Enzimska hidroliza je razvijena za odgovarajuće komercijalne enzime za hranu

Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija

2.2. Učinak ultrafiltracije na svojstva kolagen hidrolizata

Proces ultrafiltracije može biti korisna, industrijski korisna metoda za proizvodnju malih frakcija peptida sa željenom veličinom molekula i visokom bioaktivnošću, ovisno o sastavu početnog hidrolizata i aktivnosti koja se proučava [19]. Prikazana je rastvorljivost, sadržaj slobodnih amino grupa i prinos CHs nakon liofilizacije (Tabela 1). Rastvorljivost i sadržaj slobodnih amino grupa u kontroli iznosio je 11,95 posto, odnosno 0, 79 posto. Nakon enzimske hidrolize i ultrafiltracije sa graničnom molekulskom težinom od 3 kDa, najveća rastvorljivost (21,17 posto) i sadržaj slobodne amino grupe (14,17 posto) uočena je u CH-Alcalase<3 kda.="" however,=""><3 kda="" was="" the="" lowest="" yield="" (12.42%)observed.="" therefore,="" although="" ultrafiltration="" is="" useful="" in="" separating="" chs="" with="" a="" low="" molecular="" weight="" it="" may="" cause="" a="" reduction="" in="">

Prosječna molekularna težina proteinskih hidrolizata važan je faktor koji određuje njihova biološka svojstva [19]. Općenito, prosječna frakcija sa MW<3 kda="" represents="" a="" collagen="" hydrolysate;="" an="" average="" fraction="" with="" mw="">50 kDa represents gelatin, and an average fraction with MW>300 kDa predstavlja kolagen [20,21]. Relativna distribucija molekulske težine kontrolnog uzorka (uzorak prije tretmana), CH-Alkalaze i CH-Alkalaze<3 kda="" is="" depicted="" in="" figure="" 4.="" the="" molecular="" weight="" distribution="" was="" over="" 20,100="" da="" for="" the="" control,="" which="" did="" not="" include="" the="" collagen="" hydrolysate=""><3 kda).="" this="" could="" not="" be="" numerically="" provided="" in="" this="" study,="" as="" the="" detection="" limit="" of="" the="" index="" detector="" system="" only="" ranged="" from="" 106="" to="" 20,100="" da.="" however,="" ch-alcalase="" showed="" detectable="" values="" in="" a="" higher="" range="" of="" relative="" molecular="" weight="" distribution,="" which="" ranged="" from="" 20,100="" da="" to="" 4270="" da="" (maximum="" peak:12,600="" da).="" in=""><3 kda,="" the="" molecular="" weight="" distribution="" mainly="" showed="" three="" peaks:="" one="" with="" an="" mw="" of="" approximately="" 4270="" da="" (maximum="" peak),="" one="" with="" an="" mw="" of="" approximately="" 424="" da,="" and="" one="" with="" an="" mw="" of="" approximately="" 222="" da="" and="" 102="" da.="" ultrafiltration="" is="" an="" effective="" purification="" method="" used="" to="" obtain="" low="" molecular="" weight="" peptides="" from="" crude="" hydrolysates.="" results="" indicated="" that="" enzymatic="" hydrolysis="" by="" alcalase="" clearly="" reduced="" the="" high="" mw="" of="" the="" control="" (either="" collagen="" or="" gelatin),="" and="" that="" ultrafiltration="" was="" an="" effective="" purification="" method="" that="" can="" be="" used="" to="" obtain="" low="" molecular="" weight=""><3 kda)="" from="" crude="" collagen="" hydrolysates.="" reportedly,="" low="" molecular="" weight="" peptides="" (2-20="" amino="" acids)="" are="" more="" biologically="" active="" compared="" to="" their="" parent="" polypeptide/proteins,="" which="" are="" larger="">

Molimo kliknite ovdje da saznate više

Prikazan je sastav aminokiselina u CHs (Tabela 2). CHS pomoću različitih proteaza ima različite sastave aminokiselina i antioksidativna svojstva [23]. Aminokiselinski sastav kolagena bio je bogat glicinom (Gly), prolinom (Pro) i glutaminskom kiselinom (Glu). Sadržaj aminokiselina u CHs (CH-Alkalaza i CH-Alkalaza<3 kda)="" increased="" more="" than="" that="" of="" the="" control,="" following="" enzymatic="" hydrolysis="" with="" or="" without="" ultrafiltration.="" in="" particular,="" the="" content="" of="" gly,="" pro,="" and="" glu="" was="" much="" higher="" in=""><3 kda(gly="" 218="" mg/g,="" pro="" 152="" mg/g,="" and="" glu="" 120="" mg/g)="" than="" ch-alcalase(gly149="" mg/g,="" pro="" 95="" mg/g,="" and="" glu78="" mg/g).="" an="" increase="" in="" the="" content="" of="" these="" amino="" acids="" is="" strongly="" related="" to="" enhanced="" antioxidant="" capabilities="" [16,20].="" gly="" and="" pro="" contain="" hydrophobic="" amino="" acid="" groups,="" and="" glu="" contains="" negatively="" charged="" amino="" acid="" groups.="">cistanche stemPrijavljeno je da ove aminokiseline povećavaju antioksidativnu aktivnost zbog njihove povećane rastvorljivosti u lipidima ili putem reakcija slobodnih radikala [1,24].

2.3. Antioksidativno i anti-age djelovanje kolagen hidrolizata

Antioksidativna aktivnost CH je izmjerena korištenjem 2,2'-i-bis-(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline)(ABTS) eseja aktivnosti uklanjanja radikala i testa smanjenja snage. ABTS aktivnost uklanjanja radikala kontrolne (suspenzije kolagena), CH-Alkalaze i CH-Alkalaze<3 kda="" at="" different="" concentrations="" is="" shown="" (figure="" 5a).abts="" radical="" scavenging="" activity="" of="" peptides="" assay="" is="" important="" to="" exclusively="" measure="" the="" ability="" of="" an="" antioxidant="" peptide="" to="" induce="" a="" hydrogen="" atom="" transfer="" [25].="" abts="" radical-scavenging="" effects="" of="" all="" treatments="" increased="" in="" a="" concentration-dependent="" manner=""><0.05). ch-alcalase="" and=""><3 kda="" showed="" much="" higher="" abts="" radical-scavenging="" activity="" values,="" with="" 41.4%-88.2%="" compared="" to="" the=""><8.5%. both="" ch-alcalase="" and=""><3 kda="" had="" high="" abtsradical-scavenging="" abilities="" of="" ~60%="" when="" concentrations="" were="" greater="" than="" 2.5="" mg/ml.=""><3 kda="" showed="" a="" significantly="" higher="" abts="" radical-scavenging="" activity="" value="" than="" ch-alcalase.="">ekstrakt cistanche salsaOpćenito, na antioksidativnu aktivnost peptida mogu uticati njihove aminokiselinske sekvence, broj prisutnih slobodnih aminokiselina, stepen hidrolize i molekularna težina peptida [26,27]. Konkretno, hidrolizati male molekularne mase poseduju jača antioksidativna svojstva u poređenju sa hidrolizatima visoke molekulske mase [2,26].

Slika 5. Antioksidativna aktivnost hidrolizata kolagena (CH) u 2,2'-i-bis-(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonskoj kiselini)(ABTS) čišćenje radikala (A) i redukciona moć (B) testovi. Podaci označeni različitim slovima (ac) pokazuju statistički značajne razlike u zavisnosti od različitih tretmana (str<0.05).>prednosti i nuspojave cistanche tubulosaPodaci označeni različitim slovima (AD) pokazuju statistički značajne razlike u zavisnosti od koncentracije (p < 0.05).

Cistanche može protiv starenja

Smanjenje moći kontrole, CH-Alkalaze i CH-Alkalaze<3 kda="" are="" shown="" (figure="" 5b).="" the="" reducing="" power="" of="" peptides="" may="" also="" serve="" as="" a="" significant="" indicator="" of="" their="" antioxidant="" potential="" [28,29].="" the="" reducing="" power="" of="" chs="" ranged="" from="" 0.074="" to="" 0.424="" in="" a="" dose-dependent="" manner=""><0.05). the="" control="" group="" had="" the="" lowest="" reducing="" power,="" which="" did="" not="" change="" significantly="" with="" increasing="" concentrations="" of="" the="" control.="" in="" contrast="" to="" abts="" radical-scavenging="" activity,="" the="" reducing="" power="" of="" ch-alcalase="" was="" higher="" than="" that="" of=""><3 kda.="">ekstrakt cistanche tubulosaSlična zapažanja sugeriraju da sirovi hidrolizat kolagena može biti učinkovitiji u smanjenju snage od ultrafiltriranih kolagenskih peptida [30].

Inhibicija aktivnosti tirozinaze, kolagenaze i elastaze korištena je da bi se potvrdili njihovi in ​​vitro efekti protiv starenja [20]. Rezultati inhibicije aktivnosti tirozinaze, kolagenaze i elastaze kontrolne CH-Alkalaze i CH-Alkalaze<3 kda="" are="" summarized="" (table="" 3).="" tyrosinase,="" collagenase,="" and="" elastase="" inhibitors="" have="" been="" used="" as="" important="" ingredients="" of="" cosmetics="" for="" skin="" whitening,="" anti-aging,="" and="" anti-wrinkling,="" respectively.="" collagenase="" and="" elastase,="" especially,="" are="" known="" to="" be="" major="" enzymes="" responsible="" for="" dehydration="" and="" wrinkle="" formation="" on="" the="" skin="" surface[31].="" the="" results="" indicated="" that="" the="" tyrosinase="" inhibition="" effect="" of="" vitamin="" c(95.50%,1="" mg/ml,="" positive="" control)="" was="" higher="" than="" that="" of="" the="" other="" treatments(table="" 4).="" tyrosinase="" inhibition="" effects="" of="" control,="" ch-alcalase,="" and=""><3 kda="" groups="" were="" 28.21%,="" 15.44%,="" and="" 30.20%,="" respectively.="" thus,="" the="" chs="" did="" not="" show="" a="" better="" skin="" whitening="" effect="" compared="" to="" the="" control.="" collagenase="" inhibition="" by="" the="" control,="" ch-alcalase,="" and=""><3 kda="" groups="" were="" 6.45%,54.37%,="" and="" 61.90%,="" respectively.="" in="" addition,="" ch-alcalase="" and=""><3 kda="" inhibition="" of="" collagenase="" corresponded="" to="" that="" of="" vitamin="" cat="" 1="" mg/ml.="" thus,="" chs="" obtained="" from="" this="" study="" may="" be="" effective="" collagenase="" inhibitors="" that="" may="" possibly="" play="" an="" important="" role="" in="" anti-aging="" activities.="" however,="" all="" collagen="" samples="" did="" not="" display="" elastase="" inhibition="" effects,="" which="" may="" result="" from="" a="" lack="" of="" skin="" elasticity.="" overall,="" vitamin="" c(1="" mg/ml)="" inhibited="" various="" activities="" of="" the="" enzymes="" in="" the="" following="" order:="" tyrosinase(95.50%)="">collagenase(48.09)> elastase(2/.00%o).CH-Alcalase(5 mg/mL)inhibited various activities of the enzymes in the following order: collagenase (54.37%)> tyrosinase (15.44%)>elastaza (bez aktivnosti). CH-Alkalaza<3 kda="" (5="" mg/ml)="" inhibited="" these="" activities="" in="" the="" following="" order:="" collagenase="" (61.90%)="">tyrosinase (30.20%)>elastaza (bez aktivnosti). Slični trendovi prijavljeni u drugoj studiji pokazuju da hidrolizati kolagena pokazuju potencijal da djeluju kao agensi protiv starenja i inhibitori kolagenaze [20].

3. Materijali i metode

3.1. Predtretman svinjske kože

Svinjska koža je kupljena od lokalnog dobavljača (Seul, Koreja), a sva vidljiva masnoća i vezivno tkivo svinjske kože uklonjeno je žiletom. Svinjska koža korištena u ovoj studiji dobivena je od jedne svinje kako bi se minimizirale biološke varijacije. Obrezana svinjska koža je četiri puta oprana u vodi na 90 stepeni po 1 min da bi se uklonila masnoća i ostaci. Koža je zatim izrezana na kvadratne dijelove veličine 1 cm i usitnjena u destilovanoj vodi 3 minute koristeći blender sa četiri krila (CNHR-26, Bosch, Hong Kong, Kina). Svinjska koža u prahu je homogenizirana velikom brzinom (25,000o/min) u trajanju od 5 minuta korištenjem Ultra Turrax-a (T25, IKA Labotechnik, Staufen, Njemačka). Otprilike 100 g mješavine svinjske kože (50 posto konačnog čvrstog sadržaja) je upakovano u vakuumu i zamrznuto na -20 stepeni i pohranjeno za upotrebu u roku od 1 mjeseca.

3.2. Komercijalne proteaze i reagensi

Alcalase, Flavorzyme, Neutrase i Protamex su kupljeni od Novozymes (Bagsvaerd, Danska). Bromelain i Papain su kupljeni od Daesong Sangsa (Seul, Koreja). Sve hemikalije za antioksidativne i anti-aging testove kupljene su od Sigma-Aldrich Chemical Company (St. Louis, MS, SAD). Svi ostali reagensi i rastvarači korišćeni u ovoj studiji bili su analitičkog kvaliteta.

3.3. Enzimska hidroliza

Enzimska hidroliza je razvijena za odgovarajuće komercijalne enzime koji se koriste za hranu (na osnovu preporuka proizvođača; tabela 4). Pripremljena mješavina svinjske kože razrijeđena je destilovanom vodom do konačnog sadržaja čvrste tvari od 5 posto. Ova koncentracija je odabrana kako bi se osiguralo ponašanje tečenja zbog svoje niske viskoznosti. Smjesa od 5 posto svinjske kože nazvana je suspenzija kolagena (ili kontrola). Suspenzija kolagena je hidrolizirana u reaktorima korištenjem šest komercijalnih enzima za hranu u omjeru enzim:supstrat 1:100. Alikvoti uzorka (5 mL) su izvučeni na 1, 3, 6, 12 i 24 h hidrolize i odmah zagrevani na 100 stepeni tokom 10 minuta da bi se inaktivirao enzim, nakon čega je usledilo hlađenje na 0 stepeni pomoću ledene vode. Tokom vremena uzorkovanja, pH je kontrolisan korišćenjem 1 M NaOH prema potrebi. Nakon hlađenja, uzorci su centrifugirani na 4000×g 15 minuta, a supernatant (hidrolizat kolagena; CH) je sakupljen. CH je dalje koncentriran ultrafiltracijom, korištenjem sistema AmiconStirred Cells (kataloški broj UFSC 20001, EMD Millipore Corporation, Burlington, MA, USA) sa graničnom molekulskom težinom od 3 kDa (MWCO) (UltracelMembrane, EMD Millipore Corporation, Burlington, MA, SAD) na 60 psi gasovitog azota, na 20 stepeni.cistanche tubulosa recenzijePripremljeni CH je osušen zamrzavanjem i čuvan u hermetički zatvorenim posudama na 20 stepeni do analize.

3.4. Određivanje pH, obnavljanja proteina, sadržaja amino grupa bez rastvorljivosti i proizvodnog prinosa. pH uzoraka (kontrola i CHs) je određen pomoću pH metra (Model S220, Mettler Toledo GmbH, Columbus, OH, SAD). Oporavak ili rastvorljivost proteina određena je procjenom sadržaja proteina korištenjem proteinskog testa bicinhoninske kiseline (BCA), prema uputama proizvođača (Sigma-Aldrich, St. Louis, MS, USA) sa serumskim albuminom kao standardom. Sadržaj slobodnih amino grupa određen je testom 2,4,6-trinitrobenzen sulfonske kiseline (TNBSA) prema uputstvima proizvođača (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) koristeći L-leucin kao standard. Izmjerene su i mokre i suhe težine da bi se izračunalo proizvodno polje.

3.5. Distribucija molekularne težine

3.5.1.Natrijum dodecil sulfat-poliakrilamid gel elektroforeza (SDS-PAGE)

SDS-PAGE obrasci uzoraka (kontrola i CH) mjereni su prema prethodno objavljenoj metodi [10]. Uzorci su razrijeđeni sa 8 M uree (konačna koncentracija proteina, 4 mg/mL). Svaki uzorak je pomiješan sa jednim dijelom pufera za uzorke KTG 020 (10 posto glicerola, 2 posto SDS, 0,003 posto bromofenol plavog, 5 posto -merkaptoetanola i 63 mM Tris-HCl, pH 6.8) iz KOMA Biotech Inc. ., (Seul, Koreja) i kuvano 2 min. Smjesa uzorka (20 μL) stavljena je u EzWayTM PAG 6 posto akrilamidne gelove (KOMA Biotech Inc., Seul, Koreja). Nakon elektroforeze, gel je fiksiran, obojen i odbojan. Molekularne težine su određene korištenjem standarda širokog raspona molekulske težine između 10 i 210 kDa.

3.5.2. Gel permeaciona hromatografija (GPC)

Raspodjela molekulske mase uzoraka određena je prema prethodno objavljenoj metodi [3]. Gel permeaciona hromatografija (GPC) je izvedena korišćenjem YL9100 sistema tečne hromatografije visokih performansi (HPLC) (YL9100, Youngling Instrument Co., Ltd, Gyeonggi-do, Koreja) opremljenog sa tri Ultrahidrogel TM 120 kolone ( 7,8×3000 mm) iz Watersa (Milford, MA, SAD). Mobilna faza je destilovana/dejonizovana voda pri brzini protoka od 1,0 mL/min, a distribucija molekulske težine kolagenskih peptida je praćena pomoću YL 9100 detektora indeksa refrakcije na 40 stepeni. Komplet standarda za molekularnu težinu (106-67, 500 Da, Polymer Standards Service, Mainz, Njemačka) služio je kao standard.

3.6.Amin{2}} kiselinski sastav

Sastav aminokiselina uzoraka analiziran je derivatizacijom sa {{0}}fluorenil etoksi karbonil (FMOC)-kloridom i o-ftalnim dijaldehidom (OPA) na Ultimate 3000 HPLC sistemu ( Dionex, Idstein, Njemačka) opremljen sa dva detektora (fluorescentni detektor i UV detektor) i VDSpher 100 C18-E (4,6 mm × 150 mm, veličina čestica 3,5 μm, VDS Optilab, Berlin, Njemačka). Zapremina ubrizgavanja bila je 1,0 L, a mobilna faza je bila sastavljena od dva eluenta: 40 mM dvobaznog natrijum fosfata (pH 7) i 45 posto (o/v) acetonitrila/45 posto (v/v) rastvora metanola. Povezivanjem UV detektora i fluorescentnog detektora, ultraljubičasti zraci su detektovani na 338 nm, OPA derivat je detektovan na 450 nm talasne dužine emisije i 340 nm talasne dužine ekscitacije, FMOC derivat je detektovan na 305 nm talasne dužine emisije 266. nm talasne dužine pobude. Za kalibraciju je korištena mješavina aminokiselina (1,0 nmol mL-I za svaku aminokiselinu).

pri čemu je Atotalamino kiselina bio sadržaj nakon hidrolize upotrebom 6 M HCl (na 130 stepeni tokom 24 h), a Afree amino kiselina je sadržaj nakon solubilizacije u destilovanoj vodi.

3.7. Procjena antioksidativne aktivnosti

3.7.1.2,2'-Azino-bis-(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonska kiselina) (ABTS) Aktivnost uklanjanja radikala

ABTS aktivnost uklanjanja radikala CH je mjerena prema prethodno objavljenoj metodi [20]. Kation ABTSradical je generiran miješanjem ABTS matične otopine (7.0 mM) sa kalijum persulfatom (2,45 mM) i inkubacijom rezultirajuće smjese u mraku na sobnoj temperaturi preko noći. Otopina ABTS radikala je razrijeđena u 5.0 mM fiziološkom rastvoru puferiranom fosfatom (pH7,4) do nivoa apsorbancije od 0,70±0,02 na 734 nm. Jedan mL razrijeđene otopine ABTS radikala pomiješan je sa 1 mL svakog uzorka. Deset minuta kasnije, mjerene su apsorbancije uzorka (uzorak A, sa uzorkom) i kontrole (kontrola A bez uzorka) na 734 nm. Aktivnost uklanjanja radikala ABTS-a ( posto ) izračunata je kao:

3.7.2. Smanjenje snage

Snaga redukcije CH je izmjerena prema prethodno objavljenoj metodi [20]. Jedan mL svakog uzorka pomiješan je sa 1 mL 0.2 M fosfatnog pufera (pH6,6) i 1 mL 1 posto kalijum-fericijanida. Smjesa je inkubirana na 50 stepeni 20 minuta, a zatim je dodan 1 mL 10% trihlorosirćetne kiseline. Alikvot od 2 mL ove mješavine za inkubaciju pomiješan je sa 2 ml destilovane vode i 0,4 mL 0,1 posto željeznog hlorida. Nakon 10 minuta, mjerena je apsorbancija rezultirajućeg rastvora na 700 nm na spektrofotometru (OPTIZEN, Mecasys Co., Daejeon, Koreja). Smatralo se da povećana apsorbanca (na 700 nm) reakcione smeše ukazuje na povećanu redukcionu moć.

3.8. Procjena efekta protiv starenja

3.8.1. Inhibicija aktivnosti tirozinaze

Inhibicija tirozinaze određena je prethodno opisanom metodom [20]. Rastvor premiksa koji sadrži 70 μL 0,1 M fosfatnog pufera (pH6,8), 30 uL tirozinaze pečuraka (167U/mL; Sigma-Aldrich, SAD), a 20 L uzorka je inkubirano 5 minuta na 30 stepeni. Približno 100 μL 3,4-dihidroksi fenil-L-alanina (L-DOPA) je zatim dodano da bi se pokrenula enzimska reakcija. Apsorpcija na 492 nm je mjerena tokom 20 minuta da bi se pratilo formiranje L-DOPA. Kao pozitivna kontrola poslužila je askorbinska kiselina (1 mg/mL), koja je korištena za poređenje. Omjer inhibicije je izračunat na sljedeći način:

gdje je A mješavina sa tirozinazom bez uzorka; B je bila mješavina bez uzorka i tirozinaze; C je bila mješavina sa uzorkom i tirozinazom, a D je bila mješavina s uzorkom, ali bez tirozinaze.

3.8.2. Inhibicija aktivnosti kolagenaze

Inhibicija kolagenaze određena je prethodno opisanom metodom [20]. Ukratko, pripremljen je 50 mM tricin pufer (pH7.5) koji sadrži 10 mM kalcijum hlorida i 400 mM natrijum hlorida. Zatim, 50 mL 1,0 mM N-[3-(2-furil) akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala rastvora i 0,2 mg/ml kolagenaze (iz Clostridium histolyticum, tip IA, 0.{101} {19}} FALGPA U/mg čvrsta materija; Sigma-Aldrich, SAD) dodani su u prisustvu i odsustvu uzoraka. Reakcija je zaustavljena dodavanjem limunske kiseline (6 posto). Reakciona smeša je odvojena dodavanjem etil acetata. Apsorbancija supernatanta je izmjerena na 345 nm. Askorbinska kiselina (1 mg/mL) služila je kao pozitivna kontrola i korištena je za poređenje. Procenat inhibicije je izračunat kao:

gdje je A mješavina sa kolagenazom bez uzorka; B je mješavina bez uzorka i kolagenaze; C je bila mješavina s uzorkom i kolagenazom, a D je bila mješavina s uzorkom, ali bez kolagenaze.

3.8.3. Inhibicija aktivnosti elastaze

Inhibicija elastaze određena je prethodno opisanom metodom [20]. N-sukcinil-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilid (Suc-Ala-Ala-Ala-pNA) služio je kao supstrat, a otpuštanje p-nitroanilina je praćeno 2{{20}} min na 25 stepeni. Deo (1 ug) svinjske pankreasne elastaze (PPE) tipa IV je otopljen u 1 mL 0.2 M Tris-HCl pufera (pH 8.0). reakciona smjesa je sadržavala 0,2 M Tris-HCl pufera (pH8,0), 1 ppm PPE, 0,8 mM Suc-Ala-Ala-Ala-pNA, uzorak i gore spomenuti supstrat. Izmjerena je apsorpcija na 214 nm. Askorbinska kiselina (1 mg/mL) služila je kao pozitivna kontrola korištena za poređenje. Omjer inhibicije je izračunat na sljedeći način:

gdje je A mješavina sa elastazom i bez uzorka; B je mješavina bez uzorka i elastaze; C je bila mješavina s uzorkom i elastazom, a D je bila mješavina s uzorkom, ali bez elastaze.

3.9.Statistička analiza

Podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost±standardna devijacija (SD). Značajnost razlika između grupa procijenjena je korištenjem višestrukih poređenja i analize varijanse (ANOVA), nakon čega je slijedio Tukey test poštene značajne razlike (HSD). Razlike sa p vrijednostima manjim od 0.05 smatrane su statistički značajnim.

4. Zaključak

U ovoj studiji, hidrolizati kolagena, funkcionalni sastojak hrane, uspješno su proizvedeni enzimskom hidrolizom, praćenom ultrafiltracijom i pročišćavanjem. Različite komercijalne proteaze su testirane na njihovu potencijalnu korisnost u proizvodnji odgovarajućih hidrolizata kolagena. CHS hidrolizovan alkalazom bio je najefikasniji hidrolizovani CH, a ultrafiltracija praćena prečišćavanjem bila je efikasna u stvaranju aktivnih peptida male molekularne težine. Rezultati su pokazali da CHs pokazuju odlične antioksidativne aktivnosti i inhibiciju kolagenaze. Stoga se CH dobiveni ovom studijom mogu koristiti u prehrambenoj, kozmetičkoj ili farmaceutskoj industriji kao prirodni aditiv, koji posjeduje antioksidativna svojstva i svojstva protiv starenja. Dalje studije koje uključuju in vivo procjenu aktivnosti starenja aktivnih peptida u ljudskoj koži mogu se pokazati korisnima.

Ovaj članak je preuzet iz Molecules 2019, 24, 1104; doi:10.3390/molecules24061104 www.mdpi.com/journal/molecules