Učinak terapijske hipotermije na ozljedu bubrega kod pacovog modela asfiksijskog srčanog zastoja: Α Fokus na stopu preživljavanja, patofiziologiju i antioksidativne enzime

SO EUN KIM^1*, HA‑YOUNG SHIN^2*, EUI‑YONG LEE², YEO‑JIN YOO², RYUN‑HEE KIM², ET AL

Abstract.

Iako je multiorganska disfunkcija povezana sa stopom preživljavanja nakon srčanog zastoja (ca), većina dosadašnjih studija fokusirala se na srca i mozak, a nekoliko studija je razmatralo zatajenje bubrega. Stoga je cilj ove studije bio ispitati efekte terapijske hipotermije na stopu preživljavanja, patofiziologiju i antioksidativne enzime u bubrezima pacova nakon asfiksijskog CA. Pacovi su žrtvovani jedan dan nakon CA. Stopa preživljavanja, koja je procijenjena pomoću Kaplan-Meierove analize, bila je 42,9 posto jedan dan nakon cca. Međutim, hipotermija, koja je izazvana nakon ca, značajno je povećala stopu preživljavanja (71,4 posto). kod pacova sa normotermijom sa ca, nivo azota uree u serumu je značajno povećan jedan dan nakon ca. pored toga, nivo kreatinina u serumu je značajno povećan jedan dan nakon CA. Međutim, kod CA štakora izloženih hipotermiji, nivoi azota uree i kreatinina značajno su se smanjili nakon cca. Histohemijsko bojenje otkrilo je značajno vremensko povećanje bubrežne povrede nakon što je grupa sa normotermijom bila podvrgnuta ca. Međutim, oštećenje bubrega značajno je smanjeno u grupi sa hipotermijom. Imunohistohemijska analiza bubrega pokazala je značajno smanjenje antioksidativnih enzima (bakar-cink superoksid dismutaza, mangan superoksid dismutaza, glutation peroksidaza i katalaza) s vremenom u grupi sa normotermijom. Međutim, u grupi sa hipotermijom, ovi enzimi su značajno povišeni nakon cca. zajedno, rezultati su otkrili da je bubrežna disfunkcija nakon asfiksijskog ca snažno povezana sa ranom stopom preživljavanja, a terapeutska hipotermija smanjuje oštećenje bubrega putem efikasnih antioksidativnih mehanizama.

Ključne riječi: asfiksijski zastoj srca, sindrom nakon srčanog zastoja, liječenje hipotermije, bubrezi, histopatologija, antioksidativni enzimi

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

cistanche izgubljeno carstvo biljasprečavabolest bubrega, kliknite ovdje da dobijete uzorak

Uvod

Srčani zastoj (ca), također poznat kao kardiopulmonalni zastoj ili cirkulatorni zastoj, uključuje iznenadni prestanak normalne cirkulacije krvi zbog neuspjeha srca da pravilno pumpa krv (1). mogu izazvati ishemiju cijelog tijela, koja uzrokuje oštećenje više organa, uključujući mozak, srce, bubrege i jetru. Većina istraživačkih studija koje su uključivale ca u proteklih pola stoljeća fokusirale su se na poboljšanje stope uspješnog povratka spontane cirkulacije (roSc), uz značajan napredak (2-4). Iako hitna reanimacija može poboljšati roSc, stopa preživljavanja s lošom prognozom je zabrinjavajuća (5-7). Sindrom nakon srčanog zastoja (PcaS) odnosi se na patofiziološke posljedice roSc nakon uspješne kardiopulmonalne reanimacije (cPr) nakon ca (8). PcaS je glavni uzrok smanjenog preživljavanja nakon roSc (9). Stopa preživljavanja PcaS u ranom periodu kod pacijenata je samo 30 posto (5). Nema sumnje da su srce i mozak važni organi u PcaS-u. U međuvremenu, studije su rijetko istraživale zatajenje bubrega nakon ca (1,10,11). Prolazno oštećenje bubrežne funkcije je uobičajeno kod pacijenata koji su preživjeli cca (12). Incidencija i uticaj bubrežne disfunkcije nakon ca nisu dobro opisani (13). osim toga, naša prethodna studija je sugerirala da niska rana stopa preživljavanja nakon roSc u eksperimentalnim studijama (14) može biti snažno povezana sa zatajenjem bubrega kao što je akutna ozljeda bubrega. jedan od najčešćih uzroka akutnog oštećenja bubrega je ca (15). akutna ozljeda bubrega je česta PcaS koja se razvija kod ~30 posto bolničkih pacijenata sa ca (16).

reaktivne kisikove vrste (roS) se sastoje od niza kisikovih intermedijera, uključujući superoksidni anion slobodnih radikala (o2•‑), neradikalni vodikov peroksid (H2o2), visoko reaktivni hidroksilni slobodni radikal (OH•), peroksinitrit (onoo) , i singletni kiseonik (1o2) (17). Otkriveno je da roS igra bitnu ulogu u nekoliko eksperimentalnih stanja bubrega, kao što su akutna ishemijska bubrežna insuficijencija, odbacivanje bubrežnog transplantata, akutni glomerulonefritis i toksična bubrežna oboljenja (18). Postoje značajni dokazi koji podržavaju sintezu roS neposredno nakon akutnog ishemijskog moždanog udara (19) i akutnog infarkta miokarda (20). Poznato je da je roS važan kod ishemijskih bolesti, kao što su moždani udar i infarkt miokarda. Na primjer, Hackenhaar et al (21) izvještavaju da se roS stvara u krvi pacijenata sa PcaS; međutim, studije su retko ispitivale formiranje roS u bubrezima nakon ca tokom ranog post-PcaS perioda (22,23).

Iz tog razloga, pretpostavljena je hipoteza da su roS važni kod ozljede bubrega nakon ca i doprinose niskoj stopi preživljavanja u ranim fazama PcaS. Da bi se ispitala ova hipoteza, indukovana je asfiksijska ca kod pacova i uočena je stopa preživljavanja u ranim fazama PcaS. dodatno, izvršena je trenutna i odgođena hipotermija kako bi se povećala niska stopa preživljavanja povezana s PcaS nakon roSc. Nadalje, histopatološki je analizirana bubrežna disfunkcija i procijenjene su promjene izazvane roS, kao što su bakar-cink superoksid dismutaza (Sod‑1), mangan superoksid dismutaza (Sod‑2), katalaza (caT) i glutation peroksidaza (GPX). putem imuno-histohemijske analize nakon roSc.

cistanche pharma special

materijali i metode

Eksperimentalne životinje i grupe.Ukupno 62 mužjaka Sprague-Dawley (Sd) pacova (težina 270-300 g; starost 10 sedmica) dobijena su iz eksperimentalnog centra za životinje nacionalnog univerziteta Jeonbuk (iksan, Republika Koreja). Bili su smješteni na temperaturi od 23±2˚C i vlažnosti od 60±10 posto u ciklusu svjetlo/mrak od 12 sati. Imali su slobodan pristup hrani i vodi. svi eksperimentalni protokoli su odobreni na osnovu etičkih procedura i naučne brige od strane institucionalnog odbora za brigu o životinjama i upotrebu nacionalnog univerziteta Jeonbuk (odobrenje br. JBnu 2020‑084).

Eksperimentalne životinje su stratificirane u tri kategorije [grupa lažne operacije, ca pod normotermijom i ca i tretman hipotermije (HT)] kako slijedi: i) grupa I, lažna grupa (n=5) održavana je u uslovima normotermije bez ca; ii) grupa ii, grupa sa normotermijom bez tretmana hipotermije (33˚C) nakon CA (n=17); i iii) grupa iii (n=40), grupa koja je podvrgnuta ca pod normotermijom i liječena HT nakon ca 2 h (n=17), 4 h (n=13) i 6 h (n=10) nakon roSc, gdje su svi pacovi ponovo zagrijani do normotermije.

CA indukcija i CPR.Ca i cPr su izvedeni kako je prethodno opisano (24,25) uz manje modifikacije (slika 1). Ukratko, pacovi su anestezirani sa 2-3 posto izoflurana i mehanički ventilirani kako bi se održalo disanje pomoću ventilatora za glodare (Harvard aparat). Za praćenje periferne saturacije kiseonikom (Spo2), sonda za zasićenje kiseonikom za pulsnu oksimetriju (Nonin Medical, inc.) je pričvršćena na levo stopalo. Tjelesna temperatura je održavana na 37±0.5˚C tokom i nakon operacije ca. Za praćenje promjena na elektrokardiogramu (EKG), elektrokardiografske sonde (cytiva) su postavljene na udove kako bi se dobili podaci od tri elektrode, koji su kontinuirano praćeni. Lijeva femoralna arterija i desna femoralna vena su odvojeno kanulirane radi praćenja srednjeg arterijskog tlaka (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) i intravenske injekcije.

Nakon perioda stabilizacije od 5 minuta, intravenozno je primijenjen vekuronijum bromid (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.), anestezija je prekinuta i mehanička ventilacija je povučena. MaP ispod 25 mm‑Hg i naknadna električna aktivnost bez impulsa korištena je za definiranje CA (25,26). CA je potvrđen 3-4 min nakon injekcije vekuronijum bromida. 5 min nakon otprilike, cPr je započet intravenskom primjenom bolus injekcije epinefrina (0.005 mg/kg; Sigma-Aldrich;

Merck KGaa) i natrijum bikarbonat (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) nakon čega je uslijedila mehanička ventilacija sa 100 posto kisikom i ručne kompresije prsnog koša brzinom od 300/min dok MaP ne dosegne 60 mm‑Hg i uočena elektrokardiografska aktivnost . kada je životinja bila hemodinamski stabilna i spontano disala (obično 1 h nakon roSc), kateteri su uklonjeni i životinja je ekstubirana.

Upravljanje temperaturom među grupama.Tjelesna temperatura grupe sa normotermijom je održavana na 37±0.5˚C tokom i nakon operacije CA i održavana je sve dok pacovi nisu žrtvovani prema vremenskom rasporedu. u grupi sa hipotermijom, utvrđeno je ca pri normalnoj temperaturi; zatim je tjelesna temperatura održavana uz pomoć leda i ventilatora na 33±0.5˚C odmah nakon CPR-a tokom 2, 4 i 6 h i brzo su zagrijavani podlogom za grijanje do željene temperature ( 37±0.5˚C). Pacovi su zatim vraćeni u kaveze dok nisu žrtvovani jednog dana nakon CPR/roSc. Telesna temperatura je praćena rektalnim temperaturnim senzorom (27).

Biohemijska analiza seruma.Intraperitonealna injekcija 30 mg/kg pentobarbital natrijuma (JW Pharm co., ltd.) korištena je za anesteziju svih životinja. Krv je uzeta iz trbušnih vena svake životinje u svakoj grupi. Serum je sakupljen centrifugiranjem krvi (2,774 xg, 15 min, 4˚C) i čuvan je na ‑80˚C do analize. Nivoi azota ureje u krvi (Bun) i kreatinina u serumu određivani su prema metodama Međunarodne federacije kliničke hemije (28) pomoću automatizovanog hemijskog analizatora Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). svi testovi su izvedeni u tri primjerka koristeći svježi serum.

Obrada tkiva.Pacovi su duboko anestezirani intraperitonealnom injekcijom 200 mg/kg pentobarbital natrijuma (JW Pharm co., ltd.) i perfuzirani su transkardijalno sa 0.1 M fiziološkog rastvora sa fosfatnim puferom (PBS; pH 7,4), nakon čega sledi 4 procenta paraformaldehida u 0,1 M fosfatnog pufera (PB; pH 7,4). Bubrezi su izolovani od svake životinje i fiksirani sa 4 procenta paraformaldehida u 0,1 M PB (pH 7,4) na sobnoj temperaturi tokom 1 nedelje, zatim isečeni sagitalno, ugrađeni u parafin i presečeni (6 µm).

Hematoksilin i eozin (H&E), Periodic Acid-Schiff (PAS) i Massonovo trihromsko bojenje.Bojenje H&e izvršeno je radi ispitivanja patoloških promjena u bubrezima prema prethodno opisanoj proceduri (29). PaS bojenje je obavljeno da bi se ispitale promjene u glomerulima prema prethodno opisanim procedurama (30-32). Massonova trihromna metoda bojenja korištena je za definiranje tubularne ozljede, s obzirom na tubularne dilatacije, tubularne atrofije, formiranje tubularnog gipsa, vakuolizaciju, degeneraciju, intersticijalnu fibrozu i ljuštenje tubularnih epitelnih ćelija ili zadebljanje tubularne bazalne membrane prema prethodno opisanoj proceduri33 ,34).

ukupno 2 iskusna patologa procijenila su histopatološke promjene na dvostruko slijep način. slike 10 obojenih sekcija/pacova snimljene su pri x400 uvećanjima pomoću Leica dM 2500 svjetlosnog mikroskopa (Leica Microsystems GmbH). U svakoj sekciji analizirano je ukupno 10 polja. Histopatološka analiza bubrežnih lezija urađena je prema prethodno opisanim procedurama (35,36). Ukratko, lezije su kategorizirane kao bez značajnih mikroskopskih lezija (nSMl), minimalne, blage, umjerene ili izražene lezije, respektivno, ocijenjene korištenjem sljedeće skale sa slijepim testom: normalno, 0 bodova;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">

Glomerularne lezije su definirane gubitkom ćelijskih elemenata, kolapsom kapilarnog lumena, amorfnog hijalinskog materijala sa ili bez adhezija na Bowmanovoj kapsuli (30-32) i ocijenjene sljedećim numeričkim skalama: bez oštećenja, { {7}} bodova; vrlo blag, 1 bod; blagi, 2 boda; umjereno, 3 boda; i teška, 4 boda. Povreda tubule boduje se sledećim sistemom bodovanja: bez povrede tubule, 0 bodova; 1‑9 posto tubula ozlijeđenih, 1 bod; 10-25 posto tubula ozlijeđenih, 2 boda; 26-50 posto tubula ozlijeđenih, 3 boda; 51-75 posto tubula ozlijeđenih, 4 boda; i najmanje 76 posto tubula ozlijeđenih, 5 bodova (33,34).

Malondialdehid (MDA).Koncentracija Mda u korteksu bubrega procijenjena je prema prethodno opisanom protokolu (23,37,38). Ukratko, homogenizacija i centrifugiranje bubrežnog tkiva izvedeni su na 8,832 xg tokom 10 minuta na 4˚C, a supernatant je sakupljen i pohranjen na ‑80˚C za MDA analizu. Sadržaj MDA je određen u skladu sa uputstvima TBarS test kita (kat. br. 10009055; cayman chemical company).

Imunohistohemija (IHC) za antioksidativne enzime. iHc je izveden sa Sod-1, Sod-2, caT i GPX kako bi se proučavale promjene u antioksidativnim imunoreaktivnostima u bubrezima. iHc je izveden prema našoj prethodno opisanoj metodi (22). Ukratko, sekcije (6 µm) su inkubirane sa primarnim kozjim anti-Sod1 (1:500; kat. br. SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), kozjim anti-Sod2 (1:1 ,000; kat. br. SaB2501676; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), zec anti-caT (1:1,000; kat. br. ab16731; Abcam) i zec anti-GPX ( 1:1,000; kat. br. ab22604; Abcam) preko noći na 4˚C, nakon čega slijedi biotinil-konjugovani anti-zeč (1:250; kat. br. Ba-1000-1,5; vektorske laboratorije , inc.) i biotinilovano-konjugirana anti-kozja (1:250; kat. br. Ba-5000‑1.5; Vector Laboratories, Inc.) sekundarna antitijela 2 h na 24°C i razvijena korištenjem Vectastaina aBc (Vektorske laboratorije , inc.). Zatim su vizualizirani rastvorom 3,3'-diaminobenzidina (u 0,1 M Tris-HCl puferu).

Leica dM 2500 mikroskop je korišćen za snimanje preseka pri uvećanju od x400. Ukupno je odabrano 10 sekcija/pacova i uhvaćeno je 10 područja. Softver za analizu praga slike verzija 1.52a (Nacionalni institut za zdravlje) korišten je za mjerenje procenta (procenta) relativne optičke gustine (šip).

Statistička analiza.Svi eksperimenti su ponovljeni u tri primjerka. Graph Pad Prism verzija 5.0 (GraphPad Software, inc.) korištena je za analizu podataka, koji su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna greška srednjih (SeM) vrijednosti. Preživljavanje je analizirano korištenjem Kaplan-Meierove statistike i log-rank testa. MaP i periferni kiseonik su upoređeni korišćenjem jednosmernih i dvosmernih ponovljenih mera analize varijanse da bi se procenio efekat vremena. Da bi se utvrdila značajnost razlika, sprovedene su post hoc analize koristeći Tukeyjev test za sva višestruka poređenja u paru. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Rezultati

Fiziološke promjene, stopa preživljavanja i biohemijske varijable u serumu. Nije bilo statistički značajne razlike među grupama u pogledu osnovnih karakteristika, uključujući tjelesnu težinu, MaP i Spo2 (Tabela i i slika 2). Do indukcije ca došlo je 3-4 min nakon intravenske injekcije vekuronijum bromida (2 mg/kg). CA je potvrđen izoelektričnim EKG, Spo2 i MaP, a oni su se promijenili prema očekivanjima prema eksperimentalnom protokolu (Slika 2a-c). kao što je prikazano na slici 2d, tjelesna temperatura je bila različita među svim grupama nakon roSc, kao što je otkriveno na slici 3, stopa preživljavanja svake grupe procijenjena je na dan nakon ca. Stopa Grupe II iznosila je 42,9 posto.

U grupi iii, stopa nakon 2 h-HT bila je 42,9 posto, stopa nakon 4 h-HT bila je 57,1 posto, a stopa nakon 6 h-HT bila je 71,4 posto. u ovom eksperimentu nije bilo razlike između štakora u grupi ii i štakora sa 2 h-HT u grupi iii.

kao što je prikazano na slici 4B, nivo bundeva u serumu u Grupi i bio je 13,8 mg/dl jedan dan nakon cca. u grupi ii, nivo Bun je značajno povećan na 35,3 mg/dl. u Grupi iii, nivo punjenja bio je 3{{10}}.7 mg/dl nakon 2 h‑HT, 25.0 mg/dl nakon 4 h‑HT i 22,7 mg/ dl nakon 6 h‑HT. pored toga, kao što je otkriveno na slici 4c, nivo kreatinina u serumu u Grupi I bio je {{20}}.23 mg/dl. u grupi ii, nivo kreatinina je značajno povećan na 0.43 mg/dl. u grupi iii, nivoi kreatinina su bili niži od onih uočenih u grupi ii i to: 0,39 mg/dl nakon 2 h‑HT, 0,37 mg/dl nakon 4 h‑HT i 0,36 mg/dl nakon 6 h‑HT.

Histopatološki nalazi. u Grupi I (lažno), intaktne histološke strukture otkrivene su H&e, PaS i Massonovim trihromskim bojenjem (slika 5A). Intersticijska fibroza nije otkrivena u svim grupama, dok je u Grupi ii, ca-indukovana bubrežna histopatologija ispitana jedan dan nakon roSc koristeći H&e, PaS i Massonovo trihromsko bojenje. Teška CA-indukovana povreda bubrega značajno je povećana u proksimalnim tubulima i glomerulima; posebno, ivice bubrežnih tubularnih epitelnih ćelija bile su ozbiljno erodirane (sl. 5a i B). osim toga, u ovoj grupi, glomerularne kapilare su proširene inflamatornim ćelijama, a intersticijski edem i akutna bubrežna tubularna nekroza su ozbiljni u poređenju sa onima uočenim u Grupi I (slika 5a).

u Grupi iii, povreda bubrega je oslabljena jedan dan nakon roSc (sl. 5a i B). posebno, ca-indukovana ozljeda u proksimalnim tubulima značajno je smanjena nakon 6 h-HT u usporedbi s onom uočenom u Grupi ii. pored toga, lokalna ekspanzija proksimalnih tubula je smanjena u poređenju sa onim otkrivenim u Grupi ii (slika 5A). Za glomerule, 6 h‑HT značajno je oslabio glomerularnu povredu u poređenju sa onom otkrivenom u Grupi ii (sl. 5a i B).

MDA nivo. kao što je otkriveno na slici 4a, nivo Mda u korteksu bubrega je značajno povećan jednog dana nakon ca u Grupi ii u poređenju sa Grupom i. Međutim, u grupi III, nivo MDA je značajno smanjen nakon 4 h‑ i 6 h‑HT. također je smanjen u 2 h‑HT, ali nije bilo statistički značajne razlike u odnosu na grupu ii.

Nalazi imunoreaktivnosti antioksidativnih enzima.

U grupi I, procenjene su normalne imunoreaktivnosti Sod-1, Sod-2, GPX i caT, otkrivajući da su one uglavnom locirane u tubulima (slika 6a). u Grupi ii, Sod-1, Sod-2, GPX i CAT imunoreaktivnosti su značajno smanjene jednog dana nakon roSc u poređenju sa onima otkrivenim u Grupi i (sl. 6a i B).

u Grupi iii, imunoreaktivnosti Sod-1, Sod-2, GPX i caT nakon 2 h-HT nisu se značajno razlikovale od onih uočenih u Grupi ii (sl. 6a i B). u slučaju 4 h‑HT, četiri imunoreaktivnosti bile su značajno veće od onih otkrivenih u Grupi ii (sl. 6a i B), pokazujući da je, posebno, imunoreaktivnost GPX-a bila značajno viša u poređenju sa drugim imunoreaktivnostima. u slučaju 6 h‑HT, sve imunoreaktivnosti bile su veće od onih identifikovanih kod štakora koji su primili 4 h‑HT, što otkriva da je imunoreaktivnost štapića svakog Sod‑1, Sod‑2, GPX i caT bila 78,4, 67,4, 86,5 i 79,5 procenata, respektivno, u poređenju sa Grupom i (sl. 6a i B).

herba epimedium sagittatum

Diskusija

U studijama na životinjama, srce i mozak su najviše pogođeni organi nakon ishemijske/reperfuzijske (i/r) ozljede nakon cca (39,40). ipak, određene studije su objavile da akutna povreda bubrega ima uticaj na neurološki oporavak (41,42). Stoga je važno istražiti akutnu ozljedu bubrega nakon ca i cPr . u ovoj studiji, odrasli mužjaci Sd pacova korišteni su za asfiksijski ca ubrizgavanjem vekuronijevog bromida. CA je potvrđen 3-4 min nakon indukcije asfiksije, a cPr je izveden 5 min nakon cca. Karta, EKG i Spo2 su izmijenjeni kako se očekivalo tokom cca i nakon roSc. u našoj sadašnjoj studiji, stopa preživljavanja u Grupi iii bila je 42,9 posto jedan dan nakon roSc kod pacova izloženih 2 h-HT, 57,1 posto kod pacova tretiranih sa 4 h-HT i 71,4 posto kod pacova podvrgnutih 6 h-HT. che i saradnici (26) izvještavaju da je stopa preživljavanja bila 40 posto dva dana nakon roSc u modelu pacova sa asfiksijom ca. osim toga, Wang i saradnici (43) su izvijestili da je kod pacova kombinacija hipotermije i levosimendana (senzibilizator kalcijuma i otvarač kalijumskih kanala) nakon roSc značajno povećala preživljavanje. Na osnovu ovih nalaza, HT kod pacova sa ca može povećati stopu preživljavanja nekoliko dana nakon roSc. Međutim, kod ljudi, HT nakon ca teško povećava stopu preživljavanja nakon roSc (44).

Disfunkcija bubrega je prijavljena kod 12-28 posto pacijenata sa ca nakon uspješne reanimacije (13). osim toga, akutna ozljeda bubrega razvila se kod 43 posto pacijenata reanimiranih nakon ca, a više od 75 posto ovih epizoda dogodilo se unutar tri dana nakon ca (45). na životinjskim modelima, akutna povreda bubrega izazvana i/R (tj. ROSC nakon CA) je značajno oslabljena HT (43,46,47). Na primjer, Tissier i saradnici (47) su izvijestili o značajnom slabljenju lezija bubrega od strane HT u zečjem modelu ca, na osnovu histopatologije i elektronske mikroskopije, u poređenju sa kontrolnom grupom. u našoj sadašnjoj studiji, rezultati histopatoloških glomerularnih i tubularnih lezija bubrega u Grupi ii su očigledno poboljšani jedan dan nakon roSc. u ovoj grupi, serumski nivoi Bun i kreatinina su značajno povećani nakon ROSC u poređenju sa lažnom grupom (Grupa i). Ovi rezultati su bili slični onima iz prethodnih studija koje su uključivale ca modele pasa, zečeva i prasadi (47-49). Dakle, oštećenje bubrega je značajno povećano u ranoj fazi nakon ca kod eksperimentalnih životinja. u našoj sadašnjoj studiji, bubrežne glomerularne i tubularne lezije i histopatološki rezultati u Grupi iii su značajno smanjeni nakon 4 h‑ i 6 h‑HT jedan dan nakon roSc u poređenju sa Grupom ii. Ribeiro i saradnici (46) i Souza i saradnici (50) su izvijestili da je HT djelotvoran na životinjskim modelima ozljede bubrega i/r. Islam i saradnici (23) i Jawad i saradnici (22) su utvrdili da HT smanjuje ozbiljnost ozljede bubrega i povećava stopu preživljavanja u asfiksijskom ca modelu. Nalazi sugeriraju da HT ima značajan renalprotektivni učinak, koji je povezan s povećanom stopom preživljavanja.

Endogeni antioksidativni enzimi uglavnom uključuju Sods, CAT i GPX. Ovi enzimi pružaju prvu liniju odbrane od o2•‑ i OH•. SOD‑1 i SOD‑2 pružaju odbranu od oksidativnog stresa katalizirajući dismutaciju o2•‑ u o2 i H2o2 (51). Oksidativni stres je ključni faktor u povredi organa i hemodinamskoj disfunkciji tokom PcaS i stvaranju roS tokom i/r ozljede. Aktivnost antioksidativnih enzima je promijenjena i/r ozljedom nakon ca (21). naša studija je otkrila da su nivoi Sod‑1, Sod‑2, GPX i caT smanjeni nakon roSc u Grupi ii u poređenju sa Grupom i. Nivoi ovih antioksidativnih enzima su smanjeni nakon i/r, što uzrokuje oštećenje i smrt stanica zbog potrošnje endogenih antioksidansa kao rezultat oslobađanja roS (52).

Xia i saradnici (53) su prijavili povećanu antioksidativnu aktivnost u bubrežnim tkivima miševa izloženih HT kod ozljede bubrega i/r. Hackenhaar et al (21) uočili su značajno povećanje aktivnosti Sod-1, Sod-2, GPX i caT nakon 6, 12, 36 i 72-h HT kod ljudi nakon roSc. u prethodnim studijama na pacovskom modelu asfiksijskog ca, Islam i suradnici (23) su izvijestili da HT nakon ca smanjuje oksidativni stres u bubrezima, a Jawad i suradnici (22) su izvijestili da HT nakon ca štiti bubreg od ozljeda izazvanih ca, pokazujući da je nrf2/Ho‑1 povećan u bubrezima. u našoj sadašnjoj studiji, imunoreaktivnost Sod‑1, Sod‑2, GPX i caT značajno je povećana nakon 4 h‑HT i 6 h‑HT u Grupi iii u poređenju sa Grupom ii, što sugerira da je HT aktivirao antioksidativne enzime i smanjio oksidativni stres.

Na osnovu preživljavanja, histopatologije, biohemijskih i imunohistohemijskih rezultata ove studije, utvrđeno je da je disfunkcija bubrega česta i povezana sa mortalitetom u ranim fazama PcaS nakon roSc, u našem modelu pacova asfiksijskog ca. Međutim, 4 h- ili 6 h-HT nakon ROSC-a značajno je smanjilo oštećenje bubrega, što sugerira da HT inducira aktivaciju antioksidativnih enzima, kao što su Sod-1, Sod-2, GPX i caT, što rezultira smanjenim oksidativnim stresom u bubrezima. kao rezultat toga, pretpostavljeno je da HT smanjuje oštećenje bubrega antioksidativnim mehanizmom i povećava ranu stopu preživljavanja. Međutim, western blot analiza je potrebna da bi se razjasnio mehanizam oštećenja bubrega i HT u otprilike nakon roSc. Ovo je potencijalno ograničenje ove studije i naglašava potrebu za daljim studijama.

myricetin

1 odsjek za urgentnu medicinu, istraživački institut kliničke medicine Jeonbuk nacionalnog univerziteta, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;

2 College of Veterinary Medicine and Biosafety Research Institute, Jeonbuk nacionalni univerzitet, san, Jeollabuk-do 54596;

3 odsjek za biomedicinske nauke i istraživački institut za bionauku i biotehnologiju, Univerzitet Hallym, Chuncheon, Gangwon-do 24252;

4 odsjek za hirurgiju, Nacionalna univerzitetska bolnica Kangwon,

Medicinski fakultet, Kangwon nacionalni univerzitet, Chuncheon, Gangwon-do 24289; 5 odsjek neurobiologije, Medicinski fakultet, Kangwon nacionalni univerzitet, Chuncheon, Gangwon-do 24341, Republika Koreja

Priznanja

nije primjenjivo.

Finansiranje

Ova studija je podržana od strane Programa osnovnih naučnih istraživanja kroz Nacionalnu istraživačku fondaciju Koreje koju finansira Ministarstvo obrazovanja (br. grantova nrF‑2019r1c1c1002564, nrF‑2019r1F1a1062696 i nrF{8}}09F19).

Dostupnost podataka i materijala

Skupovi podataka korišteni i/ili analizirani tokom tekuće studije dostupni su od odgovarajućeg autora na razuman zahtjev.

Doprinosi autora

SeK, HYS, MHW i HJT bili su odgovorni za dizajn eksperimenta, prikupljanje podataka, analizu podataka i pisanje rukopisa. eYl, YJY, rHK, JHc i TKl izvršili su eksperimente i analizu podataka. dca, BYP, JcY, SKH i iSK izvršili su analizu podataka i dali kritičke komentare na cijeli proces studije. svi autori su pročitali i odobrili konačni rukopis. HYS i HJT potvrđuju autentičnost svih neobrađenih podataka.

Etičko odobrenje i saglasnost za učešće

svi eksperimentalni protokoli su odobreni na osnovu etičkih procedura i naučne brige od strane Institucionalne komisije za negu i upotrebu životinja nacionalnog univerziteta Jeonbuk (odobrenje br. JBnu 2020‑084; Jeonju, Južna Koreja).

Pristanak pacijenata za objavljivanje

nije primjenjivo.

Konkurentni interesi

Autori izjavljuju da nemaju suprotstavljene interese.

Reference

1. Girotra S, chan PS i Bradley SM: Njega nakon reanimacije nakon vanbolničkog i bolničkog zastoja srca. Srce 101: 1943‑1949, 2015.

2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS i Cha KC: Kraći interval defibrilacije promovira uspješne ishode defibrilacije i reanimacije. reanimacija 143: 100‑105, 2019.

3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a i Papadimitriou l: Ishemija-modificirani albumin predviđa ishod kardiopulmonalne studije: eksperimentalna studija. resuscitation 81: 591‑595, 2010.

4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se i Angelos MG: potreba za kiseonikom tokom kardiopulmonalne reanimacije (cPr) da bi se došlo do povratka spontane cirkulacije. resuscitation 80: 951‑955, 2009.

5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a i carrillo Á; iberoamerican Pedijatrijski srčani zastoj Mreža istraživanja riBePci: Post povratak faktora spontane cirkulacije povezanih sa mortalitetom u pedijatrijskom bolničkom srčanom zastoju: prospektivna multicentrična multinacionalna opservaciona studija. crit care 18: 607, 2014.

6. Mongardon n, Dumas F, postati S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F i cariou a: Sindrom postkardijalnog zastoja: Od neposredne reanimacije do dugoročnog ishoda. Ann intenzivna nega 1: 45, 2011.

7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et al: Sindrom nakon srčanog zastoja: epidemiologija, patofiziologija, liječenje i prognoza. konsenzus međunarodnog odbora za reanimaciju (American Heart Association, Australsko i Novozelandsko vijeće za reanimaciju, Europsko vijeće za reanimaciju, Fondacija za srce i moždani udar Kanade, Interamerican Heart Foundation, Vijeće za reanimaciju Azije i Vijeće za reanimaciju Afrike Južne Afrike ); komitet za hitnu kardiovaskularnu negu američkog udruženja za srce; konzilijuma za kardiovaskularnu hirurgiju i anesteziju; konzilijum za kardiopulmonalnu, perioperativnu i intenzivnu negu; savjet za kliničku kardiologiju; i Vijeće za moždani udar. tiraž 118: 2452‑2483, 2008.

8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et al: Sindrom nakon srčanog zastoja: epidemiologija, patofiziologija, liječenje i prognoza. Naučna izjava Međunarodnog komiteta za vezu o reanimaciji; komitet za hitnu kardiovaskularnu negu američkog udruženja za srce; konzilijuma za kardiovaskularnu hirurgiju i anesteziju; konzilijum za kardiopulmonalnu, perioperativnu i intenzivnu negu; savjet za kliničku kardiologiju; savjet za moždani udar. resuscitation 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017

9. Jentzer Jc, promjena Md i dezfulian c: Disfunkcija miokarda i šok nakon srčanog zastoja. BioMed res int 2015: 314796, 2015.

10. Madl c i Holzer M: Funkcija mozga nakon reanimacije nakon srčanog zastoja. curropin crit care 10: 213‑217, 2004.

11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je i Trzeciak S: Višestruka disfunkcija organa nakon povratka spontane cirkulacije u sindromu postkardijalnog zastoja. crit care Med 41: 1492‑1501, 2013.

12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, gubitnici H, laggier an i Müllner M: Efekat blage terapeutske hipotermije na bubrežnu funkciju nakon kardiopulmonalne reanimacije kod muškaraca. resuscitation 60: 253‑261, 2004.

13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW i Rittenberg Jc; Usluga nakon srčanog zastoja: bubrežna disfunkcija je uobičajena nakon reanimacije nakon vanbolničkog zastoja srca. resuscitation 84: 1371‑1374, 2013.

14. Lee JH, Lee TK, Kim iH, Lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: promjene u histopatologiji i nivoima faktora tumorske nekroze u srcima štakora koji slijede asfiksijski zastoj srca. Clin Exp Emerg Med 4: 160‑167, 2017.

15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, et al; Početak i završetak istraživača potporne terapije za bubrege (BeST Kidney): akutno zatajenje bubrega kod kritično bolesnih pacijenata: multinacionalna, multicentrična studija. JAMA 294: 813‑818, 2005.

16. Mattana J i Singhal Pc: Prevalencija i determinante akutnog zatajenja bubrega nakon kardiopulmonalne reanimacije. arh. pripravnik Med 153: 235‑239, 1993.

17. Sachse a i Wolf G: reaktivne vrste kiseonika indukovane angiotenzinom II i bubrezi. J am Soc Nephrol 18: 2439‑2446, 2007.

18. Baud l i ardaillou r: reaktivne vrste kiseonika: proizvodnja i uloga u bubrezima. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.

19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a i Feuerhake W: oksidativni stres i patofiziologija ishemijskog moždanog udara: nove terapeutske mogućnosti. Ciljevi lijekova protiv neuronskih poremećaja CNS-a 12: 698‑714, 2013.

20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n i Moin S: povišena oštećenja DNK, oksidativni stres i oslabljen odbrambeni sistem odgovora kod pacijenata sa infarktom miokarda. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780‑789, 2018.