Abstract

Pozadina:Postoji nedostatak tehnika snimanja i obrade slike za precizno razlikovanje i kvantifikaciju dermalnog ekstracelularnog matriksa (ECM), prvenstveno kolagena. Ova studija imala je za cilj razviti i demonstrirati holistički pristup slikanju i obradi slike kako bi se vizualiziralo i kvantificiralo remodeliranje kolagena na makro-, mikro i nano-skali koristeći histohemijsko snimanje, refleksivno konfokalnu mikroskopiju (RCM) i mikroskopiju atomske sile (AFM) , odnosno.

Glikozid cistanche takođe može povećati aktivnost SOD u tkivima srca i jetre, te značajno smanjiti sadržaj lipofuscina i MDA u svakom tkivu, efikasno hvatajući različite reaktivne radikale kisika (OH-, H₂O₂, itd.) i štiteći od oštećenja DNK uzrokovanih od strane OH-radikala. Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju jaku sposobnost uklanjanja slobodnih radikala, veću redukcijsku sposobnost od vitamina C, poboljšavaju aktivnost SOD u suspenziji sperme, smanjuju sadržaj MDA i imaju određeni zaštitni učinak na funkciju spermatozoida. Cistanche polisaharidi mogu pojačati aktivnost SOD i GSH-Px u eritrocitima i plućnim tkivima eksperimentalno starenja miševa uzrokovanih D-galaktozom, kao i smanjiti sadržaj MDA i kolagena u plućima i plazmi, te povećati sadržaj elastina. dobar učinak čišćenja na DPPH, produžava vrijeme hipoksije kod starijih miševa, poboljšava aktivnost SOD u serumu i odlaže fiziološku degeneraciju pluća kod eksperimentalno starenja miševa. i ima potencijal da bude lijek za prevenciju i liječenje bolesti starenja kože. U isto vrijeme, ehinakozid u Cistancheu ima značajnu sposobnost uklanjanja slobodnih radikala DPPH i sposobnost uklanjanja reaktivnih vrsta kisika i sprječavanja degradacije kolagena izazvane slobodnim radikalima, a također ima dobar učinak popravljanja oštećenja anjona slobodnih radikala timina.

Kliknite na Kako koristiti Antioxidant Cistanche

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Materijal i metode:Kao dokaz koncepta, komercijalni proizvod protiv starenja za koji se zna da indukuje neosintezu i reorganizaciju kolagena testiran je ex vivo na biopsijama ljudske kože od dvije starije žene.

Rezultati:U odnosu na netretiranu kožu, kolagena vlakna (RCM) i fibrili (AFM) su bila duža i poravnata nakon tretmana. Sadržaj kolagena i elastina (histohemijsko snimanje i ELISA) se statistički poboljšao nakon tretmana.

zaključak:Na osnovu naših nalaza, možemo zaključiti: (1) AFM, RCM i histohemijsko snimanje mogu precizno razlikovati kolagen od drugih komponenti ECM u koži i (2) metode obrade slike mogu omogućiti kvantitaciju i stoga uhvatiti mala poboljšanja u remodeliranju kolagena nakon tretman (komercijalni kozmetički proizvod s tehnologijom organizatora kolagena kao dokaz koncepta). Prijavljeni holistički pristup slikanju ima direktne kliničke implikacije na naučnike i dermatologe da donose brze, u realnom vremenu i tačne odluke u istraživanju i dijagnostici kože.

KLJUČNE RIJEČI

protiv starenja, mikroskopija atomske sile, reorganizacija kolagena, dermalno remodeliranje, ekstracelularni matriks, refleksna konfokalna mikroskopija (Vivascope)

1. UVOD

Kontrolirano remodeliranje dermalnog ekstracelularnog matriksa (ECM) je bitno za normalan razvoj i homeostazu kože i drugih organa. ECM remodeliranje je zaštitni znak u patofiziologiji starenja kože,1 zacjeljivanju rana i nekih smrtonosnih bolesti uključujući, ali ne ograničavajući se na rak i fibrozu.2 Postoje brojne estetske i medicinske mogućnosti za liječenje ovih stanja kože, međutim, metode snimanja su rijetke za vizualizacija u realnom vremenu remodeliranja ECM-a, prvenstveno kolagena koji je najzastupljenija strukturna komponenta dermalnog ECM-a. Iako su u razvoju, neke od novih neinvazivnih tehnika kliničkog snimanja u realnom vremenu za vizualizaciju kolagena i njegove organizacije su multifotonska mikroskopija s drugom harmonijskom generacijom (MPM-SHG), 3 refleksna konfokalna mikroskopija (RCM),4 optička koherentna tomografija (OCT),5,6 Lindfieldova konfokalna optička koherentna tomografija (LC-OCT) zasnovana na kombinaciji modaliteta RCM i OCT,7 magnetne rezonancije (MRI),8 i ultrazvučnog snimanja.9 Od njih, RCM, MPM i LC-OCT su CE certificirani instrumenti za snimanje kože. Međutim, među svima njima, RCM tehnika (Vivascope® 1500 i 3000 iz Lucid, Inc. SAD) je jedina dijagnostička tehnika kliničke dermatologije koju je odobrila FDA (510(k)# K080788), koju također pokriva većina osiguranja u SAD za dijagnosticiranje kožnih lezija.10 To je neinvazivna i isplativa alternativa klasičnoj biopsiji i histopatološkim tehnikama za dijagnosticiranje i praćenje karcinoma kože i njihovog liječenja.10 Među pretkliničkim metodama snimanja za vizualizaciju organizacije kolagena, mikroskopija atomske sile ( AFM),11 elektronska mikroskopija,11,12 histohemijsko snimanje pomoću fluorescentne mikroskopije,13 polarizirana svjetlosna mikroskopija,14 konfokalna laserska skenirajuća mikroskopija (CLSM),15,16 multimodalna konfokalna refleksija i fluorescentna mikroskopija,17 i rendgensko raspršenje pod malim kutom18 dobro poznat.

Jedno od glavnih upozorenja koje ograničavaju upotrebu gore navedenih tehnika kliničkog snimanja je da zahtijeva zamornu ručnu procjenu jer je stručnost i iskustvo u predmetu za preciznu analizu crno-bijelih slika struktura kože preduvjet.19,20 Stoga se ulaže više napora. potrebno u području obrade slika za razvoj i validaciju algoritama i softvera za automatizaciju analize,5 proizvodnju digitalno obojenih slika koje se lako tumače,16,17 i izdvajanje kvantitativnih informacija za praćenje progresije bolesti i terapije, uključujući organizaciju kolagena u kontekstu našeg istraživanja.3,6,12–14 To će omogućiti ne-dermatolozima i dermatolozima da donose odluke brže i sa više samopouzdanja jer će se odluke donositi na osnovu veće veličine uzorka randomiziranih slika. Urađene su neke fundamentalne studije kako bi se pokazalo korištenje RCM-a i MPM-a za razumijevanje promjena kože povezanih sa starenjem (uključujući organizaciju kolagena) kod mladih naspram starijih ili fotoostarjelih subjekata.21,22 Međutim, postoji ograničen napor u proširenju moći ovih tehnika snimanja kako bi se uhvatilo poboljšanje u liječenju, što zahtijeva sofisticiranu obradu slike da bi se dobile kvantitativne informacije.3,13,16

Ova studija imala je za cilj razvoj i demonstriranje holističkog pristupa slikanju i obradi slike kako bi se vizualizirala i kvantificirala poboljšanja u remodeliranju kože (prvenstveno kolagena). Kao dokaz koncepta, korišćen je klinički dokazan komercijalni kozmetički proizvod protiv starenja s tehnologijom organizatora kolagena za procjenu izvodljivosti korištenja obrade slike za kvantificiranje manjih promjena u kolagenu prije i nakon tretmana.

2 MATERIJALI I METODE

2.1 Biopsije kože i njihovo liječenje

Biopsije kože koje su korištene u ovom istraživanju bile su ostatak materijala iz plastične kirurgije abdomena dobijen od dva donatora nakon njihovog pristanka (pristanak zadržavaju klinike). Donor #1 (62 godine) i donor #2 (52 godine) su bile žene i tip kože po Fitzpatricku II. Biopsije su održavane u standardnim uslovima kulture i svakodnevno tretirane test proizvodom ili kontrolom (netretirane ili placebo) tokom 6 dana, a sakupljene su 7. dana za snimanje i ELISA. Biopsije donora #1 korištene su za ELISA, RCM i AFM, dok su biopsije donora #2 korištene za histohemijsko snimanje.

2.2 RCM i AFM snimanje

Biopsije kože od donora #1 su sakupljene 7. dana i direktno snimljene bez ikakvog sečenja i bojenja. AFM (Bruker, Multimode 8 AFM) i RCM (Vivascope® 1500) korišćeni su za dobijanje nano i mikro slika kolagena visoke rezolucije u koži tretiranoj test proizvodom, a netretiranoj kao kontrola. Za sve eksperimente, AFM je bio opremljen malom konzolom (PPP-FMR- 20, nanosenzori): konstanta opruge, k=0.5–9.5 N/m, rezonantna frekvencija, f {{13} }–115 kHz u vazduhu i radio je u režimu točenja na sobnoj temperaturi. Uzorci kože postavljeni su bočno na magnetni disk (1 mm × 1 mm) i postavljeni na pozornicu. AFM slike su dobijene bočnim/bočnim pogledom na biopsije kože kako bi se izbjeglo presecanje. Za RCM snimanje, sedam nasumičnih slika dobijeno je iz tretiranih i netretiranih biopsija sa gornje strane (stratum corneum) i dna (strana dermisa) kako bi se dobile visokokvalitetne slike kolagena. RCM slike su obrađene i analizirane pomoću ConfoScan® za teksturu kolagena da bi se prijavio srednji indeks fragmentacije. Indeks fragmentacije je definiran površinom objekata podijeljenom s brojem objekata dobivenih nakon obrade sirovih slika za teksturu kolagena. Slika S1 prikazuje obradu slike pomoću ConfoScan®-a za dobijanje kvantitativnih vrednosti indeksa fragmentacije kolagena (CFI).

2.3 Histohemijsko snimanje

Kako bi se testirao učinak proizvoda protiv starenja na tretman foto-stare kože (oporavak foto-oštećenog kolagena i elastina), biopsije donora #2 su bile izložene simuliranoj dozi UV (6 J/cm2 sa 96 posto UVA zraka). ). Uzorci i uslovi testirani u eksperimentima bili su: (A) negativna kontrola (netretirana, bez UV zračenja i bez testiranog proizvoda), (B) pozitivna kontrola (koža izložena UV zračenju, ali bez testiranog proizvoda) i (C) tretirana ( koža izložena UV zračenju, nakon čega slijedi svakodnevni tretman testnim proizvodom). Biopsije kože su sakupljene 7. dana, podijeljene na rezove, obojene na kolagen (bojenje po Picosirius-u) i elastin (imunobojenje) i snimljene. Slike su obrađene i analizirane korišćenjem zaštićenog algoritma za analizu slike kako bi se dobile kvantitativne informacije o sadržaju kolagena i elastina u papilarnom dermisu. Ukratko, analitički proces za dobivanje kvantitativnih informacija o sadržaju kolagena i elastina uključuje konverziju RGB slika u LAB prostor boja, filtriranje pozadine kako bi se dobile jasne slike kolagena i elastina, a zatim normaliziranje sadržaja kolagena i elastina u papilarnom dermisu na isto područje ili nekoliko piksela. Bilo je šest biopsija ili uzoraka kože za svako stanje i dva dijela ili slike iz svakog uzorka, što je rezultiralo N=12 slika i tačaka podataka za statističko testiranje. Slika S2 prikazuje šematski pristup obradi slike kako bi se dobile kvantitativne vrijednosti sadržaja kolagena.

2.4 ELISA

Nakon uzimanja tkiva 7. dana, korišćena je bušilica prečnika 4 mm za dobijanje manjih biopsija i odabrane su dve biopsije sa ∼25 mg/biopsija. Probušene biopsije (50 mg ukupne težine) pomiješane su u puferu za lizu koji je sadržavao 0,1 posto tritona i koktel inhibitora proteaze, nakon čega je uslijedila homogenizacija tkiva korištenjem automatizovanog dvostrukog obrađivačkog homogenizatora sa mehaničkim i ultrazvučnim karakteristikama za potpunu lizu tkiva. Lizirano tkivo je centrifugirano, supernatant je sakupljen, podijeljen na dva dijela i čuvan na -80°C do upotrebe. Uz normalizaciju težine (50 mg), uzorci su također normalizirani na ukupan sadržaj proteina u supernatantu. Supernatant je analiziran na Pro-Collagen 1, Elastin, Alpha-Smooth Muscle actin (A-SMA), Tenascin-X i hijaluronsku kiselinu koristeći komercijalne ELISA komplete. Statistika je obavljena na N=6 tačaka podataka (3 biopsije × 2 alikvota).

3 REZULTATA

Histohemijsko snimanje (slika 1) dalo je makroskopske informacije o distribuciji i količini kolagena i elastina. Jasno smanjenje crvene boje snopova kolagenih i elastinskih vlakana uočeno je nakon tretmana biopsija kože UV.

U tabeli 1 prikazane su kvantitativne vrijednosti sadržaja kolagena i elastina u tri tretmana. Ove vrijednosti su nam omogućile mjerenje poboljšanja u sadržaju kolagena i elastina i statistička poređenja. Smanjenje sadržaja kolagena (-23 posto naspram netretiranog) i elastina (-30 posto naspram netretiranog) nakon izlaganja UV zrakama bilo je značajno (Slika 2). Nakon tretmana sa test proizvodom u trajanju od 6 dana, biopsije kože izložene UV zračenju uspjele su povratiti kolagen (plus 18 posto u odnosu na UV tretirane) i elastin ( plus 46 posto u odnosu na UV tretirane). Iako organizacija kolagena nije jasna na histohemijskim slikama (jer je kolagena najzastupljenije i gušće zbijeno u koži), karakteristično okomito poravnanje elastinskih vlakana koja se protežu prema epidermisu uočeno je u nativnoj (Slika 1A) i UV oštećenoj koži nakon tretman sa test proizvodom (slika 1C).

ELISA (Slika 3) upoređuje nivoe biomarkera izraženih u biopsijama kože tretirane ispitivanim proizvodom ili placebom (koji nema koktel aktivnih sastojaka poznatih po remodeliranju kože). U poređenju sa placebom, došlo je do 2-3 puta povećanja nivoa elastina i kolagena, posebno pro-kolagena tipa 1 (testni proizvod u odnosu na placebo). Iako nije značajno, primećeno je i primetno povećanje (P < 0.1) hijaluronske kiseline i tenascina-X.

RCM je uspješno otkrio organizaciju kolagenih vlakana (snop kolagenih vlakana) u koži (slika 4). Zahvaljujući svojim optičkim karakteristikama konfokalne i četvrtvalne ploče, tehnika je bila u mogućnosti da uspješno razlikuje kolagen (snažni endogeni kontrastni agens sa dvostrukim prelamanjem) od drugih matrica bez rezanja i bojenja kože. Kratki fragmentirani kolagen i njegov zbijeni raspored (karakterističan za oštećeni i loše organizirani kolagen u ostarjeloj/fotoostarjeloj koži) uočeni su u netretiranoj biopsiji kože. Nakon tretmana sa test proizvodom u trajanju od 6 dana, raspored kolagenih vlakana u ovoj 62-godišnjoj biopsiji ženske kože (donor #1) izgleda relativno organiziranije od netretiranih, kolagenskih vlakana dužine preko 100 µm. paralelno jedno s drugim. Iako slab kontrast, možemo uočiti oblik i veličinu fibroblasta (naglašeno strelicama na slici 4), velike i raširene fibroblaste pravilnih oblika u tretiranoj koži u odnosu na netretiranu kožu. Svijetle okrugle ćelije na slici 4C su od posebnog interesa. To mogu biti mastociti ili inflamatorne ćelije. Nije jasno jesu li ove upalne stanice reprezentativne za normalna zdravstvena stanja kože ili su izražene kao odgovor na značajnu silu primijenjenu na lasersku glavu kako bi se pokušao postići bolji kontakt između laserske glave i kože za visokokvalitetne slike kolagena. vlakna.

Tabela 2 prikazuje srednji indeks fragmentacije određen ConfoScan® analizom sedam nasumičnih slika tretirane i netretirane kože. Indeks fragmentacije kolagena za tretiranu u odnosu na netretiranu grupu bio je 0.032 i 0,064, respektivno. Smanjenje indeksa fragmentacije ukazuje na poboljšanje organizacije kolagena.

Da bi se dublje sagledao raspored kolagena, dobijene su AFM slike kako bi se vizualizirao raspored kolagena na nanoskali (slika 5). Možemo vidjeti pojedinačne kolagene fibrile (taj snop koji formira kolageno vlakno) nanometarske debljine. Nadalje, također možemo vidjeti karakteristični poprečni obrazac trake kolagenih vlakana (D ~ 68 nm), koji je u skladu s literaturom,11 i potvrđuje da je AFM bio u stanju razlikovati kolagen od drugih ECM vlakana. U skladu sa RCM, relativno paralelna organizacija kolagenih fibrila je takođe uočena pod AFM za tretiranu i netretiranu kožu.

4 DISKUSIJA

U ovom istraživanju istražili smo potencijal korištenja tri tehnike snimanja za vizualizaciju promjena u kolagenu u biopsijama ljudske kože tretirane komercijalnim proizvodom protiv starenja koji sadrži neke referentne sintetičke peptide za koje je poznato da induciraju remodeliranje kolagena. Tehnike histohemijskog snimanja i RCM snimanja su spojene sa obradom slike kako bi se dobile polukvantitativne informacije o sadržaju kolagena i fragmentaciji kao indeksu za poboljšanje kolagena nakon tretmana sa proizvodom protiv starenja.

Zanimljivo je da je naša studija pokazala vrlo snažnu korelaciju između histohemijskog snimanja i ELISA testa kako bi se prijavilo značajno povećanje nivoa kolagena i elastina nakon tretmana sa test proizvodom. Prokolagen tipa 1 je marker novosintetiziranog kolagena, a njegova prekomjerna ekspresija fibroblastima kao odgovor na Matrixyl® (Sederma/Croda) je dobro okarakteriziran mehanizam za djelovanje protiv starenja.23,24 Također je došlo do značajnog povećanja u ekspresiji A-SMA, markera jedinstvenog za miofibroblaste, koji su posebno diferencirane ćelije fibroblasta. Uloga A-SMA u kontrakciji i remodeliranju ECM posredovane fibroblastima je dobro shvaćena,25 i prijavljena je direktna korelacija između ekspresije A-SMA i aktivnosti kontrakcije fibroblasta.26 Povećanje hijaluronske kiseline, iako nije značajno, moglo bi biti prvenstveno pripisuje se prisustvu hijaluronske kiseline kao hidratantnog sastojka u proizvodu protiv starenja. TNSX je novi ECM protein koji je lokaliziran između ili na površini kolagenih vlakana u dermisu kože27, a navodi se da TNSX inducira fibrilogenezu kolagena ovisnu o dozi,28,29 iako postoji kontroverza da li se TNSX specifično veže za pro-kolagenski tip. 1 ili druge biomolekule kolagena i ECM također.28,29 Prijavljeno je povećanje TNSX ovisno o dozi kao odgovor na SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics), aktivni sastojak u proizvodu za testiranje protiv starenja (Međunarodna patentna prijava # PCT /IB2017/056370). Stoga se može pretpostaviti da Matrixyl® (Sederma/Croda) i SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics) u testnom proizvodu rade zajedno kako bi olakšali sintezu i usklađivanje svježe sintetiziranog kolagena, prokolagena tipa 1. Značajno smanjenje kolagena i elastina nakon UV tretmana (model foto-oštećene kože), nakon čega slijedi njihova popravka nakon tretmana sa proizvodom protiv starenja (nivo se vraća na izvornu kožu koja nije izložena UV zračenju) ukazuje na sposobnost histohemijskog snimanja (polarizirana mikroskopija) i tehnike obrade slike da mjere male promjene u sadržaju komponenti ECM (Slike 1 i 2). Uloženi su marljivi napori da se pokuša slikati organizaciju kolagena i elastina (nakon imunofluorescentnog označavanja) koristeći novokupljeni Thunder Leica fluorescentni sistem za snimanje. Međutim, rezolucija nije bila dovoljno visoka, pa se ništa pouzdano nije moglo zaključiti o organizaciji. CLSM slikanje zasnovano na fluorescenciji nudi veću rezoluciju od konvencionalnog fluorescentnog snimanja širokog polja kako bi se omogućila jasna vizualizacija organizacije kolagena i elastina. Konvencionalno fluorescentno snimanje širokog polja ograničeno je dominacijom sekundarne fluorescencije i debljinom uzoraka, što nije zabrinjavajuće za CLSM.

Bili smo u mogućnosti vizualizirati organizaciju kolagena koristeći RCM (slika 4). RCM je bolji izbor od CLSM-a jer (1) RCM ne koristi nikakvu oznaku ili bojenje (za razliku od fluorescentnog-CLSM-a koji zahtijeva imunofluorescentno označavanje) uklanjajući sve šanse za nesigurnost ili nespecifičnost zbog oznaka, i (2) RCM je široko rasprostranjen koristio je kliničku tehniku ​​dermalnog snimanja kolagena. Poboljšanje teksture kolagenih vlakana, dugih i tankih vlakana nakon tretmana sa proizvodom protiv starenja (u odnosu na gusta i kratka fragmentirana kolagena vlakna u netretiranoj koži) ukazuje na njegov način djelovanja na strukturnom nivou. Rezolucija RCM-a bila je dovoljno visoka da uhvati čak i ćelije fibroblasta, fabriku sinteze kolagena kože. Kolagenska vlakna omotana oko fibroblasta mogu biti novosintetizovana kolagena vlakna jer su tanja u prečniku od okolnih kolagenih vlakana i njihovih snopova (Slika 4). Na osnovu ConfoScan® analize randomiziranih RCM slika, možemo zaključiti da netretirana koža ima mnogo veći indeks fragmentiranog kolagena u odnosu na tretiranu kožu. Iako na RCM snimcima možemo vidjeti paralelno poravnanje kolagenih vlakana nakon tretmana ispitivanim proizvodom, to se ne može zaključiti osim ako se ne izračuna omjer izotropije/anizotropije, što je bilo izvan okvira ovog istraživanja. Međutim, ultravisoka rezolucija AFM-a na nanorazmjeri otkriva dokaze poravnanja kolagena na nivou pojedinačnih fibrila. Na osnovu pozitivne korelacije između RCM i AFM snimaka na paralelnom poravnanju kolagenih vlakana (netretiranih naspram tretiranih), postoji velika mogućnost da proizvod protiv starenja ima zatraženo svojstvo reorganizacije kolagena. Za buduća istraživanja, studiju bi trebalo provesti kako bi se pratila ista točka (kolagenska vlakna) tokom vremena (longitudinalna studija) prije i nakon tretmana testnim proizvodom kako bi se ispitalo da li se radi o poravnanju postojećeg kolagena ili novosintetiziranih kolagenskih vlakana više usklađen. Međutim, takva longitudinalna studija će zahtijevati integraciju RCM i AFM instrumenata u sposobnost snimanja živog tkiva i time-lapse snimanja kako bi se uhvatile promjene u realnom vremenu u remodeliranju kolagena.

5 ZAKLJUČCI

Na osnovu naših nalaza istraživanja iz ove studije dokazivanja koncepta, možemo zaključiti da su tehnike AFM, RCM i histohemijskog snimanja sposobne pratiti promjene u organizaciji kolagena na nano, mikro i makro skali, respektivno. AFM i RCM slike pokazuju dokaze poravnanja kolagena na nano i mikro skali nakon tretmana sa test proizvodom. Analiza randomiziranih RCM i histohemijskih slika korištenjem vlastitih pristupa obradi slike dalje ukazuje da koža nakon tretmana s test proizvodom ima manju fragmentaciju kolagena i veću denzifikaciju kolagena u usporedbi s netretiranom. Iako su određeni napori uloženi u razvoj i validaciju algoritama za obradu slike3,5,6,12–14,16,17 potrebno je više istraživanja u ovom pravcu kako bi se postigle odluke o pretkliničkom i kliničkom istraživanju i dijagnostici zasnovane na podacima. Naš holistički pristup primjene tehnika snimanja visoke rezolucije i visokog sadržaja u kombinaciji sa moćnim i robusnim algoritmima za obradu slike i softverom je korak u tom smjeru.

Iako je opseg ovog istraživanja bio ograničen na istraživanje organizacije kolagena kao odgovora na proizvod protiv starenja na ex vivo biopsiji ljudske kože, ove tehnike snimanja imaju implikacije za praćenje i kvantifikaciju remodeliranja ECM-a, što je obilježje normalnog razvoja, zacjeljivanje rana, kao i ključni marker u patofiziologiji životno opasnih stanja kao što su fibroza i rak koji nastaju nekontroliranim remodeliranjem ECM.2

SUKOB INTERESA

Autori izjavljuju da se nijedan sukob interesa ne može shvatiti kao prejudiciranje nepristrasnosti objavljenog istraživanja.

REFERENCE

1. Shin JW, Kwon SH, Choi JY, Na JI, Choi HR, Park KC. Molekularni mehanizmi starenja kože i pristupi protiv starenja. Int J Mol Sci. 2019;20(9):2126.

2. Cox TR, Erler JT. Remodeliranje i homeostaza ekstracelularnog matriksa: implikacije za fibrozne bolesti i rak. Dis Model Mech. 2011;4(2):165–78

3. Pittet JC, Freis O, Vazquez-Duchene MD, Perie G, Pauly G. Procjena sadržaja elastina/kolagena u ljudskom dermisu in-vivo multifotonskom tomografijom-varijacija sa dubinom i korelacija sa starenjem. Kozmetika. 2014;1(3):211–21

4. Longo C, Casari A, Beretti F, Cesinaro AM, Pellacani G. Starenje kože: Mikroskopska procjena epidermalnih i dermalnih promjena korištenjem konfokalne mikroskopije. J Am Acad Dermatol. 2013;68(3):e73–82.

5. Yamazaki K, Li E, Miyazawa A, Kobayashi M. Istraživanje višestrukih optičkih svojstava i morfologije bora u područjima uglova oka sa višekontrastnom Jonesovom matričnom optičkom koherentnom tomografijom. Skin Res Technol. 2020;27(3):435–443.

6. Yow AP, Cheng J, Li A, Srivastava R, Liu J, Wong DWK, et al. Automatski in vivo 3D sistem optičke koherentne tomografije kože visoke definicije. Annual Int Conf IEEE Eng Med Biol Soc. 2016;2016:3895–8

7. Ruini C, Schuh S, Sattler E, Welzel J. Konfokalna optička koherentna tomografija linijskog polja – praktične primjene u dermatologiji i poređenje s utvrđenim metodama snimanja. Skin Res Technol. 2021;27:340–52.

8. Tal S, Maresky HS, Bryan T, Ziv E, Klein D, Persitz A, et al. MRI u otkrivanju kozmetičkih filera za injektiranje lica. Head Face Med. 2016;12(1):27.

9. Mandava A, Ravuri PR, Konathan R. Ultrazvučno snimanje kožnih lezija visoke rezolucije. Indijski J Radiol Imaging. 2013;23(3):269–7.

10. Edwards SJ, Mavranesouli I, Osei-Assibey G, Marceniuk G, Wakefield V, Karner C. Vivascope 1500 i 3000 sistemi za otkrivanje i praćenje kožnih lezija: sistematski pregled i ekonomska procjena. Procjena zdravstvene tehnologije. 2016;20(58):1–260.

11. Ushiki T. Kolagenska vlakna, retikularna vlakna, elastična vlakna. Sveobuhvatno razumijevanje sa morfološkog stanovišta. Arch Histol Cytol. 2002;65(2):109–26

12. Starborg T, Kalson NS., Lu Y, Mironov A, Cootes T, Holmes D, et al. Korištenje transmisione elektronske mikroskopije i 3view(R) za određivanje veličine kolagenih vlakana i trodimenzionalne organizacije. Nat Protoc. 2013;8(7):1433–48.

13. Wegner KA, Keikhosravi A, Eliceiri AW, Vezina CM. Fluorescencija pikozirius crvenog multipleksirana sa imunohistohemijom za kvantitativnu procjenu kolagena u presjecima tkiva. J Histochem Cytochem. 2017;65(8):479–90.

14. Changoor A, Tran-Khanh N, Methot S, Garon M, Hurtig MB, Shive MS, et al. Metoda mikroskopije polariziranog svjetla za precizno i ​​pouzdano ocjenjivanje organizacije kolagena u obnavljanju hrskavice. Osteoarthr Cartil. 2011;19(1):126–35.

15. Bernstein EF, Chen YQ, Kopp JB, Fisher L, Brown DB, Hahn PJ, et al. Dugotrajno izlaganje suncu mijenja kolagen papilarnog dermisa. Poređenje kože zaštićene od sunca i fotoostarele kože Northern analizom, imunohistohemijskim bojenjem i konfokalnom laserskom skenirajućom mikroskopom. J Am Acad Dermatol. 1996;34(2 pt 1):209–18.

16. Schuurmann M, Stecher MM, Paasch U, Simon JC, Grunewald S. Evaluacija digitalnog bojenja za ex-vivo konfokalnu lasersku skenirajuću mikroskopiju. JEADV. 2020;34(7):1496–9.

17. Gareau DS. Izvodljivost digitalno obojenih multimodalnih konfokalnih mozaika za simulaciju histopatologije. J Biomed Opt. 2009;14(3):034050.

18. Zhang Y, Ingham B, Cheong S, Ariotti N, Tilley RD, Naffa R, et al. Sinhrotronski sinhrotron pod malim uglom rendgenske studije raspršenja strukture kolagena tokom obrade kože u realnom vremenu. Ind Eng Chem Res. 2018;57(1):63–9.

19. Od slike do informacije: Obrada slike u dermatologiji i biologiji kože. U: Hamblin, M., Avci, P., Gupta, G., urednici. Imaging in dermatology, 1. ed. Academic Press: Amsterdam, Nizozemska; 2016. str. 519–35.

20. Schneider SL, Kohli I, Hamzavi IH, Council ML, Rossi AM, Ozog DM. Nove tehnologije snimanja u dermatologiji, dio II: Primjene i ograničenja. J Am Acad Dermatol. 2019;80(4):1121–31.

21. Guida S, Pellacani G, Ciardo S, Longo C. Reflektivna mikroskopska slika starenja kože i raka kože. Dermatol Prac Concept. 2021;11(3):2021068.

22. Wang H, Shyr T, Fevola MJ, Cula GO, Stamatas GN. Morfološke promjene dermalnog matriksa u ljudskoj koži su dokumentirane in vivo multifotonskom mikroskopijom. J Biomed Opt. 2018;23(3):1–4.

23. Jones RR, Castelletto V, Connon CJ, Hamley IW. Kolagen stimulirajući efekat peptidnog amfifila C16-KTTKS na ljudske fibroblaste. Mol Pharm. 2013;10(3):1063–9.

24. Gorouhi F, Maibach HI. Uloga lokalnih peptida u prevenciji ili liječenju stare kože. Int J Cosmet Sci. 2009;31(5):327–45.

25. Shinde AV, Humeres C, Frangogiannis NG. Uloga aktina a-glatkih mišića u kontrakciji i remodeliranju matriksa posredovanom fibroblastom. Biochim Biophys Acta. 2017;1863(1):298–309.

26. Hinz B, Coletta G, Tomasek JJ, Gabbiani G, Chaponnier C. Ekspresija aktina alfa glatkih mišića povećava kontraktilnu aktivnost fibroblasta. Mol Biol Cell. 2001;12(9):2730–41.

27. Valcourt U, Alcaraz LB, Exposito JY, Lethias C, Bartholin L. Tenascin-X: Izvan arhitektonske funkcije. Cell Adh Migr. 2015;9(1–2):154–65.

28. Egging D, van den Berkmortel F, Taylor G, Bristow G, Schalkwijk J. Interakcije humanih tenascin-X domena s dermalnim ekstracelularnim matriksnim molekulima. Arch Dermatol Res. 2007;298(8):389–96.

29. Minamitani T, Ikuta T, Saito Y, Takebe G, Sato M, Sawa H, et al. Modulacija fibrilogeneze kolagena tenascinom-X i kolagenom tipa VI. Exp Cell Res. 2004;298(1):305–15

PODRŽNE INFORMACIJE

Dodatne prateće informacije mogu se naći u online verziji članka na web stranici izdavača.

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】