baJezik
Dom / Znanje / Sadržaj

Znanje

Ehinakozid suzbija inhibiciju rasta i apoptozu izazvanu deksametazonom u osteoblastnim MC3T3-E1 ćelijama

Mar 11, 2022

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Abstract.

Glukokortikoidi (GC) se široko koriste za liječenje kroničnih bolesti. Produžena i/ili predozirana primjena GC-a ima mnoge nuspojave na ljudsko zdravlje uključujući osteoporozu izazvanu GC-om (GIOP). U ovoj istrazi, cilj je bio da se proceni uticaj kojiechinacoside iz cistanche(ECH) djeluje na mišje osteoblastne MC3T3-E1 ćelije tretirane deksametazonom. Otkrili smo da ECH(echinacoside iz cistanche) (5, 10, 20, and 40 mg/l) inhibited dexamethasone (1,000 nM)-suppressed cell viability as demonstrated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The dose of 10 mg/l was selected for the following experiments because this dose had a better effect than the dose of 5 mg/l, and the doses >10 mg/l imalo je sličan učinak kao ova doza. ECH(echinacoside iz cistanche)(10 mg/l) ili pifitrin- (PFT-) (inhibitor p53, 20 µM) potisnuli su deksametazonom indukovanu MC3T3-E1 apoptozu kao što je ilustrovano pomoću analize toka dvostrukog označavanja Aneksina V/propidijum jodida (PI) . ECH(echinacoside iz cistanche)ili PFT-tretman je također ublažio djelovanje deksametazona na inhibiciju ekspresije Bcl-2, kao i djelovanje deksametazona na stimulaciju ekspresije p53 i Bax. Štaviše, prekomjerna ekspresija p53 posredovana lentivirusom preokrenula je efekte ECH(echinacoside iz cistanche)u MC3T3-E1 ćelijama tretiranim deksametazonom, što sugerira da ECH(echinacoside iz cistanche)inducirani anti-apoptotički efekti u osteoblastima tretiranim deksametazonom putem ap53-zavisnog puta. Ukratko, ECH(echinacoside iz cistanche)ima zaštitni efekat protiv apoptoze osteoblastičnih ćelija izazvane deksametazonom, što sugeriše da ECH(echinacoside iz cistanche)mogu imati potencijal za kliničku primjenu u liječenju GIOP-a.

cistanche to treat osteoporosis

Cistanche deserticola ima mnogo efekata, kliknite ovde da saznate više

Uvod

Glukokortikoidi(GC) se često koriste za liječenje širokog spektra kroničnih bolesti, uključujući upale, rak i autoimune poremećaje (1). Međutim, produžena i/ili predozirana primjena GC-a ima mnoge nuspojave, kao što su hipertenzija, hiperglikemija, glaukom, osteonekroza i osteoporoza (2-4). Jasno je da upotreba GC-a povećava gubitak koštane mase i rizik od prijeloma (3-6). GC mogu inducirati apoptozu osteoblasta i narušiti funkciju ovih stanica. Na primjer, deksametazon, GC hormon, može povećati ekspresiju p53 u osteoblastnim MC3T3-E1 ćelijama, uzrokujući tako ćelijsku apoptozu (7,8). Osteoblastna apoptoza dovodi do smanjenog formiranja kostiju. Oralna upotreba bisfosfonata (alendronata i risedronata) (9,10) uvedena je za liječenje osteoporoze izazvane GC (GIOP). Međutim, niske stope adherencije ograničavaju efikasnost oralnih bisfosfonata. Drugi lijekovi također imaju ograničenja kao što su nezgodna primjena [zoledronska kiselina (11)] i visoka cijena [PTH 1-34 (teriparatid) (12,13)]. Shodno tome, postoji potreba za razvojem novih mogućnosti liječenja GIOP-a.

Echinacoside from Cistanche (ECH)je feniletanoidni glikozid izolovan iz tradicionalne kineske medicineHerbaCistanches(14). ECH(echinacoside iz cistanche)ima zaštitne efekte na neuronski sistem (15-20), jetru (21,22) i pluća (23) kroz promoviranje proliferacije stanica i inhibiciju upalnog odgovora, proizvodnju reaktivnih vrsta kisika (ROS) i apoptozu stanica. Iako ECH(echinacoside iz cistanche)također može promovirati osteoblastnu regeneraciju kostiju i ima izvanrednu antiosteoporotsku aktivnost na modelima štakora (24,25), ne postoje postojeći zapisi koji opisuju efekte ECH(echinacoside iz cistanche)na apoptozu osteoblastičnih ćelija izazvanu GC. Stoga smo istražili uticaj ECH(echinacoside iz cistanche)djeluje na apoptozu osteoblastičnih ćelija izazvanu deksametazonom i razjasnio je preliminarni mehanizam u MC3T3-E1 ćelijama.


CISTANCHE

materijali i metode

Uzgoj of ćelije. Banka ćelija Kineske akademije nauka (Šangaj, Kina) obezbedila je mišje osteoblastične MC3T3-E1 ćelije. Rast ćelija odvijao se u -minimalnom esencijalnom mediju (-MEM) (Hyclone; GE Healthcare, Logan, UT, USA) koji sadrži 10 posto fetalnog goveđeg seruma (FBS; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc., Grand Island, NY, SAD ) i penicilin/streptomicin (Beijing Solar Science and Technology Co., Ltd., Peking, Kina). Održavanje ćelija je sprovedeno u okruženju sa 95 odsto vazduha i 5 odsto ugljen-dioksida na temperaturi od 37˚C.

Theproizvodnjaoflentivirusprekomjerno izražavanje p53. Da bi se stvorio p53 ekspresijski konstrukt, sintetizirana je regija kodirajuće sekvence proteina (CDS) mišjeg p53 gena i umetnuta uEkoRI/BamHI restrikcijska mjesta lentivirusnog ekspresionog vektora pLVX-puro (Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, Kalifornija, SAD) od Genewiz, Inc. (Peking, Kina). Konstrukt je verifikovan DNK sekvenciranjem. 293T ćelije (Shanghai GeneChem Co., Ltd., Šangaj, Kina) transficirane su mješavinom plazmida, uključujući plazmide za pakovanje virusa i ekspresijski plazmid p53 (pLVX-p53) ili kontrolni plazmid (pLVX) putem Lipofectamine 2000 (Invitrogen: Thermo Fisher: Scientific, Inc., Carlsbad, CA, SAD) na osnovu uputstava proizvođača. Virusni supernatant je sakupljen 48 h nakon transfekcije i korišten za inficiranje MC3T3-E1 ćelija. Procjena ekspresije p53 provedena je 48 h nakon virusne infekcije.

Kvantitativnopolimerazalanacreakcija(qPCR). Koristili smo TRIzol reagens (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc.) da odvojimo ukupne RNA i MC3T3-E1 ćelije i RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis kit (Thermo Fisher Scientific, Inc., Rockford, IL, SAD) prema uputama proizvođača za reverznu transkripciju ukupne RNK. Nivo p53 mRNA detektovan je putem qPCR-a na ABI Prism 7300 sistemu za detekciju sekvenci (Applied Biosystems: Thermo Fisher Scientific, Inc., Foster City, Kalifornija, SAD). Prajmeri su bili sljedeći: 5'-CCC CTGTCATCTTTTTGTCCCT-3' i 5'-AGCTGGCAGAAT AGCTTATTGAG-3' za p53, 5'-CTGCCCAGAACATCA TCC-3' i 5'-CTCAGATTC{CCT-3' 18}}' za GAPDH.

Zatim smo procijenili nivoe mRNA p53 putem 2-ΔΔCT metoda (26) sa GAPDH kao internom kontrolom.

Western blotting. Liza MC3T3-E1 ćelija odvijala se u puferu za radioimunoprecipitaciju sa inhibitorima proteaze (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.), a centrifugiranje lizata je nastavljeno 15 minuta na temperaturi od 4˚C na 9,600 xg tako da se padavine mogu ukloniti. Nakon toga, procijenili smo količinu proteina s BCA test kitom (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Jednaka količina proteina je dodata na 10 ili 15 posto SDS-PAGE i prebačena na nitroceluloznu membranu (EMD Millipore, Bradford, MA, SAD). Membrane su blokirane sa 5 posto obranog mlijeka i ispitane primarnim antitijelima. Nakon 3 puta ispiranja fiziološkom otopinom puferovanom fosfatom (PBS), izvršena je inkubacija membrana sa sekundarnim antitijelom konjugiranim s peroksidazom hrena (1:1,000; kat. br. A0208; Beyotime Institute of Biotechnology, Šangaj, Kina) . Proveli smo Western blotting testove putem kompleta za poboljšanu hemiluminiscenciju (ECL) (EMD Millipore). GAPDH je korišten kao interni standard. Izvori primarnih antitijela bili su sljedeći: Bax (Sc-493) i Bcl-2 (Sc-492) oba iz Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, Kalifornija, SAD); p53 (br. 2524) i GAPDH (br. 5174) oba iz Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, SAD).

Eksperimentalno grupisanje. Da bi se odredila odgovarajuća doza deksametazona, tretman MC3T3-E1 ćelija je sproveden sa nizom količina deksametazona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM; Sigma -Aldrich; Merck KGaA, St. Louis, MO, SAD). 48 h nakon inkubacije ćelija, sprovedeni su testovi Cell Counting Kit-8 (CCK-8) kako bi se otkrila proliferacija ćelija.

Za odabir odgovarajuće doze ECH(echinacoside iz cistanche), tretman MC3T3-E1 ćelija je sproveden sa 1,000 nM deksametazona i različitim dozama ECH (0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Šangaj, Kina). Kao kontrola poslužile su ćelije uzgojene u normalnim uslovima (mock). CCK-8 analiza je obavljena nakon 48 h kulture.

Za sve ostale eksperimente, ćelije MC3T3-E1 su podijeljene u pet grupa: grupa 1 (mock), ćelije su uzgajane u normalnim uslovima; grupa 2, ćelije su transducirane sa pLVX lentivirusom; grupa 3, ćelije kultivisane sa 10 mg/l ECH(echinacoside iz cistanche); grupa 4, ćelije sa 20 µM pifitrina- (PFT-; Selleck Chemicals, Houston, TX, SAD); grupa 5, ćelije transducirane sa pLVX-p53 lentivirusom i tretirane sa 10 mg/l ECH(echinacoside iz cistanche). Ćelije u grupama 2-5 tretirane su sa 1,000 nM deksametazona. Apoptoza ćelije i ekspresija proteina mjerene su nakon 48 h kulture.

Celltest proliferacije.Posijali smo MC3T3-E1 ćelije u 96-jažice na 3x103ćelije/bunarić i kultivisao ih u normalnim uslovima preko noći. Ćelije su tretirane prema indikacijama. Nakon 48 h kulture, CCK8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, SAD) analiza je zatim izvedena prema uputstvima proizvođača. Ukratko, medij za kulturu u svakoj jažici je zamijenjen sa 100 µl 10 posto CCK-8 otopine u mediju. Nakon inkubacije ćelija u trajanju od 1 h na temperaturi od 37˚C, procijenili smo apsorbanciju na talasnoj dužini od 450 nm čitačem mikroploča. Izračunata je relativna vitalnost ćelija (procent) sa vezama za kontrolne bunare.

Cellevaluacija apoptoze. Koristili smo Annexin V-FITC komplet za apoptozu ćelija (Beyotime Institute of Biotechnology) za kvantifikaciju ćelija koje prolaze kroz ranu apoptozu prema uputstvima proizvođača. Ukratko, sakupljanje tretiranih ćelija je sprovedeno tripsinizacijom. Ćelije su isprane PBS-om i resuspendirane puferom za vezivanje aneksina. Inkubacija ćelija je sprovedena preko Aneksina V-FITC u trajanju od 15 minuta na temperaturi od 4˚C, nakon čega je usledila inkubacija sa propidijum jodidom (PI) u trajanju od 5 minuta na 4˚C. Smatralo se da ćelije u donjem desnom kvadrantu (Aneksin V-FITC pozitivne i PI negativne) aktivno prolaze kroz ranu apoptozu.

Statističkianaliza. Podaci su srednje vrijednosti ± SD za sva tri nezavisna eksperimenta. Tukeyjev test višestrukih poređenja i jednosmjerna analiza varijanse provedeni su kako bi se analizirale razlike između grupa putem softvera GraphPad Prism (verzija 6.0; GraphPad Software, Inc., San Diego, Kalifornija, SAD). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

CISTANCHE

Rezultati

Uspostavljanjeofa odgovarajuću dozuofdeksametazon.Da bi se odredila odgovarajuća doza deksametazona, ćelije MC3T3-E1 su bile izložene povećanim količinama deksametazona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM) tokom 48 h . Kao što je prikazano na slici 1, relativna vijabilnost ćelija određena CCK-8 testom je povećana u ćelijama tretiranim niskim koncentracijama deksametazona (1 i 10 nM), a značajno smanjena u ćelijama izloženim visokim koncentracijama deksametazona (100 i 1,000 nM).

Establishment of the suitable dose of DEX. Concentrations of 0, 1, 10, 100 or 1,000 nM of DEX were added to MC3T3-E1 cells for 48 h, and CCK-8 was then performed

Najznačajnije smanjenje je uočeno u ćelijama sa 1,000 nM deksametazona. Tako je 1,000 nM deksametazona odabrano u narednim testovima.

Efekat ECH(echinacoside iz cistanche)na inhibiciju rasta ćelija izazvanu deksametazonom. Zatim smo istražili efekat ECH(echinacoside iz cistanche)na inhibiciju rasta ćelija izazvanu deksametazonom. Tretman MC3T3-E1 ćelija je sproveden sa 1,000 nM deksametazona i različitim dozama ECH(echinacoside iz cistanche)(0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; slika 2). 48 h nakon tretmana, dodavanje ECH(echinacoside iz cistanche)u dozama od 5, 10, 20 i 40 mg/l značajno je smanjio oštećenje ćelija izazvano deksametazonom. ECH(echinacoside iz cistanche)pri dozi od 10 mg/l ima očigledniji učinak nego kod doze od 5 mg/l. Vijabilnost ćelija bila je slična u ćelijama tretiranim sa 10, 20 i 40 mg/l ECH(echinacoside iz cistanche). Dakle, 10 mg/l ECH(echinacoside iz cistanche)je korišten u sljedećim eksperimentima.

Prekomjerna ekspresija p53 konstruiranjem lentivirusa. Dexametha sone može pojačati regulaciju p53, izazivajući tako apoptozu osteoblasta (8). Proučiti efekte ECH(echinacoside iz cistanche) on dexamethasone-induced p53 expression, we constructed a lentivirus encoding p53 (pLVX-p53) and transduced the virus into MC3T3-E1 cells. The expression of p53 was analyzed at 48 h after transduction. Fig. 3 shows that p53 mRNA and protein levels were increased to >2 puta u pLVX-p53-transduciranim ćelijama u poređenju sa ćelijama sa kontrolnim virusom (pLVX). p53 je bio uključen u efekat ECH(echinacoside iz cistanche) na apoptozu izazvanu deksametazonom. MC3T3-E1 ćelije su tretirane Plavixom ili pLVX-p53, 10 mg/l ECH(echinacoside iz cistanche), 20 µM PFT- (p53 inhibitor) i 1,000 nM deksametazona, a zatim je izmjerena ćelijska apoptoza preko Annexin V-FITC kompleta za apoptozu. Kao što je prikazano na slici 4A, tretman deksametazonom je značajno indukovao ćelijsku apoptozu u poređenju sa ćelijama kultivisanim u normalnim uslovima (mock). ECH(echinacoside iz cistanche) i PFT-tretman značajno je zaštitio ćelije MC3T3-E1 od apoptoze izazvane deksametazonom. Dodatno, prekomjerna ekspresija p53 poništila je zaštitne efekte ECH(echinacoside iz cistanche).

Poznato je da su Bcl-2 i Bax, kao važni regulatori apoptoze, regulisani p53 (27). Western blotting je pokazao da su promjene ekspresije proteina p53 i Bax bile u skladu sa promjenama ćelijske apoptoze, dok se ekspresija Bcl-2 promijenila u suprotnom smjeru (slike 4B i C). Značajno je da su nivoi proteina p53 značajno potisnuti ECH(echinacoside iz cistanche)i PFT-tretman u ćelijama koje prekomerno eksprimiraju p53 i tretirane deksametazonom (slika 4C). Ovi podaci sugeriraju da ECH(echinacoside iz cistanche)može imati zaštitne efekte na apoptozu izazvanu deksametazonom putem inhibicije ekspresije p53.

15_1

Efekti cistanche echinacoside

Diskusija

Funkcija ECH protiv apoptoze(echinacoside iz cistanche)opisan je u modelu akutnog oštećenja jetre izazvanog D-galaktozaminom (D-GalN) i lipopolisaharidom (LPS) i u stanicama humanog neuroblastoma (SH-SY5Y) izazvanih faktorom tumorske nekroze- ili 1-metil{{6 }}fenilpiridinijumion (MPP plus ) (17,22,28). Prijavljeno je da tretman deksametazonom može inhibirati proliferaciju i inducirati apoptozu MC3T3-E1 ćelija (8,29). U trenutnoj studiji, relativna vitalnost ćelija je značajno smanjena u ćelijama izloženim visokim koncentracijama deksametazona (100 i 1,000 nM), što je bilo u skladu sa prethodnom studijom (8). Dodatni tretman ECH (5-40 mg/l) značajno je inhibirao vitalnost ćelija suprimiranih deksametazonom. Štaviše, izlaganje deksametazonu (1,000 nM) stimulira apoptozu MC3T3-E1 ćelija, koju je tretman ECH-om u značajnoj mjeri obuzdao. Izvještaj je dao prvi prikaz kako je ECH zaštićen od apoptoze osteoblastnih stanica izazvane deksametazonom i sugerirao da ECH može imati potencijal za kliničku primjenu u GIOP.

Nadalje, pokušali smo istražiti preliminarni mehanizam zaštitnih efekata ECH(echinacoside iz cistanche). Deksametazon može poboljšati transkripciju p53, izazivajući na taj način apoptozu osteoblasta i zaustavljanje ćelijskog ciklusa (8). p53 je smanjen od strane ECH u SH-SY5Y ćelijama (28). Ovde je PFT- (inhibitor p53) imao slične zaštitne efekte kao ECH, dok je prekomerna ekspresija p53 preokrenula zaštitne efekte ECH. Promjene ekspresije proteina p53 u različitim uvjetima bile su u skladu sa promjenama apoptoze ćelije. Ovi rezultati pokazuju da ECH može imati zaštitne efekte na apoptozu osteoblastičnih ćelija izazvanu deksametazonom putem inhibicije ekspresije p53. Proteini porodice Bcl-2, kao što su Bcl-2 i Bax, mogu promijeniti permeabilnost mitohondrijalne membrane, aktivirati efektorske kaspaze i uzrokovati apoptozu ćelije (30). Dobro je poznato da p53 može regulisati Bcl-2 i Bax (27). Ovdje tretman sa PFT- ili ECH(echinacoside iz cistanche) je umanjio inhibitorne efekte deksametazona na nivoe anti-apoptoznog proteina Bcl-2, kao i stimulativne efekte koje deksametazon ima na nivoe pro-apoptoznog proteina Bax, dok je prekomjerna ekspresija p53 preokrenula efekte ECH. Ovi rezultati su dalje pokazali uključenost p53 u zaštitnu funkciju ECH.

Ukratko, pokazali smo da ECH(echinacoside iz cistanche)ima obećavajući zaštitni efekat na apoptozu osteoblastičnih ćelija izazvanu deksametazonom, što sugeriše da ECH može imati potencijal za kliničku primenu u lečenju GIOP.

effects of echinacoside from cistanche

Efekti ehinakozida iz cistanche

Reference

  1. Buttgereit F, Burmester GR i Lipworth BJ: Optimizirana terapija glukokortikoidima: Oštrenje starog koplja. Lancet 365: 801-803, 2005.

  2. Schäcke H, Döcke WD i Asadullah K: Mehanizmi uključeni u nuspojave glukokortikoida. Pharmacol Ther 96: 23-43, 2002.

  3. Fukushima W, Fujioka M, Kubo T, Tamakoshi A, Nagai M i Hirota Y: Epidemiološki pregled idiopatske osteonekroze glave femura širom zemlje. Clin Orthop Relat Res 468: 2715-2724, 2010.

  4. Civitelli R i Ziambaras K: Epidemiologija osteoporoze izazvane glukokortikom hladnoćom. J Endocrinol Invest 31 (Suppl): 2-6, 2008.

  5. Gudbjornsson B, Juliusson UI i Gudjonsson FV: Prevalencija dugotrajnog liječenja steroidima i učestalost donošenja odluka za prevenciju osteoporoze izazvane steroidima u svakodnevnoj kliničkoj praksi. Ann Rheum Dis 61: 32-36, 2002.

  6. van Staa TP, Geusens P, Pols HA, de Laet C, Leufkens HG i Cooper C: Jednostavan rezultat za procjenu dugoročnog rizika od prijeloma kod pacijenata koji koriste oralne glukokortikoide. QJM 98: 191-198, 2005.

  7. Rickard DJ, Sullivan TA, Shenker BJ, Leboy PS i Kazhdan I: Indukcija brze diferencijacije osteoblasta u kulturama stromalnih ćelija koštane srži pacova pomoću deksametazona i BMP-2. Dev Biol 161: 218-228, 1994.

  8. Li H, Qian W, Weng X, Wu Z, Li H, Zhuang Q, Feng B i Bian Y: Glukokortikoidni receptor i sekvencijalna aktivacija P53 deksametazonom posreduju u apoptozi i zaustavljanju ćelijskog ciklusa osteoblastičnih MC3T3-E1 ćelija. PLoS One 7: e37030, 2012.

  9. Stoch SA, Saag KG, Greenwald M, Sebba AI, Cohen S, Verbruggen N, Giezek H, West J i Schnitzer TJ: Jednom tjedno oralni alendronat 70 mg kod pacijenata sa glukokortikoidnim gubitkom kostiju: A 12- mjesečno randomizirano, placebom kontrolirano kliničko ispitivanje. J Rheumatol 36: 1705-1714, 2009.

  10. Wallach S, Cohen S, Reid DM, Hughes RA, Hosking DJ, Laan RF, Doherty SM, Maričić M, Rosen C, Brown J, et al. Calcif Tissue Int 67: 277-285, 2000.

  11. Reid DM, Devogelaer JP, Saag K, Roux C, Lau CS, Reginster JY, Papanastasiou P, Ferreira A, Hartl F, Fashola T, et al; Istraživači HORIZON-a: Zoledronska kiselina i risedronat u prevenciji i liječenju glukokortikoidom izazvane osteoporoze (HORIZON): Multicentrično, dvostruko slijepo, dvostruko lažno, randomizirano kontrolirano ispitivanje. Lancet 373: 1253-1263, 2009.

  12. Langdale BL, Rajzbaum G, Jakob F, Karras D, Ljunggren O, Lems WF, Fahrleitner-Pammer A, Walsh JB, Barker C, Kutahov A, et al: Smanjenje stope fraktura i bolova u leđima i povećanje kvaliteta života kod žena u postmenopauzi tretirani teriparatidom: 18-Mjesečni podaci iz Evropske Forsterove opservacijske studije (EFOS). Calcif Tissue Int 85: 484-493, 2009.

  13. Saag KG, Zanchetta JR, Devogelaer JP, Adler RA, Eastell R, Vidi K, Krege JH, Krohn K i Warner MR: Efekti teriparatida u odnosu na alendronat za liječenje osteoporoze izazvane glukokortikoidima: Trideset šestomjesečni rezultati nasumične analize dvostruko slijepo, kontrolirano ispitivanje. Arthritis Rheum 60: 3346-3355, 2009.

  14. Jia Y, Guan Q, Guo Y i Du C: Echinacoside stimuliše proliferaciju ćelija i sprečava apoptozu ćelija u MODE-K ćelijama crevnog epitela povećanjem ekspresije transformišućeg faktora rasta- 1. J Pharmacol Sci 118: 99-108, 2012.

  15. Kuang R, Sun Y, Yuan W, Lei L i Zheng X: Zaštitni efekti ehinakozida, jednog od feniletanoidnih glikozida, na citotoksičnost izazvanu H(2)O(2) u PC12 ćelijama. Planta Med 75: 1499-1504, 2009.

  16. Kuang R, Sun Y i Zheng X: Supresija dušikovog oksida uključenog u zaštitni efekat ehinakozida na H2O2-indukovanu ozljedu PC12 ćelija. Nat Prod Commun 5: 571-574, 2010.

  17. Deng M, Zhao JY, Tu PF, Jiang Y, Li ZB i Wang YH: Echinacoside spašava SHSY5Y neuronske ćelije od apoptoze izazvane TNFalpha. Eur J Pharmacol 505: 11-18, 2004.

  18. Geng X, Tian X, Tu P i Pu X: Neuroprotektivni efekti ehinakozida u mišjem MPTP modelu Parkinsonove bolesti. Eur J Pharmacol 564: 66-74, 2007.

  19. Zhao Q, Gao J, Li W i Cai D: Neurotrofni i neurospasivni efekti ehinakozida u subakutnom MPTP mišjem modelu Parkinsonove bolesti. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

  20. Zhu M, Lu C i Li W: Prolazna izloženost ehinakozidu je dovoljna da aktivira Trk signalizaciju i zaštiti neuronske ćelije od rotenona. J Neurochem 124: 571-580, 2013.

  21. Wu Y, Li L, Wen T i Li YQ: Zaštitni efekti ehinakozida na hepatotoksičnost izazvanu ugljen-tetrahloridom kod pacova. Toksikologija 232: 50-56, 2007.

  22. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T i Wen T: Ehinakozid poboljšava akutnu ozljedu jetre uzrokovanu D-galaktozaminom plus lipopolisaharidom kod miševa putem inhibicije apoptoze i upale. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

  23. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L i Zhao J: Zaštita ehinakozida od akutne ozljede pluća uzrokovane oleinskom kiselinom kod pacova. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.


Moglo bi vam se i svidjeti