofarmakologija. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF spašava BAF53b zavisnu sinaptičku plastičnost i memoriju vezanu za kokain u jezgri akumbens. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Memorija prepoznavanja objekata: neurobiološki mehanizmi kodiranja, ucjenjenja i dohvaćanja. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. N-CoR-HDAC3 kompleks jezgrenih receptora nuklearnih receptora inhibira JNK put kroz integralnu podjenit GPS2. Mol Cell. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Isticanja

- Blokiranje aktivnosti deacetilaze HDAC3 u dorsalnom hipokampusu poboljšalo je dugoročnu memoriju lokacije objekata, ali nije imalo utjecaja na formiranje memorije povezane s kokainom. Umanjujući HDAC3 deacetylase domenu u prelimbnom korteksu nije uticao na formiranje memorije povezane s kokainom. - Blokiranje aktivnosti deacetilaze HDAC3 u infralimbnom korteksu nije imalo utjecaja na izumiranje. - Poremećaj aktivnosti deacetilaze HDAC3 u dorsalnom hipokampusu rezultirao je olakšanim izumiranjem.

Figura 1.

Dominantna negativna tačka mutant virus (HDAC3(Y298H)-v5 izražava učinkovito u leđnom hipokampusu. (A) V5 epitop je dodat u point mutant virus. (B) Reprezentativna slika imunofluorescencije koja pokazuje izraz V5 epitopne tag (zelene) u leđnom hipokampusu (DH) nakon infuzije AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Nije opaženo mrljanje V5 sa AAV-EV kontrolnim virusom. Ćelije su bile kontraodbojne sa DAPI (plava). (C) V5 mRNA je značajno povećana u DH ofmice infused with AAV- HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n = 5, HDAC3(Y298H)-v5 n = 4. (D) HDAC3 je također značajno povećan u DH ofmice infused with AAV-HDAC(Y298H)-v5 u odnosu na AAV-EV kontrole, AV-EV n = 6, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. *p<>

Na 2.

Blokiranje HDAC3 aktivnosti u DH poboljšanu memoriju za lokaciju objekta (OLM), ali ne i za prepoznavanje objekata (ORM). (A) Miševi su 24 sata kasnije dobili obuku za subthreshold (3 min) u okruženju sa dva identična objekta i 24 sata kasnije primili test retencije u kojem se jedan objekat premješta na novu lokaciju. Shematski opisuje metode za B i C. (B) Miševi s obzirom na AAV-HDAC3(Y298H)-v5 pokazali su značajnu sklonost za lokaciju objekta romana 24h nakon treninga u odnosu na EV kontrole, AAV-EV n = 8, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. (C) Grupe se nisu razlikovale u ukupnom vremenu istraživanja dvaju objekata. (D) Miševi su 24 sata kasnije dobili obuku za subthreshold (3 min) u okruženju sa dva identična objekta i 24 sata kasnije primili test retencije u kojem je jedan objekt zamijenjen romanom jedan (ORM), AAV-EV n = 9, HDAC3(Y298H)-v5 n = 7. Shematski opisuje metode za E i F. (E) Ni AAV-EV kontrola ni AAV-HDAC3(Y298H)-v5 miševi nisu izlagali značajne preferencije za romanski objekt. (F) Grupe se nisu razlikovale u ukupnom vremenu istraživanja dvaju objekata. *p<>

Na 3.

Blokiranje AKTIVNOSTI HDAC3 u dorsalnom hipokampusu nema efekta na formiranje CPP memorije izazvane kokainom. (A) Shema kokain-CPP procedura. (B) Cocaine- CPP izraz indiciran mean CPP score (vrijeme provedeno u kokainu upareno (CS+) minus saline-paired (CS−) ± s.e.m). U dozi za regenerator kokaina od 5 mg/kg, AAV-HDAC3(Y298H)- v5 miševi su tokom post-testa izlagali sličan CPP rezultat EV kontrolama, AAV-EV n = 15, HDAC3(Y298H)-v5 n = 15.

Na 4.

Fokalno homozigozno brisanje gena Hdac3 u leđnom hipokampu nema efekta na formiranje CPP memorije izazvane kokainom. (A) Shema kokain-CPP procedura. (B) Cocaine-CPP izraz indiciran sa mean CPP score (vrijeme provedeno u kokainu upareno (CS +) minus saline-paired (CS−) ± s.e.m). Pri 5 mg/kg doze za regenerator kokaina, Hdac3flox/flox miševi su tokom post-testa izlagali slične CPP rezultate hdac3+/+ kontrolama. (C) Reprezentativna immunofluorescence slika koja pokazuje izraz odHDAC3 (zelena) u leđnom hipokampusu nakon infuzije AAAV2.1 Cre infused u Hdac3+/+ i Hdac3flox/flox miševi. Ćelije su bile kontraodbojne sa DAPI (plava). (D) Kvantifikacija immunostaininga je potvrdila da je HDAC3 značajno smanjen kod Hdac3flox/flox miša u odnosu na Hdac3+/+ kontrole, Hdac3+/+ n = 12, Hdac3flox/flox n = 11. *p<>

Na 5.

Blokiranje AKTIVNOSTI HDAC3 u prelimbnom korteksu (PrL) nema efekta na formiranje CPP memorije izazvane kokainom. (A) Shema kokain-CPP procedura. (B) Cocaine- CPP izraz indiciran mean CPP score (vrijeme provedeno u kokainu upareno (CS+) minus saline-paired (CS−) ± s.e.m). Pri 5 mg/kg doze za regenerator kokaina, AAV-HDAC3(Y298H)- v5 miševi su tokom post-testa izlagali sličan CPP rezultat EV kontrolama, AAV-EV n = 12, HDAC3(Y298H)-v5 n = 12. (C) Reprezentativna immunofluorescence slika koja pokazuje izraz V5 epitop tag (zelena) nakon infuzije AAV-HDAC3(Y298H)-v5 ciljanje PrL. Nije opaženo mrljanje V5 sa AAV-EV kontrolnim virusom. Ćelije su bile kontraodbojne sa DAPI (plavim) i neuroni su bili kontrainstirali NeuroTrace (crveno). V5 izraz je uglavnom bio ograničen na prelimbicnu regiju medijalnog prefrontalnog korteksa. (D) Ciljana virusna infuzija u PRL. Zasjenjene regije mišje atlas slike ilustriraju reprezentativni produžek virusne infuzije.

Na 6.

Blokiranje AKTIVNOSTI HDAC3 u infralimbnom korteksu (IL) nema efekta na izumiranje CPP memorije izazvane kokainom. (A) Shema kokain-CPP procedura. (B) Cocaine- CPP izraz indiciran mean CPP score (vrijeme provedeno u kokainu upareno (CS+) minus saline-paired (CS−) ± s.e.m). Životinje su u početku trenirane na 20 mg/kg kokaina. Naknadno, životinje su primale intra-IL AAV-EV ili AAV-HDAC3(Y298H)-v5 virusne infuzije, a ispitivana je memorija izumiranja. AAV-HDAC3(Y298H)-v5 miševi su izlagali sličan CPP rezultat EV kontrolama tokom post-testova 2–5, AAV-EV n = 17, HDAC3(Y298H)- v5 n = 16. (C) Reprezentativna immunofluorescence slika koja pokazuje izraz V5 epitope tag (zelena) nakon infuzije AAV-HDAC3(Y298H)-v5 ciljanje IL. Nije opaženo mrljanje V5 sa AAV-EV kontrolnim virusom. Ćelije su bile kontraodbojne sa DAPI (plavim) i neuroni su bili kontrainstirali NeuroTrace (crveno). V5 izraz je uglavnom bio ograničen na infralimbičnu regiju medijalnog prefrontalnog korteksa. (D) Ciljana virusna infuzija u IL. Zasjenjene regije slika atlasa miša ilustriraju reprezentativni obim virusne infuzije.