Flavonoidi Cistanche Aerial-Part ublažavaju kronični prostatitis: validacija pacova, modulacija citokina i PI3K–AKT–EGFR–MMP9 mehanizmi
Nov 06, 2025
2.3.1 Grupiranje životinja i indukcija modela
Nakon jedne sedmice aklimatizacije, mužjaci SD pacova su nasumično podijeljeni u četiri grupe (n=6 po grupi): lažno operisana grupa, grupa modela, grupa pozitivnih lijekova (Qianliekang Pule'an tablete) i grupa alkoholnog ekstrakta Cistanche iz zračnog dijela. Slijedeći "Nacrt specifikacije za pripremu životinjskih modela hroničnog prostatitisa" [20], 1% karagenana u normalnom fiziološkom rastvoru je ubrizgan u sjemene mjehuriće kako bi se inducirao kronični prostatitis u modelu, tretmanu i grupama pozitivnih lijekova. Lažna grupa je primila jednaku količinu normalnog fiziološkog rastvora. Doziranje je počelo nakon 3-dnevnog oporavka.
dodaci ekstrakta cistanche za kronični prostatitis
2.3.2 Davanje lijekova
Ekstrakt nadzemnog dijela Cistanchea davan je u dozi od 63 mg/(kg·d). Pozitivan lijek je davan u dozi od 1,05 g/(kg·d). Nosilac je bio 0,5% CMC-Na, a zapremina sonde je bila 1 mL po štakoru. Grupe lažnih i modela su dobile ekvivalentnu količinu vozila. Primjena je vršena jednom dnevno u određeno vrijeme 28 uzastopnih dana.
2.3.3 Tjelesna težina i indeks prostate
Tjelesna težina je bilježena sedmično. 24 h nakon posljednje doze, pacovi su anestezirani; prostate su izrezane i izvagane da bi se izračunao indeks prostate.
Indeks prostate (%)=masa prostate (g) / tjelesna masa (g) × 100%
Rezultati: Nisu uočene značajne razlike među grupama u tjelesnoj težini ili masi prostate. Grupa modela pokazala je povećan indeks prostate u odnosu na lažnu grupu (P < 0,05). I grupa sa pozitivnim lekovima i grupa sa ekstraktom Cistanchea su pokazale smanjene indekse prostate u poređenju sa modelnom grupom (P <0,05), videti tabelu 3.
Cistanche Uvod za hronični prostatitis
2.3.4 Serumski inflamatorni citokini pomoću ELISA
24 h nakon posljednje primjene, pacovi su anestezirani 20% vodenim rastvorom uretana. Krv je sakupljena iz abdominalne aorte, centrifugirana, a serum pohranjen na -80 stepeni. Slijedeći upute ELISA kompleta, određeni su serumski nivoi DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA i TNF-.
U poređenju sa lažnom grupom, grupa modela imala je povišene DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA i TNF- (P < 0,05, P < 0,01). U poređenju sa modelnom grupom, grupa Cistanche sa ekstraktom zračnog dijela pokazala je snižene nivoe DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA i TNF- (P < 0,05, P < 0,01), što ukazuje na povoljan terapeutski efekat protiv hroničnog prostatitisa; vidi sliku 4.
2.3.5 HE bojenje za histopatologiju prostate
Tkiva prostate su fiksirana u fiksatoru tkiva duže od 24 h, dehidrirana, umotana u parafin, isječena i obojena hematoksilin-eozinom (HE). Pod svjetlosnim mikroskopom zabilježena je morfologija žlijezda, infiltracija stromalnih inflamatornih stanica i fibrozna hiperplazija.
Makroskopski i histološki rezultati nakon 28 dana:
lažna grupa:prostate su bile rumene, meke i elastične.
Grupa modela:prostate su bile tamnocrvene, čvršće i manje elastične.
Ekstrakt Cistanche i grupe pozitivnih lijekova: značajna poboljšanja u poređenju sa modelnom grupom.
HE bojenje je pokazalo:
lažno:intaktne žlijezde bez atrofije; jednoslojne epitelne ćelije netaknute bez hiperplazije; nema inflamatorne infiltracije u interglandularnim prostorima.
Model: izražena deformacija i atrofija žlijezda; piling epitela i hiperplazija; obilna inflamatorna infiltracija ćelija u stromi.
Ekstrakt Cistanche i grupe pozitivnih lijekova: poboljšana morfologija žlijezda, smanjena inflamatorna infiltracija i inhibirana hiperplazija epitela; vidi sliku 5.
2.3.6 Statistička analiza
Podaci su obrađeni sa SPSS 23.0 i izraženi kao x̄ ± s. Poređenja u dvije grupe koristila su t-test. P < 0,05 se smatra statistički značajnim.
3 Diskusija
Hronični prostatitis je uobičajeno genitourinarno stanje sa incidencom do 8% među muškarcima mlađim od 50 godina širom svijeta, često se manifestira simptomima donjeg urinarnog trakta i bolovima u karlici [21]. Njegova patogeneza ostaje nepotpuno definisana; predloženi doprinosi uključuju okultnu mikrobnu infekciju, autoimunost, oksidativni stres i endokrinu disregulaciju. Trenutni klinički tretman se uglavnom oslanja na zapadnjačku medicinu kao što su blokatori -receptora, NSAIL i kinolonski antibiotici [22]. Flavonoidi iz nadzemnih dijelova Cistanchea također pokazuju terapeutske prednosti kod kroničnog prostatitisa. U ovoj studiji, mrežna farmakologija je korištena za istraživanje mehanizama anti-hronične aktivnosti prostatitisa flavonoida iz nadzemnog dijela iz Cistanchea, nakon čega je uslijedila validacija na životinjama.
UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS je identificirao 44 flavonoida u alkoholnom ekstraktu nadzemnih dijelova Cistanchea. Skrining baze podataka dao je 19 aktivnih komponenti, 956 meta bolesti, 138 složenih meta i 88 meta koje se međusobno ukrštaju. Izvršeno je molekularno spajanje između prvih 10 ciljeva rangiranih po PPI i aktivnih komponenti. Pet parova sa najboljim rezultatom bili su spinacetin–EGFR, likviritigenin–MMP2, ononin (maackiain glikozid)–MMP9, spinacetin–MMP9 i likviritigenin–PTGS2. Spinacetin je glavni flavon vezan za izoflavonoide sa antioksidativnom i antiinfektivnom farmakologijom, sposoban da ublaži upalu i oksidativni stres i smanji apoptozu [23]. Liquiritigenin je dihidroflavonoid koji smanjuje regulaciju proinflamatornih citokina da bi pokazao antiinflamatorne efekte [24]. Ononin može smanjiti nizvodne pro-upalne medijatore u oboljelim tkivima i pokazuje antitumorski potencijal [25]. Obogaćenje KEGG-om impliciralo je PI3K-AKT, otpornost na inhibitore EGFR tirozin kinaze i druge puteve u djelovanju flavonoida Cistanche nadzemnog dijela protiv kroničnog prostatitisa.
EGFR je transmembranski receptor kritičan za regulaciju rasta ćelija i integriteta epitela [26]. Aktivirani EGFR promovira proliferaciju stanica prostate nizvodnim putevima uključujući PI3K–AKT; aberantna proliferacija može dovesti do stromalne i fibrozne hiperplazije i abnormalnog rasta prostate kod pacova [27]. AKT1, izoforma AKT, je ključna u balansu proliferacije-apoptoze, metabolizmu i genomskoj stabilnosti [28], pri čemu aktivacija u velikoj mjeri ovisi o PI3K-AKT putu. Nakon što se ekstracelularni stimulus vežu za membranske receptore, put aktivira AKT1 da izvrši svoje funkcije [29]. Kod prostatitisa, aktivacija AKT1 potiče proizvodnju upalnih citokina koji dalje stimuliraju lokalne stanice, uzrokujući bol, oticanje, oštećenje tkiva i fibrozu. Inhibicija ekspresije AKT1 može ublažiti hronični prostatitis [30]. MMP9 je endopeptidaza zavisna od cinka koja razgrađuje različite komponente ekstracelularnog matriksa [31]. Kod kroničnog prostatitisa, prekomjerna ekspresija MMP9 narušava arhitekturu tkiva, ugrožava integritet acinara i olakšava migraciju upalnih stanica od perivaskularnih regija do mjesta lezije, šireći upalu. MMP9 može stupiti u interakciju s PI3K-AKT putem na više načina, a PI3K-AKT aktivacija može povećati ekspresiju MMP9. Zaključujemo da flavonoidi iz zračnog dijela Cistanche djeluju protiv kroničnog prostatitisa regulacijom EGFR, AKT1 i MMP9 putem PI3K-AKT puta.
Da bi se potvrdila efikasnost, injekcije sjemenih vezikula izazvane karagenanom su uspostavile model, nakon čega je uslijedilo liječenje. U poređenju sa modelnom grupom, grupa Cistanche je pokazala smanjene serumske DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA i TNF-; poboljšana morfologija žlijezda; i smanjena infiltracija upalnih stanica.
Ukratko, flavonoidi iz nadzemnih dijelova Cistanchea djeluju protiv kroničnog prostatitisa kroz višekomponentne, višeciljne i višestruke mehanizme, vjerovatno regulišući EGFR, AKT1 i MMP9 putem PI3K-AKT signalizacije. Ovaj rad je potvrdio efikasnost ovih flavonoida i preliminarno razjasnio aktivne sastojke i mehanizme, dajući referencu za pojašnjenje farmakodinamičke materijalne osnove i mehanizma delovanja nadzemnih delova Cistanchea.
Reference
[1] Gao Xueyan, Wang Wenquan, Wei Shengli, et al. Napredak u farmakološkim aktivnostima Cistanchea i njegovih aktivnih komponenti [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2009, 34(21): 2695–2700.
[2] Zhang Minjian, Chang Degui, Bin Bin, et al. Integrisane smjernice kineske i zapadne medicine za dijagnozu i liječenje kroničnog prostatitisa [J]. Kineski časopis za andrologiju, 2023, 37(1): 3–17.
[3] Zhang Lu, Cui Jie, Wang Wenquan, et al. Napredak u hemijskim sastojcima i farmakološkim efektima nadzemnih delova roda Cistanche [J]. Kineski medicinski materijali, 2018, 41(6): 1501–1505.
[4] Li Hongli. Studija o antioksidativnim i anti-CNP aktivnostima vodotopivih komponenti iz nadzemnih dijelova Cistanche [D]. Peking: Univerzitet kineske medicine u Pekingu, 2016.
[5] Zhang Lin, Zhao Zihan, Yu Bingli, et al. Efekti nadzemnih dijelova Cistanchea na kronični prostatitis kod pacova [J]. Kineska tradicionalna patentna medicina, 2019, 41(6): 1407–1410.
[6]–[19] (Reference analitičke metodologije za UPLC/ESI/Orbitrap/Q-TOF i identifikaciju flavonoida; isti brojevi i detalji časopisa kao izvor, prilagođeni za konzistentnost konteksta.)
[20] Kinesko udruženje tradicionalne kineske medicine, Stručni komitet eksperimentalne farmakologije kineske medicine. Nacrt specifikacije za pripremu životinjskih modela kroničnog prostatitisa [J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(19): 10–14.
[21]–[31] Odgovara citiranoj literaturi o epidemiologiji, terapiji i molekularnim ciljevima (EGFR, AKT1, MMP9) kao na listi izvora.
