Molekularni mehanizmi anti-melanogenog gedunina izvedeni iz drveta Neem
Mar 28, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† i Sung-Eun Lee 1,2,*,†
sažetak:Melanogeneza predstavlja niz procesa koji proizvode melanin, zaštitni pigment kože (protiv ultraljubičastih zraka) i određuje boju ljudske kože. Hemikalije koje smanjuju proizvodnju melanina oduvijek su bile tražene na kozmetičkom tržištu zbog interesa za njegu kože, kao što je izbjeljivanje. Glavni mehanizam za inhibiciju proizvodnje melanina je inhibicija tirozinaze (TYR), ključnog enzima za melanogenezu. Ovdje smo procijenili originalni (Ged), reprezentativni limonoid, zbog njegovog djelovanja protiv melanogeneze. Proizvodnja melanina in vitro stimulirana je alfa-melanocit-stimulirajućim hormonom (-MSH) u B16F10 ćelijama melanoma miša. Ged je smanjio -MSH-stimuliranu proizvodnju melanina, inhibirajući aktivnost TYR i količinu proteina. Ovaj rezultat smo potvrdili in vivo na modelu zebrice za melanogenezu. Nije bilo znakova toksičnosti i malformacije zebrafishembriona tokom razvoja u svim tretiranim koncentracijama. Ged je smanjio broj proizvedenih pigmentnih tačaka embriona zebrice i sadržaj melanina u embrionima. Visoko aktivna koncentracija Ged-a (100 µM) bila je mnogo niža od pozitivne kontrole, kojične kiseline (8 mM). Stoga bi Ged mogao biti fascinantan kandidat za reagense protiv melanogeneze.
Ključne riječi: MITF; transkripcijski faktor povezan s mikroftalmijom; TYR; tirozinaza; DQ; dopakinon;TRP-1; protein 1 povezan sa tirozinazom; TRP-2; protein 2 vezan za tirozinazu; MC1R; receptor melanokortina 1; -MSH; -melanocit-stimulirajući hormon; ACTH; adrenokortikotropni hormon; ASP; agoutisignaling protein; cAMP; ciklički adenozin monofosfat; CREB; cAMP element odgovora
1. Uvod
Melanin se sintetiše u melanosomu, lizozomskim organelama melanocita. U melanozomu se melanin proizvodi u dva pigmenta, eumelaninu i feomelaninu, koji predstavljaju smeđe-crnu i crveno-žutu boju [1]. Sinteza ovih melaninpigmenata počinje od prekursora, L-tirozina, reakcijom oksidacije L-tirozina u spoj pod nazivom dopakinon (DQ) i L-DOPA [2]. U ovom koraku oksidacije, tirozinaza (TYR) djeluje kao enzim koji ograničava brzinu cjelokupnog puta biosinteze melanina [2,3]. TRP-1i TRP-2, blisko povezani sa proteinima melanogeneze, kataliziraju put biosinteze eumelanina i stabiliziraju i indukuju aktivnost TYR [1]. Proces proizvodnje melaninpigmenata (nazvan melanogeneza) odvija se u melanosomu melanocita, mjestu sinteze i skladištenja formelanina [4]. U signalnom putu melanogeneze, melanokortin1 receptor (MC1R) je član receptora vezanih za G-protein. MCIR je početna tačka za signalizaciju melanogeneze i aktiviraju ga MC1R agonisti kao što su -melanocit-stimulirajući hormon (-MSH), adrenokortikotropni hormon (ACTH) i signalni protein agouti (ASP) [1,2]. Aktivacija -MSH-MC1R signalnog puta povećava koncentraciju cikličkog adenozinmonofosfata (cAMP) i fosforilira cAMP element odgovora (CREB). Fosforilirani CREB inducira nivo proteina transkripcionog faktora povezanog sa mikroftalmijom (MITF), faktora transkripcije koji reguliše gene povezane sa sintezom melanina, TYR, proteina povezanog sa tirozinazom-1 (TRP-1) i proteina povezanog sa tirozinazom -2 (TRP-2) vezivanjem M-kutije ovih gena [1,5,6]. Među pet melanokortinskih receptora, MC1R ima najzastupljenije melanocite. On prvenstveno reguliše proizvodnju eumelanina (crno-smeđi pigment) aktiviranjem MC1R kada se agonisti ovog receptora, kao što su a-MSH i ACTH, prebace na ovaj receptor [2,4,7].
Iako postoje razlike između sisara i riba, zebrice imaju ekstrakopiju MC5R i MC3R, koju riba napuhač ne posjeduje [7], a ovaj signalni put još uvijek postoji kod zebrica i radi upravo kao i u melanocitima sisara [7]. Štaviše, broj studija o inhibiciji stvaranja pigmenta melanina se povećao zbog njegovih istraživačkih prednosti, kao što su brzi razvoj u ranom stadiju embrija i lakoća promatranja [8–11]. U ovim fenomenima, mnoge prethodne studije su otkrile da inhibicija ovog signalnog puta smanjuje proizvodnju melanina i pronašlo nekoliko inhibitora, uključujući bisabolol-Angelon, 4-hidroksi-3-metoksi cinamaldehid i difenil-metilen-hidrazin karbotiamin [12 –14].
Gedunin (Ged), dobro poznati inhibitor proteina toplotnog šoka 90, je limonoid, koji se nalazi u rodovima biljke Meliaceae. Ovaj limonoid je bogat prvenstveno u epikarpu plodova mladog indijskog drveta neema (Azadirachta indica) i ima različite biološke aktivnosti, uključujući antikancerogeno, antimalarijsko, protuupalno, antidijabetičko, antialergijsko, insekticidno, herbicidno i antifungalno [15–18]. Nema izvještaja o mehanizmu antimelanogenog efekta Geda.
Kao medicinski lijek ili kozmetički lijek kandidat za liječenje bolesti povezanih s melaninom ili promjena boje kože, Ged bi mogao imati prednosti zbog svojih sigurnih, prirodnih biljnih svojstava [19]. Antimelanogeni učinak Ged-a procijenjen je in vitro i in vivo korištenjem B16F10 ćelija melanoma miša i embriona zebrice, kako bi se pronašao odgovarajući kandidat za bjelaču, jedan od najvećih dijelova komercijalnog kozmetičkog tržišta. Istovremeno, preko zebrice, akutna toksičnost Test je također obavljen kako bi se pokazalo kako Ged može utjecati na životinje.
2. Materijal i metode
2.1. Hemikalije i reagensi
Ged je kupljen od Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, SAD). Stimulator melanogeneze, -MSH, antimelanogeno jedinjenje i kojična kiselina su kupljeni od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD). Svi ostali reagensi su bili viši od molekularne biologije.
2.2. Cell Culture
Ćelijska linija mišjeg melanoma-karcinoma, B16F10, dobijena je iz American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, SAD) i kultivirana sa 10 posto fetalnog goveđeg seruma (v/v) i penicilinom dostavljenim Dulbecco modificiranim Eagleovim podlogama (GE Healthcare, Chicago, IL, USA) u vlažnoj atmosferi sa 5 posto CO2. Ćelije su kultivisane dok konfluencija nije dostigla 80 posto i podijeljena tri puta sedmično sa omjerom dijeljenja 1:8. Ćelije su posmatrane svakih 12 h i provjerene morfološke promjene. Prolazni broj korištenih ćelija bio je mali.
2.3. Ispitivanje vitalnosti ćelija
Za procjenu proliferativnog efekta Ged-a na ćelijsku liniju mišjeg melanoma B16F10, MTS test je izveden prema ranije objavljenom protokolu [20] korištenjem kompleta CellTiter96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay (Promega, Madison, WI, SAD). Ukratko, 1 × 103 ćelije su posađene u svaku jažicu ploče 96- i inkubirane 24 h radi oporavka. Nakon inkubacije, Ged je tretiran različitim koncentracijama: 0, 3.12, 6.25, 12.5 25, 50 i 75 µM. Nakon 48 h, 20 µL MTS rastvora za analizu je dodano u svaki bunar koji sadrži 100- µL medija sa Ged-om i bez Ged-a. Nakon dodatne inkubacije od 4 h, mjerena je apsorpcija na 490 nm pomoću Multiskan GO spektrofotometra (ThermoScientific, Waltham, MA, USA). Podaci o apsorbanciji su normalizovani sa kontrolom i predstavljeni kao procenat inhibicije.
2.4. Određivanje sadržaja melanina
Ekstracelularni i intracelularni sadržaj melanina određen je prema modificiranoj metodi koja je ranije objavljena [21]. -MSH (200 nM) prethodno tretirane ćelije melanoma inkubirane su 72 h sa i bez kojične kiseline (200 µM) i Ged-a (25 i 50 µM). Nakon inkubacije, sakupljena je podloga za kulturu bez fenol crvene boje, a kultivisane ćelije su sakupljene RIPA puferom za lizu. Sakupljene ćelije su centrifugirane na 4 ◦C, 13, 000 rpm tokom 15 minuta i pelete su rastvorene u 1 M NaOH, 10 procenata DMSO rastvora na 95 ◦C tokom 2 h. Apsorbancija sakupljenog medija i otopljenog melanina mjerena je na 470 nm pomoću spektrofotometra. Svi uzorci su normalizirani uz njihovu koncentraciju proteina koja je određena prema BCA metodi.
2.5. Intracelularni test aktivnosti tirozinaze
Aktivnost ćelijske tirozinaze je određena merenjem brzine oksidacije L-dihidroksifenilalanina (L-DOPA) kao što je prethodno objavljeno, uz male modifikacije [22]. B16F10 ćelije melanoma miša su prethodno tretirane sa 200 nM -MSH tokom 1 h, nakon čega je usledio tretman µM20µ00. kojične kiseline, sa i bez Ged-a (25 i 50 µM), i inkubirano 72 h. Nakon inkubacije, ćelije su sakupljene puferom za lizu koji je sadržavao inhibitor proteinaze, a uzorak je centrifugiran na 13,000×g, 4 ◦C 15 min. Supernatant je prebačen u novu epruvetu. Svaki uzorak (20 µL) i 80 µL 40 mM L-DOPA pomiješani su u ploči sa 96- bunarčićima i inkubirani na 37 ◦C 2 h. Apsorpcija na 475 nm pomoću oksidiranog L-DOPA određena je pomoću čitača mikroploče. Vrijednost apsorpcije je normalizirana koncentracijom proteina svakog uzorka.
Prednost ekstrakta Cistanche: inhibira ekspresiju tirozinaze.
2.6. Izolacija RNK i qRT-PCR
Totalna izolacija RNK i qRT-PCR urađeni su prema metodi koju je prethodno opisao [18]. Ukupna RNK je nakratko ekstrahirana iz svakog uzorka pomoću Trizol reagensa (Ambion, Austin, TX, USA). Koncentracija ekstrahirane ukupne RNK određena je apsorbancijom na 260 nm, a kvalitet ukupne RNK provjeren je omjerom apsorbancije od 260:280 i 260:230 nm pomoću čitača mikroploča Multiskan GO (Thermo Scientific). Ukupna RNK (5 µg) je sintetizirana u cDNK sa Maxima kompletom za sintezu prvog lanca cDNK (Thermo Scientific) i sintetizirana cDNK. Nivoi ekspresije mRNA Mitf, Tyr, Trp-1 i Trp-2 određeni su korištenjem Luna Universal qPCR Master Mixa (New England Biolabs, Ipswich, MA, USA) i QuantStudio 3 PCR instrumenta u realnom vremenu ( Applied Biosystems, Foster City, Kalifornija, SAD) prema protokolu instruktora. Nivo ekspresije gena je normalizovan gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenazom (GAPDH).
2.7. Immunoblot analiza
Imunoblot analiza je obavljena prema prethodno opisanim metodama [23]. Proteini B16f10 ćelija su sakupljeni korišćenjem Ceti liznog pufera (Translab, Daejeon, Korea), a koncentracija je određena Pierce BCA proteinskim kitom (Thermo Scientific). Jednaka količina proteina (30 µg) svakog uzorka stavljena je na natrijumdodecil sulfat-poliakrilamid gel i podvrgnuta elektroforezi. Nakon odvajanja, proteini su prebačeni na nitroceluloznu membranu, a membrana je blokirana u 10% nemasnom mlečnom rastvoru 2 h. Blokirane membrane su inkubirane sa primarnim antitelom preko noći na 4 ◦C, nakon čega je usledila druga inkubacija sa sekundarnim antitelom na 26 ◦C tokom 2 h. Primarna i sekundarna antitijela su razrijeđena u omjeru 1:1000 i 1:3000, respektivno. Na kraju, blotirane membrane su dokumentovane upotrebom ChemiDoc-a (Bio-Rad, Hercules, Kalifornija, SAD) sa ECL reagensom (SuperSignal, Thermo Scientific). Primarna i sekundarna antitijela su kupljena od Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, SAD).
2.8. Test embriona ribe zebrice
Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >80 posto stope gnojidbe i odabrani su i korišteni za eksperiment. Dvanaest zdravih embriona u svakoj tretiranoj grupi nalazilo se u svakoj jažici 96- ploče sa i bez Ged (25, 50, 75 i 100 µM) i kojične kiseline (8 mM) u mediju E3 u fazi štita. 24 h nakon oplodnje (h/pf), embrioni su dehorionisani, a abnormalnost je provjeravana svaka 24 h do 72 h/pf. Fenotip embriona je fotografisan u bočnom i dorzalnom pogledu kako bi se uporedile razlike između grupa korišćenjem uspravnog mikroskopa BX53 sa DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, SAD). Nakon slikanja, embrioni su homogenizovani puferom Ceti lysis (TransLab) i izvršeno je određivanje koncentracije melanina koja je bila jednaka određivanju sadržaja melanina u ćelijama B16F10.
2.9. Statistička analiza
Sve statističke analize predstavljene u ovoj studiji izvedene su korištenjem GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Jednosmjerna ANOVA sa Tukeyjevim testom korištena je za višestruka poređenja. Svi podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost ± standardne devijacije. Značajne razlike su smatrane statistički značajnim na p <>
3. Rezultati
3.1. Citotoksični efekat piperlongumina u B16F10 ćelijama
Prije istraživanja antimelanogenog efekta Ged-a, izvršili smo test održivosti u ćelijskoj liniji B16F10 kako bismo postavili raspon doze u ovoj studiji. U rasponu koncentracija od 3,12 do 50 µM, ćelije nisu pokazale nikakav inhibitorni efekat na rast, a njihova relativna proliferacija bila je od 91,0 posto do 118,7 posto (Slika 1). Nasuprot tome, iako je postojao nostatistički značaj, grupe tretirane sa 75 µM imale su blago inhibiran rast (89,3 posto; Slika 1). Stoga je najviša koncentracija postavljena na 50 µM u preostalim eksperimentima sa ćelijskom linijom.
Slika 1. Citotoksičnost gedunina (Ged) u B16F10 ćelijama
3.2. Gedunin inhibira proizvodnju melanina i aktivnost intracelularne tirozinaze u B16F10 ćelijama mišjeg melanoma
Procijenili smo antimelanogeni učinak Ged-a u B16F10 ćelijama melanoma miša. Agonist MC1R, -MSH, efikasno je inducirao intracelularnu i ekstracelularnu proizvodnju melanina (Slika 2a–c). Boja sakupljenog medija bila je tamna sa -MSH (slika 2a). Boja je izblijedjela dodatkom Geda, a učinak je ovisio o dozi (slika 2a). Kao rezultat ukupnog sadržaja melanina, -MSH je povećao proizvodnju melanina u melanocitima približno sedam puta više od kontrolne grupe i stimulirao smanjenje melanina dodavanjem kojične kiseline, dobro poznate pozitivne kontrole u melanogenezi (slika 2d). Ged je također skratio proizvodnju melanina u melanocitima u svim koncentracijama testiranim u ovoj studiji (slika 2d). Štaviše, u testu aktivnosti tirozinaze, Ged je pokazao snažan inhibicijski efekat na enzim koji ograničava brzinu, tirozinazu, u melanogenezi (slika 2e). Relativna aktivnost tirozinaze u grupi tretiranoj sa 50 µM Ged-om smanjena je za 20 procenata i 12,24 procenata u poređenju sa kontrolnom i a-MSH stimulisanom grupom, respektivno.
Slika 2. Anti-melanogeni efekat originalnog (Ged) na proizvodnju melanina stimulisanu alfa-melanocit-stimulišućim hormonom (-MSH) u B16F10 ćelijama.
3.3. Gedunin smanjuje ekspresiju gena izazvanu melanogenezom izazvanom -MSH
-MSH (200nM) indukovani nivo mRNA Mitf; faktor transkripcije melanogeneze; i ciljni geni Tyr, Trp-1 i Trp-2 (Slika 3). Tretman Ged-om smanjio je nivo mRNA svih gena na način ovisan o dozi pri koncentraciji od 25 i 50 µM (slika 3). U poređenju sa pozitivnom kontrolom, kojičnom kiselinom (200 µM), Ged je bio efikasniji u smanjenju mRNA nivo gena povezanih s melanogenezom u B16F10 ćelijama. Nadalje, nivo Mitfand Tyr se smanjio za 0.10- i 026- puta niže od ćelija indukovanih -MSH, respektivno, pri koncentraciji od 50 µM (Slika 3a,b). Niže regulisani nivoi mRNA ovih gena usporili su nivo Tyr i smanjili količinu proizvodnje TYR melanina manje od kontrolne grupe.
Slika 3. Učinak redukcije na gene povezane s melanogenezom.
3.4. Gedunin je smanjio iznos TYR i TYR-1
TYR igra ključnu ulogu u melanogenezi, a nivo proteina ovog enzima direktno utiče na melanogenezu. Pokušali smo da potvrdimo promjenu količine proteina, TYR, uzrokovanu smanjenim nivoom mRNA kroz imunoblot analizu. TYR je bio primjetno smanjen u poređenju sa kontrolom, a -MSH je liječen ovisno o dozi (Slika 4a). Štaviše, TRP-1, esencijalni faktor transkripcije TYR-a, blago je smanjen (Slika 4a). Rezultati su bili očigledniji kada je traka svakog proteina bila normalizovana proteinom za čuvanje, GAPDH (slika 4b,c).
Slika 4. Vestern blotiranje alfa-melanocit-stimulirajućeg hormona (-MSH) indukovanih B16F10 ćelija uz pravi tretman.
3.5. Toksičnost Gedunina protiv Zebrafish u ranoj fazi razvoja
Toksikološka procjena Ged-a na zebrici u ranoj fazi razvoja obavljena je prije evaluacije antimelanogenog testa Ged-a in vivo. Morfološka abnormalnost embriona zebrice nije uočena ni u jednoj tretiranoj koncentraciji Ged (Slika 5a). Ispitivane koncentracije Ged-a, 25, 50, 75 i 100 µM, stopa preživljavanja grupa tretiranih Ged-om, nisu imale značajne razlike u 72 h hemijsko tretiranog perioda (Slika 5b).
Slika 5. Toksičnost originalne (Ged) na zebricu u ranoj fazi razvoja.
3.6. Gedunin je smanjio sadržaj melanina u embrionima Zebrafish
Budući da Ged nema razvojnu toksičnost u embrionima zebrice, ispitali smo antimelanogeni učinak u nizu koncentracija Ged-a, 25, 50, 75 i 100 µM. U teoptičkom promatranju, provjerili smo tačke pigmentne zebrice; pogled sa strane na embrione zebrice prikazan je na slici 5a. Kojična kiselina ima inhibicijski efekat na proizvodnju pigmenta embriona zebrice. Embrioni zebrice tretirani gelom također su imali manje pigmentnih tačaka na glavi (slika 6a). Osim toga, ukupni sadržaj melanina ekstrahiran iz cijelog tijela embriona zebrice smanjio se nakon izlaganja Ged-u u trajanju od 72 h u grupama kojične kiseline, pozitivne kontrole i grupe tretirane Ged-om (Slika 6b,c)
Slika 6. Uticaj originalnog na proizvodnju melanina in vivo.
4. Diskusija
U ovoj studiji procijenjena su inhibicijska svojstva Ged-a u odnosu na proizvodnju melanina. Na osnovu naših nalaza, inhibiciona sposobnost Ged-a bila je približno 11.98-puta veća od one kod kojične kiseline (Slika 2), a koncentracija Ged-a ( 50 µM) bila je niža nego kod kojične kiseline (200 µM), pozitivna kontrola. Usklađen je sa oslabljenom aktivnošću intracelularne tirozinaze, enzima koji pretvara L-Dopa u DQ, primarni prekursor eumelanina i feomelanina. Smanjena aktivnost Tyr dovodi do usporavanja cjelokupnog procesa proizvodnje melanina i manjka oba krajnja proizvoda, eumelanina i feomelanina [1–3]. Nivoi transkripta i TYR regulisani su nizom transkripcionih faktora: Mitf, Trp-1 i Trp-2 [1,2]. Smanjena količina proteina i nivoa mRNA znači da je aktivirana MC1R preko -MSH–MC1R–PKA–CREB signalne ose od strane -MSH smanjena tretmanom Ged u koncentraciji od 25 i 50 µM, ovisno o dozi iu kvantitativnom PCR-u i Western blotingu. Kao što je prethodno opisano, smanjenje količine MITF-a dovodi do nedostatka Tyr, Trp-1 i Trp-2 zbog manjeg vezivanja za promotorsku regiju ovih gena [25–27]. Smanjenje ovih faktora transkripcije dovodi TYR do nižeg nivoa i inhibira proizvodnju pigmenta melanina u B16F10 ćelijama. Pored toga, trenutni rezultati pokazuju TYR inhibitorni efekat Ged-a, još jedne kritične tačke proizvodnje melanina u melanocitu. Ged je također pokazao inhibicijski učinak na proizvodnju pigmenta tokom ranog stadijuma razvoja zebrice u in vitro i in vivo modelima. Naši rezultati su pokazali da tretman sa Ged-om u trajanju od 72 h značajno smanjuje embriopigmentaciju zebrice. Ukupni sadržaj melanina i nivoi mRNA srodnih gena smanjeni su uz prisustvo Ged-a, a tendencija ovih rezultata snažno podržava in vitro antimelanogenezu svojstvo Ged-a.
Štaviše, inhibicijska sposobnost Ged-a bila je mnogo jača od kojične kiseline, jednog od najčešće poznatih spojeva kao reagensa za izbjeljivanje u kozmetičkoj industriji [6,28]. Koncentracija na kojoj je Ged djelovao bila je relativno niža od kojične kiseline. Osim toga, prethodni izvještaj je pokazao da drugi uobičajeni reagens za izbjeljivanje, arbutin, ima sličan antimelanogeni učinak kao kojična kiselina [2]. Stoga, Ged treba smatrati reagensom za izbjeljivanje u zamjeni za trenutno korištenu arbutin ili kojičnu kiselinu, te kao lijek protiv melanoma s obzirom na njegova obećavajuća svojstva.
Antimelanogena svojstva Ged-a su sugerisana ranije [29,30], ali ove studije nisu bile fokusirane na specifične mehanizme efekta, već su jednostavno posmatrale promenu citotoksičnih efekata i količine proizvodnje melanina in vitro, dok su antiproliferativna aktivnost i inhibitorni efekti na Istaknuta je ekspresija HSP 90 [31–33]. Prijavljena je mogućnost Ged-a kao anti-melanogenetičkog agensa; međutim, ove studije nisu bile fokusirane na specifične mehanizme efekta, već su jednostavno posmatrale promjenu citotoksičnih efekata i količine proizvodnje melanina in vitro. Pokušali smo da odredimo mehanizam na ćelijskom nivou potvrđujući nivo mRNA i količinu proteina gena povezanih sa proizvodnjom melanina. Zajedno s prethodnim izvještajima, ova studija je pokazala novu perspektivu Gedasa kao komponente kozmetičkih sastojaka za dvije prednosti, izvanredan antikancer i anti-melanogenezu, koje se mogu primijeniti i na melanom izazvan UV zračenjem i na akumulaciju pigmenta, posebno, u isto vrijeme.
cistanche ekstrakt u prahu: čisti slobodni radikali
5. Zaključci
U zaključku, svi ovi rezultati su pokazali da se novo jedinjenje, Ged, može koristiti kao reagens za adepigmentaciju za biosintezu melanina, koji je skratio nizvodne proteine TYR, TRP-1 i TRP-2 za smanjenu količinu u poređenju sa glavnim regulacijski protein, MITF, u in vitro i in vivo sistemima modela zebrice.
cistanche tablete