Efikasnost kombinovanog tretmana ekstrakta Laminaria Japonica i Cistanche Tubulosa u rastu kose

Kyungha Shin1#, Tae-Su Kim2#, Jangbeen Kyung1, Dajeong Kim1, Dongsun Park1, Ehn-Kyoung Choi1, Sung-Pyo Lee2, Woong-Suk Yang2, Myung-Hwa Kang3, Yun-Bae Kim1*

1Koledž veterinarske medicine, Nacionalni univerzitet Chungbuk, Cheongju, Koreja

2Misuba RTech Co., Ltd., Asan, Koreja

3Odjel za nauku o hrani i ishrani, Univerzitet Hoseo, Asan, Koreja

S obzirom da se u posljednje vrijeme opadanje kose na koži glave povećalo čak i kod mladih ljudi, što ozbiljno utječe na kvalitetu života pojedinaca, efekti ekstrakta Laminaria japonica (LJE) koji stimuliraju rast kose iCistanche tubulosaekstrakt (CTE). Nakon potvrđivanja anagene faze folikula pod brijanjem, mužjaci C57BL/6 miševa su dermalno primijenjeni sa 3 posto minoksidila ili oralno s kombinacijama LJE i CTE tokom 21 dana. Minoksidil je potaknuo ponovni rast kose i povećao aktivnosti -glutamil transpeptidaze (-GTP) i alkalne fosfataze (ALP). Osim toga, Minoksidil je regulirao nivoe epidermalnog faktora rasta (EGF) i vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF). Istodobna primjena LJE i CTE u dozi od 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE je imala sinergističke promotivne efekte na ponovni rast kose, uporedive sa 3 posto minoksidila. LJE je prvenstveno pojačao ALP aktivnost, dok je CTE povećao i -GTP i ALP aktivnosti, kao i ekspresiju EGF i VEGF. In vivo model upale zračnih vrećica, vaskularna eksudacija izazvana karagenanom i povećane koncentracije dušikovog oksida i prostaglandina E2 u eksudatima su sinergistički potisnute istovremenom primjenom LJE i CTE. Osim toga, infiltracija upalnih stanica bila je značajno inhibirana kombiniranim tretmanom. Rezultati sugeriraju da kombinirani oralni tretman s LJE i CTE u odgovarajućim dozama i omjerima sprječava gubitak kose i poboljšava alopeciju, što bi dijelom moglo biti posredovano njihovim protuupalnim djelovanjem.

Ključne riječi:Rast kose, upala, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa,kombinovani tretman

Za više informacija kontaktirajte:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanchedeserticola ima mnogo efekata, kliknite ovde da saznate više

U posljednje vrijeme gubitak kose na vlasištu sve je veći čak i kod mladih ljudi, što ozbiljno utječe na kvalitetu života pojedinca. Iako ćelavost nije jedan od zdravstvenih problema, može uzrokovati dubok psihološki neugodan društveni stres. Stoga je od velikog interesa razviti nove preventivne i/ili terapeutske materijale za gubitak i ponovni rast kose. Unatoč tržištu vrijednom milijardu dolara, postoji nekoliko trenutno učinkovitih proizvoda [1]. Folikuli dlake se remodeliraju tokom ciklusa perioda rasta (anagen), regresije (katagen), mirovanja (telogen) i opadanja (egzogen) [2]. Tokom katagena,

mnoge folikularne ćelije prolaze kroz programiranu ćelijsku smrt (apoptozu) [3], smanjujući veličinu folikula kako folikuli ulaze u telogen. Aktivacija retko cikličnih epitelnih matičnih ćelija lociranih u području ispupčenja folikula dovodi do regeneracije folikula na početku sljedeće anagene faze [4]. Potomstvo matičnih ćelija formira novi folikularni matriks tokom rane anagene, a osovina dlake i unutrašnji omotač korena su izvedeni iz ovih relativno nediferenciranih ćelija matriksa [5]. Dobro je poznato da veličina folikula dlake i trajanje anagene faze određuju veličinu (prečnik) i dužinu dlake, respektivno. Ovaj ciklični rast kose reguliran je različitim faktorima rasta.

Minoksidil, finasterid i propecija su komercijalno dostupni za usporavanje opadanja kose i olakšavanje ponovnog rasta kose. Minoksidil je kao vazodilatator imao nuspojavu da olakša rast kose [6], što može biti posljedica njegovih aktivnosti opskrbe hranjivim tvarima i otvaranja kalijevih kanala [7,8]. Minoksidil je efikasan za androgenu alopeciju, između ostalih tretmana ćelavosti, iako njegova efikasnost nestaje u roku od nekoliko mjeseci nakon prekida liječenja. Poređenja radi, finasterid i propecija, terapeutici benigne hiperplazije prostate i raka prostate, registrovani su u mnogim zemljama za androgenu alopeciju (ćelavost muškog oblika). Finasterid i propecija su sintetički anti-androgeni, inhibiraju reduktazu tipa II 5-, enzim koji pretvara testosteron u dihidrotestosteron (DHT) u ćelijama papile na dnu folikula dlake [9]. Laminaria japonica, Undaria pinnatifida i Cladosiphon okamuranus, široko rasprostranjene u mnogim zemljama, dugo su se koristile kao terapeutici u orijentalnoj medicini. U prethodnim studijama, fukoidan, kompleks sulfatnog polisaharida, ekstrahiran je i identificiran iz morskih algi i potvrđeno je da posjeduje antioksidativno, antikoagulativno, antikancerogeno i protuupalno djelovanje [10,11]. Nakon toga, dokazano je blagotvorno djelovanje fukoidana na upalne bolesti, ishemiju, imunološku disfunkciju i tumore [12,13]. S druge strane,Ekstrakt Cistanche tubulosa(CTE) se također naširoko koristi za tradicionalne lijekove u Kini. CTE poboljšava protok krvi snižavanjem nivoa holesterola u krvi [14]. Nedavno je objavljeno da CTE smanjuje proizvodnju faktora tumorske nekroze- (TNF-) i interleukina-4 (IL-4) koji su glavni faktori za proizvodnju dušikovog oksida (NO) na putu upale [15]. Takođe smo pokazali da fukoidan iz ekstrakta Laminaria japonica (LJE) i CTE sinergistički ublažavaju upalu in vitro i in vivo [16]. Naročito je pokazano da postoji bliska povezanost upale kože (posebno suzne žlijezde) s alopecijom [17]. Stoga se pojavljuju protuupalni aspekti liječenja alopecije [18]. Na osnovu aktivnosti poboljšanja protoka krvi i upale, istražujemo kombinovanu efikasnost LJE i CTE na rast kose i osnovne mehanizme, u poređenju sa 3% minoksidila (Hyundai Pharmaceutical, Seul, Koreja), dobro poznatom kosom pojačivač rasta.

CistancheEkstrakt protiv opadanja kose

Materijali i Metode

Materijali

LJE i CTE su nabavljeni od Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Koreja). Osušeni prah Laminaria japonica ekstrahovan je u prečišćenoj vodi na 60oC tokom 24 sata, filtriran kroz membranu od 0,45 µm, dezinfikovan i osušen raspršivanjem. Cistanche tubulosa je ekstrahovan u 80 posto etanola, dezinfikovan, koncentriran i osušen. LJE i CTE su držani na 4oC, pomešani (1:3) i rastvoreni u prečišćenoj vodi pre upotrebe i oralno davani u zapremini od 5 mL/kg.

Životinje

Mužjaci C57BL/6 miševa za proučavanje rasta dlake i mužjaci ICR miševa za ispitivanje upale kupljeni su od Daehan Biolink (Eumseong, Koreja) i smješteni u prostoriji sa konstantnim uvjetima okoline (23±2ºC; 45-65 posto relativne vlažnosti ; 12-sat ciklus svjetlo-tamno; 150-300 lux svjetlina). Hrana za pelete i pročišćena voda bili su dostupni ad libitum. Sve eksperimente na životinjama odobrio je Institucionalni komitet za brigu o životinjama (IACUC) Nacionalnog univerziteta Chungbuk (CBNU), Koreja, i sprovedeni u skladu sa Standardnim operativnim procedurama (SOP) Centra za laboratorijska istraživanja na životinjama, CBNU.

Tretman za rast kose

Nakon potvrde anagene faze posmatranjem homogeno-ružičaste boje kože na leđima miševa C57BL/6 (starih 6 sedmica, n=8/grupa) nakon šišanja u telogenskoj fazi, dlaka je obrijana [1 ,19,20]. Od sljedećeg dana odabrani su miševi bez vidljivih ogrebotina i oralno tretirani LJE (18 ili 54 mg/kg), CTE (54 ili 162 mg/kg) ili njihovom mješavinom (18 plus 54 ili 54 plus 162 mg/kg) jednom dnevno tokom 21 dana. Niske doze LJE (18 mg/kg) i CTE (54 mg/kg) su iz procijenjenih doza za ljude od 100 mg/tjelu (70 kg) i 300 mg/tjelu nakon površinske translacije tjelesne težine (Km{{23} } za čovjeka/Km=3 za miša), respektivno. Visoke doze LJE i CTE su postavljene na 3 puta, samostalno ili u kombinaciji, kako bi se procijenili maksimalni sinergistički efekti [16]. Minoksidil (3 procenta, 0,2 mL) se lokalno nanosio jednom dnevno na obrijanu kožu po istom rasporedu sa LJE/CTE tretmanom.

Grubo posmatranje rasta kose

U danima u intervalima od 3- dana nakon brijanja i tokom tretmana, miševi su lagano anestezirani dietil etrom, a fotografije su snimljene na njihovim stražnjim stranama. Odnos ponovnog rasta dlaka (ponovo izrasla površina/obrijana površina) na fotografijama je analiziran korišćenjem kompjuterizovanog sistema za analizu slike (Imageinside, Daejeon, Koreja).

Mikroskopski pregled folikula dlake

14. i 21. dana, miševi su žrtvovani dubokom anestezijom dietil eterom, a njihova dorzalna koža je uklonjena [1]. Dorzalna koža je prerezana na dva dijela. Formalinom fiksirani, parafinom ugrađeni dijelovi tkiva (5 µm u promjeru) jednog dijela obojeni su hematoksilin-eozinom kako bi se ispitao broj folikula dlake i histološki nalazi. Drugi dio tkiva je zamrznut u tečnom dušiku za enzimsku analizu i imunotest.

Analiza aktivnosti enzima

Kožno tkivo je homogenizovano u 4 zapremine fosfatnog pufera (pH 7,4). Homogenat je centrifugiran na 3,000 o/min 20 min, a supernatant je korišten za analizu aktivnosti -glutamil transpeptidaze (-GTP) i alkalne fosfataze (ALP) koristeći p-nitrofenol fosfat (PNPP)-DEAV kao supstrat [1,21].

Kvantifikacija faktora rasta

Epidermalni faktor rasta (EGF) i faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF) su kvantificirani korištenjem kompleta za enzimski imunosorbentni test (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, SAD) prema uputama proizvođača [1,22].

Liječenje upale

ICR miševi (stari 7 sedmica, n=8/grupa) oralno su tretirani LJE (18 ili 54 mg/kg), CTE (54 ili 162 mg/kg) ili njihovom mješavinom (18 plus 54 ili 54 plus 162 mg/kg) jednom dnevno tokom 7 dana [16]. Prvog dana tretmana LJE i CTE, miševima je subkutano ubrizgano 10 mL sterilnog vazduha u zadnju stranu da bi se formirala vrećica [16,23,24]. Nakon 2 i 5 dana, u vrećicu je ponovo ubrizgano 5 mL zraka. Jedan sat nakon završnog tretmana LJE i CTE, 1 mL karagenana (1 posto u fiziološkom rastvoru; Sigma-Aldrich, St. Louis, SAD) ili njegov nosač (fiziološki rastvor) je ubrizgan u vrećicu.

Analiza eksudata

Vazdušna vrećica je isprana sa 1 mL hladnog fiziološkog rastvora 6 sati nakon injekcije karagenana, a neto zapremina

tečnosti za ispiranje zabilježena je [16]. Ukupan broj inflamatornih ćelija uključujući neutrofile, monocite i limfocite određen je pomoću kolter brojača. Koncentracije NO i prostaglandina E2 (PGE2) određene su Griessovim reagensom (Sigma-Aldrich) i

enzimski imunotest (EIA) koristeći Correlate-EIA kit (Assay Designs, Ann Arbor, SAD), respektivno [16].

Cistancheekstrakt protiv starenja i gubitka kose

Statistička analiza

Podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost±standardna greška. Statistička značajnost je određena jednosmjernom analizom varijanse, nakon čega je uslijedio posthoc Tukeyjev test višestrukog poređenja. P-vrijednosti<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Rezultati

Primena minoksidila (3 procenta), referentnog materijala, značajno je olakšala rast dlake kod miševa C57BL/6, pokazujući skoro potpunu pokrivenost (92,4 procenta) obrijanog područja (slike 1, 2B) u poređenju sa 29,2 procenta kod normalnog rast (Slike 1, 2A) 21. dana. Iako manje efikasan od primjene Minoksidila, oralni tretman LJE-a je također olakšao rast kose, što je dovelo do 33,5 i 69,1 posto pokrivenosti pri 18 i 54 mg/kg, respektivno (Slike 1, 2C, 2D). CTE je takođe bio efikasan u povećanju rasta kose, dostigavši ​​73,6 i 80,4 posto

pokrivenost na 54 i 162 mg/kg, respektivno (Slike 1, 2E, 2F). Primetno je da je kombinovana terapija sa visokim dozama LJE (54 mg/kg) i CTE (162 mg/kg) značajno pojačala rast kose od 12. dana, uporedivo sa efektom Minoksidila (Slike 1, 2H), iako su niske doze LJE (18 mg/kg) i CTE (54 mg/kg) ispoljavaju sinergistički efekat samo u ranoj fazi (Slike 1, 2G).

U poređenju sa normalnim folikulima dlake (Slika 3A), primena Minoksidila je poboljšala integritet folikula dlake, pokazujući veće folikule i deblje dlake (Slika 3B). Takvi efekti su takođe pronađeni na koži miševa tretiranih LJE i/ili CTE (Slike 3C-3H). Posebno je efikasnost kombinovanog tretmana LJE i CTE u jačanju folikula dlake bila uporediva sa Minoksidilom.

Primena minoksidila povećala je aktivnost -GTP-a koji indukuje folikule dlake u anagenu fazu za 90-120 procenata

14. i 21. dana, u poređenju sa nivoom normalne kože (Slika 4). LJE (54 mg/kg) je takođe pojačao aktivnost enzima, iako je bilo velikih varijacija. CTE je pokazao slične efekte, značajno povećavajući aktivnost -GTP 14. dana. Zanimljivo je da je kombinovano liječenje LJE i CTE dodatno povećalo aktivnost enzima više nego kada su ekstrakti korišteni sami.

Aktivnost ALP, markera rasta kostiju i angiogeneze, značajno se povećala u koži 14. i 21. dana nakon lokalne primjene Minoksidila (Slika 5). LJE i CTE su također povećali aktivnost ALP nakon oralne primjene na način ovisan o dozi. Značajno je da je aktivnost enzima sinergijski pojačana kombinovanim tretmanom sa LJE i CTE.

U analizi EGF-a, poznatog faktora rasta kose, primjena Minoksidila je povećala nivo EGF-a

3,5 puta normalne kontrole u oba dana 14. i 21. (Slika 6). LJE (18 mg/kg) je povećao EGF samo 21. dana, dok je CTE (162 mg/kg) uvelike povećao njegovu proizvodnju 14. i 21. dana. Zanimljivo je napomenuti da je kombinovano liječenje LJE i CTE čak i na niske doze su pokazale izražene sinergističke efekte.

Tretman minoksidilom je također povećao nivo VEGF-a za 50-80 procenata iznad kontrolne vrijednosti (Slika 7). Iako je LJE bio neefikasan, CTE je pokazao izvanredne efekte poboljšanja. Osim toga, kombinovana terapija LJE i CTE pokazala je sinergijsko djelovanje u ranoj fazi 14. dana.

Injekcija karagenana u vazdušnu vrećicu ICR miša povećala je volumen eksudata u vrećici 6 puta u odnosu na kontrolni nivo (Tabela 1). Takva povećana eksudacija je značajno oslabljena tretmanom LJE (18 i 54 mg/kg) ili CTE (54 i 162 mg/kg). Primetno je da se kombinovani tretman sa LJE i CTE dodatno smanjio

volumen eksudata, u poređenju sa pojedinačnim efektima. Broj inflamatornih ćelija je drastično povećan injekcijom karagenana: 34,6, 4,2 i 24,9 puta kontrolni nivoi za neutrofile, monocite i limfocite, respektivno (Tabela 1). Međutim, LJE i CTE su značajno smanjili inflamatorne ćelije na dozno zavisne načine, u čemu je LJE bio nešto superiorniji od CTE. Očekivano, sinergijski efekti u infiltraciji inflamatornih ćelija postignuti su istovremenom primenom LJE i CTE.

Paralelno sa infiltracijom upalnih ćelija u vrećici, sadržaj NO i PGE2 u vrećici se također drastično povećao nakon injekcije karagenana (Tabela 1). U poređenju sa blagim dejstvom LJE,

CTE je značajno snizio koncentraciju NO. Kombinirano liječenje LJE i CTE dodatno je smanjilo nivo NO na način ovisan o dozi. Na sličan način, povećani nivo PGE2 je bio sinergijski

potisnuta kombinovanom terapijom LJE i CTE (Tabela 1).

Cistancheekstrakt pojačavaimuniteti sprečava gubitak kose

Diskusija

Ljudska glava ima u prosjeku 100,000 folikula dlake.

Tokom života, svaki folikul raste i opada oko 20 puta, pokazujući dnevni gubitak kose od 100 pramenova [25]. Gubitak kose uključujući alopeciju i ćelavost je uznemirujuće stanje za muškarce i žene, posebno u modernom društvu. Stoga je od velike važnosti razviti nove terapije koje sprečavaju gubitak kose i poboljšavaju tretman kose; tj. vaskularna eksudacija i infiltracija inflamatornih ćelija su sinergistički potisnute. U kvantitativnoj analizi, glavni inflamatorni medijatori NO i PGE2 bili su značajno kontrolirani nakon oralne istodobne primjene LJE i CTE. Zanimljivo je da je LJE pokazao antiinflamatornu aktivnost veću od one polupročišćenog fukoidana [16], pretpostavlja se da u LJE može postojati dodatni aktivni sastojak(i), osim fukoidana.

Uzeti zajedno, rezultati pokazuju da kombinovani oralni tretman sa LJE i CTE poboljšava gubitak kose regulacijom faktora rasta i povezanih aktivnosti enzima, a dijelom i kroz protuupalni potencijal. Stoga se predlaže da kombinacija koja uključuje LJE i CTE u odgovarajućim kliničkim dozama i omjerima može biti kandidatski recept za pacijente s gubitkom kose.

Priznanja

Ovo istraživanje su finansijski podržali Vodeći razvoj industrije za ekonomsku regiju Vodećeg ureda za industriju Chungcheong, Korejski institut za unapređenje tehnologije (KIAT) i Ministarstvo ekonomije znanja (MKE), a dijelom i Program razvoja prehrambene tehnologije visoke dodane vrijednosti , Ministarstvo poljoprivrede, prehrane i ruralnih poslova (MAFRA; broj granta 113034-3).

Sukob interesa Autori izjavljuju da ne postoji finansijski sukob interesa za objavljivanje ovih rezultata.

Reference

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Promoviranje efekta mješavine biljnih ekstrakata na ponovni rast dlake kod C3H/HeJ miševa. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.

2. Paus R, Cotsarelis G. Biologija folikula dlake. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.

3. Cotsarelis G. Folikul dlake: umire od pažnje. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.

4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Ćelije koje zadržavaju etiketu nalaze se u području ispupčenja pilosebacealne jedinice: implikacije na folikularne matične ćelije, ciklus kose i karcinogenezu kože. Cell 1990; 61(7): 1329-1337.

5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfogeneza i obnova folikula dlake iz odraslih multipotentnih matičnih ćelija. Cell 2001; 104(2): 233-245.

6. Burton JL, Marshall A. Hipertrihoza uzrokovana minoksidilom. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.

7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Mehanizam djelovanja vazodilatacije izazvane minoksidil sulfatom: uloga za povećanu K plus permeabilnost. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.

8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoksidil sulfat je aktivni metabolit koji stimulira folikule dlake. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.

9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasterid, inhibitor tipa 2 5alfa-reduktaze, u liječenju muškaraca s androgenom alopecijom. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.

10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Antivirusna svojstva frakcija fukoidana iz Leathesia difformis. Phytomedicine 1999; 6(5): 335-340.

11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potencijalni antioksidativni i antikoagulantni kapacitet frakcija fukoida male molekularne težine ekstrahovanih iz Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.

12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan poboljšava bubrežni protok krvi u ranoj fazi bubrežne ishemije/reperfuzijske ozljede kod pacova. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.

13. Li N, Zhang Q, Song J. Toksikološka procjena fukoidana ekstrahiranog iz Laminaria japonica kod pacova Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.

14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Hipoholesterolemijski efekti ekstrakta Cistanche tubulosa, kineske tradicionalne sirove medicine, na miševe. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.

15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Inhibicijski efekat akteozida izolovanog iz Cistanche tubulosa na oslobađanje hemijskog medijatora i proizvodnju inflamatornih citokina od strane RBL-2H3 i KU812 ćelija. Planta Med 2010; 76(14): 1512- 1518.

16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Sinergistički protuupalni efekti Laminaria japonica fucoidan i ekstrakta Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.

17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Povezanost upale suzne žlijezde s alopecijom areatom. Orbit 2015; 34(1): 45-50.

18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, Lis-Swiety A. Novi aspekti liječenja alopecije areate. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.

19. Hattori M, Ogawa H. Biohemijska analiza rasta kose sa aspekta starenja i aktivnosti enzima. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.

20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Učinak DREAMMO® losiona za vlasište na promociju rasta kose u modelu alopecije C57BL/6 miševa. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.

21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus

R. Aktivnost i lokalizacija alkalne fosfataze tokom ciklusa mišje dlake. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.

22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. Transdukcija signala VEGF- receptora. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.

23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Protuupalni efekti etanolnog ekstrakta Angelica gigas u modelu upale vrećice karagenana i zraka. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.

24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Protuupalni efekti superkritičnog ekstrakta Houttuynia cordata u modelu upale karagenan-zračne vrećice. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.

25. Rebora A. Patogeneza androgenetske alopecije. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.

26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, novo jedinjenje za promociju rasta kose in vitro i in vivo modela miša. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.

27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Upotreba aktivnosti gama-glutamil transpeptidaze kao markera ciklusa dlake i indukcije anagena u folikulima dlake miša. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.

28. Hamada K, Suzuki K. Evaluacija biohemijskih indeksa kao markera ciklusa dlake kod C3H miševa. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.

29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Sulfirani polisaharid fukoidan stimuliše osteogenu diferencijaciju matičnih ćelija ljudskih masnoća. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Faktori rasta i citokini u razvoju i ciklusu folikula dlake: nedavni uvidi iz životinjskih modela i potencijali za kliničku terapiju. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.

31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo je promovirao rast folikula dlake miševa kontroliranim oslobađanjem faktora rasta. Biomaterials 2003; 24(13): 2387-2394.

32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Hemotaktički efekat faktora koji potiče od ćelija dermalne papile na ćelije spoljašnjeg omotača korena. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.

33. Stenn KS, Paus R. Kontrole ciklusa folikula dlake. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.

34. Chapman RE, Hardy MH Efekti intradermalno ubrizganog i lokalno primijenjenog mišjeg epidermalnog faktora rasta na rast vune, kožu i folikule vune merino ovaca. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.

35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Faktor vaskularne permeabilnosti/faktor rasta vaskularnog endotela, mikrovaskularna hiperpermeabilnost i angiogeneza. Am J Pathol 1995; 146(5):

1029-1039.

36. Ellis RA, Moretti G. Vaskularni obrasci povezani sa categen folikulima kose u ljudskom skalpu. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448- 457.

37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Angiogena svojstva folikula dlake vibrissa pacova povezana su sa lukovicom. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.

38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Kontrola rasta kose i veličine folikula VEGF-posredovanom angiogenezom. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.

39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Distribucija VEGF mRNA indiferentnih faza folikula dlake fluorescencijom in situ hibridizacijom u kombinaciji sa konfokalnom laserskom mikroskopijom. U: Istraživanje kose za naredni milenijum (Van Neste DJJ, ur), Elsevier, Amsterdam, 1996; pp 407-412.

40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Uspješno liječenje gubitka kose nalik alopeciji areata sa kontaktnim senzibilizatorom dibutilestera skvarinske kiseline (SADBE) kod C3H/HeJ miševa. J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.