Viši nivoi etil glukuronida u kosi kod pacijenata sa smanjenom funkcijom bubrega
Mar 25, 2022
ali.ma@wecistanche.com
Gudrun Høiseth, et al
Pozadina:
Nivoi etil glukuronida (EtG) u kosi često se koriste za razlikovanje pijenja u društvu od obilnog pijenja. Pacijenti sa smanjenimfunkciju bubregaimaju odloženo izlučivanje EtG i može se posumnjati na povećano ugrađivanje u kosu. Cilj ove studije bio je uporediti EtGlevels kose kod pacijenata sa smanjenimfunkciju bubregaonima viđenim kod zdravih dobrovoljaca.
Metode:Uključeno je 12 pacijenata sa bubrežnom bolešću. Nivoi EtG u kosi prilagođeni su procijenjenom dnevnom unosu etanola (EDI) i upoređeni sa 21 prethodno objavljenom zdravom osobom.
Rezultati: Nivoi EtG kose kod 12 pacijenata kretali su se između < granice="" detekcije="" i="" 134="" pg/mg,="" a="" edi="" se="" kretao="" između="" 0.1="" i="" 12="" g.="" nivoi="" etg="" u="" kosi="" bili="" su="" značajno="" viši="" kod="" pacijenata="" u="" poređenju="" sa="" zdravim="" dobrovoljcima="" (p="">
Zaključci:Ovi preliminarni rezultati ukazuju na smanjenje nivoa EtG u populaciji pacijenatafunkciju bubregatreba tumačiti s oprezom.
Ključne riječi:Alkohol, biomarker, etil glukuronid.
Click to Cistanche tubulosa prednosti i nuspojave i Cistanche za poboljšanjefunkciju bubrega
NIVOI etil glukuronida (EtG) u kosi se koriste kao marker dugotrajne upotrebe alkohola, a predložena je granična vrijednost od 30 pg/mg u proksimalnom 3-cm segmentu kose za otkrivanje visoke dnevne unos alkohola (iznad 60 g/d; Potgieter, 2000) tokom posljednja 3 mjeseca (Alt et al., 2000; Morini et al., 2009). Do sada, svi objavljeni članci ukazuju na to da EtG u kosi pokazuje najbolju dijagnostičku osjetljivost i specifičnost za detekciju kronične konzumacije teške alkohola u usporedbi s drugim tradicionalnim biomarkerima etanola (EtOH). Samo tretman kose, poput bojenja ili izbjeljivanja, mogao bi negativno utjecati na određivanje EtG, dok svi ostali procijenjeni parametri (starost, spol, boja kose, itd.) izgleda da ne utiču na pouzdanost EtG (Morini et al., 2010).
Nedavno smo pokazali produžena vremena detekcije urina za EtG i EtS kod pacijenata sa smanjenimfunkciju bubrega(Hoiseth et al., 2012). Kako je izlučivanje putem bubrega glavni put eliminacije EtG i etil sulfata (EtS), to implicira da se kod ove populacije pacijenata mogu vidjeti veće koncentracije EtG i EtS u krvi u odnosu na zdrave dobrovoljce, nakon identičnog unosa alkohola. Ova situacija je također uočena kod 1 pojedinačnog subjekta s bubrežnom bolešću u prethodnoj studiji (Hoiseth et al., 2009). Viši nivoi EtG u krvi mogu rezultirati većim ugrađivanjem u kosu i naknadno višim nivoima EtG u ovoj matrici. Stoga je cilj ove studije bio da se ispita da li se nivo dlake kod pacijenata sa EtGin smanjiofunkciju bubregarazlikovali od onih uočenih kod zdravih dobrovoljaca.
MATERIJALI I METODE
Protokol studija
Nondialyzed renal disease patients were recruited from the renal failure clinic at Akershus University Hospital, Lørenskog, Norway. Inclusion criteria were serum creatinine value >90 lmol/L in women and >100 lmol/L kod muškaraca (Rustad et al., 2004), procijenjena stopa glomerulusfiltracije (GFR)<60 ml/min/1.73="" m2="" (automatically="" calculated="" from="" creatinine="" using="" the="" modification="" of="" diet="" in="" renal="" disease="" formula="" including="" age="" and="" sex;="" rule,="" 2007),="" and="" a="" diagnosis="" of="" decreased="">funkciju bubregau pacijentovom dnevniku. Samo pacijenti koji su umjereno konzumirali alkohol uključeni su u našu studiju koju su odobrili Nacionalni komitet za istraživačku etiku u Norveškoj, Norveška direkcija za zdravlje i lokalni etički komitet u Univerzitetskoj bolnici Akershus. Svi pacijenti su potpisali informirani pristanak prije pohađanja studije.
Procijenjeni dnevni unos EtOH (EDI; izračunat na osnovu testa praćenja vremenske linije) za posljednja 3 mjeseca dobijen je intervjuisanjem pacijentove brige o vrsti napitka i količini konzumirane u tipičnom danu. Informacije su dobijene i iz medicinske dokumentacije pacijenata. Ovo je uključivalo dijagnoze, vrijednost serumskog kreatinina i procijenjenu GFR, kao objektivna mjerenja individualne bubrežne funkcije. Također su prikupljene vrijednosti aspartat aminotransferaze (AST), alanin aminotransferaze (ALT) i gama-glutamiltransferaze (GGT), kao objektivne mjere moguće prekomjerne konzumacije alkohola. Kosa je sakupljena od svakog pacijenta rezanjem uzorka dlake što je moguće bliže koži. Proksimalni segment dlake 3-cm, koji otprilike predstavlja zadnja 3 mjeseca, dostavljen je na EtG analizu. Rezultati ovih pacijenata su upoređeni sa 21 prethodno objavljenim zdravim dobrovoljcem (Politi et al., 2006).
Efekat cistanchea se poboljšavafunkciju bubrega
Analitičke metode
EtG u kosi određen je prethodno objavljenom metodom (Morini et al., 2006). Ukratko, oko 100 mg kose je oprano sa 2 različita organska rastvarača (dihlorometanom i metanolom), osušeno pod mlazom azota i izrezano na male komade (od 1 do 2 mm dužine). Uzorci su zatim natopljeni u 700 lL dejonizovane vode sa penta-deuterisanim etil glukuronidom (D5-EtG) kao internim standardom i inkubirani preko noći na sobnoj temperaturi. Sljedećeg dana su ultrazvučni 2 sata i centrifugirani na 10,8009g. Konačno, 8 lL je ubrizgano u sistem tečne hromatografije-tandem masene spektrometrije. Kromatografsko odvajanje je izvedeno u izokratskom načinu reverzne faze, koristeći mobilnu fazu koja sadrži vrlo visok postotak vode (0,1 posto mravlje kiseline plus 1 posto acetonitrila). Maseni spektrometar je korišten u modovima praćenja višestrukih reakcija, a negativna polarizacija i 2 različita prijelaza korišteni su za identifikaciju EtG i D5-EtG. Kalibraciona kriva u rasponu od 3 do 200 pg/mg korištena je u svrhu kvantifikacije. Granica detekcije (LOD) bila je 2 pg/mg, a donja granica kvantifikacije bila je 3 pg/mg.
Statistika
Razlike između nivoa EtG u dlakama kod pacijenata i zdravih dobrovoljaca proučavane su pomoću analize višestruke linearne regresije sa EDI kao kovarijantom. Date su p-vrijednosti za razliku između grupa (prilagođene za doze). P-vrijednost ispod 0.05 se smatra značajnom. Korelacija između nivoa EtG i GFR ili kreatinina u serumu je procenjena korišćenjem Spearmanovog neparametarskog testa korelacije.
REZULTATI
Uključeno je 12 pacijenata (8 muškaraca i 4 žene). Srednja dob je bila 64 godine (raspon, 42 do 84), a srednji indeks tjelesne mase 26,2 kg/m2 (raspon 18,9 do 29,4). Sva 3 kriterija za smanjenafunkciju bubregabili su prisutni kod svih pacijenata. Srednja vrijednost kreatinina u serumu bila je 189 lmol/L (raspon,130 do 670). Srednja procijenjena GFR bila je 29,2 mL/min/1,73 m2 (raspon, 8,0 do 54,0), a svi ispitanici su imali dijagnozu smanjene bubrežne funkcije u svom medicinskom kartonu. Svi ispitanici su imali ALT, AST i GGT u granicama normale (<=50 u/l="" for="" alt="" and="" ast,=""><= 60="" u/l="" for="" ggt;="" klauke="" et="" al.,="" 1993;="" rustad="" et="" al.,="" 2004;="" szasz,="">
Nivoi EtG kose kod 12 pacijenata kretali su se između
Kod pacijenata sa smanjenimfunkciju bubrega(n=12), postojala je značajna korelacija između nivoa EtG u kosi (korigovan za EDI) i GFR (Spearmanov ρ=0.61, p=0.036). Korelacija između EtG kose (korigovano za EDI) i serumskog kreatinina bila je nešto slabija i nije statistički značajna (Spearmanov ρ=0.53, p=0.076).
DISKUSIJA
Ova studija je sugerirala da su među osobama koje piju u društvu, nivoi EtG u kosi viši kod barem nekih pacijenata sa smanjenimfunkciju bubregau poređenju sa zdravim dobrovoljcima. Odnos između nivoa EtG u kosi i GFR je također ojačao ovu pretpostavku.
Nalaz viših nivoa EtG u kosi u ovoj grupi pacijenata bio je očekivan iz teorijskih razmatranja, ali prema saznanjima autora, nije ranije razmatran. U zdravoj populaciji, prethodne studije pokazuju da vrlo mali broj onih koji piju u društvu ima EtG vrijednosti za kosu iznad preporučene vrijednosti za tešku upotrebu alkohola (30 pg/mg; Alt et al., 2000; Appenzeller et al., 2007a; Politi et al. , 2006; Pragst i Yegles, 2008; Yegles et al., 2004). Sadašnja populacija je imala EDI vrijednosti daleko ispod praga za obilnu konzumaciju alkohola, ali 3 pacijenta su i dalje imala nivo EtG dlake što ukazuje na veliku konzumaciju alkohola. Dalje bi se moglo zamisliti da pacijenti sa bubrežnom bolešću sa većim unosom, ali i dalje u okviru definicije društvenog pijenja, češće mogu premašiti nivo od 30 pg/mg i pogrešno se klasifikovati kao osobe koje piju. Takođe, kod pacijenata kod kojih je potreban veoma nizak unos alkohola (npr. u slučaju transplantacije bubrega), merenje nivoa EtG u kosi može dovesti do lažnih zaključaka o većem unosu.
Prva slabost ove studije je mali broj pacijenata. Ovo je bila posljedica veličine grupe pacijenata sa stvarnim kliničkim stanjem, te opći savjet za ovu grupu da se suzdrži od konzumiranja alkohola. Ovaj rad se mora smatrati preliminarnim izvještajem i potrebne su veće studije da bi se potvrdili rezultati. S druge strane, činjenica da su nivoi EtG dlake kod tako ograničenog broja pacijenata značajno viši u odnosu na zdrave dobrovoljce može ukazivati da je razlika značajna. Druga slabost ove studije je da su pacijenti bili konzumenti malih dnevnih količina alkohola, što je rezultiralo vrijednostima EtG za kosu ispod LOD-a za 7 od 12 učesnika. To je moglo biti posljedica toga što su pacijenti slijedili klinički savjet o smanjenju konzumacije alkohola zbog bolesti bubrega. Nedovoljno prijavljivanje EDI-ja je također moguća. S druge strane, validirani upitnik je korišten da bi se minimizirao ovaj izvor greške, a isti upitnik je korišten u prethodnoj studiji korištenoj za poređenje. Također, vrijednosti AST, ALT i GGT unutar referentnih vrijednosti barem su ukazivale da među pacijentima nije bilo onih koji su jako pili. Nadalje, uporedili smo rezultate norveških pacijenata u ovoj studiji sa italijanskim zdravim dobrovoljcima. Ovo bi moglo predstavljati nesigurnost u pogledu interpretacije, ali prethodni izvještaji ukazuju da različita pigmentacija ne utiče na rezultate EtG u kosi (Appenzeller et al., 2007b). Također, korištena je ista analitička metoda.
Uzimajući u obzir moguće posljedice lažno pozitivne dijagnoze obilnog pijenja na osnovu EtG kose kod pacijenata s bubrežnom bolešću, treba poduzeti daljnje studije kako bi se stekao bolji uvid u odnos između konzumiranja alkohola, stepena zatajenja bubrega i EtGlevels kose.
Cistanche je dobar zafunkciju bubrega
ZAHVALNICA
Autori su zahvalni dr. Eiriku Pettersenu iz Univerzitetske bolnice Akershus na pomoći u regrutovanju pacijenata.
REFERENCE
Alt A, Janda I, Seidl S, Wurst FM (2000) Određivanje etil glukuronida u uzorcima kose. Alcohol 35:313–314.
Appenzeller BM, Agirman R, Neuberg P, Yegles M, Wennig R (2007a) Segmentalno određivanje etil glukuronida u kosi: pilot studija. Forensic Sci Int 173:87–92.
Appenzeller BM, Schuman M, Yegles M, Wennig R (2007b) Pigmentacija ne utiče na koncentraciju etil glukuronida u kosi. Alcohol 42:326–327.
Hoiseth G, Morini L, Polettini A, Christophersen A, Morland J (2009) Kinetika krvi etil glukuronida i etil sulfata kod onih koji teški piju tokom detoksikacije alkohola. Forensic Sci Int 188:52–56.
Høiseth G, Nordal K, Pettersen E, Mørland J (2012) Produžena vremena detekcije urina za EtG i EtS kod pacijenata sa smanjenom funkcijom bubrega. Alcohol Clin Exp Res DOI: 10.1111/j.1530-0277.2011.01713.x [Epub ispred štampanja].
Klauke R, Schmidt E, Lorentz K (1993) Preporuke za provođenje standardnih ECCLS procedura (1988) za katalitičke koncentracije kreatin kinaze, aspartat aminotransferaze, alanin aminotransferaze i gama-glutamiltransferaze na 37 stupnjeva njemačkog standardiziranog odbora. za kliničku hemiju, Enzimska radna grupa Njemačkog društva za kliničku hemiju. Eur J Clin Chem Clin Biochem 31:901–909.
Morini L, Politi L, Groppi A, Stramesi C, Polettini A (2006) Određivanje etil glukuronida u uzorcima kose tečnom hromatografijom/elektrosprej tandem masenom spektrometrijom. J Mass Spectrom 41:34–42.
Morini L, Politi L, Polettini A (2009) Etil glukuronid u kosi. Osetljiv i specifičan marker hroničnog opijanja. Ovisnost 104:915–920.
Morini L, Zucchella A, Polettini A, Politi L, Groppi A (2010) Efekat izbeljivanja na etil glukuronid u kosi: eksperiment in vitro. Forensic Sci Int 198:23–27.
Politi L, Morini L, Leone F, Polettini A (2006) Etil glukuronid u kosi: da li je pouzdan marker hroničnog visokog nivoa konzumiranja alkohola? Ovisnost 101:1408–1412.
Potgieter A (2000) Nauci, praksi i pacijentu je potreban rad Društva Plinius Maior. Alkohol 35:16–24.
Pragst F, Yegles M (2008) Određivanje etil estera masnih kiselina (FAEE) i etil glukuronida (EtG) u kosi: obećavajući način za retrospektivno otkrivanje zloupotrebe alkohola tokom trudnoće? Ther Drug Monit 30:255–263.
Pravilo AD (2007) Razumijevanje procijenjene brzine glomerularne filtracije: implikacije za identifikaciju hronične bolesti bubrega. Curr Opin Nephrol Hypertens 16:242–249.
Rustad P, Felding P, Franzson L, Kairisto V, Lahti A, Martensson A, Hyltoft PP, Simonsson P, Steensland H, Uldall A (2004) Projekat nordijskog referentnog intervala 2000: preporučeni referentni intervali za 25 uobičajenih biohemijskih svojstava. Scand J Clin Lab Invest 64:271–284.
Szasz G (1974) Novi supstrati za mjerenje aktivnosti gama-glutamil transpeptidaze. Z Klin Chem Klin Biochem 12:228.
Yegles M, Labarthe A, Auwarter V, Hartwig S, Vater H, Wennig R, Pragst F (2004) Poređenje koncentracija etil glukuronida i etil estera masnih kiselina u kosi alkoholičara, pijanica i trezvenjaka. Forensic Sci Int 145:167–173
