Likopen i N-acetilcistein pružaju zaštitu od oštećenja izazvanih cisplatinom

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Sinergistički zaštitni efekti likopena i N-acetilcisteina protiv hepatorenalne toksičnosti izazvane cisplatinom kod štakora

Asmaa Elsayed, Ashraf Elkomy i dr.

Uvod

Cisplatin(CP) je jedan od najčešće korišćenih hemoterapeutskih lekova. Iakocisplatinima dobro poznatu antineoplastičnu aktivnost protiv višestrukih maligniteta, štetni efekti, uglavnom zbog pojačanih oksidativnih i apoptotičkih efekata ćelija u različitim tkivima, ograničavaju njegovu primjenu-2. CP (Cisplatin) je visoko aktivan citotoksični agens u liječenju raka; međutim, nefrotoksičnost ograničava njegovu upotrebu4. CP (Cisplatin) primjena dovodi do oštećenja jetre zbog peroksidacije i oksidacije lipida što dovodi do promjena u biomarkerima jetre i antioksidativnim enzimima³. Mnoge studije su prijavile CP (Cisplatin)-indukovana hepatotoksičnost- i nefrotoksičnost10-14.

likopen (LP)je aciklični karotenoid (derivat vitamina A) sa snažnim i efikasnim djelovanjem na uklanjanje slobodnih radikala i protuupalnim, imunostimulativnim, antibiotskim i antimutagenim djelovanjem15,16, LP (Likopen) je crveni pigment koji je prisutan u velikoj količini u paradajzu i drugom crvenom voću. Hemijska struktura likopena sadrži mnoge dvostruke veze koje imaju glavnu ulogu u uklanjanju reaktivnih vrsta kiseonika (ROS)17 Potrošnja paradajza ili proizvoda od paradajza često je povezana sa povećanim nivoom likopena u cirkulaciji i smanjenim oksidativnim oštećenjem lipida, proteina i DNK18. LP (Likopen), prirodni antioksidans, ima antioksidativno djelovanje protiv nekoliko ozljeda tkiva uzrokovanih oksidativnim stresom9. In vitro likopen, antioksidativna učinkovitost je do 100 puta snažnija od vitamina E. Osim toga, LP (Likopen) ima kemo-preventivnu aktivnost protiv određenih oblika karcinoma20 Zaštitna aktivnost LP (Likopen) protiv hepatorenalnog oštećenja izazvanog hemoterapijama je privukla značajnu istraživačku aktivnost posljednjih godina.

N-acetilcistein (NAC)je medicinski i dijetetski dodatak koji se obično koristi kao mukolitički agens za liječenje predoziranja paracetamolom1. NAC (N-acetilcistein) je prolijek L-cisteina, prekursora glutationa (GSH). Balans oksidans-antioksidans može se modulirati pomoću NAC (N-acetilcistein) regulacija nivoa GSH u ćelijama, inhibiranje peroksidacije lipida i uklanjanje ROs2,23. NAC je sposoban da obnovi ravnotežu prooksidant/antioksidans i obično se koristi kao efikasan antioksidans protiv oksidativnog stresa i in vivo i in vitro2425. CP (Cisplatin) se klinički koristi za mnoge bolesti kao kelator teških metala za zaštitu od oksidativnog stresa i sprječavanje ozljeda stanica26. NAC (N-acetilcistein) ima korisna medicinska svojstva, uključujući inhibiciju kancerogeneze, tumorigeneze, mutageneze i rasta tumora i metastaza27.

Cilj ovog dizajna bio je utvrditi zaštitne efekte LP (Likopen) i/ili NAC (N-acetilcistein) protiv toksičnosti jetre i bubrega uzrokovane CP (Cisplatin) kod pacova istraživanjem biohemijskih, markera oksidativnog stresa i ekspresije kaspaze-3.

Cistanche može liječiti oštećenu funkciju bubrega

materijali i metode

Hemikalije. CP (Cisplatin) (CAS broj:15663-27-1), (50 mg/ml parenteralna primjena) kupljen je od EIMC Pharmaceuticals Company (Kairo,Egipat).LP (Likopen) (CAS broj:502-65-8)kupljeno je od kompanije Sigma Aldrich (Saint Louis, MO, SAD).NAC (N-acetilcistein) (CAS broj:616-91-1) je kupljen od kompanije South Egypt Drug Industries Company (SED-ICO) (6. oktobar, Egipat). Analitički kompleti su kupljeni od kompanije Bio-diagnostics (Giza, Egipat).

EFEKTI EKSTRAKTA CISTANCHE: štite jetru

Rezultati

Cisplatinnapravio indukciju hepatoksičnosti i nefrotoksičnosti na koju ukazuju povišeni serumski nivoi biomarkera jetre i bubrega (Tabela 1). Aktivnosti AST, ALT i ALP i koncentracija kreatinina, uree, holesterola, triglicerida i LDL holesterola su značajno povećane kao rezultat CP (Cisplatin) tretman u poređenju sa onima kod kontrolnih pacova. Takođe, CP (Cisplatin) smanjene serumske koncentracije ukupnog proteina, albumina i HDL kolesterola. S druge strane, drugačiji je slučaj gdje su ovi parametri značajno smanjeni kod pacova tretiranih CP sa LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), ili kombinovani tretman (LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein)) u poređenju sa CP grupom. Značajno je da su ovi parametri značajno smanjeni kada su štakori intoksicirani CP tretirani oba LP(Cisplatin) i NAC (N-acetilcistein) u odnosu na liječenje LP (Likopen) ili NAC (N-acetilcistein) sam. Vrijednosti su bile značajno niže u odnosu na kontrole. Dakle, kombinacija LP i NAC ukazuje na bolju zaštitu od hepatorenalnog oštećenja uzrokovanog CP nego sama.

Tabela 1. Efekti LP, NAC i/ili CP na biohemijske parametre seruma (n=7). Podaci su izraženi kao srednja vrijednost±SE (n=7).Različita nadnaslovna slova u istom redu označavaju statističku značajnost na P manje od ili jednako 0.05.Cisplatin(CP) u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP); likopen (LP) u dozi od 10 mg/kg; N-acetilcistein (NAC) u dozi od 150 mg/kg; aspartat aminotransferaza (AST); alanin aminotransferaza (ALT); alkalna fosfataza (ALP); lipoprotein visoke gustine (HDL); lipoprotein niske gustine (LDL).

Efekti CP (Cisplatin) intoksikacija i liječenje LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), a njihova kombinacija na MDA, redukovanom glutationu i antioksidativnim enzimima u tkivima jetre i bubrega prikazana je u tabelama 2 i 3, respektivno. Nivoi MDA su se značajno povećali, a nivoi CAT, SOD i GSH u jetri su značajno smanjeni kod pacova intoksikiranih CP u poređenju sa kontrolnim pacovima. LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) tretmani su umanjili efekte CP (Cisplatin) na MDA u tkivu jetre, CAT, SOD i GSH, ali ove y vrijednosti su se i dalje značajno razlikovale od kontrolnih vrijednosti. Kombinovani LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) tretman je značajno poboljšao oksidativna oštećenja uzrokovana CP u tkivima jetre i bubrega u odnosu na LP (Likopen) ili NAC (N-acetilcistein) sami tretmani. Ovi rezultati su potvrđeni nalazom histopatologije.

Tabela 2. Efekti LP, NAC i/ili CP na antioksidativne parametre u tkivima jetre (n=7).Podaci su izraženi kao srednja vrijednost±SE (n{{0}}). Različita nadnaslovna slova u istom redu označavaju statističku značajnost kod P manjeg ili jednakog 0,05.Cisplatin(CP) u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP); Likopen (LP) u dozi od 10 mg/kg; N-acetilcistein (NAC) u dozi od 150 mg/kg. Malondialdehid (MDA); katalaza (CAT); superoksid dismutaza (SOD); smanjenog glutationa (GSH).

Tabela 3. Efekti LP NAC, i/ili CP na antioksidativne parametre u bubrežnom tkivu. Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ±SE (n=7).Različita nadnaslovna slova u istom redu označavaju statističku značajnost na P manje od ili jednako 0.05.Cisplatin(CP)u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP);;Lvkopen (LP) u dozi od 10 mg/kg:N-acetilcistein (NAC)u dozi od 150 mg/kg. Malondialdehid (MDA); katalaza (CAT); superoksid dismutaza (SOD); smanjenog glutationa (GSH).

Histopatološki nalazi pokazali su normalno organizirane hepatocite koji formiraju zračeće hepatične vrpce oko centralne vene, s normalnim tkivom jetre uključujući krvne sinusoide i portalne strukture koje su uočene u dijelovima tkiva iz kontrolne fiziološke otopine, LP (Likopen), i NAC (N-acetilcistein)-tretirani pacovi. Nasuprot tome, uočili smo ozbiljne alternativne promjene u jetrenom parenhima, uključujući gubitak normalnog rasporeda jetrenih vrpci, zagušenost centralne vene i sinusoida, pjenastu vakuoliziranu citoplazmu i izražene degenerativne promjene povezane s teškom nuklearnom piknozom koja je uočena u dijelovima CP. (Cisplatin) tretirani pacovi. Zanimljivo, LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), a njihova kombinacija je značajno obnovila uobičajenu arhitekturu jetre (slika 1).

S druge strane, slika 2 prikazuje normalnu arhitekturu bubrežnog korteksa, bubrežnog tjelešca, glomerula, proksimalnih uvijenih tubula i distalnih uvijenih tubula pacova iz kontrolne, LP (Likopen), i NAC (N-acetilcistein) grupe. Nasuprot tome, CP (Cisplatin)-intoksicirani štakori su pokazali teške nefrotske lezije povezane s izraženim degenerativnim promjenama unutar bubrežne tubularne epitelne obloge, začepljenim inter-bubrežnim krvnim žilama, hidropičnom degeneracijom, piknotičkim jezgrama u epitelnim stanicama i hijalinskim lijevanim materijalom u lumenu većine tubula. Tretman LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), ili njihova kombinacija spriječila je histopatološke promjene bubrega izazvane CP (Cisplatin).

Što se tiče rezultata imunohistohemije, došlo je do dramatične povećane regulacije kaspaze-3, bilo citoplazmatske ili nuklearne ekspresije u tkivima jetre i bubrega uzrokovane CP (Cisplatin)(sl.3 i 4, respektivno). S druge strane, ekspresije kaspaze-3 blago regulirane u odnosu na kontrolnu grupu pronađene su u LP (Likopen) plus CP i NAC (N-acetilcistein) plus CP grupe. Štaviše, CP (Cisplatin)-posredovana kaspaza-3 up-regulacija je naglo smanjena kombinovanim tretmanom LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein).

EFEKTI EKSTRAKTA CISTANCHE: PROTIVUPALA

Diskusija

CP (Cisplatin) izaziva antikancerogene efekte interakcijom sa DNK i izazivanjem programirane ćelijske smrti. Višestruke in vitro studije su pokazale citotoksične efekte CP u različitim ćelijskim linijama, ali je provedeno samo nekoliko in vivo studija45,32-36. Naši nalazi su u skladu s in vivo rezultatima drugih studija, uključujući uključenost oksidativnog stresa i apoptotičkih mehanizama u hepatorenalno oštećenje izazvano CP i potencijalnu upotrebu LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) kao zaštitni agensi protiv povreda izazvanih CP.

Povišene aktivnosti jetrenih enzima ukazuju na ćelijsko curenje i gubitak funkcionalnog integriteta hepatocita; enzimi jetre se oslobađaju u krvotok kada su hepatocitne plazma membrane oštećene1, U ovoj studiji, CP (Cisplatin)-indukovana hepatotoksičnost dokazana je značajnim promjenama u serumskim enzimima jetre (AST, ALT i ALP). CP (Cisplatin) preuzima jetra i akumulira se u hepatocitima, uzrokujući ćelijsko oštećenje koje na kraju dovodi do povećanja cirkulirajućih enzima jetre*. Pored toga, CP je povećao nivoe kreatinina i ureje, u skladu sa prethodnim studijama,17,37. Povišeni nivoi kreatinina i ureje uzrokovani su smanjenom brzinom glomerularne filtracije. Štoviše, Cayer et al.38 pripisuju toksičnost jetre i bubrega uzrokovanu CP slobodnim radikalima koji se stvaraju u stanicama jetre i bubrega, što rezultira peroksidacijom lipida i posljedično dovodi do oksidativnog stresa koji oštećuje stanice.

Primena CPV-a izazvala je značajno smanjenje ukupnog cirkulišućeg proteina i albumina. Ovaj rezultat je bio u saglasnosti sa Abuzinadahom i Ahmadom3. Nakon oštećenja jetre, CP (Cisplatin) intoksikacija smanjuje sintezu proteina i mijenja funkcionalni integritet bubrega, što dovodi do proteinurije i, na kraju, do smanjenog nivoa proteina u cirkulaciji40.

Administracija CP (Cisplatin) rezultiralo je značajno povećanjem cirkulirajućeg holesterola, triglicerida i LDL holesterola i smanjenim HDL holesterolom. Jetra igra vitalnu ulogu u regulaciji nivoa holesterola u plazmi. Stoga, kada je disfunkcija jetre izazvana liječenjem lijekovima, nivoi ukupnog holesterola u serumu (TC) i LDL-holesterola se povećavaju41. Značajan porast serumskih nivoa TC, triglicerida (TG) i LDL-holesterola nakon izlaganja pacovacisplatinje vjerovatno zbog štetnih efekata CP, što dovodi do hepatocelularne disfunkcije i poremećenog metabolizma lipida, u skladu sa nalazima Akindele et al.42. Jetra sintetiše TG i transformiše TG u holesterol lipoproteina veoma niske gustine (VLDL) za transport do perifernih tkiva, a oštećenje sinteze VLDL-C dovodi do povišenih nivoa TG3. Uočen je značajan oporavak od oštećenja CP u LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein)-tretirane grupe. Pored toga, NAC (N-acetilcistein) i LP (Likopen) imaju hipolipidemijske efekte28,44.

Što se tiče parametara oksidativnog stresa/antioksidansa, nivoi MDA (povećana peroksidacija lipida) su značajno povećani, a antioksidansi (CAT, SOD i GSH) su značajno smanjeni u tkivima jetre i bubrega nakon CP (Cisplatin) tretman. Ovi rezultati se slažu sa Abd El-Kaderom i Tahalom, Abdel-Razekom et al.12, i Elkomy et al.!. Generisanje ROS-a kao što su superoksidni anioni i hidroksilni radikali rezultiraju posredovanjem oksidativnog stresa i iscrpljivanja antioksidansa u plazmi39.

LP (Likopen) inhibira peroksidaciju lipida tako što direktno reagira s različitim ROS i sprječava oštećenje mitohondrija izazvano CP (Cisplatin). Naši rezultati sugeriraju da LP (Likopen) ometa oksidaciju lipida mitohondrijske membrane. LP (Likopen) inhibira peroksidaciju lipida kao prekidač lanca, hvatač slobodnih radikala i antioksidativni modulator 45.

Blagotvorni efekti NAC-a (N-acetilcistein) se pripisuju njegovoj ulozi snažnog hvatača slobodnih radikala. Slobodna sulfhidrilna grupa NAC može direktno reagovati sa elektrofilnim jedinjenjima, kao što su slobodni radikali45. NAC takođe stimuliše sintezu GSH i na taj način stimuliše endogenu antioksidativnu aktivnost². Direktna antioksidativna aktivnost i stimulacija endogene antioksidativne aktivnosti objašnjavaju sposobnost NAC (N-acetilcistein) za obnavljanje oksidativne homeostaze u jetri i bubrezima u našoj studiji. Uklanjanje slobodnih radikala NAC (N-acetilcistein) može spriječiti poremećen bubrežni protok krvi nakon okluzije donje šuplje vene i spriječiti smanjeni bubrežni vaskularni otpor uzrokovan CP (Cisplatin) 48. Efekat NAC (N-acetilcistein) o protoku krvi u bubregu i vaskularnom otporu kod pacova intoksikiranih CP može objasniti poboljšanje bubrežne funkcije uočeno u ovoj studiji.

Slika 1, Histopatološke promjene u presjecima jetre.

(a)-(c)Normalna organizacija jetrenih vrpci (debela strelica), sinusoida krvi (tanke strelice) i centralne vene (CV) jetre u kontroli (a), LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein)(c) grupe.

CP (Cisplatin)-inducirane promjene u jetri uključuju teške degenerativne promjene, kao što je gubitak normalnog rasporeda jetrenih vrpci, vakuolacija (tanke strelice), pjenasti izgled (debela strelica) i piknotička jezgra nekih hepatocita(S).

(e)CP (Cisplatin)-induciran gubitak normalne stanične arhitekture jetrenih vrpci sa ozbiljnom vakuolacijom jetre (debela strelica), proširenom krvnom sinusoidom (tanka strelica) i piknotičkim jezgrama hepatocita (kratka strelica).

(f) histološke promjene u jetri u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni efekti na jetru uključuju začepljene krvne žile (CV), proširenu krvnu sinusoidu (debela strelica) i kondenzaciju nuklearnog hromatina hepatocita (tanka strelica).

(g) Histološke promjene u jetri u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni efekti na jetru uključuju kongestiju CV, hidropičnu degeneraciju (tanke strelice) i degranuliranu citoplazmu hepatocita (debela strelica).

(h) Histološke promjene u jetri u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Blagi efekti na jetru uključuju proširene krvne žile (CV) i krvne sinusoide (strelice). Skalirana traka=50 μum.

Pored aktivnosti uklanjanja ROS-a, LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) obnovio aktivnosti SOD i CAT i nivoe GSH u CP (Cisplatin)-pijani pacovi. Stoga snažno predlažemo da LP (Likopen) i/ili NAC (N-acetilcistein) posredovana poboljšanja serumskih biohemijskih parametara testiranih u ovoj studiji bila su posredovana supresijom ROS-a i pojačanom regulacijom antioksidativnih mehanizama protiv CP (Cisplatin)-indukovana oksidativna povreda.

LP (Likopen) se sastoji od atoma ugljika i vodika (CHs6) sa mnogo dvostrukih veza koje smanjuju energiju potrebnu za delokalizaciju elektrona, pružajući dobar izvor doniranja atoma vodika potrebnog za stabilizaciju slobodnih radikala. Od LP (Likopen) je lipofilan, integrisan je sa lipidnim dvoslojem ćelijske membrane omogućavajući apstraktu H atoma iz LP (Likopen) umjesto da nezasićene masne kiseline zaustavljaju CP (Cisplatin)-indukovana peroksidacija lipida koja se vidi drastičnim smanjenjem MDA49.

Slika 2. Histopatološke promjene u presjecima bubrega.

(a)-(c) Normalna arhitektura bubrežnog korteksa, bubrežnog tjelešca (strelica), glomerula (G), proksimalnih uvijenih tubula (P) i distalnih uvijenih tubula (D) u kontroli (a), LP (Likopen) (1b) i NAC (N-acetilcistein)(d) grupe.

(d) CP (Cisplatin)-inducirane teške degenerativne promjene u epitelnoj sluznici bubrežnih tubula (f), začepljenim međububrežnim krvnim žilama (I), hidropičnom degeneracijom (tanka strelica) i piknotičkim jezgrama epitelnih stanica (debela strelica).

(e) CP (Cisplatin)-induciran gubitak normalne arhitekture u bubrežnim tubulima, sa hijalinskim livenim materijalima u lumenu većine tubula (debele strelice), degranuliranom citoplazmom u nekim epitelnim ćelijama (d) i deskvamiranim ćelijama (tanka strelica).

(f) Histološke promjene u bubregu u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni efekti u bubrežnim tubulima i degeneriranim i isljuštenim epitelnim stanicama (debela strelica).

(g) Histološke promjene u bubregu u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni efekti uključuju začepljene međububrežne krvne žile (C), hijalinski lijevani materijali u lumenu nekih tubula (h) i nekrozu u nekim epitelnim stanicama (e).

(h)Histološke promjene u bubregu u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Blagi efekti uključuju proteinske materijale u lumenu nekih tubula (debele strelice). Traka razmjera= 50 um.

NAC (N-acetilcistein) je donor tiola sa antioksidativnim svojstvima. Odličan je izvor sulfhidrilnih grupa i in vivo se pretvara u metabolite koji stimulišu proizvodnju glutationa (GSH), čime se održava intracelularni nivo GSH, poboljšava detoksikacija i djeluje direktno kao čistač slobodnih radikala50.

Histološka i imunohistohemijska zapažanja trenutne studije bila su u harmoniji i potvrdila su promjene biohemijskih i parametara oksidansa/antioksidansa među eksperimentalnim grupama. CP (Cisplatin) tretman je pokazao izražene nefrotoksične efekte, uključujući citoplazmatsku vakuolizaciju u tubularnim epitelnim stanicama i apoptozu, kako navode Alhoshani et al.4. Teške degenerativne promjene u bubrežnim tubulima su se javile nakon CP (Cisplatin) tretman, uključujući hidropičnu degeneraciju, piknotička jezgra, povećane citoplazmatske vezikule, citoplazmatsku vakuolizaciju, nekrozu i apoptozu tubularnih ćelija, i deskvamaciju nekrotičnih epitelnih ćelija, popunjavanje lumena tubula i formiranje hijalinskih izliva. Ovi rezultati su u skladu sa rezultatima Persea i Večeric-Halera51.

Slika 3. Promjene u ekspresiji jetrene kaspaze-3.

(a)-(c) pokazao je negativne reakcije imunološkog bojenja u kontroli (a), LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein)(c) grupe.(d) i (e)CP (Cisplatin)-inducirane promjene koje pokazuju tešku reakciju imunološkog bojenja.

(f) Bojenje kaspazom u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) grupa je pokazala umjereno imunološko obojenje. (g) Bojenje kaspazom u NAC (N-acetilcistein) plus CP grupa pokazala je umjereno imunobojenje.

(h) Bojenje kaspazom u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa je pokazala blago imunološko obojenje.

Skalirana traka= 50 μm. CP (Cisplatin) tretmanom indukovana ekspresija kaspaza-3, što ukazuje na pojavu apoptoze tubularne epitelne ćelije.

Ovi rezultati potvrđuju rezultate Liua et al.52 i Millera et al.53, koji su pokazali da CP (Cisplatin) je metabolički pretvoren u snažniji toksin, koji je uzrokovao ozljedu DNK i mitohondrijsku DNK i oštećenje disanja.

Ove promjene izazvane toksinom dovode do aktivacije apoptotičkih puteva i iniciranja upalnih odgovora.

CP (Cisplatin)-indukovana hepatotoksičnost, naznačena sinusoidnom dilatacijom, zagušenjem krvnih sudova i neorganizovanom arhitekturom jetrenih lobula, konzistentna je sa efektima izazvanim CP-om koje navode Elkomy et al.1.

NAC (N-acetilcistein) nisu imali nuspojave na jetri ili bubrezima, što se manifestira normalnom histologijom u ovim tkivima. Naši podaci su potvrdili da tretman NAC-om (N-acetilcistein) je imao zaštitni učinak protiv nefrotoksičnosti i hepatotoksičnosti, na šta ukazuje slabljenje CP (Cisplatin)-indukovane degenerativne promjene u jetri i bubrezima. Tretman pacova LP (Likopen) smanjuje nefrotoksične i hepatotoksične efekte CP (Cisplatin), na što ukazuju umjereni histopatološki nalazi u jetri i bubrezima. Kombinacija LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) je imao veliki profilaktički učinak protiv CP (Cisplatin)-indukovana hepatotoksičnost i nefrotoksičnost. Štakori tretirani LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) prije CP tretmana imao je samo blage histopatološke lezije jetre i bubrega i blagu ekspresiju kaspaze 3, što ukazuje na smanjen nivo apoptoze. Ovi rezultati su u skladu sa nalazima Jianga et al.54, koji smatraju LP (Likopen) antioksidativni lijek koji štiti jetru i bubrege od oksidativnog oštećenja izazvanog CP. Ovi rezultati se takođe slažu sa Abdel-Wahabom et al.4, koji su pokazali da NAC (N-acetilcistein) je oslabio nefrotoksičnost izazvanu CP i obnovio pravilno funkcionisanje bubrega, a sa De Vriesom7, koji je ukazao da NAC potiče detoksikaciju jetre. NAC također može smanjiti koncentraciju CP u bubrezima povećanjem njegovog izlučivanja putem bubrega i/ili sprječavanjem njegove akumulacije u bubrežnom tkivu, kao što je izvijestio Appenroth. Zhao i Shichi su pokazali da slobodna sulfhidrilna grupa može direktno reagirati s elektrofilnim jedinjenjima, kao što je npr. slobodnih radikala, a Yalcin22 je pokazao da NAC može djelovati kao antioksidans.

Prethodni tretman sa LP i/ili NAC zaštićenom od hepatorenalne toksičnosti izazvane CP, što pokazuju poboljšani biohemijski parametri, markeri oksidativnog stresa, histopatologija i ekspresija kaspaze-3. Dijetalna kombinacija LP i NAC može poboljšati kapacitet uklanjanja ROS17. Naši podaci su otkrili da istovremena primjena LP i NAC-a izaziva bolji zaštitni učinak protiv inzulta CP od njihovih pojedinačnih dodataka.

Also, other natural products protected against hepatorenal toxicity induced by CP as Citrullus colocynthis, garlic oil>, timokinon3 i L-karnitin'.

Slika 4, Promjene u ekspresiji bubrežne kaspaze-3. (a)-(c) pokazao je negativne reakcije imunološkog bojenja.

(a). Kontrolna grupa pokazuje vrlo blagu imunobojenje kaspazom-3. Bojenje kaspaze-3 u LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein) (C) grupe su pokazale negativnu reakciju imunološkog bojenja.

(d) i (e) liječena grupa sa CP (Cisplatin) pokazao ozbiljnu reakciju imunološkog bojenja. (f) Bojenje kaspazom u LP (Likopen) plus CP grupa pokazala je umjereno imunobojenje.

(g) Bojenje kaspazom u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa je pokazala umjereno imunološko obojenje. (h) Bojenje kaspazom u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP grupa pokazala je blago imunobojenje.

Skalirana traka =50 μm. bubreg povećavajući izlučivanje putem bubrega i/ili sprečavajući njegovu akumulaciju u bubrežnom tkivu, kao što je izvijestio Appenroth 36. Zhao i Shichi7 su pokazali da slobodna sulfhidrilna grupa može reagirati direktno s elektrofilnim jedinjenjima, kao što su slobodni radikali, a Yalcin2 je pokazao da NAC (N-acetilcistein) može djelovati kao antioksidans.

Zaključak

Sveukupno, naši podaci sugeriraju da CP uzrokuje značajno oštećenje tkiva u jetri i bubrezima zbog oksidativnog stresa i apoptotičkih mehanizama, o čemu svjedoče izmijenjeni biokemijski parametri i histopatološke lezije. Kombinacija LP i NAC pokazuje zaštitne efekte protiv CP posredovanog oštećenja jetre i bubrega.

EFEKTI EKSTRAKTA CISTANCHE: ANTI-OKSIDACIJA

Reference

1, Elkomy, A, et al. L-karnitin ublažava oksidativni stres i dezorganizaciju intermedijarnih filamenata citoskeleta ucisplatin-indukovana hepato-renalna toksičnost kod pacova. Front. Pharmacol.11,574441 (2020).

2. Sallam, AO et al. Meliorativni efekti L-karnitina protivCisplatin-indukovana toksičnost gonada kod pacova. Pak Vet. 41(1), 147-151 (2021).

3. Antunes, LMG, Darin, JDAC& Bianchi, MDLPProtektivni efekti vitamina C protivcisplatin-inducirana nefrotoksičnost i lipidna peroksidacija kod odraslih pacova: studija ovisno o dozi. Pharmacol.Res.41(4), 405-411(2000).

4. Alhoshani, Aret al. Zaštitni efekat dodatka rutina protivcisplatin-indukovana nefrotoksičnost kod pacova. BMC Nephrol.18(1),194(2017).

5. Karale, S. & Kamath, JVE Effect of daidzein oncisplatin-indukovana hepatotoksičnost i hepatotoksičnost kod eksperimentalnih štakora. Indian J. Pharacol.49(1), 49-54(2017).

6. Boroja, T. et al. Ekstrakt ljetne slanice (Satureja hortensis L.) Fitokemijski profil i modulacijacisplatin-indukovana jetra,

toksičnost bubrega i testisa. Food Chem Toxicol. 118, 252-263 (2018).

7. Neamatallah, T., El-Shitany, NA, Abbas, AT, Ali, SS& Eid, BGHoney štiti odcisplatin-indukovana hepatična i bubrežna toksičnost kroz inhibiciju ekspresije COX-2 posredovane NF-KB i apoptotičkog puta BAX/Bcl-2/kaspase-3 zavisnog od oksidativnog stresa. Funkcija hrane.9(7), 3743-3754(2018).

8. Mohamed, HE& Badawy, MMMModulatorni efekat zingerona protivcisplatinili hepatotoksičnost izazvana y-zračenjem regulacijom molekularnog ciljanja. Appl Radiat Isot.154,108891(2019).

9. Abdel-Daim, MMet al. Utjecaj ulja bijelog luka (Allium sativum) nacisplatin-indukovane hepatorenalne biohemijske i histopatološke promene kod pacova. Total Sci. Environ.710,136338 (2020).

10. El-Kordy, EA Utjecaj suramina na oštećenje bubrežnih proksimalnih tubularnih stanica uzrokovanoCisplatinkod pacova (histološka i imunohistohemijska studija). J. Microsc.Ultrastruct.7(4),153-164 (2019).

11. Abd El-Kader, M. & Taha, RI Uporedni nefroprotektivni efekti kurkumina i etorikoksiba protivcisplatin-indukovana akutna ozljeda bubrega kod pacova.Acta Histochem.122(4), 151534 (2020).

12. Abdel-Razek, EA, Abo-Youssef, AM& Azouz, AABenzbromaron ublažavacisplatinnefrotoksičnost koja uključuje pojačanu ekspresiju receptora alfa (PPAR-) aktiviranog proliferatorom peroksizoma.Life Sci.243,117272(2020).

13. Barakat,LAA,Barakat,N,Zakaria, MM& Khirallah,SM Zaštitna uloga nanočestica cink oksida kod ozljede bubrega uzrokovanecisplatinkod pacova.Life Sci.262,118503 (2020).

14. Sadeghi, H.et al. Antioksidativno i zaštitno dejstvo Stachys pilifera Benth protiv nefrotoksičnosti izazvanecisplatinkod pacova. Food Biochem.44(5), e13190 (2020).

15. Müller, L., Fröhlich, K. & Böhm, V. Komparativne antioksidativne aktivnosti karotenoida mjerene antioksidativnom moći redukcije željeza (FRAP), ABTS testom izbjeljivanja (TEAC), DPPH testom i testom uklanjanja peroksil radikala. Food Chem.129,139-148 (2011).