Određivanje ukupnog sadržaja saponina u Boschniakia Rossica i Herba Cistanches spektrofotometrijom Ⅰ

sažetak:

Cilj Ova kvantitativna metoda je ustanovljena za ukupne saponine u Boschniakia rossica iHerba cistanchesi sadržajodređuju se ukupni saponini． Metode Salidrozid je odabran kao referentna supstanca, korišćena je reakcija boje sa vanilinom i perhlornom kiselinom. Zatim je spektrofotometrijski određen sadržaj ukupnih saponina u cistama Boschniakia rossica i Herba na 523nm. Ｒrezultati Kriva salidrozida je bila linearna u rasponu od 0. 05133 - 0． 2567mg·ml - 1 sa korelacijom 0. 9992, a jednačina linearne regresije bila je Y=1. 611X + 0. 0573． Za Boschniakia rossica, prosječan oporavak salidrozida bio je 99． 68% sa ＲSD od 1. 68% (n=6); a za Herba distance prosječan oporavak salidrozida bio je 101. 18% sa ＲSD od 0. 94% (n=6)． Zaključak Metoda je tačna, jednostavna i pouzdana. Tako se može koristiti za određivanje sadržaja ukupnih saponina u Boschniakia rossica i Herba cistanches.

Ključne riječi:Boschniakia rossica;Herba cistanches; Ukupni saponini; Odlučnost; Spektrofotometrija; Salidroside

KOLIKO JE TREBA DA CISTANCHE proradi?

Cistanche deserticola Y. C. Ma i Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov su parazitske ljekovite biljke koje pripadaju porodici Orobanchiaceae. Cistanche deserticola je parazitska biljka koja živi na korijenu Haloxylon ammodendrona, pustinjskog drveta. Uglavnom se proizvodi u Xinjiangu i Alxa ligi, Unutrašnja Mongolija. Poznat je kao "pustinjski ginseng" zbog niskog prinosa i visoke ljekovite vrijednosti. Skakavac [1] se proizvodi na sjeveroistoku moje zemlje [2]. Prema narodnom predanju, ima efekat besmrtnosti, pa je nazvana severoistočna "Trava večnog veka". Koristi se kod impotencije zbog nedostatka bubrega, prehlade u struku i kolenima, suhoće crijeva i zatvora. Može hraniti i ojačati tijelo, odgoditi starenje i autentični je medicinski resurs na sjeveroistoku [3]. Oba imaju sličan učinak, a oba imaju efekte toniziranja bubrega, jačanja janga, vlaženja crijeva i laksativa [4]. Prema zapisima o Cistanche deserticola u "Compendiumu Materia Medica" Li Shizhen-a iz dinastije Ming, "Ova supstanca je tonik, ali nije oštra, pa se naziva smirenom. Rijetko se može dobiti iz Kongronga, pa je ispunjena Cistanche deserticola." To znači da se Cistanche deserticola nekada koristila kao alternativni medicinski materijal za Cistanche deserticola. , Moderna istraživanja su pokazala da i Cistanche deserticola i Estuary deserticola imaju farmakološke efekte kao što su protiv starenja [5, 6], protiv umora [7, 8], poboljšanje imunološke funkcije [9, 10] i poboljšanje pamćenja [{{ 12}}].

Sadržaj ukupnih glikozida u Grasshopperu i Cistanche deserticola ima vrijednost dubinske studije. Oba sadrže saponine, hlapljiva ulja, šećere, aminokiseline i druge komponente. Naučnici su izvijestili o komparativnim studijama o komponentama hlapljivih ulja, šećera, aminokiselina i drugih komponenti ova dva [4, 14, 15], ali određivanje ukupnog sadržaja glikozida dva U literaturi nije bilo izvještaja. . Glavne komponente Cistanche deserticola su fenilpropanoidni glikozidi (serija glukozida A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], a Cistanche deserticola su feniletanoidni glikozidi (serija Cistanche deserticola )[17,18], saponini ova dva su slični i dijele sličnu komponentu, salidrozid. Vjerujemo da su glikozidi važni aktivni sastojci oba, i istražujemo upotrebu spektrofotometrije za određivanje sadržaja ukupnih glikozida. , da pruži teorijsku osnovu za dalji razvoj i korištenje resursa Echinacea deserticola i Cistanche deserticola.

1 Materijali i instrumenti

1. 1 Materijal i reagensi: Amaranth officinale, sakupljen sa planine Changbai, identificiran kao biljka iz porodice Orobanaceae

Osušena cijela biljka Orobanche coerulescens, operite uzorak i ocijedite vodu

Odvojite, stavite u kutiju za sušenje konstantne temperature na 40 stepeni, osušite do konstantne težine, izgnječite, procijedite kroz sito od 40 mesh i pripremite

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., identifikovana kao navedena

Cistanche deserticola Y. C. Mamino suho meso

Stabljike, oprane, osušene na zraku, osušene do konstantne težine, zgnječene, propuštene kroz 40-mrežasto sito, ostavljene na stranu; crvena

Crassuside referentna supstanca (dobavlja Kineski institut za farmaceutske i biološke proizvode, broj serije 110818

- 200404, za određivanje sadržaja); svi korišteni eksperimentalni reagensi su domaćeg analitičkog kvaliteta.

1. 2 instrumenta 752N UV-vidljivi spektrofotometar (Shanghai Jingke); Tu{4}} par

Beam UV spektrofotometar (Beijing Puxi General Co., Ltd.); elektronska analitička vaga

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Univerzalna drobilica velike brzine (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 metode

2. 1 Priprema referentnog rastvora

Upotrijebite analitičku vagu da precizno izmjerite salidrozid 15. 40mg, otopite u metanolu prenesite u 25-odmjernu tikvicu i prilagodite volumen do oznake. Pripremite se da sadrži 0.0% salidrozida po ml. Rastvor od 616 mg se koristi kao referentni rastvor i zatvoren je u frižideru za kasniju upotrebu.

2. 2 Priprema test rastvora

Koristite analitičku vagu za precizno izvaganje ljekovitog praha skakavca i cistanche deserticola. 2. 0g, stavite u tikvicu sa okruglim dnom, dodajte 40ml 90% etanola, zagrijte i refluksirajte ekstrakciju skakavca jednom i zagrijte i refluksirajte Cistanche deserticola dva puta, vrijeme svake ekstrakcije je 1,5h, nakon usisna filtracija, sjediniti filtrat, koncentrirati do suhog u vodenoj kupelji, dodati 25ml vode da se otopi, ekstrahirati 3 puta petroleterom, svaki put po 25ml, baciti tečnost petroletra u gornji sloj, a zatim nastaviti ekstrahirati 3 puta sa vodom zasićenim n-butanolom. 25ml svaki put, kombinovati tri ekstrakta n-butanola, ispariti tečnost n-butanola u vodenom kupatilu u dimovodu, razblažiti ga metanolom u odmernoj tikvici od 10ml, dobro promešati, zatim precizno odmeriti 1ml rastvora i razblažiti sa metanola do 25 ml zapremine. bocu, dobro promiješajte i upotrijebite kao probno rješenje za kasniju upotrebu.

2. 3. Odabir mjerne talasne dužine

će 1. Staviti 25 ml referentnog rastvora i test rastvora u gradirane epruvete sa čepovima, ispariti metanolni rastvarač u vodenom kupatilu konstantne temperature na 60 stepeni i dodati 0. 2 ml 5% rastvora vanilin-glacijalne sirćetne kiseline i 0,8 ml rastvora perhlorne kiseline reagovali su u vodenom kupatilu na 60 stepeni tokom 15 minuta. Izvadite epruvetu i odmah je ohladite ledenom vodom 5 minuta. Dodati 5 ml glacijalne sirćetne kiseline i dobro protresti [20]. Pripremite referentni rastvor koristeći metanol na isti način. Otopina nakon razvoja boje je podvrgnuta skeniranju talasne dužine, a maksimalna talasna dužina apsorpcije od 523 nm nakon reakcije u boji salidrozida odabrana je između 400 i 800 nm kao merna talasna dužina ukupnih glikozida Escherichia coli i Cistanche deserticola. Obrasci skeniranja kontrolne supstance i ispitivane supstance prikazani su na slici 1.

2. 4. Ispitivanje linearnog odnosa: Koristite pipetu da precizno nacrtate referentno rješenje 0. 5,1. 0,

1. 5,2． 0,2． 5 ml je stavljeno u epruvete sa čepom od 1 do 5, a reakcija boje je izvedena prema koracima u "2.3". Prazan eksperiment je izveden sa metanolom u paralelnim uslovima, a apsorbanca je izmerena na talasnoj dužini od 523 nm. Apsorbancija A (Y ) je ordinata, koncentracija mg·ml-1

(X) je apscisa, vrši se linearna regresija, a jednačina regresije je Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), rezultat pokazuje da je masena koncentracija salidrozida na 0. Linearni odnos je dobar u rasponu od 05133-0.2567mg·ml-1. Rezultati su prikazani na slici 2.

2. 5 Test stabilnosti

Precizno izmjeriti odgovarajuću količinu testnog rastvora skakavca i cistanche deserticola, razviti boju prema metodi pod "2.3" i ravnomjerno izmjeriti vrijednost apsorpcije 6 puta u roku od 30 minuta. Ovo pokazuje da će unutar 30 minuta nakon razvoja boje, Grasshopper i Cistanche deserticola. Stabilnost testnog rastvora je relativno dobra. Rezultati su prikazani u tabeli 1.

2. 6 Test preciznosti

Precizno izmjerite odgovarajuću količinu referentne otopine, razvijte boju prema metodi pod "2.3" iznad i mjerite apsorbanciju 6 puta kontinuirano. Rezultati su prikazani u tabeli 2. Rezultati pokazuju da je preciznost ovog eksperimentalnog instrumenta dobra.

Slika 1 Tankoslojni obrasci skeniranja referentne supstance salidrozida (A), test rastvora skakavca (B) i test rastvora cistanche deserticola (C)

2. 7. Test ponovljivosti.

Precizno izmjerite 6 porcija praha skakavca i cistanche deserticola, svaka porcija sadrži 2. 0g, nakon zagrijavanja i refluks ekstrakcije korištenjem optimalnog procesa ekstrakcije koji je utvrđen, slijedite korake pod "2.3" i izmjerite apsorbancija na talasnoj dužini od 523 nm. Rezultati mjerenja prikazani su u tabeli 3 i tabeli 4.

2. 8. Test stope obnavljanja uzorka.

Precizno izmjeriti 6 uzoraka skakavca i cistanche deserticola sa poznatim masenim postotkom ukupnih glikozida. Svaki uzorak je 12 mg. Precizno dodati 2 ml referentne otopine salidrozida. Pratite "2.2" Izvucite uzorak ispod stavke, odredite ukupan sadržaj glikozida nakon razvoja boje prema stavci "2.3", i izračunajte stopu oporavka uzorka. Rezultati su prikazani u tabeli 5 i tabeli 6.