Egzozomi izvedeni iz mezenhimalnih matičnih/stromalnih ćelija 1. dio
May 30, 2022
Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija
sažetak:Egzozomi su vezikule nano veličine koje služe kao posrednici za komunikaciju između stanice. Sa svojim jedinstvenim sastavima nukleinskih kiselina, proteina i lipida koji odražavaju karakteristike stanica proizvođača, egzosomi se mogu koristiti kao terapeutici bez ćelija. Među egzosomima koji potiču iz različitog ćelijskog porijekla, egzosomi izvedeni iz mezenhimalnih matičnih stanica (MSC-egzozomi) su dobili veliku pažnju zbog svojih imunomodulatornih i regenerativnih funkcija. Zaista, mnoge studije su pokazale protuupalne, anti-stareće i zacjeljivanje rana efekte MSC-egzosoma u različitim in vitro i in vivo modelima. Osim toga, nedavni napredak u području biologije egzosoma omogućio je razvoj specifičnih smjernica i metoda kontrole kvaliteta, što će u konačnici dovesti do kliničke primjene egzosoma. Ovaj pregled naglašava nedavne studije koje istražuju terapeutski potencijal MSC egzosoma i relevantan način djelovanja za kožne bolesti, kao i mjere kontrole kvaliteta potrebne za razvoj terapeutika izvedenih iz egzosoma.
Molimo kliknite ovdje da saznate više
Ključne riječi:protiv starenja; protiv upala; rast kose; imunomodulacija; mezenhimske matične ćelije (MSC); MSC-egzozomi; kožna barijera; terapeutika; regenerativna estetika; zarastanje rana
1. Uvod
Otkriće ekstracelularnih vezikula (EVs) ili egzozoma seže u 1940-te, a ove male vezikule su dugo ignorisane kao ćelijske kante za smeće [1-3]. Počeli su privlačiti značajnu pažnju tek sredinom-2000 nakon ponovnog otkrića egzosoma kao glasnika za komunikaciju između ćelije [1,4-6]. Nije pretjerano reći da smo u osvit ere egzosoma. Bilo je više od tri hiljade publikacija o električnim vozilima ili egzosomima i srodnim temama u PubMedu godišnje u 2018. i 2019. godini[1].ekstrakt cistanche tubulosaTrka ka komercijalizaciji terapija zasnovanih na egzozomima je već počela [7-10]. Četiri najveće egzosomske start-up kompanije, Codiak Biosciences, Exosome Diagnostics, Evox Therapeutics i ExoCoBio, dobile su oko 386,2 miliona dolara od investitora [8]. Osim toga, sklopljeno je nekoliko velikih poslova između start-up-ova egzosoma i velikih farmaceutskih kompanija [10].
Egzozomi su ekstracelularne vezikule nano veličine (EV) koje oslobađaju skoro sve eukariotske ćelije [11]. Općenito, njihova veličina se kreće od 30 nM do 200 nM. Dvije druge subpopulacije EV-a su mikrovezikule (100-1000 nM) i apoptotska tijela (500-2000 nM)[12-14]. Egzozomi izvedeni iz matičnih ćelija imaju atraktivan terapeutski potencijal u nekoliko aspekata [15]. Utvrđeno je da je način djelovanja (MoA) za terapijske efekte matičnih ćelija uglavnom parakrini efekti posredovani sekretiranim faktorima iz matičnih ćelija [6,16]. Među dijelovima sekretoma matičnih ćelija, prijavljeno je da egzosomi igraju glavnu ulogu u parakrinim efektima [16-18]. Mezenhimalne matične/stromalne ćelije (MSC) su najpoželjniji izvor terapeutskih egzosoma budući da se čini da su sami MSC sigurni na osnovu ogromne količine kliničkih podataka u poslednjoj deceniji [15]. Osim toga, egzosomi izvedeni iz MSC-a (MSC-egzozomi) mogu se sterilizirati filtracijom i proizvesti kao proizvod koji se prodaje, dok sami MSC ne mogu. Štaviše, smatra se da su MSC-egzozomi oslobođeni sigurnosnih pitanja u kontekstu ćelijske terapije, kao što je tumorogeni potencijal putem ćelijske administracije [19,20].cistanche tubulosa recenzijeZaista, MSC-egzozomi su primijenjeni kao alternativa MSC-ima za nove terapijske strategije bez ćelija u različitim modelima bolesti uključujući neurološke, kardiovaskularne, imunološke, bubrežne, mišićno-koštane, jetrene, respiratorne, očne i kožne bolesti, kao i rak. [15,17,19,21,22].
2. MSC kao izvori egzozoma
MSC imaju i sposobnost samoobnavljanja (tj. mogu sami generirati više MSC) i potencijal diferencijacije (u druge tipove ćelija) [23]. MSC se mogu dobiti iz niza tkiva i telesnih tečnosti, kao što su masno tkivo, koštana srž (BM), zubna pulpa, sinovijalna tečnost (SF), amnionska tečnost (AF), placenta (PL), pupčana vrpca (UC), krv iz pupčane vrpce (UCB) i Whartonov žele (WJ) [24]. MSC također mogu biti izvedeni iz embrionalnih matičnih ćelija (ESC) ili indukovanih pluripotentnih matičnih ćelija (iPSC) [25-27]. MSC, u zavisnosti od svog porekla, mogu da se diferenciraju u različite tipove ćelija uključujući adipocite, hondrocite, osteoblaste i miocite [28]. Osim toga, MSC imaju imunomodulatorna svojstva za regulaciju različitih ćelija uključenih u imunološke odgovore, kao što su dendritske ćelije (DC), limfociti, makrofagi, mastociti, neutrofili i prirodne ćelije ubice (NK) [24]. Na tim osnovama, MSC-i su u posljednjih nekoliko desetljeća istaknuti kao moćni ćelijski terapeutici za različite bolesti.
Cistanche cam protiv starenja
U prijavljenim pretkliničkim studijama MSC-egzosoma, MSC-ovi su izolovani iz različitih tkiva/ćelija sljedećim redoslijedom: BM (51 posto), pupčano/platcentno tkivo (23 posto), masno tkivo (13 posto), izvedeno iz ESC-a ili iPSC-a. (8 posto), i drugi (5 posto)[29]. Budući da karakteristike i funkcionalnost MSC-a zavise od njihovog porijekla, očigledno je da one egzozoma MSC-a variraju u zavisnosti od porijekla MSC-a. Međutim, komparativne studije MSC-egzosoma prema njihovom tkivnom porijeklu su još uvijek ograničene, a samo nekoliko izvještaja upoređivalo je različite MSC-egzozome u okviru iste studije (Tabela 1)[30-35]:(1)ljudsko masno tkivo- izvedeni MSC(ASC)-egzozomi pokazali su veću aktivnost neprilizina, enzima koji razgrađuje amiloid (A)peptid u mozgu, zatim MSC (BM-MSC)-egzozoma ljudske koštane srži, što ukazuje na terapijski značaj ASC-egzosoma u Alchajmerovoj bolesti [30];(2) ljudski BM-MSC-EVs i Wharton'sjelly MSC(WJ-MSC)-EVs smanjili su proliferaciju stanica i inducirali apoptozu, dok su ASC-EVs povećali proliferaciju stanica i nisu imali apoptotski učinak u U87MG glioblastomskim ćelijama [31] ]. Međutim, efekti MSC-egzosoma na ćelije raka su kontroverzni [36]. Na primjer, prijavljeno je da ASC-egzozomi imaju antikancerogeno djelovanje na rak prostate i in vitro i in vivo[37];(3) ljudska menstrualna tekućina, MSC(MSC)-egzozomi i BM-MSC-egzosomi promovišu rast neurita i u kortikalnim i senzornim neuronima, dok ljudski horion MSC-egzozomi i UC-MSC-egzozomi nisu.cistanche UKOvo sugerira da bi odgovarajući odabir izvora MSC mogao biti od suštinskog značaja za liječenje neurodegenerativnih bolesti [32]; (4) ljudski iPSC MSC (MSC)-egzozomi i MSC (SM-MSC)-egzozomi sinovijalne membrane oba su oslabili osteoartritis (OA) na mišjem modelu, ali MSC-egzozomi su imali superiorni terapeutski učinak u poređenju sa SM-MSC-egzosomima [33];(5) studija koja je upoređivala
pseći MSC su izvijestili da BM-MSC oslobađaju viši nivo sekretoma, uključujući egzosome nego ASC [34]; i (6) MSC ljudske amnionske tečnosti (AF-MSC) oslobađaju veću količinu egzosoma nego BM-MSC [35]. Međutim, teško je direktno uporediti rezultate između gore navedenih studija, budući da nisu izvedene sa uporedivim procesima ili metodama za izolaciju, karakterizaciju i evaluaciju efikasnosti za egzosome. Osim toga, varijacije od različitih donatora ili metoda pripreme za MSC ostaju istaknuti izazov [38,39]. Ipak, sugerira se da bi MSC-egzozomi mogli pokazati različita svojstva i efikasnost ovisno o porijeklu MSC-a. Stoga biološke razlike kao što su porijeklo MSC-a i efikasnost njihovih egzosoma treba uzeti u obzir za specifične kliničke primjene.
3. Kontrola kvaliteta EV za razvoj terapeutskih EV
Važno je proizvoditi električna vozila kliničkog kvaliteta s procesom usklađenim s dobrom proizvodnom praksom (GMP) i kontrolom kvaliteta (QC) za razvoj terapeutika zasnovanih na EV[40-42]. Odgovarajući QC je takođe ključan za ponovljive studije u akademskim okruženjima. Nedavno je Međunarodno društvo za ekstracelularne vezikule (ISEV) predložilo seriju Minimalnih informacija za studije ekstracelularnih vezikula (MISEV), finaliziranih kao MISEV2018[43-45]. Ministarstvo za sigurnost hrane i lijekova Koreje (MFDS) objavilo je prvu svjetsku smjernicu za proizvode za EV terapiju pod nazivom Smjernica o kvaliteti, nekliničkoj i kliničkoj procjeni proizvoda za terapiju ekstracelularnih vezikula [46. Kao što je prikazano u Tabeli 2, većina kriterija u ovim smjernicama je slična[1] i već je primijenjena u GMP postavkama [42, A7,48]. Rutinski kriterijumi kontrole kvaliteta uključuju određivanje količine, veličine, identiteta i čistoće električnih vozila.
Budući da ove metode ne mogu razlikovati EV od ne-EV čestica, preporučuje se poređenje rezultata ovih metoda sa rezultatima TEM, AFM ili drugih mikroskopskih opservacija.2 Takođe se preporučuje poređenje sa rezultatima metoda kvantifikacije kao što je kvantifikacija proteina. Skraćenice: AF4, višekutno raspršivanje svjetlosti u sprezi sa asimetričnim protočnim poljem i frakcionisanjem; AFM, mikroskopija atomske sile; DLS, dinamičko raspršivanje svjetlosti; FCM, protočna citometrija; FCS, fluorescentna korelaciona spektroskopija; ISEV, Međunarodno društvo za ekstracelularne vezikule; LAL, Limulus amebocitni lizat; MoA, način djelovanja; MFDS, Ministarstvo sigurnosti hrane i lijekova; NTA, analiza praćenja nanočestica; RPS, otporni pulsni senzor; WB, Western blotting.
3.1.EVQuantity i Size
I MISEV2018 i MFDS smjernice preporučuju korištenje najmanje dvije različite metode za određivanje količine EV-a [45,46]. Kvantifikacija EV može se postići mjerenjem ukupnih količina proteina, lipida ili RNK budući da se EV sastoje od svih ovih molekula. Ove metode, međutim, ne daju informacije o broju EV čestica. Nekoliko metoda je dostupno za mjerenje broja i veličine čestica, uključujući analizu praćenja nanočestica (NTA), otporni pulsni senzor (RPS) i dinamičko raspršivanje svjetlosti (DLS). Najraširenija metoda je NTA [42,47-53]. NTA određuje broj i veličinu čestica praćenjem Brownovog kretanja pojedinačnih čestica u vodenom rastvoru [54]. Međutim, NTA pati od niske rezolucije poli-disperznih uzoraka i velikih varijacija, kao što su varijacije među uređajima, među testovima i intra-i međuindividualne varijacije [55-57]. Osim toga, NTA ne razlikuje EV od drugih nanočestica kao što su proteinski agregati.cistanche wirkungNedavno su uvedeni instrumenti za fluorescentni NTA za detekciju fluorescentno obeleženih EV sa specifičnim antitelima [58]. Međutim, kvantifikacija električnih vozila ostaje izuzetno izazovna. Nove tehnologije i instrumenti se uvode svake godine, posebno tokom ISEV konferencije, kao što su nanoflow citometrija 59,60], mikroskopija direktne stohastičke optičke rekonstrukcije [61], ExoCounter sa tehnologijom optičkog diska [62] i slikovna protočna citometrija [63] . Iako će trebati neko vrijeme da se razviju potpuno GMP kompatibilni instrumenti, očekuje se da će veliki pomaci u metodologijama za kvantifikaciju električnih vozila rezultirati prevazilaženjem trenutnih prepreka u bliskoj budućnosti.
3.2. EV Identity
Prijavljeno je da su različiti proteini povezani s EV, posebno egzozomi, uključujući tetraspanine (CD9, CD63 i CD81), aneksine, flotilin i ALG-2-protein X(Alix) u interakciji s proteinom X(Alix) i gen za osjetljivost na tumor 101 (TSG101)protein [45,64]. Proteini kao što su CD9, CD63, CD81, TSG101 i Alix se preporučuju kao specifični markeri za egzosome jer je poznato da su visoko obogaćeni egzozomima u poređenju sa ćelijama porijeklom [45,64-66]. Pored toga, pošto su Alix i TSG101 uključeni u formiranje multivezikularnih tela (MVB), prisustvo ovih proteina je neophodno za podršku endocitnog porekla egzosoma |43,45,64]. Za QC, preporučuju se barem polukvantitativne metode za otkrivanje ovih proteina u egzosomima [46]. Enzimski imunosorbentni test (ELISA) i protočna citometrijska analiza su prikladni i za objekte usklađene sa GMP-om i za opće akademske laboratorije. Iako se Western blotting široko koristi u akademskim laboratorijama, ova metoda je ograničena nedostatkom odgovarajuće kvantifikacije i validacije metode [67].
3.3.EV čistoća
Čistoća električnih vozila je takođe kritičan kriterijum za kontrolu kvaliteta. Jednostavna metoda za praćenje čistoće EV je određivanje odnosa čestica-protein, protein-lipid ili RNK-čestica [45]. Odsustvo intracelularnih proteina, kao što su histoni, lamin A/C, GRP94 (tj. HSP90B1), GM130 (tj. GOLGA2) i citokrom C (tj., CYC1), je još jedan važan kriterij za određivanje čistoće EVsoreksosoma jer su ovi proteini nisu obogaćeni egzosomima zbog njihove stroge ćelijske lokalizacije [43,45]. Nečistoće iz procesa ćelijske kulture, uključujući antibiotike i serum, također treba analizirati kako bi se pratilo uklanjanje potencijalno opasnih supstanci [46]. Svaka serija električnih vozila treba biti kvalifikovana rutinskim QC prije nego što se koristi u terapeutske svrhe ili funkcionalne analize, čak iu akademskim laboratorijama, kako bi se osigurala ponovljivost.
3.4. Testovi potencije
Test potencije je najvažniji OC kriterijum za predviđanje efikasnosti EV in vivo. Regulatorne vlasti kao što je US Food and Drug Administration (FDA) preporučuju korištenje odgovarajućih testova potencije za proizvode za ćelijsku i gensku terapiju [68]. Smjernice MISEV2018 i MFDS također preporučuju uključivanje testova potencije za EV QC [45,46]. Potencija se definira kao "specifična sposobnost ili kapacitet proizvoda, kako je indicirano odgovarajućim laboratorijskim testovima ili adekvatno kontroliranim kliničkim podacima dobijenim primjenom proizvoda na predviđeni način, da utječe na dati rezultat"[68]. Prijavljeno je da mnogi biološki i biohemijski testovi demonstriraju moć EV ili egzosoma [69,70]. Budući da je kvantifikacija EV-a i dalje izazovna, uspostavljanje odgovarajućeg testa potencije bio bi neprocjenjiv alat za praćenje konzistentnosti od serije do serije i određivanje doze EV-a [71]. Iako bi idealni testovi potencije trebali predstavljati MoA, teško je postaviti odgovarajući test potencije sa pojedinačnim biohemijskim ili izolovanim testovima baziranim na ćelijama zbog poteškoća u identifikaciji pojedinačnih bioaktivnih supstanci u složenom teretu EV. Na primjer, teško je oponašati složene imunološke odgovore in vivo sa in vitro testovima baziranim na ćelijama [70-73].
4. Anti-inflamacija i imunomodulacija pomoću MSC-egzozoma
Imunološke ćelije luče topljive faktore kao što su inflamatorni citokini i medijatori, koji mogu doprinijeti u slučaju upale [74,75]. Konkretno, proinflamatorni citokini, uključujući faktor nekroze tumora (TNF)-x, interleukin(IL)-6 i IL-1, uglavnom proizvode aktivirani makrofagi. Ovi citokini igraju važnu ulogu u regulaciji upalnih odgovora kao što je aktivacija makrofaga i regrutovanje dodatnih imunih ćelija [74,75]. Nasuprot tome, antiinflamatorne citokine proizvode regulatorne T ćelije (Tregs), pomoćne T (Th)2 ćelije, alternativno aktivirani makrofagi i monociti, koji kontrolišu inflamatorne odgovore i imunitet 75,76]. Glavni antiinflamatorni citokini uključuju agonist lL-1 receptora (lL-1RA), lL-4, IL-10 i transformirajući faktor rasta (TGF)- [76].bioflavonoidi citrusaOvi citokini inhibiraju Th1l odgovore i proizvodnju proinflamatornih citokina [76].
Upala je mehanizam urođenog imuniteta kao odgovor na štetne podražaje, uključujući patogene, oštećene stanice ili iritanse, a obično se manifestira kao toplina, bol, crvenilo, oteklina i gubitak funkcije [77]. Nekontrolirani hronični upalni odgovori povezani su s različitim upalnim bolestima kao što su alergija, astma, autoimune bolesti, upalna bolest crijeva (IBD), OA, ateroskleroza i hepatitis [77-79]. Osim toga, mnogi naučnici danas smatraju upalu osnovnim uzrokom većine kroničnih bolesti kao što su srčani udari, moždani udari, dijabetes tipa 2, Alchajmerova bolest, pa čak i rak [80,81]. Stoga je regulacija upale važan terapijski cilj za liječenje upalnih bolesti. Pokazano je da MSC imaju svojstvo intrinzične imunosupresivne sposobnosti da ublaže upalu i imunološki odgovor [82]. MSC-egzozomi mogu biti odlična alternativa MSC ćelijskoj terapiji budući da MSC-egzozomi posjeduju slične biološke funkcije kao izvorne ćelije, dok su stabilnije i imaju nižu imunogenost u odnosu na ćelije koje potiču [83]. U stvari, antiinflamatorne i imunomodulatorne funkcije MSC-egzosoma su opširno prijavljene (Tabela 3) [21,84-151].
4.1. Polarizacija makrofaga
Postoji gomila dokaza da MSC-egzozomi pospješuju polarizaciju makrofaga od M1 prema M2. Ml makrofage karakterizira ekspresija širokog spektra proinflamatornih citokina i hemokina, kao što su IL-1, IL-12 i TNF-. Nasuprot tome, fenotip M2 makrofaga induciran je Th2 citokinima i dovodi do lučenja antiinflamatornih faktora, kao što su IL-10 i TGF-, i M2 markera kao što su IL-1RA, CD163, i CC motiv hemokin 22 (CCL22)[152]. Prijavljeno je da ljudski BM-MSC-egzozomi i MSC (JM-MSC)-egzozomi vilične koštane srži pospješuju zacjeljivanje kožnih rana [86] i ublažavaju bronhopulmonalnu displaziju (BPD)[86] kroz polarizacija makrofaga M2. MiR-223 sadržan u egzosomima ublažio je upalu i ubrzao zacjeljivanje rana indukujući polarizaciju makrofaga M2. Kokultura sa BM-MSC-egzosomima povećala je ekspresiju miR-223 i smanjila ekspresiju PBX/knotted homeobox 1(PKNOX1) proteina, važnog regulatora polarizacije makrofaga, u makrofagima izolovanim iz mononukleiranih ćelija periferne krvi ( PBMC). Osim toga, nakon ko-kulture sa BM-MSC-egzosomima, CD206-pozitivni makrofagi su bili povišeni, a miR-223 inhibitori su poništili ovo povišenje [85]. U modelu miša s visokom masnoćom (HFD), nedostatak miR-223 pojačao je infiltraciju M1 makrofaga i povećao proizvodnju proinflamatornih citokina, ali je smanjio biomarkere povezane s M{44}} uključujući receptor aktiviran proliferatorom peroksizoma (PPARy) i arginaza 1(ARG1)[153]. Druga studija je razjasnila da ljudski UC-MSC-egzozomi takođe promovišu aktivaciju M2 makrofaga i regulišu zarastanje dijabetičkih kožnih rana [87]. U poređenju sa onima iz neuslovljenih UC-MSC, egzozomi iz UC-MSC-a prethodno kondicioniranih sa LPS-om sadržavali su visok nivo let-7b, ublažavali upalu i intenzivnije promovirali zacjeljivanje rana. UC-MSC-egzozomi su smanjili proteine receptora 4(TLR4) i fosfo (p)-p65 bez obzira na LPS predkondicioniranje. Nakon tretmana LPS-prekondicioniranih UC-MSC-egzosoma, ARG1, M2 marker makrofaga, je povećan, a inducibilna sintaza dušikovog oksida (iNOS), M1 makrofagni marker, smanjena [88]. Let{71}}b cilja TLR4, čija aktivacija dovodi do aktivacije nuklearnog faktora-kB(NF-kB). Dodatno, let{75}}b smanjuje ekspresiju ciklooksigenaze-2(COX{ {77}}) i proteina ciklina D1 [154]. Otkriveno je da UC-MSC-egzozomi suzbijaju upalu i pospješuju zacjeljivanje rana induciranjem lučenja citokina iz M2 makrofaga kod pacova s teškom upalom kože izazvanom opekotinama kroz smanjenje ekspresije TLR4, NF-KB i p-p65 [89]. Viši nivo miR-181c je uočen u UC-MSC-egzosomima u poređenju sa egzozomima humanih dermalnih fibroblasta (HDF). Nivo ekspresije miR-181c je smanjen zbog opekotine i povećan je nakon tretmana UC-MSC-egzozoma u kožnoj rani. Pored toga, tretman UC-MSC-egzozoma smanjio je ekspresiju TNF- i IL-1 i povećao ekspresiju IL-10. Ovi efekti su pojačani egzozomima koji su izvedeni iz miR-181-previše eksprimiranih UC-MSC [88]. U eksperimentu provedenom u mišjim astrocitima, nivo ekspresije miR-181c je smanjen LPS-om, ligandom TLR4 receptora. Prekomjerna ekspresija miR{107}c povećava lučenje IL-10 izazvano LPS[155]. U primarnoj mikrogliji, nedostatak kiseonika i glukoze (OGD) je pojačao regulaciju TLR4, dok je miR-181c preokrenuo ovu regulaciju. MiR-181c je također smanjio NF-kB i proinflamatorne citokine kao što su TNF-, IL-1 i iNOS inducirane OGD[156]. Osim toga, utvrđeno je da ljudski MSC-egzozomi induciraju polarizaciju makrofaga M2, što je potvrđeno povećanim omjerom ARG1/iNOS, što je dovelo do ublažavanja upale u dijabetičkoj kožnoj rani [89].
Osim toga, egzosomi izvedeni iz različitih MSC-a također igraju važnu ulogu u promoviranju aktivacije M2 makrofaga kod drugih upalnih bolesti, kao i kod kožnih rana. Utvrđeno je da mišji BM-MSC-egzozomi ublažavaju upalu kod ateroskleroze putem polarizacije makrofaga M2 in vivo kroz let-7/high mobility group AT-Hook 2(HMGA2)/NF-kB put [90]. Obogaćivanje porodice let-7 pronađeno je u BM-MSC-egzozomima, a tretman BM-MSC-egzozoma je povećao nivo let-7u ApoE-/-miševima [90]. Zhao i saradnici su otkrili da mišji BM-MSC-egzozomi također smanjuju ozljedu ishemije-reperfuzije miokarda (IR) kroz polariziranje makrofaga prema M2 fenotipovima (iNOS-CD206 plus), i povećanjem IL-10 i ARG1, koji su regulirani miR-182 cilja TLR4[91]. Prijavljeno je da ljudski BM-MSC-egzozomi smanjuju IBD izazvanu dekstran natrijum sulfatom (DSS) kod miševa kroz polarizaciju M2b makrofaga na način zavisan od metalotioneina-2 (MT2A) [92]. Drugi izvještaj je otkrio da mišji ESC-egzozomi poboljšavaju kardiomiopatiju povećanjem M2 makrofaga i oslobađanja IL-10 [157]. Dodatno, objavljeno je da su ASC-egzozomi pacova poboljšali infarkt miokarda promovišući polarizaciju M2 makrofaga, koja je regulirana povećanjem sfingozin{44}}fosfatnog receptora 1(S1PR1)[93]. Važnost ose sfingozin 1-fosfat (S1P)/sfingozin kinaza 1 (SphK1)/S1PR dodatno je potvrđena utišavanjem S1PR1, što je ukinulo smanjenje hipoksijom izazvane apoptoze od strane ASC-egzozoma u H9c2 ćelijama. Slično, ljudski ASC-egzozomi inducirali su markere M2 makrofaga u humanim PBMC [94]. Heo et al. otkrili su da ljudski ASC-egzozomi također induciraju fenotip M2 makrofaga potvrđujući povećan nivo transkripcijskih faktora (npr. pretvarač signala i aktivator transkripcije 6 (STAT6), MAF BZIP transkripcijski faktor B (MafB) itd.), što je dovelo do regulacija imunomodulatornih i protuupalnih efekata kao što su povećani Tregs i protuupalni citokini (npr. IL-10 i TNF- -stimulirani gen-6(TSG-6))[94 ]. Mišji ASC-egzozomi su takođe izazvali polarizaciju M2 makrofaga i smanjili upalu bijelog masnog tkiva (WAT) kod gojaznih miševa[96]. Ovi efekti zavise od faktora transkripcije, STAT3, u ASC-egzosomima. Nadalje, M2 makrofagi obrazovani ASC egzozomima izazvali su proliferaciju samih ASC i proizvodnju laktata iz ASC, što je dalje promoviralo WAT beiging [95]. Međutim, potrebne su daljnje studije kako bi se razumio detaljan osnovni molekularni mehanizam za regulaciju polarizacije M2 makrofaga pomoću MSC-egzozoma.
Ovaj članak je preuzet iz Cells 2020, 9, 1157; doi:10.3390/cells9051157 www.mdpi.com/journal/cells
