Procjena aktivnosti protiv umora ukupnih saponina Radix Notoginseng

Xu Yong-xin i Zhang Jian-jun

Fakultet za fizičku kulturu, Univerzitet Zhengzhou, Zhengzhou, NR Kina

Za više informacija: ali.ma@wecistanche.com

Pozadina i ciljevi:

Prijavljeno je nekoliko bioloških aktivnosti ukupnih saponina Radix notoginseng (TSRN), tradicionalne kineske medicine. Ova studija je provedena kako bi se istražilaaktivnost protiv umoraTSRN kod mužjaka Kunming miševa.

Metode:

Miševi su podijeljeni u četiri grupe. Prvoj grupi koja je određena kao kontrolna davana je destilovana voda putem sonde svaki dan. Druga, treća i četvrta grupa označene kao TSRN grupe su primale TSRN od 20, 40 i 80 mg/kg tjelesne težine/dan, respektivno. Liječenje je nastavljeno 28 dana. Određeno je iscrpno vrijeme plivanja, sadržaj laktata u krvi i tkivnog glikogena miševa nakon plivanja.

Rezultati:

TSRN je produžio iscrpno vrijeme plivanja miševa, efektivno odgodio povećanje laktata u krvi, kao i povećao sadržaj glikogena u tkivu.

Tumačenje i zaključci:

TSRN se pokazao obećavajućimaktivnost protiv umorau životinjskom modelu. Međutim, potrebno je dalje istraživanje kako bi se razjasnio mehanizam djelovanja TSRN naumor.

Ključne riječi: aktivnost protiv umora - laktat - plivanje - ukupni saponini Radix notoginseng

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen se uzgaja širom jugozapadne Kine, Burme i Nepala. Korijen, najčešće korišteni dio ove biljke pod nazivom Radix notoginseng ili Sanchi, ima dugu istoriju kao lijek u orijentalnoj tradicionalnoj medicini1-3. U Kini, R. notoginseng se koristi za promicanje cirkulacije krvi, uklanjanje zastoja krvi, izazivanje zgrušavanja krvi, ublažavanje otoka, odlaganjeumor,i ublaži bol4,5. Izvještava se da je R. notoginseng korisna za koronarne bolesti srca, cerebralne vaskularne bolesti, rak, dijabetes melitus, kao i za poboljšanje učenja i pamćenja u eksperimentalnim studijama6-8. Ovi terapeutski efekti se pripisuju njegovim aktivnim sastojcima, odnosno saponinima, flavonoidima i polisaharidima9-11. Ukupni saponini R. notoginseng (TSRN) smatraju se glavnim aktivnim sastojcima i mješavina su više od 20 saponina tipa Dammarane, uključujući ginsenozid Rg1, Rg2, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rh, F2 i notoginsenozid R1, R2, R3, R4, R6, Fab, Fc, Fe, itd12. Iako su poznate mnoge biološke aktivnosti i farmakološke funkcije TSRN-a. Poznato je da postoje ograničene studije koje istražuju njegove učinke nafizički umor. Stoga je ova studija osmišljena da istražiaktivnost protiv umoraukupnih saponina R. notoginseng u modelu pacova.

Materijal i metode

Istraživanje je sprovedeno u Laboratoriji za biohemiju Univerziteta Zhengzhou (Zhengzhou, Kina). Biljni materijali: Osušeni uzorak R. notoginseng dobijen je od kompanije Henan Chinese Herbal Medicine Company, (Zhengzhou, Kina), a autentičnost je potvrđena od strane Odeljenja za botaniku Univerziteta Zhengzhou (Zhengzhou, Kina). Uzorak je identificiran makromorfološkim i mikroskopskim karakteristikama i tankoslojnom hromatografijom (TLC). Na osnovu kineske farmakopeje identificiran je kao korijen

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen. Priprema ukupnih saponina R. notoginseng (TSRN):

Osušeni R. notoginseng samljeven je u prah i propušten kroz sito od 40 mesh. TSRN je pripremljen metodom Sun et al13. Ukratko, napajani uzorci (1 kg) su ekstrahovani sa 70 posto etanola na 100 stepeni (3×4 l) i koncentrirani u vakuumu (40 stepeni) da bi se ispario rastvarač da bi se dobila mala zapremina. Nakon ekstrakcije etrom (3×0,5 l), dio vodenog sloja je ekstrahovan n-butanolom sve dok sloj n-butanola nije postao bezbojan. Rastvor n-butanola je koncentrisan i osušen u vakuumu (60 stepeni). Osušeni ekstrakt je podvrgnut hromatografiji na koloni D101 smole, ispran sa H2O i eluiran sa etanolom da bi se dobio TSRN. TSRN je sadržavao 64,3 ± 1,15 posto notoginsenozida kako je utvrđeno tankoslojnom hromatografijom i spektrofotometrijskom metodom.

životinje:

Mužjaci Kunming miševa, težine između 18- 22 g, dobijeni su iz Laboratory Animal Centra, Medicinskog fakulteta Univerziteta Zhengzhou (Zhengzhou, Kina), i hranjeni su komercijalnom ishranom i vodom ad libitum. Komercijalna prehrana sastojala se od 12 posto masti, 60 posto ugljikohidrata i 28 posto proteina. Životinje su bile smještene u ciklusu 12-h svjetlo/mrak na temperaturi od 22 ± 1 stepen i vlažnosti od 50 ± 5 posto. Miševi su ostavljeni da se aklimatiziraju na laboratorijsko okruženje najmanje 1 sedmicu prije eksperimenata. Etičko odobrenje za izvođenje eksperimenata na životinjama dobijeno je od Institucionalnog odbora za etiku životinja.

Grupisanje životinja:

Devedeset i šest miševa je nasumično podijeljeno u četiri grupe, od kojih se svaka sastojala od 24 miša. Prva grupa označena kao kontrolna grupa (Kontrola) je svakodnevno davana destilovanom vodom putem sonde. Druga, treća i četvrta grupa označene kao TSRN grupe su primale TSRN od 20, 40 i 80 mg/kg tjelesne težine na dan, respektivno. Davanje destilovane vode ili TSRN je nastavljeno 28 dana. Prema preliminarnim eksperimentima, potvrđeno je da su doze TSRN-a i 28 dana tretmana korištene u ovoj studiji prikladne i efikasne kod testiranih miševa.

Iscrpni test plivanja:

Nakon završnog tretmana sa TSRN ili destilovanom vodom, miševi su ostavljeni da miruju 30 minuta. Zatim je osam miševa izvađeno iz svake grupe radi iscrpnog testa plivanja. Životinje su stavljene u rezervoar za plivanje (50 × 50 × 40 cm) dubine 30 cm sa vodom održavanom na 25 ± 2 stepena. Rep svakog miša bio je napunjen snopom komada olova, što je iznosilo 10 posto njegove tjelesne težine. Iscrpljenost je određena posmatranjem gubitka koordinisanih pokreta i nemogućnosti povratka na površinu u roku od 10 sekundi14. Vrijeme kupanja je odmah zabilježeno.

Mjerenje biohemijskih parametara vezanih za umor:

Nakon završnog tretmana sa TSRN ili destilovanom vodom, miševi su ostavljeni da miruju 30 minuta. Zatim je osam miševa izvađeno iz svake grupe za analizu laktata u krvi. Miševi su bili prisiljeni da plivaju 30 minuta nakon opterećenja (2 posto tjelesne težine), a krv je sakupljena iz repne vene prije i poslije plivanja. Sadržaj laktata u krvi mjeren je prema preporučenim procedurama koje pruža komercijalni dijagnostički komplet (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, Kina). Preostalih osam miševa je izvađeno iz svake grupe radi analize tkivnog glikogena. Miševi su bili prisiljeni da plivaju 90 minuta bez opterećenja. Nakon sat vremena mirovanja, miševi su ubijeni dislokacijom grlića materice pod anestezijom. Sakupljeni su jetra i gastrocnemius mišići15. Sadržaj tkivnog glikogena je testiran prema preporučenim procedurama koje pruža komercijalni dijagnostički komplet (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, Kina).

Statistička analiza

: Svi testovi su obavljeni u tri primjerka. Eksperimentalni podaci izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija. Jednosmjerna analiza varijanse (ANOVA), LSD i Dunnett-ovi T3 testovi su obavljeni kako bi se utvrdila značajna razlika između uzoraka unutar intervala pouzdanosti od 95 posto, korištenjem softvera SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, SAD).

Rezultati

Učinci TSRN-a na iscrpno vrijeme plivanja miševa:

Iscrpno vrijeme plivanja treće i četvrte grupe značajno se povećalo (P<0.05) when="" compared="" with="" the="" control="" group.="" however,="" the="" exhaustive="" swimming="" time="" of="" the="" second="" group="" showed="" no="" significant="" changes="" compared="" with="" the="" control="" group="" (fig.="" 1).="" the="" swimming="" time="" of="" the="" second,="" third,="" and="" fourth="" groups="" increased="" by="" 21.15,="" 27.41,="" and="" 34.01="" percent,="" respectively.="">

Učinci TSRN na sadržaj laktata u krvi miševa nakon plivanja:

Nije bilo značajne razlike u sadržaju laktata u krvi između TSRN tretiranih grupa i kontrolne grupe prije plivanja. Nakon plivanja, sadržaj laktata u krvi svake grupe za liječenje TSRN značajno se smanjio (P<0.05) when="" compared="" to="" the="" control="" group="" (fig.="" 2).="" the="" results="" indicated="" that="" the="" blood="" lactate="" contents="" of="" the="" second,="" third="" and="" fourth="" groups="" decreased="" by="" 47.14,="" 57.59,="" and="" 61.96="" percent,="">

Učinci TSRN na sadržaj tkivnog glikogena kod miševa nakon plivanja:

Nakon plivanja, sadržaj glikogena u jetri i mišićima u svakoj TSRN liječenoj grupi značajno se povećao (P<0.05) when="" compared="" with="" that="" of="" the="" control="" group="" (fig.="" 3).="" the="" liver="" glycogen="" contents="" of="" tsrn="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.12,="" 115.84,="" and="" 153.58="" percent,="" respectively.="" the="" muscle="" glycogen="" contents="" of="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.54,="" 83.74,="" and="" 73.98="" percent,="">

Diskusija

Ova studija je dizajnirana da istraži aktivnost protiv umora ukupnih saponina R. notoginseng (TSRN). Prinudno plivanje životinja korišteno je kao kriterij njihove fizičke radne sposobnosti. Mnoga istraživanja su istakla da plivanje ima prednosti u odnosu na druge oblike vježbanja, uključujući traku za trčanje16-19. Da bi se standardiziralo opterećenje i smanjilo vrijeme plivanja, utezi u određenim procentima tjelesne težine dodani su na grudi ili rep životinje17,20. Ova studija je pokazala da je TSRN produžio iscrpno vrijeme plivanja miševa, što je ukazalo na to da TSRN ima aktivnost protiv umora i može podići toleranciju na vježbanje. Da bi se istražili mehanizmi, neki biohemijski parametri su određeni kod miševa nakon plivanja. Laktat u krvi je proizvod glikolize ugljikohidrata u anaerobnom stanju, a glikoliza je glavni izvor energije za intenzivno vježbanje u kratkom vremenu21,22. Dakle, laktat u krvi je jedan od važnih pokazatelja za procjenu stepena sportskog umora. U ovoj studiji, TSRN je efikasno odgodio povećanje laktata u krvi i pojavu umora. Energija za vježbanje se u početku dobiva razgradnjom glikogena, nakon napornog vježbanja mišićni glikogen dolazi do iscrpljivanja, a kasnije će energija dolaziti iz cirkulirajuće glukoze koju oslobađa jetra. Dakle, sadržaj glikogena u jetri i mišićima su osjetljivi parametri koji se odnose na umor23-25. U ovoj studiji, TSRN je značajno povećao sadržaj glikogena u tkivu miševa nakon plivanja. Zaključno, rezultati sugeriraju da je TSRN imao aktivnost protiv umora, što je produžilo iscrpno vrijeme plivanja miševa, efektivno odložilo povećanje laktata u krvi, kao i povećalo sadržaj glikogena u tkivu. Dalja studija je potrebna da bi se razjasnio tačan mehanizam uticaja TSRN na umor.

Ovo je naš proizvod protiv umora! Kliknite na sliku za dozu cistanche tubulosa

Reference

1. Wang CZ, Xie JT, Zhang B, Ni M, Fishbein A, Aung HH, et al. Hemopreventivni efekti Panax notoginseng i njegovih glavnih sastojaka na SW480 ljudske ćelije kolorektalnog karcinoma. Int J Oncol 2007; 31: 1149-56.

2. Gupta YK, Briyal S, Gulati A. Terapijski potencijal biljnih lijekova u cerebralnoj ishemiji. Indian J Physiol Pharmacol 2010; 54: 99-122.

3. Sungnoon R, Chattipakorn N. Antiaritmički efekti biljne medicine. Indian Heart J 2005; 57: 109-13.

4. Choi RC, Jiang Z, Xie HQ, Cheung AW, Lau DT, Fu Q, et al. Antioksidativni efekti dvogodišnjeg cvijeta Panax notoginseng protiv H2O2-indukovane citotoksičnosti u kultivisanim PC12 ćelijama. Chin Med 2010; 5:38.

5. Lei XL, Chiou GC. Kardiovaskularna farmakologija Panax notoginseng (Burk) FH Chen i Salvia miltiorrhiza. Am J Chin Med 1986; 14: 145-52.

6. Chan P, Thomas GN, Tomlinson B. Zaštitni efekti trioleina ekstrahiranog iz Panax notoginseng protiv kardiovaskularnih bolesti. Planta Med 2002; 68: 1024-8.

7. Kim HC, Shin EJ, Jang CG, Lee MK, Eun JS, Hong JT, et al. Farmakološko djelovanje Panax ginsenga na toksičnosti u ponašanju uzrokovane psihotropnim agensima. Arch Pharm Res 2005; 28: 995-1001.

8. Chuang CM, Hsieh CL, Lin HY, Lin JG. Panax notoginseng Burk ublažava oštećenje funkcija učenja i pamćenja i povećava imunoreaktivne ćelije ED1, BDNF i beta-sekretaze kod pacova ozlijeđenih ishemijom-reperfuzijom u kroničnom stadiju. Am J Chin Med 2008; 36 : 685-93.

9. Wu W, Zhang XM, Liu PM, Li JM, Wang JF. Efekti Panax notoginseng saponina Rg1 na elektrofiziološka svojstva srca i prag ventrikularne fibrilacije kod pasa. Acta Pharm Sin 1995; 16: 459-63.

10. Chen JC, Chen LD, Tsauer W, Tsai CC, Chen BC, Chen YJ. Efekti ginsenozida Rb2 i Rc na inferiornu pokretljivost spermatozoida in vitro. Am J Chin Med 2001; 29: 155-60.

11. Wei JX, Wang JF, Chang LY, Du YC. Hemijske studije san chi Panax notoginseng I: Studije o sastojcima Sanchi korijenskih dlačica. Acta Pharm Sin 1980; 15: 359-64.

12. Li X, Wang G, Sun J, Hao H, Xiong Y, Yan B, et al. Studija farmakokinetike i apsolutne bioraspoloživosti ukupnog Panax notoginsenozida, tipičnog višestrukog sastava tradicionalne kineske medicine (TCM) na pacovima. Biol Pharm Bull 2007;

13. Sun HX, Pan HJ, Pan YJ. Hemolitičke aktivnosti i imunološki pomoćni učinak Panaxa, a ne ginseng saponina. Acta Pharmacol Sin 2003; 24: 1150-4.

14. Wu JL, Wu QP, Huang JM, Chen R, Cai M, Tan JB. Učinci L-malata na fizičku izdržljivost i aktivnosti enzima povezanih sa malat-aspartatnim šatlom u jetri miševa. Physiol Res 2007; 56: 213-20.

15. Feng H, Ma HB, Lin HY. Protiv umora djelovanje vodenih ekstrakata lista Toona sinensis Roemer i promjene vezane za vježbanje u peroksidaciji lipida u vježbama izdržljivosti. J Med Plants Res 2009; 3: 949-54.

16. Matsumoto K, Ishihara K, Tanaka K, Inoue K, Fushiki T. Bazen za plivanje s podesivom strujom za procjenu kapaciteta izdržljivosti miševa. J Appl Physiol 1996; 81: 1843-9.

17. Mizunoya W, Oyaizu S, Ishihara K, Fushiki T. Protokol za mjerenje kapaciteta izdržljivosti miševa u bazenu za plivanje sa podesivom strujom. Biosci Biotechnol Biochem 2002; 66: 1133-6.

18. Kamakura M, Mitani N, Fukuda T, Fukushima M. Efekat protiv umora svežeg matičnog mleča kod miševa. J Nutr Sci Vitaminol 2001; 47: 394-401.

19. Jung KA, Han D, Kwon EK, Lee CH, Kim YE. Efekat protiv umora Rubus coreanus Miquel ekstrakta kod miševa. J Med Food 2007; 10: 689-93.

20. Ascensão A, Magalhães J, Soares J, Ferreira R, Neuparth M, Marques F, et al. Trening izdržljivosti ublažava srčano oksidativno oštećenje izazvano doksorubicinom kod miševa. Int J Cardiol 2005; 100 : 451-60.

21. Yu B, Lu ZX, Bie XM, Lu FX, Huang XQ. Čišćenje i djelovanje protiv umora fermentiranih odmašćenih peptida soje. Eur Food Res Technol 2008; 226: 415-21.

22. Tang KJ, Nie RX, Jing LJ, Chen QS. Anti-atletsko djelovanje saponina (Ginsenosides) iz američkog ginsenga (Panax quinquefolium L.). Afr J Pharm Pharmacol 2009; 3: 301-6.

23. Suh SH, Paik IY, Jacobs K. Regulacija homeostaze glukoze u krvi tokom dužeg vježbanja. Mol Cells 2007; 23 : 272-9.

24. Wei W, Zheng LY, Yu MY, Jiang N, Yang ZR, Luo X. Anti-zamorna aktivnost ekstrakta iz potopljene fermentacije Ganoderma lucidum koristeći Radix astragali kao supstrat. J Anim Plant Sci 2010; 6: 677-84.

25. Shang HP, Cao SH, Wang JH, Putheti R. Glabridin iz kineske biljke sladića inhibira umor kod miševa. Afr J Trad CAM 2010; 7: 17-23.