2 Results

2.1 Poređenje refrakcijske greške i aksijalne dužine među grupama

U poređenju sa normalnom grupom, refrakciona greška pacova u FDM grupi, grupi Cistanche formule i PIR grupi je značajno smanjena, dok je aksijalna dužina značajno povećana (svi P < 0,05). U poređenju sa FDM grupom, refrakciona greška pacova u grupi sa Cistanche formulom i PIR grupi je značajno povećana, a aksijalna dužina značajno smanjena (sve P < 0,05). U poređenju sa grupom formule Cistanche, refrakciona greška pacova u PIR grupi je smanjena, a aksijalna dužina povećana (sve P < 0,05) (tablica 2).

Tabela 2. Poređenje dioptrije i aksijalne dužine među grupama pacova

Napomena:U poređenju sa normalnom grupom, *P < 0,05; u poređenju sa FDM grupom,P < 0,05; u poređenju sa grupom suplemenata krvi, aP < 0,05.

EKSTRAKT BILJKE CISTANCHE ZA POBOLJŠANJE ZDRAVLJA BUBREGA

Provjerite listu

Služba podrške Wecistanche-Za više detalja o saradnji
Email:wallence.suen@wecistanche.com
 

2.2 HE bojenje

U normalnoj grupi struktura svakog sloja retine je bila jasna, ćelije su raspoređene ujednačeno i gusto i nije bilo abnormalnih morfoloških promjena. U FDM grupi, retina je istanjena, ganglijske ćelije su raspoređene labavo i nepravilno, a pojavile su se vakuolne promjene. Povećana je debljina retine pacova u grupi sa Cistanche formulom i PIR grupi, raspored ćelija je bio u osnovi pravilan, povećan je broj ganglijskih ćelija, a ćelije su bile gusto raspoređene, sa najznačajnijim performansama u grupi sa Cistanche formulom (Slika 1).

O: Normalna grupa; B: FDM grupa; C: grupa formula za ishranu krvi i tonificiranje bubrega; D: PIR grupa. ① označava sloj nervnih vlakana; ② označava unutrašnji pleksiformni sloj; ③ označava sloj žilnice; ④ označava sloj sklere.
Slika 1 HE bojenje očiju štakora u svakoj grupi (×400)

2.3 Poređenje nivoa ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu među grupama

Nivoi ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu pacova u normalnoj grupi, FDM grupi, grupi Cistanche formule i PIR grupi su bili 133,59 ± 8,46, 96,28 ± 5,23, 124,56 ± 7,59 i 115,49 ± 6, respektivno. U poređenju sa normalnom grupom, nivoi ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu pacova u FDM grupi, grupi Cistanche formule i PIR grupi su značajno smanjeni (svi P < 0,05). U poređenju sa FDM grupom, nivoi ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu pacova u grupi sa formulom Cistanche i PIR grupi su značajno povećani (svi P < 0,05). U poređenju sa grupom sa formulom Cistanche, nivo ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu pacova u PIR grupi je smanjen (P < 0,05) (Slika 2).

O: Normalna grupa; B: FDM grupa; C: grupa formula za ishranu krvi i tonificiranje bubrega; D: PIR grupa. ① označava sloj nervnih vlakana; ② označava unutrašnji pleksiformni sloj; ③ označava sloj horoidee; ④ označava sloj sklere.
Slika 2 Imunohistohemijsko bojenje za otkrivanje nivoa ekspresije TGF-β2 u skleralnom tkivu pacova u svakoj grupi (×400)

2.4 Poređenje nivoa ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u skleralnom tkivu među grupama

U poređenju sa normalnom grupom, nivoi ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u skleralnom tkivu pacova u FDM grupi, grupi Cistanche formule i PIR grupi su značajno smanjeni (svi P < 0,05). U poređenju sa FDM grupom, nivoi ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u skleralnom tkivu pacova u grupi sa formulom Cistanche i PIR grupi su značajno povećani (svi P < 0,05). U poređenju sa grupom koja je primala formulu Cistanche, nivoi ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u skleralnom tkivu pacova u PIR grupi su značajno smanjeni (svi P < 0,05) (Tabela 3, Slika 3).

Tabela 3. Poređenje ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u tkivu retine

Napomena:U poređenju sa normalnom grupom, *P < 0,05; u poređenju sa FDM grupom,P < 0,05; u poređenju sa grupom suplemenata krvi, aP < 0,05.

O: Normalna grupa; B: FDM grupa; C: grupa formula za ishranu krvi i tonificiranje bubrega; D: PIR grupa.
Slika 3. Western blot analiza ekspresije proteina AQP1 i CAV1 u skleralnom tkivu pacova u svakoj grupi.

2.5 Poređenje nivoa ekspresije GLAST i GLT-1 mRNA u skleralnom tkivu među grupama

U poređenju sa normalnom grupom, relativni nivoi ekspresije GLAST i GLT-1 mRNA u skleralnom tkivu pacova u FDM grupi, grupi Cistanche formule i PIR grupi su značajno povećani (svi P < 0,05). U poređenju sa FDM grupom, relativni nivoi ekspresije GLAST i GLT-1 mRNA u skleralnom tkivu pacova u grupi sa formulom Cistanche i PIR grupi su značajno smanjeni (svi P < 0,05). U poređenju sa grupom formule Cistanche, relativni nivoi ekspresije GLAST i GLT-1 mRNA u skleralnom tkivu pacova u PIR grupi su značajno povećani (svi P < 0,05) (Tabela 4).

Tabela 4. Relativna mRNA ekspresija GLAST-a i GLT-1 u retinalnom tkivu

Napomena:U poređenju sa normalnom grupom, *P < 0,05; u poređenju sa FDM grupom,P < 0,05; u poređenju sa grupom suplemenata krvi, aP < 0,05.

3 Diskusija

FDM ozbiljno utječe na vizualnu funkciju i kvalitetu života pacijenata. U teoriji tradicionalne kineske medicine (TCM), pojava miopije usko je povezana s nedostatkom yina jetre i bubrega. Nedovoljna količina krvi u jetri dovodi do pothranjenosti očiju, a nedostatak esencije bubrega dovodi do neadekvatnog snabdijevanja srži mozga, što u konačnici dovodi do smanjenja vida [5]. Zasnovano na teoriji TCM-a da se "jetra otvara u oči, a bubreg pohranjuje esenciju za proizvodnju srži", metoda toniziranja bubrega i hranjenja krvi dala je važnu ideju za liječenje miopije.

Više detalja o Cistancheu za poboljšanje funkcije bubrega

Cistanche, poznat kao "pustinjski ginseng" i jedan od "devet besmrtnih lijekova" u TKM-u, ima istoriju od više od 2.000 godina medicinske upotrebe. Zapisan je kao vrhunski hranjivi medicinski materijal u drevnim klasicima TCM i veoma je cijenjen zbog svojih efekata toniziranja bubrega, obnavljanja esencije, hranjenja krvi i vlaženja suhoće. Za razliku od mnogih drugih TCM biljaka, Cistanche raste isključivo u pustinjama, uglavnom parazitirajući na korijenima Tamarix ramosissima u regijama kao što su Xinjiang, Unutrašnja Mongolija i Gansu u Kini. Ovo jedinstveno okruženje za rast ga daje bogatim aktivnim sastojcima, uključujući ehinakozid, verbaskozid i flavonoide. Moderna naučna istraživanja su potvrdila da ovi aktivni sastojci imaju snažna antioksidativna svojstva, mogu smanjiti apoptozu stanica, promovirati proliferaciju stanica, popravljati oštećene stanice i proširiti krvne žile – biološke aktivnosti koje su u velikoj mjeri u skladu s TCM efektom „toniziranja bubrega i hranjive esencije“ [16]. Osim toga, dokazano je da Cistanche jača imunitet promicanjem proliferacije limfocita, odupire se umoru povećanjem proizvodnje glikogena u jetri i djeluje protiv starenja uklanjajući slobodne radikale, što ga čini obećavajućim prirodnim sastojkom za razvoj zdravstvenih proizvoda i farmaceutskih proizvoda [16].

Refrakciona greška je pokazatelj sposobnosti fokusiranja oka. U FDM-u, kontinuirano prilagođavanje žižne daljine sočiva i promjene u obliku očne jabučice kako bi se jasno vidjeli objekti mogu dovesti do rasta aksijalne dužine, što dodatno pogoršava miopiju i formira začarani krug [6-7]. Formula koja sadrži Cistanche, sa Cistanche tubulosa kao osnovnim sastojkom, nasljeđuje TCM terapeutski princip toniziranja bubrega i hranjenja krvi. Aktivni sastojci Cistanchea, kao što su ehinakozid i verbaskozid, mogu poboljšati mikrocirkulaciju oka, poboljšati opskrbu mrežnice hranjivim tvarima i ublažiti napetost cilijarnih mišića, čime se smanjuje zamor vida i reguliše refrakciona greška [16]. Rezultati ove studije pokazuju da formula koja sadrži Cistanche može značajno regulisati aksijalnu dužinu, što može biti povezano sa njenom sposobnošću da poboljša periorbitalnu cirkulaciju krvi, smanji intraokularni pritisak i promoviše popravku i regeneraciju ćelija retine i cilijarnih mišića. Štaviše, Cistancheov učinak promoviranja proliferacije stanica i popravljanja oštećenih stanica može pomoći u regulaciji remodeliranja kolagenih vlakana sklera, čime se inhibira abnormalno širenje očne jabučice [16].

Patogeneza FDM uključuje interakciju različitih faktora rasta i citokina. Kao ključni faktor, TGF-β2 aktivira nizvodne signalne puteve vezivanjem za receptore ćelijske površine, učestvujući u regulaciji proliferacije ćelija rožnjače i sklere, promovišući produženje aksijalne dužine i na taj način pogoršavajući progresiju miopije [11]. Formula koja sadrži Cistanche ispoljava svoj terapeutski efekat regulacijom nivoa ekspresije TGF-β2 u FDM. Njegov mehanizam može uključivati ​​inhibiciju abnormalne aktivacije TGF-β2/Smad signalnog puta i smanjenje ekspresije proteina povezanih s remodeliranjem ekstracelularnog matriksa, čime se odlaže stanjivanje sklere i produženje aksijalne dužine. Ovaj efekat je verovatno povezan sa antioksidativnim i antifibrotičkim aktivnim sastojcima u Cistancheu, kao što su flavonoidi i ehinakozid [16]. Prethodne studije TCM pokazale su da toniziranje bubrega i hranjenje krvi mogu poboljšati stanje nedostatka krvi i nedostatka bubrega, a uzajamno promoviranje dovoljne količine krvi i zdravog bubrega pomaže u održavanju normalnih fizioloških funkcija ljudskog tijela [12]. Osim toga, formula koja sadrži Cistanche također ima efekte poboljšanja vidne funkcije, regulacije imunološke funkcije i odlaganja produženja aksijalne dužine, što zajedno pruža garanciju za liječenje FDM.

AQP1 je akvaporin koji se eksprimira u oku i učestvuje u metabolizmu i transportu intraokularne tečnosti. Kod FDM, abnormalna ekspresija AQP1 može uzrokovati poremećaje metabolizma intraokularne tekućine i utjecati na oblik očne jabučice. Regulacijom stanja hidratacije i osmotskog pritiska ekstracelularnog matriksa, AQP1 može indirektno aktivirati TGF-β2 signalizaciju, čime reguliše MMPs/TIMPs sistem i učestvuje u degradaciji skleralnog kolagena i stanjivanju sklere. Osim toga, kao protein uključen u intracelularnu signalizaciju i vezikularni transport, abnormalna ekspresija CAV1 može biti povezana s oštećenjem i disfunkcijom stanica retine u FDM [13]. Rezultati ove studije pokazuju da formula koja sadrži Cistanche može regulisati nivoe ekspresije AQP1 i CAV1 u očima FDM pacova. Konkretno, formula može povećati ekspresiju AQP1, promovirati ravnotežu metabolizma intraokularne tekućine i poboljšati stanje hidratacije ekstracelularnog matriksa; istovremeno reguliše ekspresiju CAV1, poboljšava intracelularnu transdukciju signala i vezikularni transport i smanjuje disfunkciju stanica retine. Sinergistički efekat AQP1 i CAV1 može inhibirati abnormalnu aktivaciju TGF-β2 signalnog puta, čime se odlaže remodeliranje ekstracelularnog matriksa sklere i produženje aksijalne dužine. Prethodne kliničke studije su također pokazale da su pacijenti sa miopijom liječeni formulama koje toniziraju bubrege i hranjuju krv, poboljšale vid i stanje fundusa, što je u skladu s rezultatima ove studije [14].

Abnormalni transport vode je jedan od važnih patoloških mehanizama FDM, koji može promijeniti sadržaj vode u tkivu sklere i pogoršati deformaciju sklere [15]. Aktivni sastojci u Cistancheu, kao što su ehinakozid i verbaskozid, imaju jake biološke aktivnosti. Oni mogu poboljšati očnu cirkulaciju krvi, promovirati normalan metabolizam i funkcionalni oporavak sklere [16]. Rezultati ove studije pokazuju da su nakon intervencije sa formulom koja sadrži Cistanche nivoi ekspresije GLAST-a i GLT-1 u tkivu sklere značajno smanjeni. Mogući razlozi su sljedeći: prvo, sastojci u Cistancheu poboljšavaju opskrbu očnog mikrookruženja kisikom i hranjivim tvarima poboljšavajući očnu cirkulaciju krvi, čime se obezbjeđuje dobro okruženje za normalan rad GLAST-a i GLT-1. Drugo, formula koja sadrži Cistanche može direktno djelovati na GLAST i GLT-1, inhibirati oslobađanje abnormalnih neurotransmitera regulacijom njihove aktivnosti i promovirati ponovnu upotrebu normalnih neurotransmitera. U tom procesu, također može smanjiti očne upalne reakcije regulacijom očne imunološke funkcije, čime štiti strukturni integritet i funkcionalnu stabilnost transportera.

4 Zaključak

Formula koja sadrži Cistanche može efikasno poboljšati refrakcioni status FDM štakora i inhibirati prekomerni rast aksijalne dužine. Njegov mehanizam djelovanja može biti višeciljani i višestruki: s jedne strane, toniziranjem bubrega i njegujući krv (u skladu s TCM teorijom), poboljšava mikrocirkulaciju oka i opskrbu hranjivim tvarima, te ublažava napetost cilijarnih mišića; s druge strane, regulacijom ekspresije AQP1 i CAV1, obnavlja ravnotežu metabolizma intraokularne tekućine i funkcije retine, inhibira abnormalnu aktivaciju TGF-β2/Smad signalnog puta i smanjuje degradaciju ekstracelularnog matriksa, čime se odlaže stanjivanje sklere. Osim toga, formula također može održavati homeostazu neurotransmitera retine regulacijom funkcije glutamatnih transportera kao što su GLAST i GLT-1, što ukazuje na njen potencijal da intervenira u FDM na više nivoa od molekula do cijelog tijela.

Za istraživače i programere koji se bave razvojem biljnih proizvoda, rezultati ove studije ističu potencijal Cistanchea kao prirodnog sastojka za intervenciju miopije. Čisti aktivni sastojci Cistanchea (ehinakozid, verbaskozid, itd.), određeni farmakološki efekti (poticanje proliferacije stanica, antioksidans, reguliranje signalnih puteva) i duga povijest sigurne upotrebe u TKM-u čine ga idealnim kandidatom za razvoj funkcionalne hrane, zdravstvenih dodataka, pa čak i farmaceutskih preparata za prevenciju i liječenje miopije. Štaviše, Cistanche tubulosa, sa najvećim sadržajem aktivnih sastojaka među vrstama Cistanche, industrijski su proizvela preduzeća kao što je Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd., koja pruža stabilnu opskrbu sirovinama i podršku za kontrolu kvalitete za razvoj proizvoda [16].

Međutim, na terapeutski efekat formule koja sadrži Cistanche utiču različiti faktori, kao što su individualne razlike i trajanje leka. Ova studija također ima određena ograničenja, te je potrebno dodatno provjeriti specifične mehanizme regulacije formule. Buduća istraživanja mogu se fokusirati na optimizaciju doznog oblika i doziranja Cistanchea, istraživanje njegove kombinirane upotrebe s drugim prirodnim sastojcima i provođenje kliničkih ispitivanja za procjenu njegove sigurnosti i djelotvornosti kod ljudi, kako bi se promovirala transformacija i primjena proizvoda na bazi Cistanchea u području prevencije i liječenja miopije.

Reference

[1] LIN MY, LIN IT, WU YC, WANG I J. Postepeni skrining kandidata za lijekove za kontrolu miopije korištenjem modela miopije zebrice, miša i zlatnog sirijskog hrčka [J]. EBioMedicine, 2021, 65: 103263.

[2] LEE SY, NAM YK, KIM Y K. Karakterizacija mRNA akvaporin1ab (Aqp1ab) u mud loach (Misgurnus mizolepis) izloženom teškim metalima i imunostimulansima [J]. Comp Biochem Physiol Dio A Mol Integr Physiol, 2022, 270: 111226.

[3] ZHU X, WU X, YANG H, XU Q, ZHANG M, LIU X, et al. Povećana regulacija LINC01003 posredovana m6A reguliše migraciju ćelija ciljajući CAV1/FAK signalni put u gliomu [J]. Biol Direct, 2023, 18(1): 27.

[4] ABED ZI, ARIANEJAD M, AZIZI Z. Egzozomi izvedeni iz mezenhimalnih matičnih ćelija smanjuju hiperplaziju kod psorijaze indukujući transformirajući faktor rasta β2 (TGF-β2) [J]. Mol Biol Rep, 2024, 51(1): 635.[5] YU Z F. Istraživanje uloge i mehanizma akupunkture za "regulaciju jetre i toniziranje bubrega" u prevenciji i kontroli miopije na osnovu mikrocirkulacije fundusa i tehnologije kiseonika u krvi [D]. Chengdu: Univerzitet tradicionalne kineske medicine Chengdu, 2022.[6] ZHU Y, BIAN JF, LU DQ, TO CH, LAM CS, LI KK, et al. Promjena signalizacije EIF2, glikolize i sekrecije dopamina kod miopije lišene forme kao odgovor na liječenje 1% atropinom: dokazi iz interaktivne iTRAQ-MS i SWATH-MS proteomike korištenjem modela zamorca [J]. Front Pharmacol, 2022, 13: 814814.[7] SHU Z, CHEN K, WANG Q, WU H, ZHU Y, TIAN R, et al. Uloga retinalnih dopamin D1 receptora u očnom rastu i razvoju miopije kod miševa [J]. J Neurosci, 2023, 43(48): 8231-8242.[8] HOU J M. Zaštitni efekat recepta Yangxue Bushen na apoptozu skleralnih ćelija u eksperimentalnoj visokoj miopiji [D]. Xining: Univerzitet Qinghai, 2015.[9] DIAO CX, GUO JG, WU QX, ZHANG H, WEN Y. Intervencija kineske medicine u remodeliranju sklere: napredak istraživanja TGF-β/BMP puta u poboljšanju miopije [J]. New Chin Med, 2024, 56(17): 190-195.[10] LUO Y, GUO XQ, CHEN YX, CAO WX, KANG ZF, ZHUANG Z Y. Studija o efektu formule yangxue bushen na remodeliranje sklere i TGF-β2 kod zamoraca sa miopijom deprivacije oblika [J]. Chin J Ophthalmol, 2023, 33(10): 905-909.[11] HAN X, LI M, ZHAO J, ZHANG X, SUN B, XU H. Koncentracija hidroksiprolina i pridruženi faktori očuvanih stromalnih sočiva rožnjače izvedene ekstrakcijom leće rožnjače [J]. Cornea, 2024, 43(10): 1285-1290.[12] YAO L. Istraživanje o učinku angelica sinensis na debljinu horoidee u zamoraca sa deprivacijom oblika i qi-om i miopijom tipa nedostatka krvi [D]. Shenyang: Univerzitet tradicionalne kineske medicine Liaoning, 2023.[13] REN YL, ZHANG XF, KONG L, TANG ZS, ZHANG L W. Ekspresija kaveolina-1 u retini miševa sa akutnom očnom hipertenzijom [J]. Rec Adv Ophthalmol, 2020, 40(5): 407-410.[14] LIN T, GAO J, WANG Y, KANG ZF, WU NL, ZHUANG ZY, et al. Učinak dekocije koja hrani krv i tonifikuje bubrege na vizualnu funkciju pacijenata sa visokom kratkovidnošću [J]. China J Chin Ophthalmol, 2021, 31(4): 250-253, 259.[15] BURGOYNE C, WANG YX, JEOUNG J, HONG SU, GARDINER S, REYNAUD J, et al. OCT morfologija glave optičkog nerva kod miopije II: izvijenost perineuralnog kanala i debljina koroide u visokoj miopiji - teza američkog oftalmološkog društva [J]. Am J Ophthalmol, 2023, 252(1): 225-252.[16] Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd. Cistanche za bolest bubrega [EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 01.08.2022.