Istraživanje terapijskih efekata formulacije zasnovane na Cistanche na kronični nebakterijski prostatitis (CNP) i njegov mehanizam putem mikrobiote crijeva i metabolomike u modelu štakora
Jul 04, 2025
Abstract
Na osnovu aneksperimentalni model pacova autoimunog prostatitisa (EAP)., ova studija istražujeterapeutski efekti i osnovni mehanizmi kapsule zasnovane na Cistanche (CBC)u ublažavanjuhronični nebakterijski prostatitis (CNP). Cilj je osigurati pretkliničku osnovu za razvojpoboljšani botanički lijekovisa proširenim indikacijama za upravljanjehronični prostatitis i sindrom karlične boli.
metodologija:
Histopatološke promjeneu tkivu prostate pacova procijenjeni su putembojenje hematoksilin-eozinom (HE)..
Infiltracija bijelih krvnih zrnacaigustina lecitinau homogenatima prostate procijenjeni su mikroskopski.
Nivoi u serumusuperoksid dismutaza (SOD)imalondialdehid (MDA)mjerene su biohemijskom analizom.
Inflamatorni citokini(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 i IL-10) su kvantificirani pomoćuenzimski imunosorbentni test (ELISA).
16S rDNK sekvenciranjeje korišten za procjenu promjena umikrobiota crijeva.
Neciljana metabolomikaizvršena je analiza da bi se razjasnilometabolički putevi na koje utiče CBC.
Western blot (WB)je korišten za provjeru modulacijeSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalni put.
Rezultati:
CBC administracija značajno:
Smanjeno histološko oštećenjena tkiva prostate;
Povećana tjelesna gustina lecitinaismanjena infiltracija leukocita;
Sniženi proinflamatorni citokini(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);
Povišen protuupalni citokin IL-10;
Poboljšan sastav crijevne mikrobiote, pri čemu se značajno povećavaLactobacillusiBifidobacterium animalis, uz smanjenjeunclassified_f_PrevotellaceaeiVeillonella;
Promijenjeno 10 ključnih metabolita, uključujućisfingoziniretinoil-glukuronid, utičemetabolizam sfingolipidaimetabolizam retinola;
Smanjena ekspresija SPHK1 i S1P1, i inhibiranoPI3K i Akt fosforilacijau tkivu prostate.
zaključak:
Cistanche-Based Capsules (CBC) efikasnoublažavaju upalne ozljedeu tkivu prostate EAP pacova. Mehanizmi mogu uključivati:
Modulacija disbioze crijevne mikrobiote;
Korekcija metaboličkih disfunkcija;
Suzbijanje signalnog puta SPHK1/S1P1/PI3K/Akt.
Ovi nalazi podržavaju potencijalBiljne formulacije dobivene od Cistancheakao aprirodna, višeciljna terapijazahronični nebakterijski prostatitisi ponuditi obećavajući smjer za budućnostinovacija biljnih lijekova.
Ključne riječi:
Kapsule na bazi Cistanchea; hronični nebakterijski prostatitis; mikrobiota crijeva; metabolomika; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt put; biljni tretman za prostatitis; prirodna protuupalna terapija; EAP model pacova
Formula čaj na bazi Cistanchea
sažetak:
Hronični nebakterijski prostatitis/sindrom kronične karlične boli (CNP/CPPS), također poznat kao prostatitis kategorije III, čini otprilike90% svih slučajeva prostatitisa. Karakteriziraju ga nelagoda donjeg urinarnog trakta, bol u zdjelici i perineumu, seksualna disfunkcija, a često i psihološki ili neurološki simptomi. U tradicionalnoj kineskoj medicini (TCM), CNP je kategoriziran pod "Jing Zhuo" (zamućenje sjemena), često povezano s unutrašnjom vlažnom vrućinom, nedostatkom slezene ili dugotrajnom upotrebom hladnih ili gorkih lijekova koji oštećuju funkciju slezene, što dovodi do nakupljanja vlage i topline u prostati.
Trenutni zapadni farmakološki tretmani za CNP, uključujući antibiotike, -blokatore i NSAIL, prvenstveno se fokusiraju na upravljanje simptomima i često nemaju dugoročnu efikasnost. Istraživači se sve više okrećubiljni lijek kao sigurnija i holističkija alternativa.
Cistanche: obećavajući biljni kandidat
Cistanche, tradicionalna kineska biljka poznata po svomtonizira bubrege, protuupalno, imunomodulirajuće i antioksidativnosvojstva, pokazao je potencijal u liječenju različitih genitourinarnih poremećaja. Moderne farmakološke studije to pokazujuCistanche deserticolamože regulisati upalne citokine, poboljšati imunološki odgovor i poboljšati mikrocirkulaciju, čineći gaobećavajući kandidat za CNP tretman.
Uprkos rastućem interesu, precizanMehanizmi pomoću kojih Cistanche ublažava CNP ostaju slabo shvaćeni. Nedavne studije sugerišu todisbioza crijevne mikrobioteigra ključnu ulogu u patogenezi CNP. Stoga, ova studija istražuje terapeutske efekte aBiljna kapsula na bazi Cistanchea (CBC)na CNP koristeći štakorski model eksperimentalnog autoimunog prostatitisa (EAP), s posebnim fokusom nasastav crijevne mikrobiote i metabolomske promjene.
1. Materijali i metode
1.1 Životinje
30 SPF muških Sprague-Dawley (SD) pacova(300–320g) i45 SPF muških SD štakora(180–200 g) dobijeni su od Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.
Smešteni u standardnim SPF uslovima: temperatura 25±1 stepen, vlažnost 55±5%, 12-časovni ciklus svetlo/mrak.
Odobrenje za etiku životinja:HUCMS00302159, koju je odobrio Etički komitet Univerziteta kineske medicine Hubei.
1.2 Lijekovi i reagensi
Kapsule na bazi Cistanchea (CBC)(Serija: 20221226) od GMP certificirane biljne farmaceutske kompanije.
Tamsulozin hidrohlorid kapsule(pozitivna kontrola) kupljena od Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.
Kompletan Freundov adjuvans (CFA)iz Sigme (Njemačka).
ELISA setoviza IL-1 , IL-6, IL-8, IL-10, TNF- i iNOS iz Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.
Kompleti za oksidativni stres(MDA, T-SOD) iz Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.
Kompleti za ekstrakciju DNK mikrobiote crijevaimetabolomički reagensiiz Meiji Biotechnology (Šangaj).
1.3 Oprema
Centrifuga velike brzine (Eppendorf, Njemačka), UHPLC i Q-Exactive HF-X maseni spektrometar (Thermo Fisher Scientific) i drugi instrumenti za molekularnu biologiju za ELISA, PCR, sekvenciranje i analizu metabolomike.
2. Eksperimentalni protokol
2.1 Indukcija eksperimentalnog modela autoimunog prostatitisa (EAP).
2.1.1 Priprema emulzije proteina prostate-CFA
Tkivo prostate je ekstrahovano iz pacova donora, homogenizovano u sterilnom fiziološkom rastvoru sa 0,5% TritonX-100 i centrifugirano na 20.000 rpm tokom 30 minuta na 4 stepena.
Koncentracija proteina je podešena na 20 mg/mL korištenjem BCA testa.
Ekstrakt proteina je emulgiran sa CFA u omjeru 1:1 kako bi se formiraoCNP antigen emulzija.
2.1.2 Procedura imunizacije
45 SD pacova (180±20g) je nasumično podijeljeno, a 10 je dodijeljeno normalnoj grupi.
Preostali pacovi su primljenipotkožne injekcije u više tačakaemulzije CNP antigena u preponama, unutrašnjoj strani bedra i leđima.
Dopunska imunizacija je primijenjenaDan 15po istom protokolu.
Normalne kontrole primale su injekcije slane otopine.
2.2 Grupisanje i tretman
28. dana nakon imunizacije, uspješno modeliranje je potvrđeno histološkim pregledom (HE bojenje).
Pacovi su nasumično raspoređeni na:
Normalna kontrolna grupa
Grupa modela
Grupa pozitivnih droga: tamsulozin (0,021 mg/kg)
CBC grupa za niske doze: 0,63 g/kg (klinički ekvivalentna doza)
CBC High-Dose Group: 1,26 g/kg
Tretman je davan oralno jednom dnevno tokom 30 dana. Kontrolne i modelne grupe su dobile fiziološku otopinu.
2.3 Sakupljanje i analiza uzoraka
24 sata nakon konačne doze, pacovi su eutanazirani.
Krv je uzeta preko abdominalne aorte; serum je odvojen i čuvan na -80 stepeni.
Tkiva prostate su sakupljena, izvagana i makroskopski pregledana.
TheIndeks prostate (PI)izračunato je:
PI=Vlažna težina prostate / tjelesna težina
Tkiva su fiksirana u formalinu za histologiju ili zamrznuta za analizu citokina, Western blotting, ekstrakciju DNK mikrobiote i metabolomiku.
Zaključak i značaj
Ova studija ima za cilj da pružipretklinički dokaziza upotrebuBiljna terapija bazirana na cistancheu lečenjuhronični nebakterijski prostatitis. Integracijomanaliza crijevne mikrobioteimetabolomsko profilisanje, nastojimo da otkrijemovišeciljani mehanizmikroz koje Cistanche ispoljava svoje protuupalno i imunomodulatorno djelovanje.
Ovi nalazi će podržatirazvoj Cistanchea kao novog biljnog lijekaza CNP i potencijalno dovesti donove indikacijeza njegovu kliničku primjenu.
