Efekti dekocije Jianpi Bushen Yiqi na imunološku funkciju i neuromuskularne spojeve kod EAMG miševa
Jan 29, 2026
2.3 Histomorfološko poređenje timusa i limfnih čvorova u svakoj grupi miševa
Kao što je prikazano uSlika 1, korteks timusa i medula uprazna kontrolna grupamiševi su bili jasno razgraničeni, sa uređenim ćelijama. Nasuprot tome, thekontrolna grupa modelapokazuju nejasne kortikalno-medularne granice i rijetku distribuciju ćelija. U poređenju sa grupom modela, miševi ugrupa prednizonainiske, srednje i visoke doze Jianpi Bushen Yiqi grupe decokcijapokazao relativno jasne kortikalno-medularne granice i guste, dobro organizirane ćelije.
Slika 2pokazuje da ćelije limfnih čvorova u praznoj kontrolnoj grupi pokazuju kompletnu strukturu i uredan raspored. Primarni limfni folikuli su bili vidljivi u korteksu, bez sekundarnih folikula ili germinalnih centara. U grupi modela, ćelijska struktura je bila dezorganizirana, sa proliferiranim primarnim folikulima i vidljivim sekundarnim folikulima i germinalnim centrima. Grupe za prednizon i Jianpi Bushen Yiqi pokazale su smanjenu hiperplaziju limfoidnog folikula.
Tabela 3pokazuje da je, u poređenju sa slijepom kontrolnom grupom, grupa modela imala smanjen omjer površine korteksa i medule u timusu i povećane germinativne centre u limfnim čvorovima (P < 0,05 ili P < 0,01). U poređenju sa grupom modela,prednizonivisoke doze Jianpi
Slika 1. Poređenje histopatološke morfologije tkiva timusa među različitim grupama miševa (HE bojenje)
Tabela 3. Poređenje odnosa kortikalno-medularnih površina timusa i broja zametnih centara limfnih čvorova u svakoj grupi miševa
Jedinica: (x̄ ± s)
| Grupa | n | Odnos površine korteksa timusa/medule | Broj Germinalnog centra (po LN) |
|---|---|---|---|
| Blank Control | 3 | 3.62 ± 0.18 | 0.00 ± 0.00 |
| Kontrola modela | 3 | 1.74 ± 0.11 ᵃ | 6.47 ± 1.51 ᵃ |
| Prednisone | 3 | 4.62 ± 1.41 ᵇ ᶜ | 3.52 ± 0.35 ᵇ ᶜ |
| Decoction Low Dose | 3 | 2.91 ± 0.42 ᶜ | 5.77 ± 0.66 ᶜ |
| Decoction Medium Dose | 3 | 3.41 ± 1.05 ᶜ | 4.12 ± 0.25 ᶜ |
| Decoction High Dose | 3 | 4.60 ± 0.55 ᵇ ᶜ | 3.00 ± 0.71 ᶜ |
Bilješke:
ᵃ: P < 0,01 u odnosu na praznu kontrolu
ᵇ: P < 0,05 u odnosu na kontrolu modela
ᶜ: P < 0,01 u odnosu na kontrolu modela
Bushen Yiqigrupe su pokazale veći omjer površine korteksa i medule. Sve interventne grupe, uključujući prednizon i sve tri doze dekokcije, značajno su smanjile broj germinativnih centara (P < 0,01). U poređenju sa grupom prednizona, decokcija jegrupe sa niskim i srednjim dozamai dalje pokazivao nešto više kličnih centara, dok jegrupa sa visokim dozamanije imala bitnu razliku.
Napomena: Crne strelice pokazuju na limfne folikule, a crvene strelice na germinativne centre.
Slika 2. Poređenje histopatološke morfologije tkiva limfnih čvorova među različitim grupama miševa (HE bojenje)
2.4 Poređenje procenata Th1, Th2, Th17, Treg i Tfh ćelija u suspenzijama ćelija slezene
Kao što je prikazano uTabela 4, u poređenju sa slijepom kontrolnom grupom, thegrupa modelapokazao povećan procent Th1, Th2, Th17 i Tfh ćelija i smanjen procenat Treg (P < 0,05 ili P < 0,01). U poređenju sa grupom modela,grupe sa srednjim i visokim dozama dekocijaimao smanjene procente Th1 i povećane procente Treg; sve tri grupe decokcija pokazale su smanjene procente Th17 i Tfh. Posebno, thegrupa prednizonasmanjeni procenti Treg-a, što izaziva zabrinutost zbog njegovog potencijala da poremeti imunološku homeostazu.
U poređenju sa grupom koja je primala prednizon, sve grupe sa dekokcijom pokazale su smanjenje Th2, Th17 i Tfh ćelija. Thegrupe sa srednjim i visokim dozamadodatno smanjen Th1 i povećane Treg ćelije (P < 0,05 ili P < 0,01), što ukazuje na uravnoteženiju imunoregulaciju.
Napomena: NMJ, neuromuskularni spoj; AChR, acetilkolinski receptor.
Slika 3 Poređenje morfologije AChR na neuromišićnim spojevima mišićnih grupa među različitim grupama miševa
(imunofluorescentno bojenje, ×100)
Tabela 4. Poređenje postotaka Th1, Th2, Th17, Treg i Tfh stanica u suspenzijama stanica slezene među različitim grupama miševa
Jedinica: (% , x̄ ± s)
| Grupa | n | Th1 | Th2 | Th17 | Treg | Tfh |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Blank Control | 6 | 0.05 ± 0.04 | 0.03 ± 0.02 | 0.11 ± 0.06 | 16.42 ± 2.59 | 9.45 ± 3.29 |
| Kontrola modela | 7 | 3.43 ± 1.11 ᵃ | 0.82 ± 0.22 ᵃ | 1.64 ± 0.65 ᵇ | 7.99 ± 3.26 ᵃ | 18.27 ± 4.21 ᵃ |
| Prednisone | 7 | 1.84 ± 0.26 | 0.84 ± 0.47 | 1.03 ± 0.71 | 5.02 ± 1.58 ᵃ | 15.32 ± 3.84 |
| Decoction Low Dose | 7 | 1.42 ± 0.59 ᶜ ᵉ | 0.60 ± 0.16 ᶜ ᶠ | 0.73 ± 0.24 ᶜ ᶠ | 14.97 ± 2.11 ᶠ | 10.35 ± 3.72 ᶜ ᶠ |
| Decoction Medium Dose | 7 | 1.08 ± 0.59 ᶜ ᵉ | 0.47 ± 0.14 ᶜ ᶠ | 0.45 ± 0.20 ᶜ ᶠ | 13.82 ± 2.21 ᶠ | 9.87 ± 3.65 ᶜ ᶠ |
| Decoction High Dose | 7 | 1.23 ± 0.62 ᶜ ᵉ | 0.32 ± 0.14 ᶠ | 0.34 ± 0.22 ᶜ ᶠ | 13.50 ± 2.47 ᶠ | 7.97 ± 3.60 ᶜ ᶠ |
Bilješke:
ᵃ: P < 0,01 u odnosu na praznu kontrolu
ᵇ: P < 0,05 u odnosu na praznu kontrolu
ᶜ: P < 0,01 u odnosu na kontrolu modela
ᵈ: P < 0,05 u odnosu na kontrolu modela
ᵉ: P < 0,05 u odnosu na prednizon
ᶠ: P < 0,01 u odnosu na prednizon
2.5 Poređenje morfologije AChR u NMJ u svakoj mišićnoj grupi
Slika 3pokazuje da su NMJ AChR u slijepoj kontrolnoj grupi bili strukturno netaknuti i izgledali su kao kompaktne formacije nalik perecu. U grupi modela, NMJ u očnim, sternokleidomastoidnim, deltoidnim i tibijalnim prednjim mišićima izgledali su fragmentirano i deformirano, dok su žvačni, interkostalni i dijafragmalni mišići pokazali ozbiljno poremećene strukture. Sve interventne grupe su pokazale različite stepene poboljšanja morfologije AChR-a.
Kao što je prikazano uTabela 5, u poređenju sa slijepom kontrolnom grupom, modelna grupa je imala značajno smanjen odnos AChR površina u više mišića (P < 0,05 ili P < 0,01). U poređenju sa grupom modela,prednizonisrednja doza dekocijagrupe su pokazale povećanu površinu AChR u očnim mišićima. Thegrupa decokcija sa malim dozamapoboljšana AChR područja u deltoidu i prednjem tibijalisu. Thegrupa sa visokim dozamapoboljšana područja AChR u očnim, sternokleidomastoidnim, deltoidnim i tibijalnim prednjim mišićima.
U poređenju sa prednizonom,grupa sa niskim dozamapoboljšana područja AChR u očnim i žvačnim mišićima; thegrupa sa srednjom dozomu žvačnim mišićima; igrupa sa visokim dozamau sternokleidomastoidnom i prednjem tibijalisu (P < 0,05 ili P < 0,01).
Tabela 5. Poređenje područja AChR na neuromuskularnom spoju u svakoj grupi mišićnih grupa miševa
Jedinica: (% , x̄ ± s)
| Grupa | n | Očni mišić | Žvačni mišić | Sternokleidomastoidni | Deltoid Muscle | Interkostalni mišić | Dijafragma | Tibialis Anterior |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Blank Control | 3 | 3.83 ± 0.28 | 4.28 ± 0.29 | 4.48 ± 0.77 | 3.79 ± 0.12 | 3.78 ± 0.22 | 4.80 ± 0.26 | 3.60 ± 0.32 |
| Kontrola modela | 3 | 2.58 ± 0.34 ᵃ | 2.55 ± 0.45 ᵃ | 2.15 ± 0.31 ᵇ | 2.33 ± 0.15 | 2.55 ± 0.33 | 2.98 ± 0.34ᵇ | 2.95 ± 0.49 |
| Prednisone | 3 | 3.33 ± 0.49ᶜ | 2.67 ± 0.55 | 3.83 ± 0.54 | 3.49 ± 0.38 | 3.60 ± 0.16 | 3.45 ± 0.67 | 3.02 ± 0.40 |
| Decoction Low Dose | 3 | 2.76 ± 0.49ᵉ | 3.05 ± 0.37ᵉ | 3.77 ± 0.64 | 2.77 ± 0.44ᶜ | 3.03 ± 0.25 | 3.33 ± 0.33 | 3.44 ± 0.71ᶜ |
| Decoction Medium Dose | 3 | 3.32 ± 0.40ᶜ | 3.27 ± 0.75ᵉ | 3.98 ± 0.43 | 3.27 ± 0.65 | 3.50 ± 0.28 | 3.85 ± 0.42 | 3.56 ± 0.52 |
| Decoction High Dose | 3 | 3.46 ± 0.37ᶜ | 3.34 ± 0.23ᵉ | 4.54 ± 0.67ᶜ | 3.69 ± 0.39 | 3.75 ± 0.36 | 3.75 ± 0.35 | 3.84 ± 0.52ᶜ |
Bilješke:
ᵃ: P < 0,05 u odnosu na praznu kontrolu
ᵇ: P < 0,01 u odnosu na praznu kontrolu
ᶜ: P < 0,05 u odnosu na kontrolu modela
ᵈ: P < 0,01 u odnosu na kontrolu modela
ᵉ: P < 0,05 u odnosu na prednizon
Tabela 6. Poređenje nivoa AChR-Ab, IL-6 i TNF-a u serumu među različitim grupama miševa
Jedinica: (x̄ ± s)
| Grupa | n | AChR-Ab (P⁻¹) | IL-6 (pg·ml⁻¹) | TNF- (pg·ml⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Blank Control | 12 | 1.00 ± 0.13 | 110.66 ± 30.75 | 25.84 ± 9.71 |
| Kontrola modela | 12 | 3.13 ± 0.97 ᵃ | 327.91 ± 38.71 ᵃ | 124.15 ± 37.61 ᵃ |
| Prednisone | 11 | 2.05 ± 0.29 ᵇ ᶜ | 487.21 ± 124.09 ᵇ | 78.76 ± 22.35 ᵇ ᶜ |
| Decoction Low Dose | 13 | 2.50 ± 0.49ᵉ | 306.42 ± 93.91ᶜ | 89.14 ± 25.90 ᶜ |
| Decoction Medium Dose | 13 | 1.98 ± 0.34 ᶜ | 278.60 ± 63.97ᶜ | 80.36 ± 21.95ᶜ |
| Decoction High Dose | 13 | 1.42 ± 0.33 ᶜ | 224.43 ± 49.03ᶜ | 84.26 ± 36.60ᶜ |
Bilješke:
ᵃ: P < 0,01 u odnosu na praznu kontrolu
ᵇ: P < 0,01 u odnosu na kontrolu modela
ᶜ: P < 0,01 u odnosu na kontrolu modela
ᵈ: P < 0,05 u odnosu na prednizon
ᵉ: P < 0,01 u odnosu na prednizon
2.6 Poređenje nivoa AChR-Ab, IL-6 i TNF-a u serumu
Tabela 6ilustruje da, u poređenju sa slijepom kontrolnom grupom,grupa modelaimao značajno povišene nivoe AChR-Ab, IL-6 i TNF- (P < 0,01). U poređenju sa grupom modela,prednizonigrupe sa srednjim i visokim dozama dekocijaznačajno smanjen AChR-Ab. međutim,prednizon povećan IL-6, dok jegrupa decokcija visokih doza smanjena IL-6. I prednizon igrupe sa srednjim i visokim dozamasmanjen TNF- (P < 0,05 ili P < 0,01).
U poređenju sa prednizonom,grupa decokcija sa malim dozamaimao viši nivo AChR-Ab, alisve grupe decokcijasnizio IL-6, izbjegavajući proinflamatorne efekte prednizona.
3. Diskusija
Klinički, MG je kategoriziran na očnu mijasteniju gravis (oMG) i generaliziranu MG (gMG). oMG se prvenstveno manifestuje kao ptoza i diplopija, a može napredovati u gMG, karakteriziran sistemskom slabošću skeletnih mišića [1]. Teorija tradicionalne kineske medicine (TCM) pripisuje patogenezu MG disfunkcijama uslezine i bubrega. Slezena upravlja mišićima i udovima, budući da je postnatalni korijen i izvor Qi-ja i krvi. Bubreg skladišti esenciju i upravlja kostima i srži. Nedostatak oba dovodi do slabosti mišića, kao što se vidi u MG [15–16].
Na osnovu TCM principa "tretiranja korijena",tonizira slezinu i bubregepostaje centralno. TheJianpi Bushen Yiqi Decoctionoličava ovaj pristup. Njegov glavni sastojak,Astragalus membranaceus, pojačava Qi slezene i podiže Yang.Ljepilo za kornjačinu oklopiljepilo za jelenji rogobogaćuju bubrežnu esenciju i jang, jačajući mišiće i kosti.Codonopsis, Angelica sinensis, Bupleurum, Cimicifuga, iu medu prženi sladićdjeluju sinergijski kako bi nahranili krv, podigli Yang i uskladili formulu.
Ključni dodatak ovoj formulaciji jeCistanche deserticola, poznata biljka zatonizira yang bubrega i obnavlja vitalnu suštinu. Pokazalo se da Cistanche poboljšava imunološku modulaciju i poboljšava otpornost na umor, što ga čini idealnim za stanja poput MG. Prema XJCistanche, Cistanche ekstrakt podržavavitalnost živaca i mišića, promovišebalans neurotransmitera, i poboljšavaimunološka homeostaza-mehanizmi direktno relevantni za MG patofiziologiju.
Ova studija je koristila EAMG mišji model za procjenu efekata dekokcije na bihevioralne, imunološke i strukturne dimenzije NMJ. Rezultati su to pokazaliprednizonpoboljšala snagu hvata i Lennonove rezultate, ali je izazvala značajnegubitak težine, u skladu sa poznatim nuspojavama glukokortikoida [19]. Nasuprot tome, sve doze dekocijapovećana tjelesna težina, što ukazuje na bolju sigurnost.
Terapeutska efikasnost je bilazavisno od doze, sagrupa sa visokim dozamapostizanje uporedivog poboljšanja u snazi prianjanja i Lennonovom rezultatu u odnosu na prednizon koji nudi obaefikasnost i sigurnost.
Indeksi imunoloških organa otkrili su da prednizon smanjuje indeks timusa i uzrokuje kortikalno-medularnu atrofiju, narušavajući centralnu toleranciju [20]. Uvarak je, međutim, sačuvao ili poboljšao strukturu timusa, posebno u visokim dozama. Indeksi slezene su praćeni advofazni obrazac regulacije, s malim i srednjim dozama koje suzbijaju abnormalnu imunološku proliferaciju, dok visoka doza održava ravnotežu.
Sve grupe decokcija smanjile su hiperplaziju folikula limfnih čvorova, iako je samo visoka doza odgovarala prednizonu u supresiji germinalnog centra, što sugerira superiornu regulaciju centralnog i perifernog imuniteta visokim dozama.
Budući da je neravnoteža CD4⁺ T-ćelija u osnovi EAMG [4], sposobnost dekokcije darebalans Th1/Th2/Th17/Tfh i Tregćelije je ključna. Za razliku od prednizona, koji je smanjio Treg, dekocija (posebno srednje i visoke doze)poboljšani Tregi potisnute proinflamatorne podskupine. Ovoimunološka modulacija, umjesto supresije imuniteta, bolje se usklađuje s potrebama autoimunih bolesti poput MG.
Za integritet NMJ, dekokcija je pokazalapopravak višemišićnog AChR-a, nadmašujući prednizon u nekoliko mišićnih grupa. Štaviše, efektivno je smanjenAChR-Ab, IL-6 i TNF-, s visokom dozom koja pokazuje najsveobuhvatniji protuupalni efekat - bez povišenja prednizona IL-6.
Zaključak
TheJianpi Bushen Yiqi Decoction, obogaćen saCistanche deserticola, ispoljava višeciljne terapeutske efekte kod EAMG miševa. To:
Ponovno balansira Th/Treg os i potiskuje Tfh posredovanu aktivaciju B stanica
Smanjuje patogena antitijela i upalne citokine
Popravlja strukture NMJ i vraća funkciju mišića
U poređenju sa prednizonom, nudi superiornosigurnost, obnavljanje imuniteta, iciljanje na više mišića, ističući njegov potencijal kao aklinička alternativailipomoćna terapijaza MG.
Buduće studije bi to trebale istražitibioaktivna jedinjenja, metaboličkih puteva, imolekularne mete, moguće krozmrežna farmakologijaiproteomika, kako bi se ubrzao njegov razvoj kao novog terapeutika zasnovanog na TCM.
