Nove uloge pokretnih epidermalnih hloroplasta u imunitetu biljaka

sažetak:

Epiderma biljke sadrži atipične male hloroplaste. Međutim, fiziološka uloga ove organele je nejasna u poređenju sa velikim mezofilnim hloroplastima, čija je dobro poznata funkcija fotosinteza. Iako je znanje o učešću hloroplasta u imunitetu biljaka do danas prošireno, razlike između epidermalnih i mezofilnih hloroplasta su izvan okvira ove studije. S obzirom na ulogu biljne epiderme kao barijere stresovima iz okoline, uključujući napade patogena, i imunološku funkciju hloroplasta, istraživanje biljne odbrane na epidermalnim hloroplastima je polje u nastajanju. Nedavne studije su otkrile dinamičke pokrete epidermalnih hloroplasta kao odgovor na gljivične i oomicetne patogene. Nadalje, prijavljeni su proteini povezani s epidermalnim hloroplastom i ćelijski događaji koji su usko povezani s epidermalnom otpornošću na patogene. U ovoj recenziji, fokusirao sam se na nedavni napredak u biljnom imunitetu posredovanom epidermalnim hloroplastom.

Ključne riječi: epidermalni hloroplast; kretanje hloroplasta; stromule; biljni patogen; penetracija; otpornost bez domaćina; preinvazivna odbrana; Arabidopsis thaliana; Nicotiana benthamiana; CHUP1.

Biljni imunitet i ljudski imunitet su dva različita odbrambena mehanizma i postoje očigledne razlike:

1. Različiti patogeni protiv kojih se treba boriti: biljke se uglavnom odupiru biološkim patogenima kao što su bakterije, gljivice i virusi, dok se ljudski imunitet uglavnom odupire bakterijama i virusima.

2. Različite metode imunog odgovora: imunitet biljaka se uglavnom brani od patogena kroz fizičku izolaciju, hemijsku inhibiciju i regulaciju gena, dok se ljudski imunitet uglavnom opire patogenima putem makrofaga, T ćelija i B ćelija.

3. Različite imunološke specifičnosti: Imunitet biljaka usvaja isti metod odbrane od svih patogena, odnosno nespecifičan imunitet, dok je ljudski imunitet specifičan, sposoban da prepozna i proizvede odgovarajuće imunološke odgovore protiv specifičnih patogena.

4. Drugačija imunološka memorija: Biljke nemaju sposobnost imunološkog pamćenja, to jest, nakon što se odupru određenom patogenu, i dalje moraju ponovo pokrenuti imunološki odgovor sljedeći put kada se suoče s istim patogenom. Ljudski imunološki sistem ima sposobnost imunološkog pamćenja, odnosno, nakon otpora patogenu, imat će dugotrajnu imunološku memoriju za ovaj patogen, a sljedeći put kada se ponovo susretne sa istim patogenom, može brzo generirati imunološki odgovor. , čime se efikasno kontroliše patogen Infect. Dakle, u poređenju, naš ljudski imunitet je takođe veoma važan. Moramo se fokusirati na poboljšanje našeg imuniteta. Cistanche deserticola to može. Polisaharidi u mesu mogu regulisati imuni odgovor ljudskog imunološkog sistema i poboljšati stresnu sposobnost imunoloških ćelija. , Pojačava baktericidno dejstvo imunih ćelija.

Click cistanche deserticola dodatak

1. Uvod

Epiderma višećelijskih organizama, uključujući biljke, djeluje kao barijera za zaštitu od raznih stresova kao što su promjene u vanjskom okruženju i napadi patogena. Iz perspektive patogena, probijanje epidermalnih ćelija biljke je bitan prvi korak u invaziji; posebno, gljivični i oomicetni patogeni moraju prodrijeti direktno u biljnu epidermu i razviti invazivne hife iznutra za uspješnu infekciju. Na primjer, gljive antraknoze Colletotrichum i pirinčana blast gljiva Pyricularia oryzae (syn. Magnaporthe oryzae) formiraju melaniziranu ćeliju u obliku kupole zvanu apresorij na površini biljke kako bi razvili klin za prodor u epidermu biljaka domaćina, nakon čega slijedi invazivna proširenje hifa i izbijanje destruktivne bolesti [1].

Međutim, ako je biljka ne-domaćin, ovi gljivični patogeni mogu formirati melanizirani apresorijum, ali ne mogu prodrijeti u epidermalne stanice zbog pre-invazivne ne-domaćinske rezistencije (NHR) biljaka, koja općenito pruža izdržljiv, robustan i imunitet širokog spektra i učinkovito sprječava invazija ogromnog broja neprilagođenih gljiva i oomiceta u nekompatibilnim interakcijama [2,3]. U modelu kapunjaste biljke Arabidopsis thaliana, objavljeno je da mnogi imunološki putevi i komponente podupiru primjenu epidermalnog NHR-a na višeslojni način protiv ulaska neprilagođenih gljivičnih i oomicetnih patogena, kao što je Blumeria graminis f. sp. hordei [4–12], Colletotrichum tropicale [13–16], P. oryzae [17–22] i Phytophthora infestans [6,7]. Međutim, potpuno razumijevanje molekularne osnove preinvazivnog NHR ostaje nedostižno. Da bi se steklo sveobuhvatno razumijevanje NHR-a, važno je identificirati nepoznate imunološki povezane događaje i komponente u biljnoj epidermi.

Kod viših biljaka, osim nekoliko biljaka, kao što je duhan, dugo se vjerovalo da u epidermalnim stanicama ne postoje hloroplasti osim stanica čuvara [23-26]. Većina studija o hloroplastu fokusira se na ćelije mezofila, gdje su brojni tipični veliki hloroplasti visoko diferencirani za fotosintezu [27–29]. Međutim, atipični mali hloroplasti koji sadrže hlorofil također su uočeni u epidermalnim stanicama pločnika A. thaliana, iako su tilakoidi, koji su odgovorni za reakcije fotosinteze zavisne od svjetlosti, slabo razvijeni [30–36]. Stoga je fiziološka uloga epidermalnih hloroplasta nova tema u polju nauke o biljkama.

Poznato je da hloroplasti funkcioniraju kao senzori okoliša protiv višestrukih biotičkih i abiotičkih stresova [37,38]. Na primjer, za imunološki odgovor biljaka na patogene, sekundarni prenosioci, kao što su reaktivne vrste kisika (ROS) i kalcij (Ca2 plus), i prekursori fitohormona, kao što su salicilna kiselina (SA), jasmonska kiselina i abscizinska kiselina, su svi su izvedeni iz hloroplasta [39–42]. Postoje mnoge odlične kritike o ulozi hloroplasta u imunitetu biljaka. Čitaoce upućujem na nedavne preglede, koji će pružiti pregled odgovora na odbranu biljaka povezanih s hloroplastom [43–47].

Međutim, postoji vrlo malo studija odbrane biljaka koje se fokusiraju na epidermalne hloroplaste, a funkcionalne razlike između epidermalnih i mezofilnih hloroplasta u imunološkom sistemu biljaka nisu privukle veliku pažnju. Nedavno su neki izvještaji pokazali uključenost epidermalnih hloroplasta u imunitet biljaka. U ovom pregledu primarni fokus je na epidermalnim hloroplastima, a opisan je i nedavni napredak u epidermalnom imunitetu biljaka.

2. Odgovor epidermalnog hloroplasta kontrolira ulazak gljivičnih patogena u A. thaliana

2.1. Intracelularni pokreti epidermalnih hloroplasta kao odgovor na gljivične patogene u A. thaliana

U stabilnom stanju A. thaliana, epidermalni hloroplasti se ne primjećuju u blizini gornjeg periklinalnog zida (površine) kolovoznih ćelija, jer se obično nalaze na donjem periklinalnom (donjem) i antiklinalnom zidu. U nedavnom izvještaju otkrio sam da se epidermalni hloroplasti pojavljuju na površini kolovoznih ćelija kao odgovor na gljivice Colletotrichum s formiranjem melaniziranog apresorijuma, i nazvao sam ovaj fenomen epidermalni kloroplastni odgovor (ECR) (slika 1) [48].

Interestingly, ECR occurs more strongly against nonadapted fungi such as the Japanese flowering cherry pathogen Colletotrichum nymphaea PL1-1-b, the cosmos pathogen Colletotrichum fioriniae CC1, and the apple pathogen Colletotrichum siamense MAF1, compared to the adapted Brassicaceae pathogen Colletotrichum higginsianum Abr1-5, which readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 > C. siamense MAF1, while two other nonadapted strains, hau tree pathogen C. siamense COC4, and cucurbit pathogen Colletotrichum orbiculare 104-T, do not trigger ECR in the wild-type plant [48]. Importantly, C. siamense COC4 and C. orbiculare 104-T sufficiently induce ECR in plants with a mutation in the PEN2 gene [48], which encodes an atypical myrosinase that works as a core preinvasive NHR contributor against many fungal and oomycete pathogens [6,9,13,17,48–50], although these two nonadapted pathogens cannot invade pen2 mutants. The frequencies of ECR in the pen2 mutant against C. fioriniae CC1 and C. siamense MAF1 are also higher than those in the wild-type plant, whereas other single mutants of immune-related genes such as EDR1, GSH1 EDS5, and CAS have little effect on ECR [48]. These results suggest that ECR is preferentially activated when PEN2-based antifungal preinvasive defense becomes ineffective in epidermal cells. Similarly, in penetration tests on multiple Arabidopsis mutants with many immune-related mutations, these five nonadapted Colletotrichum strains displayed the differential abilities to overcome preinvasive NHR in the same order as the ECR-inducing ability; C. nymphaea PL1-1-B and C. fioriniae CC1 can invade the epidermis of the wild-type plant to some degree and more of the pen2 mutant, whereas C. siamense MAF1, COC4, and C. orbiculare 104-T can break through the epidermal NHR only in the presence of pen2 mutation or with additional mutations such as edr1, gsh1, eds5, and cas (Figure 2, Redrawn from [51]) [48,51]. Thus, there is a tight link between ECR induction in plants and the invasion ability of the nonadapted Colletotrichum fungi, which implies the involvement of ECR in epidermal preinvasive NHR, because these fungal pathogens are incompatible with and definitely cannot infect A. thaliana. The contribution of ECR to preinvasive NHR is described in a later section. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, x FOR PEER REVIEW 3 of 17 readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 >C. siamense MAF1, dok dva druga neprilagođena soja, patogen hau drveta C. siamense COC4 i patogen tikvice Colletotrichum orbiculare 104-T, ne pokreću ECR u biljci divljeg tipa [48].

Važno je da C. siamense COC4 i C. orbiculare 104-T u dovoljnoj mjeri induciraju ECR u biljkama s mutacijom u genu PEN2 [48], koji kodira atipičnu mirozinazu koja djeluje kao ključni preinvazivni NHR doprinositelj protiv mnogih gljivica i oomiceta. patogeni [6,9,13,17,48–50], iako ova dva neprilagođena patogena ne mogu napasti pen2 mutante. Frekvencije ECR u pen2 mutantu protiv C. fioriniae CC1 i C. siamense MAF1 su također veće od onih u biljci divljeg tipa, dok drugi pojedinačni mutanti gena povezanih s imunitetom kao što su EDR1, GSH1 EDS5 i CAS imaju malo uticaj na ECR [48]. Ovi rezultati sugeriraju da se ECR prvenstveno aktivira kada antifungalna preinvazivna odbrana zasnovana na PEN2-u postane neefikasna u ćelijama epiderme.

Slično, u testovima penetracije na višestrukim Arabidopsis mutantima sa mnogim imunološki povezanim mutacijama, ovih pet neprilagođenih sojeva Colletotrichum pokazalo je različite sposobnosti da prevladaju preinvazivni NHR istim redoslijedom kao i sposobnost induciranja ECR; C. nymphaea PL1-1-B i C. fioriniae CC1 mogu upasti u epidermu biljke divljeg tipa do određenog stepena i više pen2 mutanta, dok C. siamense MAF1, COC4 i C. orbiculare {{8 }}T može probiti epidermalni NHR samo u prisustvu pen2 mutacije ili uz dodatne mutacije kao što su edr1, gsh1, eds5 i cas (Slika 2, ponovo nacrtana iz [51]) [48,51]. Dakle, postoji čvrsta veza između indukcije ECR u biljkama i invazivne sposobnosti neprilagođenih Colletotrichum gljivica, što implicira uključenost ECR u epidermalni preinvazivni NHR, jer su ovi gljivični patogeni nekompatibilni i definitivno ne mogu inficirati A. thaliana. Doprinos ECR-a preinvazivnom NHR mutanti Arabidopsis koji nisu domaćini su procijenjeni na osnovu stopa ulaska posredovanog melaniziranim apresorijumom (MAE) i klasifikovani. Stopa MAE (procenti) izračunata je pomoću sljedeće numeričke formule: (broj melaniziranih apresorija sa formiranjem invazivne hife)/(broj melaniziranih apresorija). Adaptirani C. higginsianum Abr1-5 (MAFF305635) je prikazan kao kontrola. Postotak testova za unos gljivica kao "−", " plus /−", " plus ", " plus plus ", " plus plus plus " i " plus plus plus plus " je 0–2 posto, 2–10 posto, 10–20 posto, 20–35 posto, 35–60 posto, odnosno 60–100 posto. nd: nije utvrđeno. Preuzeto iz [51].

ECR nije specifičan za Colletotrichum. Epidermalni hloroplasti se također pojavljuju na površini nakon inokulacije neprilagođenim patogenom P. oryzae, koji pokazuje invaziju biljaka tipa melaniziranog apresorijum posredovanog ulaska (MAE), ali je filogenetski daleko srodan Colletotrichum [48]. Učestalost ECR-a izazvanog P. oryzae također se povećava kod pen2 mutanta. Stoga, ECR može biti epidermalni odgovor širokog spektra na širok spektar gljivičnih patogena. Ova ideja je u skladu s novim otkrićem da neprilagođena gljiva Alternaria alternata, koja nije patogen tipa MAE i formira melanizirane konidije, također inducira ECR u ne-domaćinu A. thaliana, posebno u prisustvu pen2 mutacije (Slika 3) .

2.2. Okidač odgovora epidermalnog hloroplasta

Iako ostaje otvoreno pitanje kako epidermis biljke prepoznaje gljivične patogene i inducira ECR, neki podaci ukazuju na fascinantnu korelaciju između karakteristika ulaska gljivica u pokušaje i indukcije ECR [48]. Neki od dobro proučavanih molekula izvedenih iz patogena su molekularni obrasci povezani sa patogenom/mikrobom (PAMP/MAMP), koji su visoko konzervirani među patogenima širokog spektra i doprinose njihovoj održivosti [52]. Molekularni obrasci povezani sa oštećenjem (DAMP), molekuli dobijeni iz domaćina kao što je Pep1 koji se oslobađaju ekstracelularno tokom invazije patogena, takođe su signali za urođene imune odgovore [53]. PAMP/DAMP se prepoznaju od strane receptora za prepoznavanje biljnih uzoraka (PRR), a imunitet izazvan PAMP/DAMP se pokreće putem proteina povezanih s PRR, kao što su RLP 23 i RLP30, proteini slični receptorima (RLP), FLS2 i BAK1. , membranski ugrađene receptorske kinaze (RLK) i BIK1 i PBL1, citoplazmatske kinaze slične receptorima (RLCK) [54–61].

Izuzetne kritike o PRR signalizaciji u imunitetu biljaka objavilo je nekoliko istraživača [62–65]. Intrigantno je da ECR ne zavisi od BAK1, BIK1, PBL1, Pep{5}}sensing RLKs, PEPR1 i PEPR2; stoga, PAMP i/ili DAMP signalni događaji, barem oni posredovani ovim RLK i RLCK, nisu uključeni u indukciju ECR [48]. Nadalje, kvantifikacija ECR u mutantnoj biljci pen2 protiv višestrukih mutanata C. orbicular koji su nedostatni u različitim koracima morfogeneze povezane s invazijom, otkrila je da je formiranje penetracionog klina, igličaste gljivične strukture koja izlazi iz apresorija za uspješan ulazak u biljku epidermisa, neophodna je za indukciju ECR [48].

Biljne patogene gljive i oomicete luče arsenal virulentnih proteina, koji se nazivaju efektori, kako bi manipulirali biljnim ćelijskim procesima i izazvali supresiju imuniteta. Objavljeni su brojni pregledi o efektorima biljnih patogena [66–70]. Kod Colletotrichum, fluorescentno označeni efektorski proteini prvenstveno se akumuliraju u donjim porama apresorija za izlučivanje kroz penetracioni klin [71,72]. Ova efektorska sekrecija zavisi od v-SNARE SEC22-posredovanog intracelularnog saobraćajnog puta u gljivi [72] i, što je zanimljivo, korelira sa indukcijom ECR [48]. Ova zapažanja upućuju na sljedeće potencijalne kandidate kao okidače ECR-a: (i) molekul(e) porijeklom iz patogena koji se izlučuju iz penetracionog klina tokom pokušaja ulaska gljivica i (ii) signal(i) biljnog porijekla generirani kao odgovor na stepen gljivična progresija u pokušaju prodiranja. ECR je univerzalni događaj protiv mnogih tipova gljivičnih patogena, uključujući vrste Colletotrichum, P. oryzae i A. alternata (Slika 3) [48]. Stoga, tipični efektori koji su ograničeni na uski raspon gljivičnih patogena zbog specifičnosti svog domaćina možda neće biti znak ECR; umjesto toga, uobičajeni enzimi koji razgrađuju ćelijski zid ili visoko konzervirani glavni efektori širokog spektra patogenih gljiva ili signali oštećenja biljaka koji nisu povezani s Pep1 mogu pokrenuti ECR u biljnoj epidermi.

2.3. Regulatori odgovora epidermalnog hloroplasta i preinvazivne nehostove rezistencije Arabidopsis

Veliki mezofilni hloroplasti pokazuju unutarćelijske pokrete na osnovu intenziteta svjetlosti za sigurnu i efikasnu fotosintezu; oni bježe od jakog svjetla i migriraju na antiklinalne zidove ćelije kako bi spriječili fotooštećenje (odgovor izbjegavanja) i kreću se prema slabom svjetlu i talože se na periklinalnim zidovima kako bi povećali fotosintetičku efikasnost (odgovor akumulacije). Mnogi regulatorni proteini ovog adaptivnog fenomena, koji se nazivaju pokreti fotorelokacije hloroplasta, identificirani su unutar ćelija mezofila [73]. Međutim, postoji nekoliko izvještaja, a malo se zna o komponentama koje kontroliraju unutarćelijsko kretanje epidermalnih hloroplasta [74,75]. U tom kontekstu, nedavno sam pokazao da ECR u epidermalnim stanicama dijeli zajedničke regulatorne proteine ​​s fotorelokacijskim pokretima mezofila hloroplasta [48]. Protein koji veže aktin CHUP1 stvara pokretačku silu zasnovanu na hloroplastu-aktinu i bitan je i za akumulaciju i za reakcije izbjegavanja [76-78], dok protein J-domena sličan auksilinu JAC1 regulira pojavu i nestanak filamenata kloroplast-aktina. i potreban je za akumulacijski odgovor [79]. Genetski modificirana A. thaliana pokazuje da prekomjerna ekspresija CHUP1 proteina uzrokuje snažnu supresiju ECR-a.

Tipično, epidermalni hloroplasti se jedva otkrivaju na površini, čak i nakon inokulacije neprilagođenim gljivičnim patogenima [48]. Međutim, prekomjerna ekspresija JAC1 ili delecija CHUP1 dovodi do konstitutivnog pozicioniranja epidermalnih hloroplasta na površini, bez obzira na inokulaciju gljivica [48]. Dakle, CHUP1 i JAC1 regulišu negativno i pozitivno, respektivno, pozicioniranje epidermalnih hloroplasta na površini kolovoznih ćelija (slika 4). Važno je napomenuti da je inokulacija chup1 mutanta visokim koncentracijama neprilagođenih gljiva samo neznatno povećala populaciju površinskih hloroplasta, što ukazuje na oštećenje ECR-a zbog iscrpljivanja CHUP1 proteina. Nasuprot tome, fototropin 1 i 2, koji su receptori plave svjetlosti odgovorni za kretanje fotorelokacije hloroplasta [80-82], neophodni su za aktivaciju ECR-a [48]. Stoga, lokacija fotografije kloroplasta i ECR imaju različite sisteme za prepoznavanje stimulusa za svjetlost i patogene, respektivno, ali dijele barem neke nizvodne regulatorne komponente. Sa stanovišta razlika između mezofila i epidermalnih hloroplasta, raznovrsnost adaptivnih sistema protiv različitih stresova okoline može odražavati razrađenu strategiju preživljavanja biljke.

Fascinantno je pitanje da li ECR doprinosi imunitetu biljaka u epidermalnim ćelijama A. thaliana. Da bi se razjasnilo učešće ECR-a u preinvazivnom NHR-u, istraženi su efekti oštećenja ECR-a prekomernom ekspresijom ili iscrpljivanjem CHUP1 proteina na MAE stopu više neprilagođenih gljivica u biljnoj epidermi [48]. C. nymphaea PL1-1-B, koja je pokazala relativno nižu inkompatibilnost sa A. thaliana u poređenju sa drugim neprilagođenim gljivama, pokazala je povećanu stopu MAE kod biljaka sa oštećenjem ECR (Slika 2) [48]. Štaviše, u biljkama sa pen2 ili drugim dodatnim mutacijama kao što su edr1, gsh1, eds5 i cas, povećanje ili smanjenje nivoa CHUP1 proteina promoviše MAE stopu C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1, COC4 i C orbiculare 104-T (Slika 2) [48]. Slični rezultati su dobijeni za stopu MAE kod P. oryzae. Prema tome, ECR je odgovor biljke na stres, kojim se pojačava preinvazivni NHR u epidermalnim stanicama kada gljivični patogeni pokušaju invaziju kroz penetracijski klin.

Kao što je opisano, ECR se prvenstveno aktivira u odsustvu PEN2-odbrambenog puta. Slično, inokulacija neprilagođenog C. fioriniae CC1 je također izazvala ekspresiju mnogih gena povezanih s odbranom, kao što su PAD3, CYP79B2, CYP71A13, PDF1.2a, MYB51, PR1, FRK1 i NHL10, samo u slučaju pen2 mutacije iako je prag za ECR bio niži od praga za ekspresiju ovih gena [48]. Na osnovu slojevite strukture biljnog NHR-a, ECR je jedan od odbrambenih odgovora koji je programiran da podupire preinvazivni NHR kada su putevi uključeni u preinvazivnu odbranu višeg sloja, uključujući puteve povezane s PEN2-, nedjelotvorni [ 48,51].

Ovo je u skladu sa odnosom između A. thaliana i nižeg inkompatibilnog neprilagođenog patogena C. nymphaea PL1-1-B, koji djelomično prevazilazi preinvazivnu odbranu visokog sloja [51]; C. nymphaea PL1-1-B snažno pokreće ECR i također inducira gene vezane za odbranu u biljci divljeg tipa [48]. Pretpostavlja se da postoji u prirodi nekoliko fitopatogenih gljiva, kao što je C. nymphaea PL1-1-B, koje djelimično prevazilaze preinvazivnu odbranu višeg sloja A. thaliana. Stoga su biljke razvile ECR kao jedan od mehanizama epidermalnog NHR-a protiv ovih vrsta gljivičnih patogena (Slika 4).

3. Epidermalne hloroplastne imune komponente doprinose preinvazivnoj antifungalnoj otpornosti Arabidopsisa

3.1. Preferencijalna lokalizacija komponenti povezanih s imunitetom na pokretne epidermalne hloroplaste u A. thaliana

Kako ECR doprinosi preinvazivnom NHR-u protiv neprilagođenih gljivičnih patogena ostaje da se potpuno razjasni. Fluorescentno snimanje živih ćelija otkrilo je da su komponente povezane s imunitetom, kao što su -glutamilcistein sintetaza GSH1, Ca2 plus -sensing receptor CAS, transporter porodice MATE EDS5, izohorizmat sintaza ICS1/SID2 i aminotransferaza ALD1, lokalizirane u epidermalnoj maloj hloroplasti smokve (smokva 4). [15,48,83–86]. Zanimljivo je da su fluorescentni signali ovih komponenti u epidermalnim hloroplastima mnogo jači od onih u velikim mezofilnim hloroplastima [48,83,85,86]. U ECR-aktiviranim kolovoznim ćelijama nakon inokulacije neprilagođenim C. fioriniae CC1, pronađeno je da se proteini GSH1, EDS5 i CAS lokaliziraju na površini zajedno s pokretnim epidermalnim hloroplastima, što ukazuje na čvrstu vezu između ECR-a i intracelularnog pozicioniranja ovih imune komponente [48]. Ova zapažanja mogu ojačati važnost epidermalnih hloroplasta u imunitetu biljaka

3.2. Epidermalne hloroplast-lokalizirane imunološke komponente i preinvazivna odbrana kod A. thaliana

GSH1 doprinosi obrani biljaka putem biosinteze glutationa u kompatibilnim i nekompatibilnim interakcijama A. thaliana-patogen [15,87]. CAS je uključen u prolaznu Ca2 plus signalizaciju u hloroplastima tokom imuniteta biljke [88], a CAS-ciljani gljivični efektor Sclerotinia sclerotiorum ometa SA signalizaciju u biljci domaćinu [89]. ICS1/SID2 i EDS5 su potrebni za biosintezu i transport SA prekursora, respektivno, tokom imunološkog odgovora biljke [85,90,91]. Čvrsta veza između ovih imunoloških komponenti i epidermalnih hloroplasta implicira njihovu uključenost u epidermalni NHR protiv gljivičnih patogena koji pokreću ECR. Doprinos GSH1, CAS, EDS5 i ICS1/SID2 preinvazivnom NHR protiv neprilagođenih gljiva je demonstriran; C. nymphaea PL1-1-B je pokazala povećanu MAE u epidermisu pojedinačnih mutanata gsh1, cas i eds5 u poređenju sa onim u biljci divljeg tipa [51], dok su slični efekti ovih mutacija na MAE kod C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1 i P. oryzae su uočeni kod svakog dvostrukog mutanta sa pen2 mutacijom (Slika 2) [48].

Povećane stope MAE više nekompatibilnih C. siamense COC4 i C. orbiculare 104-T potvrđene su u pen2 mutantnim biljkama sa višestrukim mutacijama u genima vezanim za imunitet (Slika 2) [48]. Stoga, efekti ovih mutiranih gena, koji kodiraju epidermalni hloroplast lokalizirani proteini, koreliraju sa ECR-om izazvanim svakim gljivičnim patogenom. Ova studija predlaže da ćelije epiderme Arabidopsis razvijaju imunološki odgovor usmjeren na ECR, pri čemu intracelularna repozicija proteina povezanih s imunitetom može poboljšati antifungalni NHR (Slika 4) [48]. Protein specifičan za epidermalni hloroplast, ALD1, neophodan je za lokalnu rezistenciju na bolesti i sistemsku stečenu rezistenciju protiv virulentnih i avirulentnih bakterijskih patogena, a ispoljava svoj učinak kontroliranjem akumulacije SA [86,92–94]. U budućnosti bi trebalo razjasniti da li ALD1 takođe funkcioniše u preinvazivnom NHR protiv gljivičnih patogena.

4. Epidermalni hloroplasti se akumuliraju na sučelju sa patogenom oomiceta i CHUP1 je neophodan za otpornost na penetraciju u Nicotiana benthamiana

4.1. Fokalna akumulacija epidermalnih hloroplasta na sučelju sa patogenom oomiceta u N. benthamiana

Uloga epidermalnih hloroplasta kao odgovor na patogen oomiceta P. infestans također je proučavana u modelu solanaceus biljke N. benthamiana [95–97]. U ovom dijelu spominjem nedavna istraživanja o dinamici kretanja epidermalnog kloroplasta i uključenosti CHUP1 u imunitet aktinomiceta, iako postoji nejasnoća u vezi sa adaptivnim ili neprilagodljivim karakteristikama P. infestans na N. benthamiana, što pokazuje dvosmislenu otpornost na starost do P. infestans; zrele biljke su otporne, dok su mlade biljke osjetljive [98].

Tokom odgovora N. benthamiana na P. infestans, epidermalni hloroplasti pokazuju unutarćelijske pokrete i akumuliraju se na sučelju sa patogenom haustoriumom, specijalizovanim hifama povezanih sa infekcijom, na BAK1-nezavisan način (slika 5) [96] . Stoga je fokalna imunost posredovana epidermalnim hloroplastima predložena u N. benthamiana-P. infestans patosistem. Sličan fenomen je uočen u ECR-aktiviranim ćelijama A. thaliana tokom antifungalnog odgovora; međutim, većina površinskih hloroplasta bila je rasuta u slučaju ECR-a i, barem pod mikroskopom, nije se povezivala sa interfejsom patogena [48]. S obzirom da se epidermalni hloroplast N. benthamiana obično otkriva na površini kolovoznih ćelija, bez obzira na inokulaciju patogena, mehanizmi rada epidermalnih hloroplasta kao odgovor na napade patogena nisu bili potpuno isti između A. thaliana i N. benthamiana.

Nadalje, CHUP{0}}povezan ECR i fokalna akumulacija epidermalnih hloroplasta na mjestima prodiranja gljivica mogu biti nezavisni događaji u A. thaliana jer je akumulacija epidermalnih hloroplasta u N. benthamiana specifična za sučelje patogena CHUP{{2} }nezavisno (slika 5) [97]. U tom kontekstu, ostaje da se razjasni da li dio epidermalnih hloroplasta A. thaliana, koji se fokalno akumuliraju na mjestima penetracije gljivica, ima posebnu ulogu (uloge) od epidermalnih hloroplasta povezanih s ECR, kao i one u N benthamiana.

4.2. CHUP1-Zavisno taloženje kaloze na mestu prodiranja oomiceta tokom epidermalne rezistencije N. benthamiana

Savage et al. objavili su da se pozicioniranje epidermalnih hloroplasta na granici između N. benthamiana i haustorije P. infestans dogodilo nezavisno od CHUP1 [97], što se malo razlikovalo od Arabidopsis ECR [48]. Međutim, oni su pokazali da je CHUP1 potreban za otpornost na prodiranje u epidermalne ćelije N. benthamiana protiv P. infestans [97]. Utišavanje ili nokautiranje dva CHUP1 alela u N. benthamiana povećava osjetljivost na P. infestans, dok akumulacija epidermalnih hloroplasta oko haustorije nije narušena kod CHUP1 nokaut mutanta (chup1) [97]. Arabidopsis chup1 mutant je također pokazao smanjeni preinvazivni NHR protiv MAE neprilagođenih gljivičnih patogena [48], što ukazuje na važnost proteina CHUP1 povezanog s hloroplastom u imunitetu epidermalne biljke protiv oomiceta i gljivičnih patogena.

Zanimljivo je da fokalno taloženje kaloze na haustoriji P. infestans, što je jedan od odbrambenih odgovora biljke, zavisi od CHUP1-, što sugerira da protein CHUP1 povezan s hloroplastom doprinosi epidermalnom imunitetu protiv patogena oomiceta tako što povećava otpornost na penetraciju putem taloženja kaloze (slika 5) [97]. Ključno pitanje je kako postoji veza između ovog taloženja kaloze i fokalne akumulacije epidermalnih hloroplasta na interfejsu patogena jer je CHUP1 protein povezan sa hloroplastom. S tim u vezi, Savage et al. nisu pokazali korelaciju između taloženja kaloze i prisustva hloroplasta oko haustorijuma [97]. U skladu sa ovim nalazom, kod A. thaliana-C. orbikularna nekompatibilna interakcija, taloženje kaloze nije u korelaciji sa aktivacijom ECR; Kaloza se dovoljno deponuje na mestima pokušaja penetracije patogena u biljci divljeg tipa, gde se ECR jedva aktivira zbog prethodne funkcije visokoslojne preinvazivne odbrane [48]. Nokaut gena CHUP1 u N. benthamiana ne utiče na druge osnovne imunološke procese, kao što je fosforilacija MAPK izazvana PAMP-om, konstitutivno aktivna ćelijska smrt izazvana preosetljivim odgovorom (HR) nalik na MEK2DD, i smrt ćelija izazvana efektorima [97].

Stoga, Savage et al. spekuliše da bi u CHUP1-nokautu N. benthamiana, smanjenje proizvodnje molekula izvedenih iz epidermalnog hloroplasta, kao što su prekursori ROS i SA, moglo vjerojatno uzrokovati oštećenje akumulacije kaloze oko haustorijuma. Oni također nisu isključili mogućnost da snimak snimka ne odražava precizno uključenost mobilizacije epidermalnog hloroplasta u haustoriju u fokalnom taloženju kaloze, jer su se hloroplasti možda udaljili od haustorije nakon taloženja kaloze [97]. Očekujem da buduća istraživanja razjasne regulatorni mehanizam taloženja kaloze na interfejsu patogena preko CHUP1 povezanog sa hloroplastom u N. benthamiana, i uporede ga sa imunim odgovorima vezanim za epidermalni hloroplast kod A. thaliana.

5. Dinamička morfologija epidermalnih hloroplasta i interakcija između organa u biljnom imunitetu

5.1. Formiranje stromule, proširenje i formiranje šupljine

Mezofil i epidermalni hloroplasti rastu dinamičke tubularne ekstenzije zvane stromule, koje su ispunjene stromom [99]. U epidermalnim ćelijama N. benthamiana, stromule se povećavaju tokom antivirusnog i antibakterijskog imuniteta, gde dolazi do smrti HR ćelija izazvane efektorima [95]. N. benthamiana također inducira formiranje stromule tokom PAMP-pokrenutog imuniteta protiv oomiceta INF1 pored bakterijskog flg22 i gljivičnog hitina na BAK1-zavisan način [95,96]. Zanimljivo je da je indukcija stromule potisnuta efektorom P. infestans AVR3a [96]. Indukcija stromule u epidermalnim hloroplastima je takođe uočena tokom antibakterijske imunosti kod A. thaliana [95]. Sve u svemu, ova zapažanja impliciraju moguću uključenost stromula u odbrambene odgovore biljaka. Važno je da su pokreti hloroplasta i veze sa drugim organelama, kao što su jezgra, posredovani stromulama tokom imunološkog odgovora biljaka [95,100]. Štaviše, stromule mogu transportovati signalne molekule vezane za odbranu ROS i odbrambeni protein kloroplasta NRIP1 u jezgro u N. benthamiana [95,101]. NRIP1 je neophodan za antivirusnu rezistenciju kod N. benthamiana [102]. Imunološki povezani proteini GSH1, EDS5 i CAS također su lokalizirani na stromule koje se protežu od epidermalnih hloroplasta u A. thaliana, iako je signal lokalizacije tilakoidnog proteina CAS u stromulama slabiji od signala druga dva proteina i može biti artefakt prekomerne ekspresije [48].

Stoga, u epidermalnim stanicama, komponente povezane s imunitetom mogu dinamički mijenjati svoje pozicioniranje kroz pokrete hloroplasta i dalje proširiti svoju lokaciju na vanjski dio hloroplasta putem stromula tijekom imunoloških odgovora. Međutim, također je vrlo kontroverzno da li povećane stromule imaju pozitivne učinke na otpornost na antimikrobne tvari. Caplan et al. izvijestili su da su mutanti N. benthamiana i Arabidopsis chup1 utišani genom CHUP1 pokazali povećane stromule, koje su vizualizirane pomoću NRIP1-GFP fuzijskog proteina, u odsustvu patogena i promovirale smrt HR stanica izazvane efektorima tokom antivirusnog i antibakterijskog imunološkog odgovora [95]. Nasuprot tome, Savage et al. je pokazao da chup1 mutanti i N. benthamiana i A. thaliana pokazuju smanjene stromule, koje su vizualizirane pomoću GFP-a, u odsustvu patogena [97].

Štaviše, chup1 mutant N. benthamiana može u dovoljnoj mjeri inducirati formiranje stromule kada se izazove sa P. infestans, uprkos njegovoj povećanoj osjetljivosti na ovaj patogen [97]. Smanjen preinvazivni NHR kod Arabidopsis sa chup1 mutacijom protiv gljivičnih patogena tipa MAE je također zabilježen [48]. Ova neslaganja mogu se objasniti u budućim studijama. Važno je napomenuti da su, u biljnom imunitetu, indukcija stromule i pokreti hloroplasta, kao što su ECR i fokalna akumulacija na interfejsu patogena, više povezani, ali različiti događaji, jer prvi zavise od PAMP signalne kinaze BAK1, dok drugi ne. Stoga se različiti signali izvedeni iz patogena mogu integrirati kroz epidermalni sistem usmjeren na hloroplast kako bi se uskladili odbrambeni odgovori.

Epidermalni hloroplasti su znatno manji od mezofilnih hloroplasta. Međutim, intrigantno je da su se mogli uočiti uvećani epidermalni hloroplasti u ćelijama aktiviranim ECR-om, a populacija uvećanih hloroplasta se postepeno povećavala tokom inkubacije sa neprilagođenim gljivičnim patogenima (Slika 6). Povećani hloroplasti nisu uočeni u ranoj fazi ECR-a. Potvrđeno je formiranje šupljina unutar uvećanih epidermalnih hloroplasta (slika 6). Fiziološki značaj ovih promjena u morfologiji epidermalnih hloroplasta tokom ECR-a trenutno je nejasan, ali epidermalni hloroplasti mogu poboljšati preinvazivni NHR putem ovih dodatnih događaja u kasnoj fazi ECR-a. Alternativno, na morfologiju organela biljaka mogu uticati efektori patogena, jer je prijavljeno da prolazna ekspresija efektorskih proteina Colletotrichum dovodi do povećanja jezgara u epidermalnim ćelijama N. benthamiana [103]. Ako su takve organelne ekspanzije među strategijama infekcije patogenom putem efektora, to je u skladu s činjenicom da mnogi efektori patogena ulaze u hloroplaste i ciljaju na proteine ​​lokalizirane u kloroplastu [46,47].

5.2. Perinuklearna klasterizacija epidermalnih hloroplasta i nuklearna kretanja

Poznato je da se hloroplasti skupljaju oko jezgra radi komunikacije među organelama, gdje se prijenos retrogradnih signala javlja kao odgovor na različite stresove okoline (37,38,104-106). U odbrambenim odgovorima N. benthamiana, prijavljeno je retrogradno ROS signaliziranje od perinuklearnih klasteriziranih hloroplasta do jezgra kroz stromule (95); isto je predloženo kod A. thaliana (88,107,108). Zanimljivo je da gubitak CHUP1 gena dovodi do povećanog perinuklearnog grupiranja epidermalnih hloroplasta i kod N. bnethamiana i kod A. thaliana (97. Perinuklearna klasterizacija epidermalnih hloroplasta također je uočena tokom Arabidopsis ECR nakon inokulacije patogena ili u CHUP{10} osiromašeni uslovi bez patogena [48]. Dakle, ove dvije biljne vrste imaju slične regulatorne mehanizme za kontrolu perinuklearnog skupljanja epidermalnih hloroplasta, u kojima CHUP1 pokazuje negativne efekte.S obzirom na oštećenje ECR i preinvazivnog NHR-a konstitutivnim površinskim pozicioniranjem epidermalnih hloroplasta u chup1 mutantu A. thaliana [48], veća perinuklearna klasterizacija epidermalnih hloroplasta također može funkcionalno propasti.U skladu s ovom idejom, CHUP{15}}nokaut N. benthamiana je osjetljiviji na P. infestans [97] .

Svjetlo-inducirano nuklearno kretanje u mezofilu Arabidopsis i ćelijama epidermalnih kolovoza ovisi o CHUP1-u [74,78]. CHUP1 se specifično lokalizuje na omotač hloroplasta, ali ne i na jezgra, i reguliše kretanje hloroplasta; stoga je CHUP{5}}posredovano unutarćelijsko kretanje epidermalnih hloroplasta pokretačka snaga za kretanje jezgara kao odgovor na jako svjetlo [74,78]. Slično, jezgra, zajedno sa perinuklearnim klasterskim hloroplastima, migriraju na površinu tokom ECR-a kod A. thaliana, koja je usko povezana sa količinom CHUP1 proteina [48]. Perinuklearni endoplazmatski retikulum se takođe repozicionira na epidermalnu površinu tokom ECR-a [48]. U N. benthamiana, jezgro se pomiče do mjesta penetracije oomiceta P. infestans [96,109]. Ovo se također opaža u drugim biljnim patosistemima koji koriste gljivične i oomicetne patogene [110–112]. Na fokalnu akumulaciju jezgra nije uticalo povećano perinuklearno grupisanje epidermalnih hloroplasta u CHUP1-nokautu N. benthamiana [97]. S obzirom na to da prekomjerna ekspresija i iscrpljivanje CHUP1 proteina ima suprotne efekte na kretanje epidermalnog hloroplasta tokom Arabidopsis ECR, bilo bi zanimljivo utvrditi da li je perinuklearna klasterizacija epidermalnih hloroplasta potisnuta prekomjernom ekspresijom CHUP1 u N. benthamiana, i stoga je li fokalna akumulacija jezgro na interfejsu P. infestans je poremećeno.

6. Zaključci

Značaj funkcije hloroplasta u imunitetu biljaka je široko priznat. Istraživanja koja se fokusiraju na tipove hloroplasta sada se pojavljuju u području antimikrobnih reakcija. S obzirom na funkciju biljne epiderme kao primarnog uporišta za odbijanje neprijatelja, kao što su gljivični i oomicetni patogeni sa sposobnošću direktne penetracije, epidermalni atipični hloroplasti su idealan predmet istraživanja zbog svoje male količine informacija u usporedbi s dobro poznatim tipičnim mezofilnim kloroplastima. .

Konkretno, nedavne studije su otkrile vezu između intracelularne dinamike epidermalnih hloroplasta i biljnog epidermalnog imuniteta, pri čemu bi ECR, fokalna akumulacija epidermalnih hloroplasta na interfejsu patogena, formiranje stromule, komunikacija među organelama i drugi procesi mogli biti orkestrirani za pojačavaju antimikrobnu rezistenciju [48,95–97,113]. CHUP1 lokaliziran u hloroplastu, koji je prvobitno identificiran kao regulator kretanja fotorelokacije hloroplasta u stanicama mezofila [76], ima ključnu funkciju u događajima vezanim za epidermalni hloroplast kao odgovor na patogene. JAC1, regulator fotoinduciranog odgovora akumulacije hloroplasta, također je uključen u intracelularno pozicioniranje epidermalnih hloroplasta tokom ECR-a [48]. Da bi se razumio mehanizam koji leži u osnovi epidermalnog imuniteta putem pokretnih odgovora usmjerenih na hloroplast, potrebna je daljnja analiza o tome koje i kako komponente upotrijebljene u sistemu za premještanje fotografija hloroplasta doprinose odbrambenim odgovorima u biljnoj epidermi.

finansiranje:

Ovo istraživanje je finansiran od strane JSPS KAKENHI Grant Numbers 15K18648, 18K05643 i 21H02194, kao i od programa Vodeća inicijativa za odlične mlade istraživače (LEADER) MEXT-a.

Priznanja:

Zahvaljujem Yoshitaka Takanu na njegovoj pomoći i korisnim diskusijama.

Sukobi interesa:

Autor izjavljuje da nema sukoba interesa.

Reference

1. Kubo, Y.; Furusawa, I. Biosinteza melanina: Preduvjet za uspješnu invaziju biljnog domaćina apppressoria Colle-totrichum i Pyricularia. U Gljivične spore i početak bolesti kod biljaka i životinja; Cole, GT, Hoch, HC, ur.; Plenum Publishing: New York, NY, SAD, 1991; str. 205–217.

2. Heath, MC Rezistencija bez domaćina i nespecifična odbrana biljaka. Curr. Opin. Plant Biol. 2000, 3, 315–319. [CrossRef]

3. Lee, H.-A.; Lee, H.-Y.; Seo, E.; Lee, J.; Kim, S.-B.; Oh, S.; Choi, E.; Choi, E.; Lee, SE; Choi, D. Current Understandings of Plant Nonhost Resistent. Mol. Interakcija biljaka i mikroba. 2017, 30, 5–15. [CrossRef] [PubMed]

4. Collins, NC; Thordal-Christensen, H.; Lipka, V.; Bau, S.; Kombrink, E.; Qiu, J.-L.; Hückelhoven, R.; Stein, M.; Freialdenhoven, A.; Somerville, SC; et al. Otpornost na bolesti posredovana SNARE proteinima na zidu biljne ćelije. Nature 2003, 425, 973–977. [CrossRef] [PubMed]

5. Jacobs, AK; Lipka, V.; Burton, R.; Panstruga, R.; Strizhov, N.; Schulze-Lefert, P.; Fincher, GB Za formiranje rane i papilarne kaloze potrebna je Arabidopsis Callose Synthase, GSL5. Plant Cell 2003, 15, 2503–2513. [CrossRef]

6. Lipka, V.; Dittgen, J.; Bednarek, P.; Bhat, R.; Wiermer, M.; Stein, M.; Landtag, J.; Brandt, W.; Rosahl, S.; Scheel, D.; et al. Odbrana prije i nakon invazije doprinose otpornosti ne-domaćina kod Arabidopsisa. Science 2005, 310, 1180–1183. [CrossRef] [PubMed]

7. Stein, M.; Dittgen, J.; Sánchez-Rodríguez, C.; Hou, B.-H.; Molina, A.; Schulze-Lefert, P.; Lipka, V.; Somerville, S. Arabidopsis PEN3/PDR8, ATP Binding Cassette Transporter, doprinosi otpornosti domaćina na neodgovarajuće patogene koji ulaze direktnom penetracijom. Plant Cell 2006, 18, 731–746. [CrossRef] [PubMed]

8. Jensen, MK; Hagedorn, PH; de Torres-Zabala, M.; Grant, MR; Rung, JH; Collinge, DB; Lyngkjaer, MF Regulacija transkripcije pomoću NAC (NAM-ATAF1,2-CUC2) faktora transkripcije smanjuje ABA signalizaciju za efikasnu bazalnu odbranu prema Blumeria graminis f. sp. hordei u Arabidopsisu. Plant J. 2008, 56, 867–880. [CrossRef] [PubMed]

9. Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Svatoš, A.; Schneider, B.; Doubský, J.; Mansurova, M.; Humphry, M.; Consonni, C.; Panstruga, R.; Sanchez-Vallet, A.; et al. Put metabolizma glukozinolata u živim biljnim ćelijama posreduje u antifungalnoj odbrani širokog spektra. Science 2009, 323, 101–106. [CrossRef]

10. Pinosa, F.; Buhot, N.; Kwaaitaal, M.; Fahlberg, P.; Thordal-Christensen, H.; Ellerström, M.; Andersson, MX Arabidopsis fosfolipaza Dδ je uključena u bazalnu odbranu i otpornost ne-domaćina na gljivice pepelnice. Plant Physiol. 2013, 163, 896–906. [CrossRef]

11. Campe, R.; Langenbach, C.; Leissing, F.; Popescu, G.; Popescu, SC; Goellner, K.; Beckers, GJM; Conrath, U. ABC transporter PEN 3/ PDR 8/ ABCG 36 stupa u interakciju sa kalmodulinom koji je, kao i PEN 3, neophodan za otpornost ne-domaćina Arabidopsis. New Phytol. 2015, 209, 294–306. [CrossRef]

12. Nielsen, ME; Jürgens, G.; Thordal-Christensen, H. VPS9a Aktivira Rab5 GTPase ARA7 kako bi pružio jasan pre- i postinvazivni urođeni imunitet biljaka. Plant Cell 2017, 29, 1927–1937. [CrossRef] [PubMed]

13. Hiruma, K.; Onozawa-Komori, M.; Takahashi, F.; Asakura, M.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Funkcija zavisne od načina ulaska indol glukozinolata u Arabidopsis za otpornost domaćina protiv patogena antraknoze. Plant Cell 2010, 22, 2429–2443. [CrossRef]

14. Hiruma, K.; Nishiuchi, T.; Kato, T.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Arabidopsis POBOLJŠANA OTPORNOST NA BOLESTI 1 je neophodan za ekspresiju biljnih defenzina izazvanu patogenom u otpornosti koja nije domaćin i djeluje putem interferencije represorske funkcije posredovane MYC2-. Plant J. 2011, 67, 980–992. [CrossRef] 15. Hiruma, K.; Fukunaga, S.; Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Watanabe, S.; Narusaka, Y.; Shirasu, K.; Takano, Y. Metabolizam glutationa i triptofana je potreban za imunitet Arabidopsis tokom preosjetljivog odgovora na hemibiotrof. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 2013, 110, 9589–9594. [CrossRef] [PubMed]

16. Irieda, H.; Inoue, Y.; Mori, M.; Yamada, K.; Oshikawa, Y.; Saitoh, H.; Uemura, A.; Terauchi, R.; Kitakura, S.; Kosaka, A.; et al. Konzervirani gljivični efektor potiskuje imunitet izazvan PAMP-om ciljajući biljne imune kinaze. Proc. Natl. Akad. Sci. SAD 2018, 116, 496–505. [CrossRef] [PubMed]

17. Maeda, K.; Houjyou, Y.; Komatsu, T.; Hori, H.; Kodaira, T.; Ishikawa, A. AGB1 i PMR5 doprinose PEN2-posredovanoj preinvazijskoj otpornosti na Magnaporthe oryzae u Arabidopsis thaliana. Mol. Interakcija biljaka i mikroba. 2009, 22, 1331–1340. [CrossRef]

18. Nakao, M.; Nakamura, R.; Kita, K.; Inukai, R.; Ishikawa, A. Otpornost ne-domaćina na penetraciju i rast hifa Magnaporthe oryzae u Arabidopsis. Sci. Rep. 2011, 1, 171. [CrossRef] [PubMed]

19. Okawa, C.; Ishikawa, A. MPK6 doprinosi otpornosti ne-domaćina na Magnaporthe oryzae u Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2013, 77, 1320–1322. [CrossRef]

20. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. SOBIR1 doprinosi otpornosti ne-domaćina na Magnaporthe oryzae u Arabidopsisu. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2016, 80, 1577–1579. [CrossRef]

21. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. ERECTA doprinosi otpornosti ne-domaćina na Magnaporthe oryzae kod Arabidopsis. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2016, 80, 1390–1392. [CrossRef]

22. Takahashi, T.; Murano, T.; Ishikawa, A. SOBIR1 i AGB1 nezavisno doprinose otpornosti domaćina na Pyricularia oryzae (syn. Magnaporthe oryzae) kod Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2018, 82, 1922–1930. [CrossRef] [PubMed]

23. DuPree, P.; Pwee, K.-H.; Grey, JC Ekspresija fuzije gena i promotora fotosinteze u epidermalnim ćelijama lista transgenih biljaka duvana. Plant J. 1991, 1, 115–120. [CrossRef]

24. Bowes, BG; Mauseth, JD Plant Structure—A Color Guide, 2. ed.; Manson Publishing, Ltd.: London, UK, 2008. 25. Vaughan, K. Immunocytochemistry of Plant Cells; Springer: Dordrecht, Holandija, 2013.

For more information:1950477648nn@gmail.com